HPLC法测定还原型谷胱甘肽片中杂质氧化型谷胱甘肽含量

目的：建立了高效液相色谱法测定还原型谷胱甘肽片中杂质氧化型谷胱甘肽含量。方法：采用AgilentTC—C18（250mm×4．6mm,5μm）柱,以磷酸盐溶液（pH3．0）-甲醇（96：4）为流动相;检测波长为210nm;流速为1．0m·min-1;柱温为30℃,进样量为20μl。结果：氧化型谷胱甘肽在浓度为1．403—22．450μg·ml-1的范围内线性关系良好（r=0．9999）。回收率分别为98．9％,RSD分别为1．5％（n=9）。结论：该方法准确高效,重复性好,可以有效控制还原型谷胱甘肽片中氧化型谷胱甘肽的含量。     

HPLC法研究还原型谷胱甘肽降解产物

目的研究还原型谷胱甘肽(GSH)在不同破坏条件下的降解产物;在此研究基础上,建立了氧化型谷胱甘肽(GSSG)杂质测定方法。方法采用CenturySIL AQ C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),50 mmol.L-1磷酸二氢钾溶液(含10 mmol.L-1庚烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇(体积比97∶3)为流动相;检测波长为210 nm。结果通过对比HPLC保留时间,确定破坏样品中主要降解产物为GSSG、二肽半胱氨酰甘氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸和胱氨酸。按外标法计算GSH原料中GSSG的含量为0.32%。结论建立的GSSG测定方法结果准确,重现性好,可用于GSH原料中GSSG的控制。     

HPLC法测定氧化型和还原型谷光甘肽

目的建立同时测定谷光甘肽原料及制剂中氧化型和还原型谷光甘肽的反相高效液相色谱法。方法采用外标法,以Hypersil C18为色谱柱,25 mmol/L KH2PO4（pH2.5）∶四氢呋喃（100∶1）为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长230 nm,进行分离测定。结果在3.12～2 490.0μg/ml间,GSH线性关系良好（r=0.999 9）,测得回收率为101.84%。在3.25～975.0μg/ml间,GSSG线性关系良好（r=0.999 9）,测得回收率为97.84%。结论所用方法准确可靠、专属性强,可用于GSH和GSSG的同时测定。     

P-糖蛋白和胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶在急性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的 探讨P糖蛋白（P-gp）和胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶（GST-π）在急性粒细胞白血病中的表达与临床意义。方法 应用免疫组织化学技术，检测59例急性粒细胞白血病中P-gp和GST-π多药耐药的表达。结果 59例急性粒细胞白血病中P-gp和GST-π表达的阳性标记与急性粒细胞白血病临床化疗有相关性（P〈0．05）。结论 P-gP和GST-π联合表达与急性粒细胞白血病化疗密切相关，检测P-gp和GST-π对急性粒细胞白血病化疗方案的制定具有重要的意义。     

氧化型谷胱甘肽中有机溶剂残留的毛细管GC测定

目的 建立毛细管气相色谱法测定氧化型谷胱甘肽中甲醇和乙醇2种有机溶剂的残留量.方法 采用SPB-5毛细管柱;FID检测器;程序升温以,32℃保持2 mim,以30℃/min的升温速率升至150℃,终止时间2 min;进样口沮度200℃;以DMF-水(7:3)为溶剂.结果 建立的色谱方法在所考察的浓度范围内,线性关系良好...     

氧化型谷胱甘肽中有机溶剂残留的毛细管GC测定

目的建立毛细管气相色谱法测定氧化型谷胱甘肽中甲醇和乙醇2种有机溶剂的残留量。方法采用SPB-5毛细管柱;FID检测器;程序升温以,32℃保持2 m in,以30℃/m in的升温速率升至150℃,终止时间2 m in;进样口温度200℃;以DMF-水(7∶3)为溶剂。结果建立的色谱方法在所考察的浓度范围内,线性关系良好,各溶剂回收率符合要求。结论本法灵敏、准确,适用于氧化型谷胱甘肽原料中有机溶剂残留量的检测。     

灯盏花素对UL补硒大鼠谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶基因表达和活性的影响

目的　观察灯盏花素对允许的最高摄入量硒大鼠肝脏、肾脏、睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)和硫氧还蛋白还原酶 (TR)基因表达和活性的影响。方法　采用RT PCR方法和酶活性测定分析GSH Px和TR基因表达水平和活性。结果　UL硒能降低大鼠肝脏组织中GSH Px和TRmRNA表达水平及活性 ,灯盏花素能增加补硒大鼠肝脏中GSH Px和TRmRNA表达水平和活性。UL硒对大鼠肾脏、睾丸组织GSH Px和TRmRNA表达水平和活性无明显影响。结论　灯盏花素能有效拮抗UL硒所致的GSH Px和TRmRNA表达和活性的下降 ,且UL硒所致的GSH Px和TRmRNA表达和活性的下降具有组织特异性。提示补硒不宜取允许的最高摄入量     

血浆氧化低密度脂蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶表达与儿童 Ⅰ型糖尿病及胰岛素抵抗的相关性研究

目的 探讨血浆氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)表达与儿童I型糖尿病(T1DM)及胰岛素抵抗(IR)的相关性.方法 选取2017年1月至2019年10月开封市儿童医院收治的113例T1DM病儿为观察组,另外选取同期健康体检儿童作为对照组.测定两组三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平,采用稳态评估模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆ox-LDL、GSH-PX表达水平,并进行组间比较;采用Spearman分析观察组血浆ox-LDL、GSH-PX表达水平与FPG、HbA1c、HOMA-IR相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆ox-LDL、GSH-PX对儿童T1DM的诊断价值;采用logistic回归模型分析影响儿童发生T1DM的因素.结果 对照组与观察组性别、年龄、体质量指数(BMI)、TC相比,均差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,观察组TG[(1.35±0.24)mmol/L比(0.81±0.21)mmol/L]、LDL-C[(2.97±0.58)mmol/L比(2.23±0.43)mmol/L]、FPG[(7.85±1.91)mmol/L比(5.06±1.28)mmol/L]、HbA1c[(8.72±2.03)％比(5.13±1.12)％]、HOMA-IR[(2.67±0.52)比(1.51±0.33)]及血浆ox-LDL表达[(763.87±152.31)μg/L比(584.82±109.64)μg/L]水平均较高(P<0.05),HDL-C[(1.29±0.31)mmol/L比(1.77±0.35)mmol/L]、GSH-PX表达[(105.61±15.27)μmol/L比(132.03±25.36)μmol/L]水平较低(P<0.05);Spearman结果显示,观察组血浆ox-LDL与FPG、HbA1c、HOMA-IR均呈正相关(P<0.05),GSH-PX与FPG、HbA1c、HOMA-IR均呈负相关(P<0.05);血浆ox-LDL、GSH-PX单独及两者联合诊断儿童T1DM的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.816、0.887,ox-LDL单独诊断的截断值为679.64μg/L,敏感度、特异度分别为71.70％、82.90％,GSH-PX单独诊断的截断值为122.70μmol/L,敏感度、特异度分别为88.50％、69.50％,两者联合诊断的敏感度为80.50％,特异度为86.70％,较单独诊断特异度有所提高;多因素logistic回归分析结果表明,TG、LDL-C、ox-LDL是儿童发生T1DM的独立危险因素(P<0.05),HDL-C、GSH-PX是儿童发生T1DM的独立保护因素(P<0.05).结论 T1DM病儿血浆ox-LDL为高表达,GSH-PX为低表达,与T1DM的发生、发展密切相关,有一定诊断价值,可能为T1DM的早期诊断及病情评估提供临床参考依据.     

喹硫平对酒精依赖患者血清Hcy、hs-CRP和GSH-Px水平影响

目的：探讨喹硫平对酒精依赖患者血清同型半胱氨酸（Hcy）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平及睡眠质量和复饮影响。方法：选择2020年1—12月酒精依赖患者86例,依据随机表法分为两组,分别为观察组与对照组,各43例。对照组采取常规治疗,包括常规宣教、心理疏导,口服地西泮片15 mg/次,3次/d,按患者实际情况逐渐减少剂量;观察组在对照组基础上给予富马酸喹硫平片,初始剂量25 mg/次,3次/d,按患者实际情况调整药物剂量,最大剂量不超过450 mg/d。两组治疗疗程6周。比较两组治疗前与治疗6周执行功能行为评定量表成人版（BRIEF-A）评分,血清Hcy、hs-CRP和GSH-Px水平,睡眠情况及随访6个月复饮率和再住院率。结果：两组治疗前酒精依赖患者元认知指数（MI）评分和行为管理指数（BRI）评分比较无明显差异（P>0.05）;两组治疗6周酒精依赖患者MI评分和BRI评分较治疗前降低（P<0.05）;观察组治疗6周酒精依赖患者MI评分和BRI评分低于对照组（P<0.05）。两组治疗前酒精依赖患者血清Hcy、hs-CRP和GS...     

注射用还原型谷胱甘肽质量标准分析方法--HPLC法的建立与验证

目的建立注射用还原型谷胱甘肽含量及有关物质氧化型谷胱甘肽(GSSG)的质量标准分析方法--HPLC法,并对其进行验证.方法采用Waters Nova-Pak(R) C1g色谱柱(3.9 mm×150 mm,4 μm),0.05 mol·L-1磷酸二氢钾的溶液(含0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠,用磷酸调节pH至3.0)-甲醇(973,V/V)为流动相,检测波长210 nm,柱温30℃.结果GSH在0.01～1 g·L-1浓度范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,n=6;平均回收率为99.72%,RSD=0.43%,n=9;日内精密度RSD为0.41%(n=6),日间精密度RSD为0.49%(n=5).GSSG在0.5～50 mg·L-1浓度范围内呈良好的线性关系,r=1.000 0,n=7;最低检测限为1 ng(rSN=3),定量限为5ng(rSN=10);平均加样回收率为99.0%,RSD=0.61%,n=9.结论本法简便、专属性好、准确可靠,可作为注射用还原型谷胱甘肽的质量标准分析方法.     

HPLC法测定注射用还原型谷胱甘肽含量

目的　建立HPLC法测定注射用还原型谷胱甘肽含量。方法　采用HPLC法 ,色谱柱为DiscoverC18(2 5 0mm×4 6mm ,5 μm) ,流动相为磷酸盐溶液 -甲醇 (96∶4 ) ,流速为 1ml·min-1,检测波长为 2 10nm。结果　还原型谷胱甘肽在 1 2～7 2 μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系。 结论　该法简便、准确 ,可作为该药品的含量测定方法     

HPLC-MS法测定正常人血浆和全血中还原型谷胱甘肽的浓度

目的建立人血浆和全血中谷胱甘肽浓度的HPLC-MS测定法.方法血浆或全血样品用6%高氯酸沉淀蛋白后直接进样测定,以SinoChrom ODS-BP(200mm×4.6 mrm,5 μm)分离,质谱检测器选择m/z 308(谷胱甘肽)进行检测,外标法以峰面积定量.结果本方法以质谱检测器选择离子检测,内源性杂质不干扰谷胱甘肽的分离检出,血浆或全血浓度在0.25～250μg·mL-1范围内,峰面积与浓度线性关系良好,平均回收率为99.6%～101.0%,日内、日间RSD分别≤4.3%和≤4.6%.10名健康志愿者的血浆还原型谷胱甘肽的浓度为(0.50±0.10)μg·mL-1,全血中浓度为(171.5±35.2)μg·mL-1.结论HPLC-MS用于测定生物样品中谷胱甘肽浓度,样品处理简单,方法准确可靠,可用于谷胱甘肽在人血浆和全血中的代谢和转运情况的研究.     

Determination of reduced and oxidized glutathione in biological samples using liquid chromatography with fluorimetric detection

A HPLC method for determination of both reduced (GSH) and oxidized (GSSG) glutathione in plasma, whole blood and rat hepatocytes has been developed and evaluated. Reduced glutathione reacts with orthophthaldehyde (OPA) to form a stable, highly fluorescent tricyclic derivate at pH 8, while GSSG reacts with OPA at pH 12. At measurement of GSSG, GSH was complexed to N-ethylmaleimide. For the separation, reverse phase column Discovery C(18), 150 mm x 4 mm, 5 microm, was used. The mixture of methanol and 25 mM sodium hydrogenphosphate (15:85, v/v), pH 6.0, was used as mobile phase. The analytical performance of this method is satisfactory for both GSH and GSSG. The intra-assay coefficients of variation were 1.8 and 2.1% for whole blood, 2.0 and 1.9% for rat hepatocytes, 4.3 and 5.2% for plasma. The inter-assay coefficients of variation were 5.8 and 6.2% for whole blood, 6.6 and 7.1% for rat hepatocytes, 6.9 and 7.8% for plasma. The recoveries were as follows: 98.2% (CV 3.5%) and 101.5% (CV 4.2%) for whole blood, 99.1% (2.5%) and 102.3 (4.4%) for rat hepatocytes, 94.1% (CV 7.5%) and 103.5 (CV 8.5%) for plasma. The calibration curve was linear in the whole range tested. The limit of detection was 14.0 and 5.6 fmol, respectively. The preliminary reference ranges of reduced and oxidized glutathione in a group of blood donors are (4.69+/-0.93) and (0.28+/-0.12)micromol/gHb for whole blood, (1.82+/-0.55) and (0.154+/-0.044)microM for plasma.     

Detoxication of industrial pollutants by the glutathione glutathione-S-transferase system in the liver of Anabas testudineus (Bloch)

The interrelationship of reduced glutathione (GSH) and glutathione-S-transferase in the liver of a freshwater climbing perch Anabas testudineus (Bloch) exposed to common industrial pollutants has been studied. In both short- and long-term treatments there was a concomitant decrease in reduced glutathione profile and an increase in glutathione-S-transferase activity. It may be surmised that the majority of xenobiotics of industrial origin are detoxicated by the glutathione glutathione-S-transferase pathways enabling the fish to survive exposure to the additive and/or synergistic toxicity of mixtures of poisons.     

还原型谷胱甘肽对丁胺卡那霉素致豚鼠耳毒性作用的影响

目的：观察还原型谷胱甘肽（GSH）对丁胺卡那霉素耳蜗毒性的干预效果。方法：健康杂色豚鼠56只,随机分为4组,分别肌注丁胺卡那霉素（amikacin）、GSH、Amikacin＋GSH（联合用药）及生理盐水。各组动物在观察期结束后,检测耳蜗组织的活性氧（ROS）水平及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力;采用耳蜗基底膜铺片的方法,对深染的外毛细胞表皮板进行计数;扫描电镜观察外毛细胞细胞器的变化。结果：丁胺卡那霉素组ROS水平增高,SOD、CAT、GSH-Px活力降低（P〈0.05）。其余3组的ROS水平均显著低于丁胺卡那霉素组（P〈0.05）,SOD、CAT、GSH-Px活力显著高于丁胺卡那霉素组（P〈0.05）,3组之间的比较各指标均无统计学意义（P〉0.05）。光镜下GSH组耳蜗三排外毛细胞呈v字型排列有序。丁胺卡那霉素组外毛细胞纤毛散乱、倒伏,深染的表皮板数明显增加,联合用药组深染的表皮板数较丁胺卡那霉素组明显减少（P〈0.01）,GSH组与生理盐水组差异无统计学意义（P〉0.05）。电镜下丁胺卡那霉素组核固缩,线粒体数量减少或大多数线粒体空泡变性;GSH组和生理盐水组细胞结构基本正常;联合用药组线粒体染色较深或轻度水肿。结论：GSH与丁胺卡那霉素联合应用可以显著地减轻丁胺卡那霉素的耳毒性。