急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因研究及其临床意义

目的 研究急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）ＰＭＬ／ＲＡＲα基因的亚型、变化以及与临床疗效、预后的关系。方法 采用筑巢式逆转录酶－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测初治ＡＰＬ患者ＰＭＬ／ＲＡＲα融合基因的ＲＮＡ异构体，监测完全缓解（ＣＲ）ＡＰＬ患者微小残留病（ＭＲＤ）。结果 ４９例且的ＡＰＬ患者ＰＭＬ／ＲＡＰα晤基因亚型，Ｓ型为４０．８％，Ｌ型较Ｓ型预后较好。分别采用三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）、全反     

PML/RARα融合基因检测早幼粒细胞白血病微小残留病

目的:PML/RARα融合基因在监测急性早幼粒细胞白血病(APL)微小残留病(MRD)中的意义.方法:诱导缓解及巩固维持治疗期间,采用筑巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测患者骨髓细胞中PML-RARα融合基因的变化.结果:长期随访的18例完全缓解(CR)患者,2例分子学复发.其中1例发生于CRI后4个月,诱导缓解治疗后获CR2,CR2后2个月再次分子学与血液学的复发,诱导治疗1个疗程获得CR3;1例发生于CR1后74个月,诱导缓解治疗后获得CR2,随访结束时生存期已达106个月.结论:在CR期定期监测PML-RARα融合基因,可尽早发现分子学复发,及时治疗可避免血液学复发.     

PML/RARa融合基因检测在早幼粒细胞白血病鉴别诊断中的意义

急性早幼粒细胞白血病 (APL) ,具有特异性的染色体易位 t(1 5∶ 1 7)及 PML/RARa融合基因。在细胞遗传学 (MIC)分型的基础上 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,检测 APL的 PML/RARa融合基因的 m RNA,可以用来诊断或鉴别诊断 ,同时也可以进行微量残留白血病细胞 (MRLC)的检测。1　材料与方法1 .1 　 病例例 1、2为经外院诊断和治疗后转入我院的患者 ,例 3～ 9为门诊或住院的患者 ,经 FAB分型不能完全确诊 ,例 1 0、1 1是同一例初诊与完全缓解 2 6个月的 M3患者 ,例 1 2、1 3是同一例完全缓解 8个月与 32个月患者。1 3…     

用PML(5E10)单克隆抗体快速诊断急性早幼粒细胞白血病

急性早幼粒细胞白血病（ａｃｕｔｅｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋａｅｍｉａ，ＡＰＬ）的诊断以往多依据特征性的形态学改变，但在许多病例中，形态学改变不明显，这类病例的诊断可用检测ｔ（１５；１７）的方法加以证实，传统的细胞遗传学技术，如荧光原位杂交（ＦＩＳＨ），逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）都可用来定位ｔ（１５；１７）或其基因产物，但上述技术尚未完全普及，且耗时较长。人们期待能找到一种更为简便的以免疫学为基础的技术。本研究对两种能快速检测ｔ（１５；１７）这一融合基因产物的免疫细胞化学技术（Ｉ…     

实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的临床意义

目的:探讨实时定量RT-PCR方法检测急性早幼粒细胞白血病(APL) PML/RARα融合基因的临床意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法,用Taqman探针检测32例初治APL患者的PML/RARα融合基因3种异构体表达水平,并对治疗过程中的20例患者融合基因表达水平进行动态观察. 结果:①实时定量RT-PCR的敏感度为101拷贝数/μl,标准品日间差异及日内差异平均变异系数均<5%;②32例PML/RARα融合基因阳性的初治APL患者中,21例为PML/RARα融合基因长型异构体,11例为PML/RARα融合基因短型异构体;③32例初治患者PML/RARα融合基因表达量中位数和±s分别为1.44%,(1.29±1.46)%.比较异构体长型及短型标准拷贝数(NCN)中位数和±s分别为1.40%,(1.46±1.18)%和1.28%,(1.39±1.51)%,差异无统计学意义P<0.05;④20例治疗后APL患者PML/RARα融合基因表达水平随着临床治疗而改变.结论:①建立了检测APL微小残留病的高敏感性、高特异性的实时定量RT-PCR方法;②32例初治APL患者PML/RARα融合基因长型及短型异构体mRNA NCN差异无统计学意义;③PML-RARα融合基因表达水平的变化与临床疾病发展相一致,有助于疗效评价、微小残留病的检测和预后判断.     

实时定量PCR监测急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα融合基因的临床意义

目的 探讨实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病（APL） PML/RARα融合基因表达水平的意义.方法 用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释作为标准品,ABL作为内参,建立标准曲线.采用TaqMan法进行实时定量PCR,并对方法的可靠性、可重复性及灵敏性进行测定.对14例APL患者在初治、诱导缓解及巩固治疗3个时期的PML/RARα mRNA转录本水平进行动态定量监测,结果以NQ表示,NQ=PML/RARα mRNA的拷贝数/ABL mRNA的拷贝数×105.结果 实时定量PCR方法可以检测出1×10-5μ g NB4细胞cDNA中PML/RARα的融合基因,其重复性和稳定性Ct值变异系数分别为1.77％和2.11％.14例患者初治时骨髓PML/RARα融合基因平均水平为3 731,经全反式维甲酸、三氧化二砷双诱导缓解时PML/RARα融合基因平均水平为231,化疗与维甲酸序贯巩固治疗2个疗程后PML/RARα融合基因平均水平为116.治疗前后比较,PML/RARα基因转录本水平明显下降（P＜0.05）.结论 实时定量PCR检测PML/RARα融合基因表达敏感性好、特异性高、重复性好,可用于急性早幼粒细胞的诊断和微小残留病的检测.     

长期生存的急性早幼粒细胞白血病复发病例PML／RARQ融合基因的变化及意义

全反式维甲酸(ATRA)和白血康治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)，使APL无病生存期(DFI)得以明显延长。但复发病例也随之增加。我们运用反转录聚合酶链反应(PCR)方法，观察生存5年以上的28例患者中5例复发者PML／RARa融合基因的变化，探讨它对长期生存的复发患者在诱导治疗、监测病情复发动向方面的意义。以期寻找白血病长期生存的治疗方法。     

复方黄黛片及其与化疗序贯应用清除APL—PML／RARα融合基因的临床研究

目的:探讨复方黄黛片及其与化疗交替序贯应用对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者PML/RARα融合基因的影响。方法:采用复方黄黛片及其与化疗序贯治疗42例APL患者,并采用RT-PCR技术监测PML/RARα融合基因。结果:①CR后1个月内融合基因转阴率达92.3%(12/13),12个月内达100%(34/34);②长期监测表明86%(31/36)的患者处于持续阴性状态。③治疗过程中融合基因转为阳性的患者加强治疗可再度转为阴性,处于持续的血液学和分子学缓解状态。结论:复方黄黛片治疗APL有很高的分子学缓解率,联合化疗可使86%以上患者处于持续血液学和分子学缓解状态。     

Exogenous PML/RARα Fusion Gene Responds to All-trans Retinoic Acid Results in Differentiation of the Human B Cell Line

The interaction of an exogenous PML/RARα fusion gene, associated with acute promyelocytic leukemia, with all-trans retinoic acid (ATRA) was examined in B-lymphoid cell lines. RPMI8866 cells were transfected with PML/RARα cDNA in the expression vector pGD and two stable transformants (RPMI8866Y-4 and RPMI8866Y-17) were established by selection with G418. ATRA inhibited the growth of those stable transformants, as assessed by [³H]-thymidine incorporation, but had no effect on the growth of control cells stably transformed with neomycin resistant gene alone. ATRA also increased expression of CD38 and immunoglobulin production in RPMI8866Y-4 cells but not in control cells. When these results are taken together, it can be observed that the exogenous PML/RARα fusion gene responds to ATRA, which results in cell differentiation of the human B cell line.