T—SPOT．TB试验快速检测结核杆菌感染的临床应用研究

目的评价结核酶联免疫斑点试验（T—SPOT．TB）快速诊断结核病的临床应用价值。方法利用酶联免疫斑点试验检测对结核分枝杆菌特异抗原刺激反应,分泌γ—干扰素的效应T细胞数量方法,测定30名健康体检者．20例非结核呼吸道疾病患者和78例结核病患者外周血单个核细胞中结核分枝杆菌抗原特异的T细胞的频率。结果78例结核病患者中．75例结核病患者结核抗原特异酶联免疫斑点试验阳性,提示方法敏感性为96．1％,30例健康对照中,2例健康体检者阳性．其他健康体检者和20例非结核呼吸道疾病患者均为阴性,方法的特异性为95％。结论T—SPOT．TB是较灵敏和特异的快速检测结核分枝杆菌感染的方法．可用于结核病的快速诊断．     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验对结核诊断价值的Meta分析

目的系统评价结核感染T细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）在结核诊断中的价值。方法通过计算机检索CNKI、万方、维普、生物医学文献数据库、PubMed等数据库,获得关于T-SPOT.TB诊断结核的诊断性试验的文献,提取四格表等信息,采用MetaDisc1.4和Stata12.0软件进行统计学分析。结果共9篇文献纳入,各研究间存在明显阈值效应引起的异质性,拟合SROC曲线,计算AUC=0.95,Q指数为0.89。试剂盒来源是引起阈值效应的可能原因,以Oxford（UK）提供的试剂盒为亚组进行分析,汇总灵敏度和特异度分别为0.91[95%CI（0.87-0.94）],0.91[95%CI（0.87-0.94）],阳性似然比和阴性似然比分别为11.09[95%CI（7.12-17.28）]和0.10[95%CI（0.07-0.15）],诊断比值比（OR）为110.97[95%CI（57.67-213.52）];合并均无显著异质性（I2均〈50%,P均〉0.05）。Begg’s检验发现不存在发表偏倚。结论T-SPOT.TB对诊断结核有较高的诊断效能,可以帮助临床实践。     

IFN—γ释放试验（T—SPOT．TB）在结核病诊断中的应用

目的探讨T淋巴细胞感染结核后IFN-γ释放斑点试验fT—SPOT．TB）在结核病诊断中的应用及价值。方法采用T—SPOT．TB方法对疑诊或待排结核患者外周血液中释放IFN-γ的结核杆菌特异性淋巴细胞的测定。结果T—SPOT．TB方法的阳性率是83．1％（89／107）,结核菌素试验（tuberculinskintest,TSTl的阳性率40．2％（43／1071,涂片找抗酸杆菌阳性率是25．6％f21／82）,TB—DNA的阳性率是9．4％（5／531．分枝杆菌分离培养阳性率是21．4％（9／42）。结论T—SPOT．TB方法检测诊断结核性疾病敏感性为83．1％、特异性为95．2％：其阳性率明显高于TST、涂片找抗酸杆菌、TB—DNA、分枝杆菌分离培养,采用该方法检测T淋巴细胞感染结核IFN-γ释放快速敏感．特异性高,在结核性疾病诊断中具有重要价值。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒（TSPOT-TB）测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93．3％,特异性为100．0％,阳性预测值为100．0％,阴性预测值为81．8％。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒(T SPOT-TB)测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93.3%,特异性为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为81.8%。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。     

结核T细胞酶联免疫斑点试验快速诊断肺外结核感染的应用价值

目的 探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断肺外结核分枝杆菌（MTB）感染的临床应用价值.方法 选择肺外MTB感染者37例（肺外MTB感染组）及非结核病对照者30例（非结核病对照组）,应用T-SPOT.TB法检测外周血单个核细胞（PMBCs）经结核特异蛋白6KD早期分泌靶向抗原（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）刺激产生γ干扰素（IFN-γ）的T淋巴细胞数,并与结核菌素皮肤试验（TB-PPD）法比较.结果 （1）T-SPOT.TB法在肺外MTB感染组的阳性率91.89％ （34/37）,显著高于非结核病对照组6.67％（2/30）,差异有统计学意义（x^2=48.403,P＜0.001）.（2） T-SPOT.TB诊断肺外MTB感染的敏感性为91.89％,特异性为93.33％,阳性预则值为94.44％,阴性预测值为90.32％,优于TB-PPD法（67.57％、56.67％、65.79％、58.62％）,差异有统计学意义（x^2=6.773、10.756、9.392、8.031,P=0.009、0.001、0.002、0.005）;两方法间一致性较弱（Kappa=0.311,x^2=6.801,P=0.009）.结论 T-SPOT.TB技术快速辅助诊断肺外MTB感染作用明显,其较高的阴性预测值在排除感染方面意义重大.     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值

目的 探讨与分析结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值。方法 选取2012年1月～2014年12月在无锡锡山人民医院接受诊治的324例疑似骨关节结核病患者为研究对象,采取随机方法将入选者分为T-SPOT.TB试验组和结核抗体试验组,每组162人,T-SPOT.TB试验组患者采取结核感染T细胞酶联免疫斑点试验,结核抗体试验组则采取结核抗体试验,对比分析两组诊断方式的灵敏度与特异度。结果 T-SPOT.TB试验组的灵敏度和特异度分别为93.43%和84.00%,结核抗体试验组的灵敏度和特异度分别为40.44%和53.85%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=184.62,P＜0.05; χ²=7.86,P＜0.05)。T-SPOT.TB试验组的假阳性率、假阴性率分别为16.00%和6.57%,结核抗体试验组的假阳性率、假阴性率分别为26.92%和59.56%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=7.86,156.18,均P＜0.05)。此外, T-SPOT.TB试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%和70.00%,结核抗体试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为88.71%和14.74%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=20.27,73.06,均P＜0.01)。结论 与结核抗体试验相比,结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在诊断骨关节结核时具有灵敏度高、特异度高等特点,值得推广使用。     

结核感染T细胞检测试验的临床应用价值及研究进展

结核病病原学确诊率低,缺乏细菌学证据易导致漏诊,错过治疗及预防的最佳时机,并造成严重的连锁反应。结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)试验是结核病辅助诊断的一种免疫学方法,目前可以用于潜伏性结核感染的诊断及活动性结核感染的辅助诊断,但在结核病高流行及低流行地区的诊断价值及应用尚存在争议。本文综述了T-SPOT.TB对结核高流行地区的菌阴性结核病、免疫缺陷结核病患者群的应用价值、影响因素及临界值判读。     

酶联免疫斑点检测（TSPOT-TB）结核分枝杆菌与结核病的相关性分析

目的研究酶联免疫斑点（T SPOT-TB）检测结核分枝杆菌特异性T细胞与结核病的相关性分析。方法用酶联免疫宽点技术测定早期分泌性抗原靶ESAT-6和ESAT-10特异性T细胞,由传染病研究所证实或可疑的72例病人作为实验对象,并将TSPOT—TB的测定结果和传统的诊断方法相比较。结果64例肺结核或肺外结核病人中,TSPOT—TB方法检测到63例,表明其灵敏度为98．4％。其中的45例病人同时做结素实验,仅有40例呈阳性（89％）,而TSPOT—TB测定100％为阳性（P=0．056）。72例病人中,有6人被排除活动性结核,其中5（83．3％）人TSPOT-TB实验阴性,因此可以在可疑活动性结核病人快速排除非结核病人。结论TSPOT-TB实验对检测结核是一种灵敏的方法,对现在低发病率背景下检测结核的诊断程序及治疗监测是一种有用的补充。     

T细胞酶联免疫斑点试验和结核菌素皮肤试验在儿童结核性疾病中诊断价值的Meta分析

目的系统评价T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)、结核菌素皮肤试验(TST)在儿童结核性疾病中的诊断价值。方法在中国知网、万方、Medline、Cochrane Library、PubMed、Embase数据库检索已发表的关于不同结核菌感染检测方法应用于儿童结核性疾病诊断的相关文献,截止日期为2018年10月31日。筛选出不同结核菌感染检测方法在结核性疾病患儿中的阳性率,对纳入的文献进行质量评价和资料提取。使用Meta-Disc 1.4、RevMan 5.3和Stata 15.1进行Meta分析。使用Meta-disc1.4软件进行敏感度和特异度分析,并绘制综合受试者工作特征曲线(SROC),采用RevMan 5.3内置的QUADAS-2评价工具对纳入文献质量进行评价;采用Stata15.1进行发表偏倚的检验,并绘制Deeks漏斗图。结果共纳入15篇研究文献。结果显示,T-SPOT.TB的汇总敏感度为89%[95%可信区间(CI):87%~91%],汇总特异度为95%(95%CI:93%~96%);TST检验的汇总敏感度为66%(95%CI:63%~70%),汇总特异度为70%(95%CI:66%~73%)。结论T-SPOT.TB较TST敏感度和特异度更高,在儿童结核性疾病中具有较高的诊断价值。     

结核感染T细胞试验在儿童结核病临床诊断中的应用研究

目的对比研究结核感染T细胞试验（T-SPOT.TB）在儿童结核病临床诊断中的应用价值。方法选取2012年3月-12月汕头市结核病防治所门诊和汕头大学医学院第二附属医院儿科就诊的结核病患儿112例、非结核病（有其他肺部疾病）患儿58例、结核病易罹患高危者60例、健康儿童60例,分别进行T-SPOT.TB、结核菌素纯蛋白衍生物皮肤试验（PPD皮试）、结核抗体检测（TB-DOT）、痰涂片抗酸染色、痰结核分枝杆菌培养,比较其灵敏度和特异度。同时对儿童结核病组按痰菌结果、病变部位、免疫状态不同进行分组比较。结果在儿童结核病组,T-SPOT.TB的阳性率为92.9%,高于其他方法,差异有统计学意义（χ^2=9.33,P〈0.01;χ^2=81.71,P〈0.01;χ^2=142.00,P〈0.01;χ^2=101.71,P〈0.01）;在非结核病组,T-SPOT.TB的假阳性率为3.4%,较痰涂片、痰培养稍高,与TB-DOT对比无异,但明显低于PPD的27.6%（χ^2=12.89,P〈0.01）;在结核病易罹患高危组,T-SPOT.TB的检出率为25.0%,高于TB-DOT、痰涂片及痰培养（P〈0.05）;在健康对照组,T-SPOT.TB的特异度为95.0%,高于PPD皮试的71.7%（χ^2=11.76,P〈0.01）。T-SPOT.TB在菌阴和菌阳、肺内和肺外结核、正常免疫和免疫缺陷组均具有良好的灵敏度（P〉0.05）。T-SPOT.TB与PPD皮试结果总符合率为78.6%。结论 T-SPOT.TB在儿童结核病的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,且受其他因素影响较小,其结果客观、准确,对儿童结核病的诊断具有较高的临床应用价值。     

酶联免疫斑点试验检测技术在血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病诊断中的应用

目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT检测技术,分析了51例发热的血液病怀疑合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病患者的外周血,作能分泌结核特异的γ干扰素的T淋巴细胞测定,以传统的诊断方法为对照。结果确诊血液病合并结核病24例,排除活动性结核病27例;ELISPOT的灵敏度为73.6%,高于PPD皮肤试验的54.5%(P<0.05),高于抗结核抗体试验的37.5%(P<0.01);准确度82.6%高于抗结核抗体的62.5%(P<0.05),高于PPD的77.77%;特异度88.88%,与抗结核抗体检测(87.5%)及PPD(93.75%)相似;ELISPOT与抗结核抗体、PPD试验结果联合分析,其诊断率为79.2%。此外,ELISPOT检测结果与性别、年龄、结核病史、抗结核抗体、机体免疫状态、外周血淋巴细胞数等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。结论ELISPOT是血液病患者合并活动性结核的重要辅助诊断工...     

检测和研究人体细胞免疫功能的实用技术——酶联免疫斑点试验

机体的免疫类型分体液免疫和细胞免疫,两者相辅相成,但不同疾病所表现的免疫类型有所侧重.如胞内寄生的病原菌、病毒和寄生虫感染以及肿瘤等疾病与患者体内的细胞免疫功能异常或失衡密切相关.目前,临床免疫检验项目早已突破局限于传染病诊断的血清学试验,如检测各种免疫活性细胞的数量及其功能特性,T细胞亚群的平衡状态等诸多免疫指标,有助于临床深入评价患者在疾病的病程中或治疗状态下的免疫应答特点及其变化规律,藉以提高临床诊疗水平.遗憾的是大多细胞免疫检测方法要求严格,常需无菌培养,质控体系尚未建立,以致许多医院检验科较少开展.幸而近年来有些试剂生产公司不断推出实用的检测细胞免疫指标的成套试剂盒,为医院根据需要及时开展新项目提供了极大的方便.现就当前使用最多的酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分两部分叙述.     

PCR—ELISA检测TB—DNA方法学建立及临床应用评价

目的 建立PCR－ELISA检测TB－DNA的方法学，探讨其最佳实验条件及优化组合，结合涂片法、培养法和PCR电泳法评价其临床应用价值。方法 常规PCR引物用地高辛标记，使扩增产物带有地高辛标记成分，再通过亲和素－生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚丙乙烯微孔中，通过固相探针与TB－DNA扩增产物进行杂交与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应，经NPP显色后测其A405nm值的大小，与同样操作处理的不同浓度标准菌株A值比较，推出样品中TB－DNA含量。结果 建立该法的最佳实验条件为PCR循环次数为35次，杂交温度为42℃，杂交时间为1h，探针浓度为0.2uM，包被浓度为10μg/ml。经北京胸部肿瘤结核病医院、北京胸科医院及中国人民解放军第309医院三家医院621例临床标本验证，其中结核组464例，该法检出率为57．3％（266／464），而涂片法仅为31．7％（147／464），培养法为35．8％（166／298），PCR电泳法检出率为45．7％（212／464），各法比较存在显差异（P＜0．01）。结论 本法作为结核病的一项免疫学和分子生物学检测指标，具有较高的临床推广应用价值。     

应用酶联免疫斑点试验检测综合医院护理人员结核潜伏感染的调查研究

目的应用酶联免疫斑点试验(ELISPOT,即T-SPOT.TB)检测并了解医院护理人员结核分枝杆菌潜伏感染情况。方法收集我院182名护理人员(其中内科病区75人,外科病区78人,辅助科室29人)的外周血进行TSPOT.TB试验,分析结核潜伏感染情况。结果 182名护理人员中,T-SPOT.TB阳性者47人,总潜伏感染率25.82%;内科、外科及辅助科室的T-SPOT.TB阳性率分别为22.67%(17/75)、26.92%(21/78)、31.03%(9/29),差异无统计学意义(χ~2=0.85,P=0.65)。工作年限≥3年的护士T-SPOT.TB的阳性率31.9%(37/116),明显高于工作年限3年的护士T-SPOT.TB阳性率15.2%(10/66),差异有统计学意义(χ~2=6.16,P=0.01),其RR值为2.62(95%CI:1.21~5.71)。结论综合性医院的护理人员结核潜伏感染率可受工作年限的影响,且与工作年限呈正相关,而受所在科室类别的影响较小。     

酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测在艾滋病合并结核感染中的意义研究

目的研究酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测在艾滋病合并结核感染中的意义。方法选取2015年6月至2016年6月该院收治的84例患者为研究对象,以患者是否合并结核感染为依据,分为两组,各42例,对比单一检测法、酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测法的诊断效果。结果结核组的联合检测阳性率高于单一检测,差异显著;组间联合检测效果相比,差异显著。结论与单一检测方相比,艾滋病合并结核感染患者经酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测,提高了诊断效果,避免了漏诊与误诊,临床上值得推广。     

T细胞酶联免疫斑点试验检测在综合医院护理人员结核潜伏感染(LTBI)状况调查中的应用

目的观察并分析应用T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)检测综合医院护理人员结核潜伏感染(LTBI)状况。方法将我院工龄超过1年的201名护理人员,其中内科、外科、辅助科室分别为82,85,34名。均予以外周血T-SPOT.TB检测,分析LTBI状况。结果所有受检人员中共有50名T-SPOT.TB检测结果为阳性,总潜伏率为26.37%;工作年限不足3年与工作年限≥3年的受检人员T-SPOT.TB阳性检出率分别为15.00%与31.40%,差异有统计学意义,且后者阳性检出率明显更高(P<0.05);不同科室中,工作年限≥3年者其阳性检出率均较工作<3年者高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论T-SPOT.TB检测技术作为新技术广泛应用于临床筛查结核病,具有高灵敏度和特异度,能快速、准确地诊断结核病感染,对控制传染源、降低感染率与提升检出率均具重要意义,可作为临床辅助诊断结核病的重要检测方式。     

护理干预对T细胞酶联免疫斑点试验结果阳性风湿性疾病患者心理状况的影响

目的:探讨护理干预对T细胞酶联免疫斑点试验结果(T-SPOT.TB)阳性风湿性疾病患者心理状况的影响。方法:将收治的64例T-SPOT.TB阳性风湿性疾病患者进行护理干预,采用汉密顿焦虑量表(HAMA)评定患者在得知T-SPOT.TB结果的次日和1周后的心理状况。结果:本组患者均顺利完成连续性治疗,正常出院。干预后HAMA总分及焦虑、害怕、紧张、失眠、记忆或注意障碍各因子得分明显低于干预前(P0.01)。结论:及时的护理干预可有效缓解T-SPOT.TB阳性风湿性疾病患者焦虑、害怕、紧张等负性情绪,提高患者满意度。     

酶联免疫斑点试验和胞内细胞因子测定及其在人类免疫缺陷病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞研究中的应用

酶联免疫斑点试验 (ELISPOT)和胞内细胞因子测定是近年测定T细胞功能的新方法 ,在国外已逐渐用于肿瘤和人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染的基础和临床研究。HIV感染是人类面临的较严峻的问题 ,HIV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对控制HIV感染具有十分重要的作用。将这 2种方法用于HIV特异性CTL研究 ,有助于了解机体感染HIV后的免疫机制和防治艾滋病策略。现将这 2种方法和特点及其在HIV特异性CTL研究方面的应用情况介绍如下。一、ELISPOT方法和特点1.方法 :ELISPOT用于测定抗原刺激后分泌某种特定细胞因子 (以IFN γ为例 )…     

T SPOT-TB试剂盒在结核病临床诊断中的应用价值

目的:研究T SPOT-TB试剂盒在结核病临床诊断中的应用价值.方法:应用T SPOT-TB试剂盒检测结核感染组(包括26例临床已确诊结核病患者和4例PPD强阳性志愿者)和非结核感染组(包括20例PPD阴性的非结核病患者和10例PPD阴性的健康对照者)外周血单个核细胞,观察斑点形成细胞(SFC)的数量.结果:30例结核感染组中,28例(93.3%)T SPOT-TB检测阳性,其中4例PPD强阳性志愿者检测均为阳性;30例非结核感染组中,仅1例(3.4%)T SPOT-TB检测阳性.T SPOT-TB阳性组的SFC显著高于T SPOT-TB阴性组.在29例T SPOT-TB阳性者中,31.0%检测孔A(ESAT-6抗原)和B(CFP-10抗原)均阳性,44.8%仅检测孔A阳性,24.2%仅检测孔B阳性.结论:TSPOT-TB试剂盒在检测结核感染、辅助结核病诊断方面具有很高的应用价值.