大鼠骨骼肌细胞葡萄糖—6磷酸酶活性的细胞化学研究

本文用酶细胞化学葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)技术对大鼠骨骼肌细胞进行了超微结构研究,结果证实,骨骼肌细胞内含有G6Pase。G6Pase活性反应产物定位于肌浆网与核被膜内,在肌浆网内,该酶活性反应产物呈异质性分布。根据肌浆网与肌膜系统之间的位置关系,骨骼肌偶联有以下3种类型:(1)终池与横小管之间的偶联,如三联体;(2)周围肌浆网与表面肌膜之间的偶联,即周围偶联;(3)肌膜下肌浆网与肌膜下横小管之间的偶联,即肌膜下偶联。对本实验结果进行了讨论。     

大鼠心肌偶联的G6P酶细胞化学研究

心肌肌膜系统与连接肌浆网之间接触的特殊结构称为心肌偶联,它广泛地存在于哺乳类动物心肌细胞内。韩氏等首先用内质网标志酶G6P酶观察了大鼠心肌细胞的偶联结构,证实了横小管与连接肌浆网形成内部倡联以及肌膜与肌膜下池构成周围偶联。本文应用细胞化学G6P酶技术对大鼠心房和心室的心肌偶联作进一步观察。现报道如下:     

益气活血方逆转心肌肥大过程中心肌超微结构的变化

【目的】观察益气活血方治疗腹主动脉缩窄大鼠所致心肌肥大对心肌超微结构的影响。【方法】用多道生物信号系统记录血压和心率,用电子显微镜观察心肌超微结构的变化。【结果】(1)压力负荷所致心肌肥大表现肌膜下水肿,肌质网及T管扩张,心肌闰盘间隙显著扩大。(2)开搏通组的肌质网及T管扩张程度减轻,闰盘病变程度轻,大部分心肌肌膜下水肿不明显。中药组的肌质网扩张程度轻于开搏通组,部分闰盘损害略重于开搏通组。未见核染色质溶解,也未见高血压Ⅱ组的核损伤。【结论】益气活血方能部分逆转腹主动脉缩窄大鼠的心肌超微结构,如肌质网、闰盘、细胞核。     

心肌钙离子调节机制的研究进展

参与心肌兴奋—收缩偶联(Excitingcontraction coupling简称E-C偶联)的钙来源问题未完全弄清。本文就近年来国内外这方面的研究进展作一综述。一、肌膜Ca~2+调节及对E-C偶联的作用 Langer等认为,心肌肌膜上至少存在两套调节Ca~2+的系统,即(1)肌膜外侧糖膜对Ca~2+通透性的调节;(2)镶嵌球蛋白对Ca~2+通透性的调节。 (一)肌膜糖膜对Ca~2+通透性的调节 1.组织化学特性组织化学染色显示心肌脂质双分子层外尚有两层结构,外层叫外衣(30nm),内层叫被     

骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构瞬时变化研究

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化。方法：采用双向红外线探测器-计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术，对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定，采用透射电镜对该肌在电刺激后0.8,5.6,8.4ms及静息期的超微结构变化进行对比研究。结果：骨骼肌组织处于静息期时，其肌膜与肌纤维的间隙较宽，受电刺激后0.8ms开始至8.4ms，肌膜与肌细胞间的间隙大大变窄。并发现骨骼肌组织在电刺激后0.8，5.6及8.4ms时肌浆网前端的膜产生两个圆孔，而当骨骼肌处于静息期时肌浆网膜并无此形态结构。结论：当骨骼肌兴奋-收缩偶联发生时，肌膜在产生去极化的同时产生位移，并与肌纤维的间距发生改变；骨骼肌收缩时肌浆网膜出现小孔。     

人参果皂甙对失血性休克犬心肌保护作用的电镜观察和Ca^2 …

探讨人参果皂甙对失血性休克犬心肌的保护作用。方法；采用健康杂种犬１６只，随机均分为失血性休克组，和失血性休克人参果皂甙治疗组。观察失血后５ｈ犬存活率及心肌超微结构和Ｃａ＾２＋改变。结果：与ＨＳ组比较，１ＨＳＧ组犬存活率明显提高差异显著；２．ＨＳＧ组犬心肌超微结构病变，如肌膜，肌原纤维，肌浆网，线粒体，闰盘等细胞器损害明显减轻；３．ＨＳＧ组犬心肌肌浆多内Ｃａ＾２＋增加，线粒体内Ｃａ＾２＋减少。     

人参果皂甙对失血性休克犬心肌保护作用的电镜观察和Ca~(2+)分析

目的 :探讨人参果皂甙对失血性休克犬心肌的保护作用。方法 :采用健康杂种犬 1 6只 ,随机均分为失血性休克组 (HS,放血使血压降至 5.3k Pa,并在这个血压上维持 5h)和失血性休克人参果皂甙治疗组 (HSG,放血前 1 h肌注人参果皂甙生理盐水溶液 ,2 5mg/kg体重 ,其它处理同 HS组 )。观察失血后 5h犬存活率及心肌超微结构和 Ca2 +改变。结果 :与 HS组比较 ,1 HSG组犬存活率明显提高 ,差异显著 (P<0 .0 0 5) ;2 HSG组犬心肌超微结构病变 ,如肌膜、肌原纤维、肌浆网、线粒体、闰盘等细胞器损害明显减轻 ;3HSG组犬心肌肌浆网内 Ca2 +增加 ,线粒体内 Ca2 +减少。结论 :这些结果从不同水平上提示人参果皂甙有抗休克、保护心肌作用     

心房颤动对右心室超微结构影响的研究

目的:探讨心房颤动(atrial fibrillation,AF)时右室心肌超微结构的变化。方法:健康杂种犬17只,随机分为快速心房起搏组(11只)和对照组(6只),通过快速心房起搏建立慢性AF动物模型,采用光镜和电镜技术观察AF犬右室心肌结构变化。结果:与对照组相比,AF犬右室心肌可见:肌原纤维排列紊乱,肌节结构模糊、断裂;线粒体数量明显增多,丛状聚集,肌原纤维之间线粒体少见,线粒体变长, 大小不一;肌浆网肿胀、破裂,数量减少;核膜凹凸明显,有时可见分叶核,异染质成簇聚集在胞浆中;闰盘结构不连续,扭曲、模糊;糖原在肌溶解区积聚,偶可形成"糖原湖",右室心肌胶原含量显著增高(7.62±0.73 vs 12.40±4.47,P<0.05)。结论:AF时右室心肌超微结构发生了明显变化,右室心肌结构重构可能是其收缩和舒张功能改变的基础。     

成人小肠肌层的超微结构观察

本实验对成人小肠肌层进行了超微结构观察,发现在环肌层的最内面(即粘膜面),存在有一层特殊平滑肌层(SML),有1～6排特殊平滑肌细胞,其特点为体积小、电子密度高,在SML和环肌主部(MCM)之间有一结缔组织间隙。该肌层及间隙内有较致密的神经分布,其神经密度及膨体出现率为全肌层最高部位,神经与肌肉间相距较近。MCM次之,LM神经密度最低。除SML外,MCM和LM神经与肌肉间距常在100nm以上。中间连接可见于肌层的三个部位:SML、MCM和LM,但缝隙连接只见于MCM。间质细胞存在于肌层的结缔组织隔内,其突起可见与平滑肌以及轴索形成特殊连接。在SML的间质细胞内还可见有类肌丝样结构。本文对以上发现与其它实验动物的肌层超微结构文献报告作了比较,并对以上超微结构特征的可能生理意义进行了讨论。     

骨骼肌胞浆Ca2+稳态与肌疾病

骨骼肌胞浆内Ca~(2+)稳态是Ca~(2+)转运系统对Ca~(2+)释放和Ca~(2+)摄取保持动态平衡的结果。本文将从细胞和分子水平 讨论肌浆网(SR)钙转运系统的分子基础以及某些肌疾病的发病机制。1 胞浆Ca~(2+)的来源 骨骼肌兴奋-收缩偶联过程中有两个因素,即肌膜的去极化和胞浆内大量的Ca~(2+)快速聚集。前者通过二氢吡啶受     

大鼠心肌细胞葡萄糖—6—磷酸酶活性的超微结构定位

本实验对大鼠心房及心室的心肌细胞葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性进行了电镜观察,G-6-Pase反应产物见于肌浆网(SR)和核被膜内。我们发现心肌细胞内G-6-Pase活性呈现异质性分布,周围连接肌浆网(PJ-SR)和内部连接肌浆网(IJ-SR)内的G-6-pase反应产物较多,核被膜内含量较少,而网状肌浆网(N-SR)则含量稀少,或者缺乏。本文对心肌细胞内G-6-Pase的可能功能意义进行了讨论。     

闰盘处蛋白质的相互作用以及相关心脏疾病

 闰盘是相邻心肌细胞在纵轴方向上的连接,在心肌细胞机械偶联和电偶联中发挥重要作用。闰盘处的3种连接 (桥粒、黏着连接和缝隙连接)、离子通道和锚蛋白G在功能上相互影响、相互依存。其中任何一个的异常都会导致另几个的结构和功能改变,从而引起整个闰盘的结构和功能异常,甚至导致心脏疾病。目前,国内外对于闰盘处各种蛋白质相互作用的复杂性和重要性以及其对心脏疾病的意义的认识尚存不足,本文就近年来该方面的研究进展作一综述。     

Atorvastatin prevents connexin43 remodeling in hypertrophied left ventricular myocardium of spontaneously hypertensive rats

Background  Connexin43 (Cx43) is the predominant gap junction protein in heart and is involved in the control of cell-to-cell communication to modulate the contractility and the electrical coupling of cardiac myocytes. Left ventricular (LV) hypertrophy is accompanied by changes of Cx43 expression. Recent studies have demonstrated that statins reduced cardiac hypertrophy. However, it is unknown whether statins can affect Cx43 expression in hypertrophied left ventricular myocardium. This study was designed to assess the effects of atorvastatin on LV hypertrophy and Cx43 expression in spontaneously hypertensive rats (SHR).
Methods  Nine-week old SHRs were randomly divided into two groups. Some received atorvastatin at 30 mg/kg by oral gavage once daily for 8 weeks (SHR-A); others received vehicle. Age-matched Wistar-Kyoto rats (WKY) received atorvastatin or vehicle for 8 weeks were used as controls. At the end of the experiment, we investigated LV hypertrophy and the expression of Cx43 in LV myocardium in four groups. Cx43 expression was investigated by the methods of Western blotting, immunohistochemistry, and transmission electron microscope. LV hypertrophy was accessed by pathological analysis and plasma brain natriuretic peptide (BNP) level.
Results  LV hypertrophy was prominent in untreated SHR. In SHR, LV myocardium Cx43 level was upregulated, and the distribution of Cx43 was displaced from their usual locations to other sites at various distances away from the intercalated disks. After atorvastatin treatment, myocardium Cx43 level was reduced in SHR-A, and the distribution of Cx43 gap junction became much regular and confined to intercalated disk. Statins also prevented LV hypertrophy in SHR.
Conclusions  These results provide novel in vivo evidence for the key role of Cx43 gap junctions in LV hypertrophy and the possible mechanism in anti-hypertrophic effect of statins. Atorvastatin treatment may have beneficial effects on LV hypertrophy in spontaneously hypertensive rats.

     

人心脏间隙连接蛋白43的时空表达

目的探讨人心脏间隙连接蛋白43(Cx43)的时空表达规律。方法应用SP免疫组化和图像分析方法,检测胎儿、新生儿和成人心肌Cx43蛋白表达和含量变化。结果(1)胎儿和新生儿Cx43呈斑点状遍布于整个心肌的细胞质内和细胞膜表面,少数位于闰盘处;(2)成人Cx43在心房肌细胞非均质分布于细胞侧面连接处和端闰盘处;心室肌典型地排列在闰盘处;(3)Cx43分布密度随年龄增长而降低,且具有腔室差异,胎儿和新生儿心房<心室,成人心房>心室。结论随着年龄的增长Cx43从细胞侧表面向端-端闰盘处转移。这种位置移动是心脏机械收缩和电传导的生理性调整。     

粘着斑蛋白α-catenin在大鼠心脏中的表达

目的　探讨粘着斑蛋白α catenin在大鼠心脏中的表达分布方式以及心肌细胞发育过程中增龄变化规律。方法　应用S -P免疫组化方法分别对幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞粘着斑蛋白α catenin的表达进行观测。结果　细胞粘着斑蛋白α catenin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达。幼年时期α catenin的免疫标记颗粒大部分集中在心肌细胞末端的闰盘处 ,少量分散地分布于细胞表面和胞浆中 ;青年、中年和老年大鼠α catenin的免疫标记典型分布在心肌细胞末端的闰盘处。结论　在大鼠心肌发育过程中 ,α catenin的表达分布存在增龄变化 ;粘着斑蛋白α catenin的分布方式与闰盘的发育是一致的     

兰尼碱受体1结构及其通道门控机制的研究进展

兰尼碱受体(ryanodine receptor,RyR)是位于肌浆网膜上的细胞内Ca2+释放通道,在骨骼肌和心肌兴奋收缩偶联等生理过程中发挥重要作用.随着单粒子冷冻电镜技术的应用以及数据分析能力的提高,近期来自中国、美国以及德国的3个课题组分别获得了整体分辨率为3.8 (A)(1 (A)=10m)、4.8A和6.1A的高清晰RyR1结构图片,相关研究同时发表于2015年第1期的Nature上,是近年来RyR结构及其门控研究的重要进展.RyR1为相对分子质量＞2 200 000的同源四聚体离子通道,主要包括由NTD、SPRY、P1、P2、B-sol以及C-sol等结构域组成的胞质区和由SI～S6、VSL以及CTD等结构域组成的通道区.Ca2+作为RyR1门控的主要影响因子,能够与胞质区EF-hand亚结构域结合,引起通道构象的变化并最终导致通道的开放.     

缝隙连接蛋白40与心房颤动关系的研究进展

心房颤动(房颤)是临床上最常见的心律失常之一。房颤的具体机制至今尚未完全阐明。缝隙连接是存在于相邻细胞间的一种特殊膜蛋白通道,使相邻细胞进行直接通讯,对心脏的协调收缩非常重要。近年研究发现,心脏的缝隙连接与心律失常有着密切关系。缝隙连接蛋白(Cx)40是心房肌主要的Cx,其在房颤时数量、分布及磷酸化状态发生变化,心房纤维化、心房扩大、炎症以及遗传因素均可使Cx发生改变,从而促进房颤的发生与维持。     

视盘三维参数对青光眼视神经损害评价的应用研究

目的通过对海德堡视网膜断层扫描仪Ⅱ型（HRT-Ⅱ）视盘参数与激光扫描偏振仪（GDX）视网膜神经纤维层（RNFL）厚度的相关性分析,探讨HRT-Ⅱ盘沿参数对青光眼视神经损害的评价。方法使用HRT-Ⅱ和GDX仪器对原发性慢性闭角型青光眼患者51例（73眼）,进行视盘参数和RNFL厚度测量,并进行视盘参数与RNFL厚度的相关分析。结果 RNFL厚度与盘沿面积（RA）、盘沿体积（RV）无相关性;RNFL厚度全周平均值与盘沿面积/视盘面积（RA/DA）、盘沿体积/视盘体积（RV/DV）呈正相关（=0.430、0.444,〈0.05）;视神经纤维指数（NFI）与盘沿面积/视盘面积（RA/DA）、盘沿体积/视盘体积（RV/DV）呈负相关（=-0.564、-0.545,〈0.01）;RNFL厚度上方平均值与上方盘沿体积/上方视盘体积（SRV/SDV）呈正相关（=0.472,〈0.05）;RNFL厚度下方平均值与下方盘沿体积/下方视盘体积（IRV/IDV）呈正相关（=0.426,〈0.05）。结论 HRT-Ⅱ视盘参数中,应用盘沿/视盘参数优于直接应用RA、RV参数,应用RV/DV三维参数优于RA/DA参数。     

EB病毒潜在膜蛋白在胃贲门腺癌组织中的表达

应用Ｓ－Ｐ免疫组化方法对８０例贲门腺癌进行抗ＥＢ病毒潜在膜蛋白单克隆抗体的检测。结果显示：癌组织阳性１４例，阳性部位主要位于癌细胞膜和胞浆内。对ＥＢＶ感染病例的形态学特征进行描述，并讨论ＥＢＶ与癌发生的联系。