正常人骨髓CD34~＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，李秀森，唐佩弦，孔繁华关键词造血干细胞；骨髓中国图书资料分类号Ｒ５５１．１ＣＤ３４＋ＨＳＣ／ＨＰＣ因具有自我更新、多向分化及重建长期造血的独特生...     

正常人骨髓CD34~＋造血干／祖细胞的高效富集与其功能亚群

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的高效富集与其功能亚群１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，唐佩弦，魏文，毛宁，孔繁华关键词造血干细胞，骨髓中国图书资料分类号Ｒ３２９．２４ＣＤ３４是目前所能认识的表达在人类ＨＳＣ／ＨＰＣ上的最早期白细...     

流式细胞术对免疫磁珠法富集的CD34^＋造血干／祖细胞分析与鉴定

流式细胞术对免疫磁珠法富集的ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞分析与鉴定１００８５０北京军事医学科学院张双喜，奚永志，唐佩弦关键词造血干细胞；流式细胞术；细胞分离术中国图书资料分类号Ｑ３３ＣＤ３４＋造血细胞为造血调控的基础研究、骨髓移植与基因治疗的最理想的靶...     

大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合缺失的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术，对４１例大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合性缺失进行研究。结果表明，３８例大肠癌信息个体中有２１例（５５．３％）发现ＤＣＣ基因杂合缺失。ＤＣＣ基因杂合性缺失与肿瘤大小、组织学类型和浸润深度无关，但有淋巴结转移（８０．００％）和ＤｕｋｅｓＣ、Ｄａｄｗｅ（７１．４％）大肠癌ＤＣＣ基因杂合缺失率显著高于无淋巴结转移（３９．１％）和Ｄｕｋｅｓ     

体外培养扩增的人脐血CD34+/细胞形成HPP-CFC的能力

目的：评价ＣＤ３４＾＋细胞体外扩增时高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）的变化。方法：利用ｍｉｎｉ－ＭＡＣＳ分离脐血ＣＤ３４＾＋细胞,流式细胞仪（ＦＡＣＳ）测定细胞纯度（８６％～９５％）。应用含ｒｈＳＣＦ、ｒｈＩＬ－３、ｒｈＩＬ－６和ｒｌＧＭ－ＣＳＦ的培养体系扩增ＣＤ３４＾＋细胞。分别于培养的第１,２和４周收取细胞进行ＨＨＰ－ＣＦＣ测定,测试体系为含重组人ＳＣＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３、ＥＰＯ等细胞因子的半固体甲基纤维素。结果：测试体系中加入单个细胞因子不能产生ＨＰＰ－ＣＦＣ,含ｒｈＩＬ－３和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ体系产生的集落小且主要为巨噬细胞集落,由所有因子组成的体系产生的集落大而致密,包含粒系３种类型。此外,尽管细胞总数量显著增加,扩增的ＣＤ３４＾＋细胞ＨＰＰ－ＣＦＣ形成率随培养时间的延长而减少。结论：本方     

1．5Gy X射线全身照射对小鼠胸腺细胞CD_3、CD_4、CD_8分子表达及

采用单克隆抗体免疫荧光技术，流式细胞术检测，观察了１．５ＧｙＸ射线单次全身照射（剂量率０．２８６Ｇｙ／ｍｉｎ）对小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的影响，及胸腺细胞亚群和细胞周期的变化。结果表明，中等剂量照射后，胸腺细胞ＣＤ３分子的百分率明显增高，胸腺细胞ＣＤ３阳性细胞比例为对照组的１７７．６１％。同时，胸腺中ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞比例亦显著增加，分别为对照的２０２．５％及１６５．８７％。然而，胸腺中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞的比例显著降低，为对照组的６８．２８％，与此同时，胸腺细胞周期中Ｓ期细胞比例明显降低，为对照组的５５．１４％。     

环孢霉素亲合素在儿童难治性肾病中基因表达的意义

环孢霉素亲合素（ＣｙＰ）是细胞环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）的受体，广泛存在生物体内，在自身免疫性疾病中发挥着重要作用。本文使用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，研究儿童难治性肾病患者用ＣｓＡ治疗前后ＣｙＰｍＲＮＡ表达及ＣｓＡ的浓度与ＣｙＰｍＲＮＡ表达之...     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力

根据阳性选择策略，采用ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将其在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＳ）组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。经ＦＡＣＳ鉴定所富集的ＣＤ３４＋造血细胞纯度平均＞９０％。人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞，最高可扩增１７７０倍。与ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ相反，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ扩增量较低，最高仅为２．３６和２．４倍，且仅在第１周出现，随后迅速减少至停止。     

脐带血造血干细胞的“质”“量”研究

目的 对脐带血造血干细胞移植的“质”“量”作出评估，使其更广泛有效地应用于临床。 方法 利用免疫磁珠分离法、ＦＡＣＳ分析与分选、体外液体培养，铺展贴壁等方法对脐带血ＣＤ３４＾＋造血干、粗细胞及其的数量、体外增殖分化性能、生长因子扩增效应，植入成人骨髓基质效率等进行研究，数据经ｔ检验。结果 脐带血有核细胞、ＣＦＣｓ、ＣＤ３４＾＋细胞及其亚群等的绝对数量明显低于常规骨髓移植所需的细胞数量，但脐带血ＣＤ     

在大肠杆菌中以非融合蛋白形式高效表达丙型肝炎核心蛋白

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增出完整的丙型肝炎病毒核心蛋白基因，将其克隆于表达载体ｐＢＶ２２０ ＰＲＰＬ启动子的下游，构建了重组质粒ｐＢＶ－ＨＣＶ；转化大肠杆菌后，以非融合蛋白方式表达了丙型肝炎病毒核心蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示，此蛋白的分子量约为２０ｋＤａ，表达量约占菌体蛋白的１１％；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验证明，此蛋白能与慢性丙型肝炎患者血清发生特异反应。序列分析结果表明，克隆于ｐＢＶ     

IL-1对多发性骨髓瘤细胞粘附分子表达的影响

为探讨人骨髓瘤细胞株ＫＭ３表面粘附分子的表达及ＩＬ－１对粘附分子表达的影响，应用直接免疫荧光标记流式细胞术分析人骨髓瘤细胞株ＫＭ３细胞表面粘附分子表达，以荧光阳性率和平均荧光强度两个指标反映粘附分子的表达量，研究ＩＬ－１对ＫＭ３细胞粘附分子表达调控。发现正常情况下，ＫＭ３细胞表面表达粘附分子ＣＤ４４、ＣＤ５４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ，不表达ＣＤ５６和ＣＤ４９ｄ；ＩＬ－１以剂量非依赖方式促进ＫＭ３细胞表面ＣＤ４４、ＣＤ５４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ表达。为进一步应用ＫＭ３细胞探讨粘附分子在ＭＭ发病机制中的作用提供实验依据     

正常人骨髓CD34~＋造血干／祖细胞的超微特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的超微特征１０００３９北京军事医学科学院附属医院奚永志，张双喜，江飞子，唐佩弦，魏文，孔繁华关键词造血于细胞；超微结构中国书资料分类号Ｒ３２９．２４经典的干细胞概念仅基于细胞的功能方面，无任何形态学的特征。那么ＨＳ...     

人胎肝FLT3配基克隆的多样性

人胎肝ＦＬＴ３配基克隆的多样性周生唐佩弦毛宁军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０ＦＬＴ３（ＦＭＳ－ｌｉｋｅｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ３）与ＦＭＳ（ＣＤ１１５）和ＫＩＴ（ＣＤ１１７）均属Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族。ＦＬＴ３主要表达于骨髓ＣＤ３４＋...     

低剂量X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞CD3分子表达的适应性反应

采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了昆明种小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的变化。首次报道了０．０７５ＧｙＸ射线单次全身照射可诱导小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达对其后１．５Ｇｙ攻击剂量照射的适应性反应。证实，１．５Ｇｙ全身照射后胸腺ＣＤ３阳性细胞明显减少，照后１８小时仅为假照射组的３３．７４％。当１．５Ｇｙ照射前６小时预先照射０．０７５Ｇｙ时，可明显减轻其后攻击剂量对ＣＤ３分子表达的抑制作用，此时，ＣＤ３     

反义bcr／ab1重组逆转录病毒表达载体的构建及其转染对K562细胞系的影响

用逆转录聚合酶链反应技术从Ｋ５６２细胞系中扩增出ｂｃｒ／ａｂ１融合区２５３ｂｐＤＮＡ片段，经反复连接与克隆，得到含同方向串联的２、３和４个拷贝的该融合基因片段的克隆载体ｐＵＣｓ。这些片段分别反向连接到逆转录病毒表达载体ｐＤＯＲｎｅｏ。ＤＮＡ序列分析、限制性内切酶分析和菌落原位杂交证实：不同拷贝数的ｂｃｒ／ａｂ１融合区基因片段已反向插入ｐＤＯＲｎｅｏ。利用脂质体介导，将重组质粒导入Ｋ５６２细胞系后，观察到转染细胞的增殖明显被抑制     

抗T淋巴细胞单克隆抗体治疗再生障碍性贫血的临床研究

用抗人Ｔ巴细胞单克隆抗体ＳＭＵ３（抗ＣＤ３）ＳＭＵ８（抗ＣＤ８）治疗３２例再生障碍性贫血，基本治愈６例，缓解７例，明显进步１１例，无效８例，有效率７５％（２４／３２）。治疗前Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ４／ＣＤ８比例倒置，淋巴细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达增高，治疗后ＣＤ４／ＣＤ８比例恢复正常，ＨＬＡ－ＤＲ表达降低，无血清病及血细胞减少等严重毒副作用。     

电离辐射对T淋巴细胞IL-2分泌和细胞毒活性的影响

正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外经１～６Ｇｙγ射线照射后，间接免疫荧光法分析受照Ｔ细胞Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）、ＣＤ＿３及ＣＤ＿（２３）阳性细胞百分率，Ｈ￣３－ＴｄＲ掺入及释放法测定白细胞介素－２（ＩＬ－２）分泌及Ｔ细胞细胞毒活性，免疫细胞化学法分析Ｔ细胞内ＴＣＲ及ＣＤ＿３表达．结果表明，Ｔ细胞ＴＣＲ、ＣＤ．及ＣＤ＿（２５）表达及ＩＬ－２分泌和细胞毒活性皆呈照射剂量依赖性降低．受照Ｔ细胞ＩＬ－２分泌及细胞毒活性抑制在一定程度上与细胞表面ＴＣＲ、ＣＤ＿３及ＣＤ＿（２５）表达减少、活性损伤有关，而细胞表面ＴＣＲ和ＣＤ＿３表达降低可能与大量ＴＣＲ及ＣＤ＿３在受照细胞胞浆内堆积有关．     

用PCR－F、PCR－SSCP对骨髓移植植入状态的观察

应用ＨＬＡ－ＤＱＡ、ＤＲＢ、ＤＰＢ、ＤＱＢ位点聚合酶链反应一指纹图（ＰＣＲ－Ｆ）和聚合酶链反应一单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法，对５例ＨＬＡ血清学配型一致的异基因骨髓移植病人，分别于移植后３５ｄ左右进行了植入状态的观察。此方法不受供、受体性别和血型的影响，具有灵敏、准确、快速、简便等优点，其中４例以特殊带型为异基因骨髓移植提供了直接的植入证据．     

脐血与成人外周血,骨髓中造血干／祖细胞数量汲增殖比较

应用免疫磁珠分离法及甲基纤维素体外集落培养法分别观赏了脐血、成人外周血及骨骨右ＣＤ３４＾＋细胞数疸和ＣＦＵ－Ｍｉｘ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成情况，并进行了比较研究，结果显示脐血造血干／祖细胞数量及增殖能力明显高于成人外周血和骨髓，脐血中ＣＤ３４＾＋细胞数分别是成人外周血和骨髓的２０￣４０倍和４￣５倍，脐血外周血的４倍和３倍，而与骨髓基本相当。     

程序性细胞死亡调控蛋白P53、c一myc及bcl－2在人骨髓CD34~＋造血干祖细胞中的表达

程序性细胞死亡调控蛋白Ｐ５３、ｃ一ｍｙｃ及ｂｃｌ－２在人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干祖细胞中的表达１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，郝秀娟，唐佩弦，魏文，孔繁华关键词造血干细胞；基因表达中国图书资料分类号Ｑ３４３．１涉及到造血，人们更为关注...