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目的 鉴定和评估pcr联合限制性片段长度多态性(rflp)及基因测序技术对发生于外生殖器或肛周部位的5种皮肤病与性病进行hpv dna检测和分型的可行性.方法 应用hpv通用引物对(my09/11)检测组织中hpv dna,并对hpv dna阳性片段进行纯化和回收.利用4种限制性内切酶对hpv dna阳性的pcr产物进行酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)对酶切产物进行分型,然后用pcr直接测序法验证分型结果并对难以分辨或少见图形进行检测.结果 50份经病理确诊的临床样本中,共有35份hpv dna阳性,其中26份来自尖锐湿疣患者,8份来自鲍温样丘疹病患者,1份来自鳞状细胞癌患者.hpv dna阳性样本中,hpv6型19份,hpv11型3份,hpv16型8份,hpv6合并hpv 11型4份,hpv62型1份.测序结果与pcr-rflp判读的hpv型别相符.结论 pcr-rflp方法可用于hpv dna检测与分型.
abstract:
objective to assess polymerase chain reaction(pcr)combined with restriction fragment length polymorphism(rflp)and gene sequencing technologies in the detection and typing of hpv dna.methods tissue specimens were collected from skin diseases and venereal disease in perianal or genitals.pcr was performed with hpv dna general primers(my09/11)in tissue samples. positive fragments of hpv dna were purified and digested by restriction enzymes.the digested fragments were typed by po]yacrylamide gel electrophoresis(page).the results were verified by direct sequencing.results in 50 clinical samples there were 35 hpv dna positive,including 26 from patients with condyloma acuminatum,8 from patients with bowenoid papulosis,and 1 from patients with squamous cell carcinoma.in hpv dna positive samples,19 were hpv6,3 were hpv11,8 were hpv16,4 were hpv6 and hpv 11,and i was hpv62.sequencing results were in accordance with the pcr-rflp results .conclusion pcrrflp method is effective in the detection and typing of hpv dna. 相似文献
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聚合酶链反应和核酸杂交检测人睾丸癌组织中人乳头状瘤病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
应用聚合链反应*(PCR)结合核酸杂交方法检测27例睾丸癌组织标本。结果发现:人乳头状瘤病毒HPV16阳性率为14.8%(4/27)。HPV18阳性标本未检出,结果提示:HPV感染与睾丸癌低相关性,首次报道睾癌中存在HPV感染。 相似文献
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聚合酶链反应和核酸杂交在检测阴茎癌人乳头状瘤病毒中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
人乳头状瘤病毒(HPV)为一种潜在的癌基因,可能为多种泌尿生殖道肿瘤的致病因子。作者用高敏感的聚合酶链反应(PCR)结合和核酸杂交方法,检测28例阴茎癌组织中的HPV16,18型病毒,结果表明:阴茎癌组织中HPV16的阳性检出率为50%(14/28),HPV18的阳性检出率为10.6%(3/28)。提示HPV16感染在阴茎癌的发生过程中可能具有重要作用,并且与患者吸烟有关 相似文献
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阴茎尖锐湿疣有乳头状瘤病毒聚合酶链反应(PCR)检测 总被引:1,自引:0,他引:1
应用聚合酶链反应,检测34例男性生殖器尖锐湿疣标本中HPV6.11型病毒。结果显示:在20例具有典型病理特征和14例组织学特征非典型标本中均检出HPV6.11型病毒。表明PCR是诊断尖锐湿疣快速,简便,高敏感和特异性强的方法。 相似文献
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肾癌与高危型人乳头状瘤病毒基因的相关性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨肾癌与高危型人乳头状瘤病毒基因 (HPV1 6 ,1 8DNA)的相关性。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)和DNA限制性内切酶酶切技术 (DNARET)对 90例成人肾恶性肿瘤组织 (其中肾透明细胞癌、肾乳头状癌、肾颗粒细胞癌各 30例 )的HPV1 6、1 8E7基因进行实验研究 ,2 0例正常肾脏组织为正常对照 ,HPV1 6、1 8阳性克隆作为阳性对照 ,去离子三蒸水做实验体系阴性对照。对每一阳性标本行限制性内切酶技术。结果 肾透明细胞癌、肾乳头状癌、肾颗粒细胞癌中HPV1 6基因表达率分别为 60 .0 %、86 .7%、63 .3 % ,总的基因表达率为 70 .0 %。HPV1 8的基因阳性率分别为 46 .7%、66 .7%、44 .3 % ,总的基因表达率为 52 .2 %。结论 高危型HPV1 6、1 8DNA与肾恶性肿瘤有一定的关系 ,尤其是HPV1 6基因表达率明显高于HPV1 8型 (P <0 .0 5) ,其中肾乳头状癌的HPV1 6、1 8基因阳性率明显高于肾透明细胞癌和肾颗粒癌 (P <0 .0 5) ,证实了高危型人乳头状瘤病毒感染是肾癌的重要致癌因素之一 相似文献
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人乳头状瘤病毒与膀胱炎及膀胱癌的关系丁强,张元芳,孙逊我们对48例膀胱癌,25例膀胱炎及7例正常膀胱组织进行人乳头状瘤病毒(HPV)16,18型DNA同源序列检测,报告如下。临床资料膀胱癌标本共48例,其中新鲜标本23例,石蜡标本25例。25例膀胱炎... 相似文献
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采用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR-SSR)对65例肾移植供受HLA-DR53组(DR4、DR7、DR9)进行基因水平分型。结果本组有位点均分型成功,无一例假阳性和假阴性;每位点重复10次,重复100%;总耗时5小时。分型结果经标准细胞株、限制性内切酶分析和寡核苷酸探针杂交予以确证,特异性100%。显示本方法用于HLA-DR53组基因分型具有高分辨率、高特异性和简捷快速物特点,适合于临床应用 相似文献
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采用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)对65例肾移植供受者的HLA-DR53组(DR4、DR7、DR9)进行基因水平分型。结果本组所有位点均分型成功,无一例假阳性和假阴性;每位点重复10次,重复性100%;总耗时5小时。分型结果经标准细胞株、限制性内切酶分析和寡核苷酸探针杂交予以确证,特异性100%。显示本方法用于HLA-DR53组基因分型具有高分辨率、高特异性和简捷快速的特点,适合于临床应用。 相似文献
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王栋 《国际泌尿系统杂志》1999,(2)
HPV是常见的DNA病毒之一,其基因型可分为低危型和高危型,后者常与恶性肿瘤有关。本文详述了HPV的生物学特性、在泌尿生殖系肿瘤中的基因表达情况以及致癌的分子生物学机理 相似文献
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人乳头状瘤病毒基因在泌尿生殖系肿瘤中表达的研究现状 总被引:2,自引:0,他引:2
王栋 《国外医学:泌尿系统分册》1999,19(2):65-67
HPV是常见的DNA病毒之一,其基因型可分为低危型和高危型,后者常与恶性肿瘤有关。本文详述了HPV的生物学特性,在泌尿生殖系肿瘤中的基因表达情况以及致癌的分子生物学机理。 相似文献
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应用逆转录酶链式反应(RT-PCR)技术,以β-微球蛋白基因为内对照,对28例术前未接受化疗的膀胱癌标本及12例正常膀胱粘膜MD1基因的表达进行了分析,82.1%(23/28)膀胱癌和41.7%(5/12)正常膀胱粘膜在167bp处显示MDR1基因特异的扩增片段,全部标本在120bp处显示β-微球蛋白基因特异的扩增片段。结果表明,膀胱癌及正常膀胱粘膜存在内源性MDR1基因的表达,从而提示膀胱癌患者对化疗药物敏感性的差异可能与其MDR1基因的异常表达有关。同时证实RT-PCR技术是一种灵敏的,可靠的MDR1基因表达的检测方法。 相似文献
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<正> 先天性的人巨细胞病毒(HCMV)感染是引起出生缺陷和胎儿致死性疾病的一个重要原因,而且到目前尚无有效的治疗方法。对先天性的 HCMV 感染的研究国内外大多数学者用新生儿尿样和脐带血为材料,其感染率在1~2%左右。这一结果对在孕早期宫内疾病做出诊断帮助不大。为此,研究一种在孕早期对先天性HCMV 感染的产前诊断方法是十分必要的,对预防带有疾病的胎儿出生有重要的意义。我们在国内首次利用聚合酶链反应(PCR)技术对68例早孕人胚组织进行了 HCMV 感染的研究,检测结果显示在16例绒毛样品中有特异性 HCMV 的基因 相似文献
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套式序列特异引物聚合酶链反应技术的建立及其在HLA配型中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
磁式序列特异引物聚合酶链反应方法,用于HLA-DR基因分型。利用一对外引物扩增HLA-DRB1第2外显子部分片段,作为第2次扩增的模板,PCR循环参数; 相似文献
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应用聚合酶链反应探讨乙肝病毒感染与胆石症的关系 总被引:5,自引:0,他引:5
目的探讨乙肝病毒感染在胆石症发病中的作用。方法应用聚合酶链式反应技术(PCR),对32例血清乙肝标志物阳性的胆石症患者和20例乙肝标志物阳性的非胆石症患者的石蜡包埋胆囊标本进行HBV-DNA检测。结果32例胆石症患者的胆囊标本HBV-DNA阳性检出率为40.63%,20例非胆石症患者的胆囊标本HBV-DNA阳性检出率为15%。结论提示乙肝病毒感染与胆石症发生有关。用PCR技术检测石蜡包埋胆囊组织中的HBV-DNA是一种简便、可靠的方法。 相似文献
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作者应用敏感而特异的聚合酶链反应对我院 1989~ 1994年 17例慢性乙肝病人的胆囊标本和 35例非慢性乙肝病人的石蜡包埋的胆囊标本中的HBV DNA进行了检测 ,以探讨慢性乙型肝炎在胆石症发病中的作用。一、材料 :(1)我院 1989年至 1994年慢性乙型肝炎病人行胆囊切除术的石蜡包埋胆囊标本 17例 ,其中伴胆石症 13例。另取非慢性乙型肝炎 (乙肝标志物阳性 )病人行胆囊切除术的石蜡包埋胆囊标本 35例做对照 ,其中伴胆石症 19例。 (2 )试剂 :采用华美生物工程公司生产的PCR扩增试剂盒。用来检测HBV DNA的一对引物选自HBVC区基因… 相似文献
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目的 研究同一胃腺癌患者的配对胃腺癌组织与非癌胃组织基因差异,并对差异基因片段进行克隆,Southern印迹杂交。方法 应用随意扩增多态性DNA指纹图分析技术(arbitrarily primer polymerase chain reaction,AP-PCR),即臆断引物的无细胞分子克隆技术,亦称臆引物的聚合酶链反应,对5例配对标本作基因组差异分析。结果 与各自配对的非癌胃组织相比,所有胃腺癌 相似文献
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