复方益母草膏药效学实验研究

目的观察复方益母草膏对大鼠未孕子宫张力、对缩宫素诱发子宫痉挛性疼痛反应、血液流变学、对体外血栓形成的影响和抗炎作用,进一步证实其药效。方法采用出生后即与雄性大鼠隔离的雌性大鼠,观察用药后离体子宫对垂体后叶素的收缩反应;观察雌性大鼠腹腔注射缩宫素15分钟内扭体次数;用肾上腺素加冰水刺激制备大鼠血瘀模型,观察对全血粘度及血浆粘度、红细胞变形和聚集性的影响;用体外血栓仪测定血栓形成的长度和重量;用蛋清致大鼠足跖肿胀和二甲苯致小鼠耳廓肿胀观察其抗炎作用。结果复方益母草膏对垂体后叶素引起的子宫平滑肌收缩具有明显抑制作用;复方益母草膏20.0g·kg-1、10.0g·kg-1、5.0g·kg-1剂量组能明显减少缩宫素所致大鼠扭体次数、显著改善肾上腺素诱导的大鼠全血粘度增高;20.0g·kg-1和10.0g·kg-1组可显著抑制肾上腺素诱导的红细胞聚集、降低蛋清所致大鼠足跖肿胀;10.0g·kg-1、5.0g·kg-1和2.5g·kg-1剂量组能明显抑制正常大鼠体外血栓形成;28.0g·kg-1、14.0g·kg-1、7.0g·kg-1剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症有明显抑制作用。结论复方益母草膏能明显抑制垂体后叶素所致离体子宫收缩反应和对缩宫素所致扭体反应;可显著改善血瘀型大鼠血液流变性;能明显抑制正常大鼠体外血栓形成;可有效抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀反应和二甲苯所致小鼠耳廓的急性炎症反应,具有良好的解痉、活血化瘀、抗炎作用。     

小鼠离体子宫收缩模型定量药理学研究

目的该文探索建立了小鼠离体子宫收缩模型,以此为对象,对药物效应定量方法进行了评价研究,并与大鼠模型进行了比较。方法缩宫素诱导离体子宫收缩,观察10-8.5～10-5mol·L-1浓度范围内维拉帕米对子宫收缩的抑制作用,采用两次归一化的方法对数据进行处理,计算各浓度的抑制率,并根据实验结果计算药物的ED50,以上述方法观察维拉帕米对大鼠及小鼠离体子宫的不同作用。结果随着维拉帕米浓度增加,其对离体子宫收缩抑制作用不断增强,在10-5mol·L-1浓度下子宫收缩被完全抑制。两次归一化的方法对结果进行计算后,得到维拉帕米对大鼠及小鼠离体子宫收缩抑制作用的ED50分别为10-7.24(10-7.46～10-7.04)mol·L-1及10-7.58(10-7.78～10-7.38)mol·L-1。结论采用本方法进行实验及数据处理,可以较好的排除多种因素的干扰,从而对药物效应的强弱进行量化。经工具药物进行验证,认为该方法灵敏、可靠、经济,可以用于离体子宫活性药物的评价。     

复方缬归滴丸对子宫平滑肌作用的实验研究

目的:研究复方缬归滴丸对子宫平滑肌痉挛的松弛作用。方法:取预先雌激素化的大鼠和豚鼠子宫固定于麦氏浴槽,“缩宫素”诱发子宫持续痉挛,以张力换能器-生理信号采集系统观察复方缬归滴丸对离体子宫平滑肌的解痉作用;扭体法观察复方缬归滴丸对“缩宫素”诱导的小鼠在体子宫平滑肌痉挛的松弛作用。结果:复方缬归滴丸对“缩宫素”诱发的离体子宫平滑肌痉挛具有迅速、强烈的,浓度依赖性的解痉作用,最大松弛度达100％,ED50为1．415 mg·L-1,其解痉作用的强度明显高于当归挥发油;扭体实验中,复方缬归滴丸组小鼠的扭体次数明显低于对照组,并呈现有剂量依赖性,与对照组间存在显著性差异。结论:复方缬归滴丸可以快速有效地松弛子宫平滑肌痉挛,对原发性痛经有明显的防治作用。     

当归芍药散活性部位DSS-A-N-30对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

目的观察当归芍药散提取部位DSS-A-N-30对离体子宫平滑肌收缩的影响,并探讨其可能的作用机制。方法制备离体大鼠子宫肌条,观察DSS-A-N-30对子宫平滑肌自发性收缩,子宫收缩激动剂诱发的子宫平滑肌条剧烈收缩,KCl致子宫平滑肌条强直收缩及缩宫素(催产素)在无钙平衡盐溶液中致子宫平滑肌条持续收缩的影响。结果DSS-A-N-30(141.5,283和566mg.L-1)可以显著抑制子宫平滑肌的自发性收缩;对缩宫素(10IU.L-1)、前列腺素F2α(1mg.L-1)和乙酰胆碱(10μmol.L-1)引起的子宫平滑肌剧烈收缩有抑制作用;对KCl(60mmol.L-1)引起的子宫平滑肌强直收缩无明显作用;对缩宫素(10IU.L-1)在无钙平衡盐溶液中引起的子宫平滑肌条持续收缩有显著抑制作用。结论DSS-A-N-30可能主要通过抑制细胞内钙库释放而松弛子宫平滑肌,对子宫平滑肌收缩产生直接的抑制作用。提示DSS-A-N-30是当归芍药散的活性部位之一,有可能开发为新型痛经治疗药物。     

川芎-香附提取物对原发性痛经模型动物的作用

目的探讨3种不同提取方式提取川芎-香附药对所得到的提取物对动物原发性痛经模型的药理作用,为川芎-香附药对治疗痛经的新药开发提供依据。方法采用缩宫素致大鼠离体子宫剧烈收缩模型,观察各提取物对大鼠离体子宫活动的影响;采用小鼠原发性痛经模型以扭体次数和扭体潜伏期为指标,观察提取物的镇痛效果。结果 3种提取物能不同程度抑制大鼠离体子宫自发活动,对缩宫素引起的离体子宫剧烈收缩的抑制活性依次为超临界CO2萃取物>醇提水沉液>水提醇沉液。3种提取物均能不同程度减少缩宫素致痛经模型小鼠的扭体次数,延长扭体潜伏期。结论超临界CO2萃取川芎-香附药对(分子蒸馏纯化)所得到的提取物对大鼠离体子宫剧烈收缩模型及小鼠原发性痛经模型具有明显抑制及镇痛作用。     

舟山眼镜蛇毒心脏毒素-13的纯化、活性及尼群地平对其作用的影响

目的　从舟山眼镜蛇 (Najaatra)毒分离纯化心脏毒素并观察其心脏毒性作用和探讨作用机制。方法　用离子交换和凝胶过滤法从蛇毒中分离纯化心脏毒素 ,观察其对整体动物 ,离体器官和组织的作用及作用影响因素。结果　从舟山眼镜蛇毒中分离出 4个有心脏毒性组分 ,纯化其中 1个定名为心脏毒素 13(Cardiotoxin 13,CTX 13) ,它含有 6 0个氨基酸 ,分子质量 7 76 9ku。小鼠ivLD50 为 0 75 6mg·kg-1。对大鼠离体心脏CTX 13可使冠脉阻力增高 ,心脏收缩幅度减小 ,停于收缩期。尼群地平 (Nit)能取消CTX 13升高冠脉阻力作用 ,同时使CTX 13的负性肌力作用逆转为正性肌力作用。CTX 13可诱发猪离体冠脉环呈剂量依赖性收缩 ,其EC50 为 2 6 0mg·L-1,Nit 0 0 5 μmol·L-1使其量效曲线平行右移 ,EC50 提高到 36 0mg·L-1。但对于大鼠离体乳头肌Nit 0 83μmol·L-1对CTX 13所致心脏毒性无明显对抗作用。在整体实验中Ni0 3mg·kg-1可使大鼠ivCTX 13的最小致死量 (MLD)从 (44 4 7± 2 8 5 ) μg·kg-1提高到(5 41 2± 2 3 2 ) μg·kg-1。结论　CTX 13的心脏毒性作用除其直接心脏毒作用外 ,尚与其收缩冠脉作用有关     

青藤碱对吗啡依赖小鼠、大鼠及豚鼠离体回肠催促戒断反应的影响

目的 :研究青藤碱 (sinomenine ,SIN)对吗啡依赖小鼠、大鼠及豚鼠离体回肠催促戒断反应的抑制作用。方法 :连续递增sc吗啡 (morphine ,Mor) ,建立大鼠、小鼠及豚鼠吗啡身体依赖性模型 ;纳洛酮 (naloxone,Nal)催促诱发吗啡身体依赖性豚鼠离体回肠的戒断性收缩。结果 :(1)SIN 14.3 - 143mg·kg- 1 显著抑制纳洛酮催促后 3 0min内小鼠的跳台次数 ;(2 )SIN 10 0mg·kg- 1 降低纳洛酮催促后 1h内大鼠的戒断症状分值及抑制体重下降 ;(3 )SIN(1.5×10 - 4 - 6.0× 10 - 4 mol·L- 1 )剂量依赖性地抑制纳洛酮催促诱发的吗啡身体依赖性豚鼠离体回肠的戒断性收缩 ;(4)吗啡身体依赖性豚鼠ipSIN(87.0和 8.7mg·kg- 1 )后 ,其离体回肠经纳洛酮催促诱发的戒断性收缩幅值显著降低。结论 :SIN对吗啡身体依赖性大鼠、小鼠的戒断症状及豚鼠离体回肠的戒断性收缩具有抑制作用     

黄芪的内皮依赖性血管舒缩作用及其机制

目的　黄芪有一定的治疗高血压作用 ,本研究观察其对大鼠离体胸主动脉环舒缩的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用大鼠离体主动脉环灌流模型 ,观察累积浓度黄芪 (0 .0 1～ 10 0g·L- 1)对基础状态、KCl预收缩和去氧肾上腺素 (PE)预收缩的血管环的作用。结果　黄芪 (0 .0 1～ 10 0g·L- 1)对基础状态或KCl预收缩的内皮完整血管环张力无影响。对PE预收缩的内皮完整血管环 ,黄芪在低浓度 (0 .0 1～ 3.0g·L- 1)时呈浓度依赖性舒张作用 ,此作用可被一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(0 .1mmol·L- 1)或鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝 (10μmol·L- 1)预处理所抑制 ;而在高浓度 (10～ 10 0g·L- 1)时呈短暂的收缩作用 ,可被内皮素转换酶抑制剂磷阿米酮 (5 μmol·L- 1)预处理所抑制。黄芪对PE预收缩的去除内皮血管环仅呈微弱的浓度依赖性舒张作用。结论　黄芪对主动脉具有内皮依赖性舒缩双相作用。其舒张机制可能为激活血管内皮细胞一氧化氮 鸟苷酸环化酶途径 ;而其收缩机制可能为促进血管内皮合成内皮素。     

腺苷三磷酸对大鼠离体胃平滑肌运动的影响

目的观察腺苷三磷酸(ATP)对大鼠离体胃平滑肌运动的调节作用。方法制备大鼠离体胃体纵行肌、胃体环行肌、胃窦纵行肌、胃窦环行肌标本,观察ATP(01,1,10,100μmol·L-1和1mmol·L-1)的作用。结果在胃体纵行肌标本,ATP诱发微弱的舒张反应,继而出现收缩反应;在高钾预收缩条件下,ATP则引起较大舒张反应后续较小的收缩反应。ATP对胃体环行肌诱发单相收缩反应。1~100μmol·L-1ATP抑制胃窦纵行肌的自发性收缩幅度,同时加快收缩频率;1mmol·L-1ATP则完全抑制自发性收缩反应;在高钾预收缩条件下,ATP产生浓度依赖性舒张反应。1~10μmol·L-1ATP先增大后减低胃窦环行肌的自发性收缩幅度,同时加快收缩频率;100μmol·L-1~1mmol·L-1ATP则抑制自发性收缩反应。结论本文首次报道了ATP影响大鼠离体胃体纵行肌、胃体环行肌、胃窦纵行肌、胃窦环行肌四种平滑肌的运动,且对各种标本的作用特点互不相同,提示ATP在生理条件下对大鼠胃的运动功能发挥重要的调节作用。     

少腹逐瘀汤对子宫的解痉和抗炎作用

目的：探讨少腹逐瘀汤的主要药理作用与机制。方法：采用离体子宫实验、缩宫素和已烯雌酚诱发小鼠痛经实验、无菌塑料管所致子宫炎症实验和皮下肉芽肿实验。结果：少腹逐瘀汤能明显降低正常♀性大鼠离体子宫自发运动的收缩和舒张强度，抑制缩宫素诱发的离体大鼠子宫收缩频率加快，延长“痛经”小鼠扭体反应潜伏期，明显减少扭体反应次数。中剂量少腹逐瘀汤明显抑制塑料管所致大鼠子宫炎症反应和棉球所致大鼠皮下肉芽肿形成。结论：少腹逐瘀汤具有良好的子宫解痉和抗炎作用。     

原发性痛经寒凝血瘀证药效评价模型的建立

目的建立原发性痛经寒凝血瘀证大鼠模型,并在模型大鼠上,确定异丙肾上腺素诱导产热的最适剂量及催产素诱导子宫痉挛性收缩的最适剂量。方法 36只大鼠切除背部棕色脂肪7d后,丙硫氧嘧啶连续灌胃42d,术后21d开始雌激素连续灌胃28d,建立痛经寒凝血瘀证模型。在中性环境温度(28℃)下,d40乙醚浅麻醉苏醒后,生物机能检测系统连续监测尾静脉推注等比剂量异丙肾上腺素前30min和给药后120min,计算单位时间的温度曲线下面积,以给药前后单位时间曲线下面积的变化率计算诱导产热的ED50;d42水合氯醛麻醉下,尾静脉推注等比剂量的催产素,生物机能检测系统连续监测给药前后各30min的大鼠宫腔压力曲线下面积,以给药前后的面积变化率计算诱导宫缩的ED50。结果成功建立了原发性痛经寒凝血瘀证的大鼠模型。异丙肾上腺素诱导该模型大鼠产热的ED50为0.210μg·g-1,95%置信区间为0.167～0.264μg·g-1;催产素诱导宫缩的ED50为0.028U·g-1,95%置信区间为0.012～0.066U·g-1。结论建立了原发性痛经寒凝血瘀证的大鼠模型;在造模大鼠上,确定了异丙肾上腺素诱导适应性产热和催产素诱导子宫痉挛的最适剂量,作为评价原发性痛经痉挛性疼痛程度及其受局部温度影响的准确指标及观察条件。     

小鼠痛经模型的建立

目的　建立简便、经济、可靠、重现性好的小鼠痛经模型。方法　雌激素给小白鼠灌胃 ,连续 3～ 2 5d ,末次给药后腹腔注射催产素 ,产生扭体 ,记录扭体潜伏期和扭体次数 ,不同条件下 ,组间比较 ,筛选最佳条件。结果　最佳雌激素为己烯雌酚 ,其最佳剂量为 2mg·kg-1;用药周期 12～ 15d时扭体次数最多 ;催产素最佳剂量为 2 0U·kg-1;催产素给药次数对扭体数无明显影响 ;模型建立后可维持约 1wk ;催产素诱发扭体作用大于PGF2α(P <0 0 5 ) ;与相同方法建立的大鼠痛经模型比较 ,扭体次数约是大鼠模型的 6倍 ;扭体次数 90 %集中在注射后 0～ 30min内 ;小鼠扭体次数存在个体差异 ;小鼠例数与其扭体变化率呈负相关 ;在体子宫研究表明 ,小鼠子宫活动度增加。结论　小鼠痛经模型是一个简便、经济、可靠、重现性好的痛经模型     

~(125)I-相思子毒素P_2在小鼠体内的血药浓度及其生物利用度

目的研究相思子毒素P2(abrinP2)在小鼠体内的血药浓度和生物利用度,为发展相思子毒素新型抗癌药打下基础。方法 ICR小鼠静脉(2.1μg.kg-1)和灌胃(87.5、43.8和21.9μg.kg-1)给予125I-相思子毒素P2(125I-abrinP2)。给药后不同时间内取血,分离血浆,用同位素示踪法检测血浆中的放射性;然后采用三氯乙酸(TCA)沉淀法检测沉淀中的放射性,PKS软件分析房室模型和计算各种参数,并根据灌胃和静脉给药的药-时曲线下面积(AUC0～∞)之比计算绝对生物利用度。结果相思子毒素P2在0.01～50μg.L-1浓度范围内线性关系良好,样品在血浆中的回收率大于85%,日内变异系数(RSD)小于5%。小鼠单次静脉注射2.1μg.kg-1相思子毒素P2的药代动力学参数分别为吸收半衰期(T12Ka)0.46h、消除半衰期(T21Ke)8.63h、药-时曲线下面积(AUC0～∞)为16.84μg.h.L-1;小鼠单次灌胃给予剂量分别为21.9、43.8、87.5μg.kg-1的125I-abrinP2后,吸收半衰期分别为1.26、1.15、0.55h;消除半衰期分别为46.21、46.21、46.19h,AUC0～∞分别为41.42、67.17、119.27μg.h.L-1。结论相思子毒素P2的血药浓度数据拟合为二室模型,在低、中给药剂量范围内符合线性动力学规律。低、中、高剂量灌胃给药的绝对生物利用度分别为24.6%、19.5%、16.7%。     

液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用法测定大鼠血浆中柴胡皂苷a浓度及其药代动力学

目的建立测定柴胡皂苷a血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用的分析方法(LC-ESI-MS),探讨其在大鼠体内的药代动力学研究中的应用。方法SD大鼠12只,随机分为2组,分别单剂量静注(5mg·kg-1)和灌胃(50mg·kg-1)柴胡皂苷a,用LC-MS法测定给药后大鼠血浆中药物浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数。结果柴胡皂苷a的血药浓度在0.025～5mg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为25μg.L-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于80%,日间和日内精密度小于10%,符合生物样品分析要求。大鼠单剂量静注柴胡皂苷a5mg·kg-1后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数Tmax,Cmax,AUC0-t,T12β,CL,Vd分别为:5min,1907μg.L-1,64370mg.h-1.L-1,100.6min,0.0867L·min-1.kg-1,21.89L.kg-1。结论该方法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于柴胡皂苷a的体内大批量样品定量分析及药代动力学研究。     

Effects of cyclopiazonic acid on rhythmic contractions in uterine smooth muscle bundles of the rat.

1. We studied the effects of cyclopiazonic acid (CPA) on rhythmic contractions and on Ca2+ uptake by the intracellular stores in longitudinal muscle strips of the rat uterus at 30 degrees C. 2. Oxytocin (1 microM) in Ca(2+)-free solution induced a transient rise in the intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) and contraction after Ca2+ loading of the stores in high-K(+)- and Ca(2+)-containing solution. CPA inhibited oxytocin-induced Ca2+ release and contraction, the half and full inhibitory concentrations of CPA being 0.3 and 10 microM, respectively. In contrast, addition of CPA after Ca2+ loading exerted no significant inhibitory effects. 3. Oxytocin (10 nM) applied in Ca(2+)-containing solution induced rhythmic increases in both force and [Ca2+]i. CPA (10 microM) had no effect on oxytocin-induced rhythmic contractions. 4. At a high concentration (300 microM), CPA inhibited the rhythmic contractions induced by 10 nM oxytocin; the frequency and the peak height were decreased, and in many bundles contractions were completely abolished. These inhibitory effects were reversed after CPA washout. 5. CPA (300 microM) inhibited the rate of rise of [Ca2+]i due to depolarization induced by high-K(+)-containing solution. 6. These results suggest that low concentrations of CPA inhibit the loading of Ca2+ into intracellular stores in intact tissue strips, and that the Ca2+ stores are not directly involved in the uterine rhythmic contractions. It is also suggested that a high concentration of CPA inhibits the mechanism that is responsible for the generation of rhythmic contractions as well as voltage-dependent Ca2+ channels.     

乌鸡白凤丸治疗原发性痛经的实验研究

目的探讨乌鸡白凤丸治疗原发性痛经的作用机制。方法利用缩宫素所致SD雌性大鼠痛经模型,观察乌鸡白凤丸不同剂量对大鼠扭体潜伏期、30min内扭体发生率和扭体次数、子宫组织中PGF2α和PGE2含量的影响;采用常规方法制备大鼠离体子宫标本,通过BL-420E生物机能实验系统,以大鼠子宫平滑肌条的平均张力和收缩频率作为评价指标,观察不同剂量乌鸡白凤丸对大鼠子宫肌收缩活动及缩宫素所致子宫痉挛的作用。结果乌鸡白凤丸能明显延长痛经模型大鼠扭体潜伏期,降低30min内扭体发生率,减少扭体次数(P<0.01);能明显降低痛经模型大鼠子宫组织中PGF2α的含量(P<0.01),升高PGE2的含量(P<0.05),降低PGF2α/PGE2比值(P<0.01);可显著降低大鼠正常子宫和缩宫素引起的痉挛子宫平滑肌条的平均张力和收缩频率(P<0.01)。结论乌鸡白凤丸对原发性痛经造成的疼痛具有良好的改善作用,其作用机制可能与调节子宫组织内PGF2α和PGE2含量及抑制子宫收缩相关。     

痛血康胶囊治疗痛经的临床前药效学试验研究

目的研究痛血康胶囊对痛经模型大鼠的疗效及作用机制。方法①大鼠腹腔注射催产素造成痛经模型,研究痛血康对催产素所致大鼠扭体反应的抑制作用、对痛经模型大鼠离体子宫收缩和子宫卵巢系数、血浆中β-EP、子宫匀浆中PGF2α含量的影响。②采用肾上腺素加冰水浴造成大鼠急性血瘀模型,研究痛血康对血液流变学的影响。③采用醋酸致痛扭体法研究痛血康的镇痛作用及采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及大鼠棉球肉芽肿法研究痛血康对炎症的抑制作用。结果痛血康对催产素所致大鼠子宫剧烈收缩引起的疼痛有明显缓解作用．对大鼠子宫平滑肌自发活动（收缩幅度与收缩频率）有明显的抑制作用,能够明显增加痛经模型大鼠血清β-EP含量,降低子宫组织中PGF2α含量,降低血瘀大鼠血液粘度,还具有抑制炎症的作用。结论痛血康胶囊具有显著抗痛经作用。