甲状旁腺功能低下患者细胞移植及其护理

目的探讨人胚甲状旁腺细胞移植治疗甲状旁腺功能减退症的临床意义。方法将培养的人胚甲状旁腺细胞在B超引导下移植到12例甲状旁腺功能减退症患者的肾周围脂肪囊中,采用放射免疫方法测定患者术前、术后血中甲状旁腺激素及钙的水平,并进行自身对照,对疗效进行评价。结果12例患者在接受人胚甲状旁腺细胞移植后,临床症状逐渐消失。结论培养的人胚甲状旁腺细胞肾周围脂肪囊内移植是治疗甲状旁腺功能低下的一种理想的新方法,而科学的护理是移植成功的重要保证。     

同种异体甲状旁腺组织移植治疗甲状旁腺功能低下的实验研究

目的 探讨甲状旁腺经不同预处理并移植于腹直肌内后甲状旁腺移植物的功能和生存情况.方法 成年雄性Wistar大鼠70只作为供体,成年雄性SD大鼠35只作为受体,建立去甲状旁腺模型受体后采用随机数字表法随机分为直接移植组、高氧培养移植组、环孢素A组、60Co照射移植组及综合处理组5组,每只受体接受2只供体的4个甲状旁腺组织块,甲状旁腺移植于大鼠的腹直肌内.观察各组大鼠在甲状旁腺移植前后不同时相血清钙和甲状旁腺激素(PTH)的变化.结果 各组在甲状旁腺组织移植后,1周内血清钙和PTH均能达到或接近正常水平,与移植前相比差异均有统计学意义(P＜0.01).各组移植物的存活时间不同,直接移植组的存活时间最短,血清钙和PTH维持正常水平的时间分别为3周和4周.高氧培养移植组、环孢素A组、60Co照射移植组以及综合处理组血清钙及PTH维持在正常或接近正常水平的时间分别为5周和8周、6周和8周、5周和7周以及5周和9周;除高氧培养移植组移植术后9周(血清钙)及60Co照射移植组移植术后8周(PTH)差异无统计学意义外,其余4组的血清钙和PTH水平在移植术后4～9周与直接移植组比较其差异均具有统计学意义(P＜0.05),直接移植组较低;高氧培养移植组、CsA组和60Co照射移植组的血清钙和PTH水平在移植术后7～9周低于综合处理组(P＜0.05),综合处理组的血清钙和PTH的维持时间较长.结论 腹直肌内甲状旁腺移植能维持血钙于正常水平;甲状旁腺移植物或受体经预处理后能延长其存活时间.甲状旁腺组织经培养后再移植是治疗甲状旁腺功能减退症的一条有效途径.     

微囊化兔甲状旁腺组织异种移植治疗甲状旁腺功能低下症的实验研究

目的探讨不同部位微囊化兔甲状旁腺组织异种移植治疗大鼠甲状旁腺功能低下症的效果。方法应用微囊技术制备微囊化（海藻酸钠-钡生物微胶囊）兔甲状旁腺组织。16只去甲状旁腺的Wistar大鼠按完全随机法分为肾脂肪囊微囊组及腹腔微囊组，每组8只。分别于移植微囊化兔甲状旁腺组织后5、15、25、35、45、55及65d检测血清钙含量，并于移植后第65d取移植物行透射电镜检查。结果移植后，肾脂肪囊微囊组大鼠血清钙水平恢复到正常范围直至观察结束时，透射电镜检查显示移植物存活良好；腹腔微囊组大鼠血清钙水平恢复到正常范围，但第65d时血清钙水平下降至〈1．6mmol／L，透射电镜检查显示移植物中心坏死，仅边缘有少数存活细胞。结论微囊化兔甲状旁腺组织异种移植在不用免疫抑制剂情况下，可以在大鼠体内存活，且有功能。不同移植部位移植后随着时间的延长存在差异，肾脂肪囊在微囊化异种组织移植中是首选的移植部位。     

甲状旁腺瘤组织同种移植治疗甲状旁腺功能低下症初步报告

目的　为甲状旁腺移植的供体来源提供一种新途径。　方法　将甲状旁腺瘤组织用 6Gy60 钴照射后 ,切成 0 5mm× 0 5mm× 0 5mm～ 1 0mm× 1 0mm× 1 0mm薄片 ,植入裸鼠肾包膜下过渡 14d ,移植给甲状旁腺功能低下症患者 ,受者术前 1d及术后 14d服用环孢素A(5mg·kg 1·d 1) ,以后不用任何免疫抑制剂。术后观察临床症状、体征、治疗的钙剂及罗钙全剂量变化 ,检测血钙及血甲状旁腺激素 ,以确定移植效果。　结果　临床应用 5例 ,其中 3例术后不需静脉补钙 ,口服钙剂量及罗钙全剂量减少 ,血钙浓度基本恢复到正常值。　结论　甲状旁腺瘤组织为甲状旁腺移植提供了一种方便、易于获取的新的供体 ,且可移植给多个患者治疗。     

胚胎干细胞转基因治疗甲状旁腺功能低下症

目的　探讨小鼠胚胎干细胞 (TC 1)转基因治疗甲状旁腺功能低下症 (HPT)。方法包装出重组人甲状旁腺素 (PTH )基因的小鼠干细胞病毒 (MSCV) ,以lml重组病毒液加入 poly brene(终浓度 8mg/L)感染TC 1细胞 ,检测基因转导效率 ,PTH分泌情况 ;以及每 1× 10 5个 /mlTC 1细胞注入模型鼠体内各组小鼠血PTH和血钙变化情况。结果　获得滴度为 2× 10 7集落形成单位 (CFU) /ml的重组逆转录病毒 ,其感染TC 1的效率为 70 % ,每 10 6 未分化TC 1每 48h分泌PTH10ng。重组有PTH基因的TC 1细胞注入模型鼠体内后 ,在观察期间实验组动物血PTH和血钙均保持在接近正常值范围内。结论　MSCV介导外源PTH基因可高效转导TC 1并持续分泌PTH ;内环境并不是决定TC 1分化的唯一因素。经基因转导的TC 1可较好的改善模型鼠的症状 ,是未来细胞移植的一种潜在来源。     

甲状旁腺移植临床及实验研究新进展

经过国内外学者多年来的不断探索,甲状旁腺移植取得了较快发展,相对其他组织器官移植,甲状旁腺移植具有供体组织来源广泛、手术方式多样而术后并发症相对较少的特点,为甲状旁腺机能减退症患者提供了一种永久治愈的方法。鉴于国内外临床及实验研究有关甲状旁腺移植手术方式、组织来源、围手术期处理等方面各异,本文通过阅读大量国内外文献结合临床实际,现对甲状旁腺移植中的各个环节进行系统综述,为指导临床实际应用提供丰富的理论依据。     

同种睾丸Leyding细胞移植治疗男性性腺功能低下症

将成人睾丸Ｌｅｙｄｉｎｇ细胞分离，纯化，体外培养后，按每个受者给予２×１０＾０７个Ｌｅｙｄｉｎｇ细胞给９例男性性腺功能低下症患者术后血睾酮水平均明显升高，其中６例达到正常水平，９例患才均有不同程度的男性性功能改善，３例患者男性第二性征恢复。     

甲状旁腺激素基因治疗甲状旁腺功能低下症

目的观察甲状旁腺激素(PTH)基因和蛋白体外表达情况,并评价其基因治疗甲状旁腺功能低下模型鼠的作用。方法(1)以脂质体将质粒pcDPG分别1次和多次转染293细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达并计算转染率;(2)转染24、48、72和96h后real-ti me定量PCR和Western blot法检测PTH基因与蛋白表达,并活性鉴定;(3)建立甲状旁腺功能低下症模型,将pcDPG质粒多次肌肉注射治疗,监测血钙和PTH值、存活时间及各器官病理变化。结果转染后24h即见GFP表达,72h达高峰,96h开始减少;多次转染后GFP表达率可达90%以上;PTHcD-NA拷贝数转染24h为5×103,72h达最高为8×104,多次转染显著增高(P<0.01);Western blot见48h和72h有PTH蛋白表达,其可对抗甲状旁腺切除小鼠抽搐症状;术后第2天血钙与PTH明显低于术前(P<0.05),pcDPG质粒大、中剂量组连续治疗48h后血钙与PTH值均恢复正常。结论重组PTH基因治疗甲状旁腺功能低下模型鼠有较好的疗效。     

转基因造血干细胞移植治疗小鼠甲状旁腺功能低下症的研究

目的　探讨输注整合有甲状旁腺素(PTH)基因的造血干细胞对甲状旁腺功能低下症的治疗效果。方法　将以pcDNA 3.1 PTH 为模板扩增出的PTH 基因插入到逆转录病毒载体MSCV中,得到含PTH基因的重组质粒,并转染PA317 包装细胞,以抗生素Geneticin筛选阳性克隆,获得重组有PTH基因的浓缩病毒悬液,以其感染人脐血造血干细胞,然后注入甲状旁腺功能低下症模型小鼠血中,术后观察小鼠症状的改善情况、血PTH及血钙浓度变化情况。结果　所获得的重组有PTH基因的浓缩病毒悬液,其病毒滴度为2×107 CFU/ml,PTH的分泌量为15 ng/48 h(106个细胞),未检测到有野生型病毒存在。实验组小鼠接受转染有PTH基因的血干细胞后,症状改善,血PTH及血钙浓度逐渐上升,并维持于接近正常水平;仅接受重组有PTH基因的浓缩病毒悬液的小鼠,短期内血PTH及血钙浓度明显升高,以后则呈缓慢下降趋势,并逐渐出现甲状旁腺功能低下症的表现;只接受造血干细胞移植的小鼠术后20 d左右全部死亡。结论　甲状旁腺功能低下症小鼠接受整合有PTH基因的造血干细胞静脉输注可获得较长期的治疗效果。     

小鼠胚胎干细胞转基因治疗甲状旁腺功能低下症的实验研究

目的　探讨小鼠胚胎干细胞 (TC 1)转基因治疗甲状旁腺功能低下症 (HPT)。方法包装出重组人甲状旁腺素 (PTH )基因的小鼠干细胞病毒 (MSCV) ,以其感染小鼠ESCs ,检测基因转导效率 ,PTH分泌情况 ;观察体内外分化情况 ,以及注入模型鼠体内各组小鼠血PTH和血钙变化情况。结果　获得滴度为 2× 10 7集落形成单位 (CFU ) /ml的重组逆转录病毒 ,经聚合酶链反应(PCR)扩增未检测到有野生型病毒存在 ,可以安全应用。感染TC 1的效率为 70 % ,每 10 6未分化TC 1每 48h分泌PTH约 10ng。重组有PTH基因的TC 1在体内外均可分化出三胚层组织 ,注入模型鼠体内 ,在观察期间实验组动物未再出现甲旁低表现 ,而且血PTH和血钙均保持在接近正常值范围内。结论　MSCV介导外源PTH基因可高效转导TC 1并持续分泌PTH ;体内外分化实验证明TC 1具有全能性 ,而且内环境并不是决定TC 1分化的唯一因素。经基因转导的TC 1可较好的改善模型鼠的症状 ,是未来细胞移植的一种潜在来源。     

Latent hypoparathyroidism in patients with autotransplanted parathyroid glands

Eighteen patients had undergone radical surgery for thyroid carcinoma. In all of them four parathyroid glands had been verified by frozen-section biopsy and removed. Thereafter two, three or four glands were autotransplanted into muscle tissue. At least 1 year after the operation the patients underwent a calcium deprivation test. Before the test they all had normal serum calcium values without treatment. During the test seven patients remained normocalcemic, seven became hypocalcemic, and four had occasional low serum calcium values. After the test all were normocalcemic again. Patients with only autotransplanted parathyroid glands left after surgery should be tested for latent hypoparathyroidism.     

经60钴照射及裸鼠过渡的胚胎甲状旁腺同种移植四例

将６～８个月龄的新鲜死胎甲状旁腺用６Ｇｙ６０钴外照射，并在Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠肾包膜下过渡１４天，然后切成０．５～１．０ｍｍ大小薄片移植给４例甲状旁腺功能低下症患者，受者仅术前１天和术后１～３天服用环孢素Ａ（剂量为２０～２５ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ），以后不用任何免疫抑制剂。通过临床症状、体征、治疗的钙剂及ＶｉｔＤ制剂用量变化以及血钙、血甲状旁腺激素的追踪观察，以确定移植物的存活状况。结果表明，４例患者疗效均满意，其中３例疗效为优，１例疗效为良。对照我们过去的各种甲状旁腺移植方法，认为该方法是最理想的。     

Therapy of hypoparathyroidism with intact parathyroid hormone

Summary  

Hypoparathyroidism, a disorder characterized by low parathyroid hormone (PTH), is generally treated with oral calcium and vitamin D supplementation. We investigated the effects of PTH(1–84) treatment in 30 hypoparathyroid subjects for 24 months. PTH(1–84) treatment in hypoparathyroidism significantly reduced supplemental calcium and 1,25-dihydroxyvitamin D requirements without generally altering serum and urinary calcium levels.     

Experimental induction of hypoparathyroidism with parathyroid hormone antibodies.

This study describes the effect of a single injection of parathyroid hormone antiserum on the serum calcium, serum phosphate, urinary cyclic AMP, and urinary phosphate levels in the intact perfused rat. A significant decline in serum calcium level with concomitant elevation in serum phosphate level and decreased urinary excretion of phosphate and cyclic AMP was noted. These findings strongly suggest that a transient hypoparathyroid state was induced by the parathyroid hormone antiserum.     

微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植的实验研究

目的 探讨微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植治疗大鼠甲状旁腺功能低下症的效果。方法 应用微囊化技术，制备微囊化（海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊）新生猪甲状旁腺细胞，32只去甲状旁腺的Wistar大鼠随机分成微囊组、非微囊组、空囊组和对照组，分别移植微囊化新生猪甲状旁腺细胞、甲状旁腺细胞、空微囊及生理盐水。移植后监测血钙及甲状旁腺素水平40周，40周后回收移植物，透射电镜检查。结果 移植后，微囊组大鼠血钙及甲状旁腺素水平恢复到正常范围内，直至观察结束时（40周），透射电镜检查显示移植物存活良好；非微囊组、空囊组和对照组大鼠的血钙及甲状旁腺素水平无改善。结论 微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植在不用免疫抑制剂情况下，可以在大鼠体内存活，且有功能；海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊对免疫活性细胞及抗体具有屏蔽作用。     

低温冷冻同种异体胎软骨移植的应用

目的探讨同种异体胎软骨在整形外科应用的可行性。方法在无菌条件下切取死胎儿的四肢及肋软骨,经低温保护剂进行超低温冷冻－８０℃,保存于－１９６℃的液氮中。经复温处理后应用于临床３８例。其中鞍鼻畸形２４例,外耳缺损４例,唇裂继发畸形６例,颏成形４例。结果经３年６个月随访。除２例外耳再造术后出现变形外,其余病例均无吸收、变形、免疫排斥反应,外形较为满意。结论同种异体胎儿软骨在整形外科有一定的应用价值。     

低温冷冻同种异体胎软骨移植的应用

目的探讨同种异体胎软骨在整形外科应用的可行性。方法在无菌条件下切取死胎儿的四肢及肋软骨,经低温保护剂进行超低温冷冻-80℃,保存于-196℃的液氮中。经复温处理后应用于临床38例。其中鞍鼻畸形24例,外耳缺损4例,唇裂继发畸形6例,颏成形4例。结果经3年6个月随访。除2例外耳再造术后出现变形外,其余病例均无吸收、变形、免疫排斥反应,外形较为满意。结论同种异体胎儿软骨在整形外科有一定的应用价值。