内耳缺血再灌注损伤机制的研究进展

目的：探讨内耳缺血再灌注损伤的发病机制，为临床治疗提供理论依据。方法：查阅近年国内外有关内耳缺血再灌注损伤发病机制的相关文献，并做进一步综合分析。结果：内耳缺血再灌注损伤的发病机制是一个复杂的病理生理过程，这个级联反应包括许多环节，如能量障碍、细胞酸中毒、兴奋性氨基酸释放增加、钙超载、自由基生成、炎性因子释放、线粒体损伤等。结论：内耳缺血再灌注损伤机制是多方面因素综合作用的结果，早期发现、全面干预是治疗的基本原则。     

大鼠全脑缺血再灌注后内耳细胞凋亡与NGF、p75的动态表达

采用大鼠全脑缺血再灌注模型,用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测缺血再灌注不同时间内耳的细胞凋亡情况,通过免疫荧光染色观察内耳细胞神经生长因子(NGF)与其低亲和力受体p75的表达和变化,并用透射电镜观察各组大鼠内耳细胞超微结构的改变,探讨NGF与p75在缺血再灌注诱导内耳细胞凋亡过程中的作用。结果显示:再灌注3d时内耳Corti器出现毛细胞凋亡,同时伴有p75与NGF的过表达;随着缺血再灌注时间延长,P75和NGF表达逐渐增强又逐渐减弱。结果提示:p75和NGF参与了脑缺血再灌注诱导的内耳延迟性毛细胞凋亡的过程,p75与NGF的过表达可能起了促进内耳感觉细胞凋亡的作用。     

前半规管灌注法制作前庭蜗器综合标本

正人类及高等动物的前庭蜗器有精细微妙的解剖结构和复杂特殊感觉功能,包括听觉和平衡功能。除外耳相对易见外,其他更加精细的部分都埋匿于形态复杂的颞骨之中,故内耳结构的显露是解剖学技术中难度较大的。目前内耳的解剖标本制作主要分为腐蚀铸型法~([1])和雕刻磨制法~([2])。铸型法的优点是将填充剂灌注到膜迷路内,制作出半规管、前庭和耳蜗的铸型标本,但缺点在于难以保留内耳区神经和脉管结     

豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后FasL蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系

目的探讨豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的情况、凋亡相关蛋白FasL表达的改变以及二者之间的关系。方法健康豚鼠40只随机分成正常组、假手术组和模型组,模型组再分为缺血30min、再灌注6h及24h三组。用组织化学方法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的组织学改变,用免疫组织化学法检测内耳FasL的表达,用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡的情况。结果正常组、假手术组内耳罕见凋亡细胞,FasL为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间段均有细胞凋亡,FasL为阳性表达,与正常组比较明显增多(<0.05)。结论 FasL参与了豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的发生。     

用干颞骨制作内耳透明标本的方法和体会

制作内耳标本有多种方法,如雕刻、铸型(合金或塑料)、脱钙解剖等。用干颞骨透明的方法也可获得较为满意的内耳标本。具体方法、步骤如下。一、颞骨的选择选用质好色白的干颞骨。如骨质不好,特别是岩部有破损,在灌注填充剂时容易外漏而污染周围部分,影响内耳的清晰度。骨质不白则影响其透明度。     

胎儿内耳标本制作

内耳结构复杂,深埋在颞骨岩部之中,故内耳标本的制作是比较困难的。目前,在教学与科研工作中,常利用金属铸型法制作内耳模型。但金属铸型内耳模型,不能如实反映人内耳的大体结构和微细结构。所以,人内耳标本的制作对教学、科研和医疗都是很有帮助的。 1.取材:10％福马林脐动脉灌注固定的7—8月龄胎儿。2.方法:将胎儿整颅取下,于耳廓上缘取下颅盖,挖尽颅腔内容,撕脱颅底硬脑膜,暴露颞骨岩部或上半规管隆凸。(1)     

内耳切片标本普通制作方法

<正> 有关豚鼠内耳切片标本制作方法都较复杂,如灌注固定,火棉包埋等等,也不易得到良好效果。其实在操作进行各个步骤中稍加注意,方法简便,易于成功。人的内耳制作也是一样。我室屡经试验,均获成功,现介绍如下: 1.取材:要用大而活泼正常豚鼠一只(所以要用豚鼠材料,因其内耳取材容易,且耳蜗肉眼清晰可见,易于掌握,若太小的豚鼠,其内耳也小,则不易切成。),将头斩     

内耳的灌注雕刻法

内耳是前庭蜗器的重要组成部分,分为骨迷路和膜迷路两部分,它深埋于颞骨岩部内,形态不规则且结构复杂,故内耳的解剖是解剖学技术中难度最大的。传统解剖内耳的方法常采用单纯的雕刻法,因此能把骨迷路完整显示的较少。我们通过多年的不断的实践,改良了内耳显示的方法,即采用磨铣、灌注再磨铣的方法完整地显示了内耳,现将方法介绍如下：     

颞骨局部腐蚀原位显示内耳铸型法

内耳铸型方法的研究已有较详细的论述在腐蚀方法上也有一些改进。考虑到临床内耳手术途径的改进和创新,与颞骨有关的定位标志和邻近结构有密切的关系,为此,我们改用局部腐蚀法制作内耳原位铸型标本,目的是更完整地保留颞骨外形和准确地显示内耳在颞骨内的自然位置。标本制作过程中,颞骨的准备和过氯乙烯灌注法按我们过去的方法处理,仅在腐蚀处理上加以改进,介绍如下。     

丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡及Fas表达的蛋白影响

目的:探讨丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury I/RI)后细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响.方法:健康豚鼠72只,雌雄不拘.随机分成正常组、假手术组、丹参干预假手术组、模型组和干预组(术前腹腔注射丹参注射液,每天一次共7d),后两组各在缺血30min、再灌注6h及24h取材.用组织化学方法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的组织学改变;用免疫组织化学法检测内耳Fas的表达;用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡情况.结果:正常组、假手术组、丹参干预假手术组内耳罕见调亡细胞,Fas为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间点均有细胞凋亡,Fas为阳性表达,与正常组比较有统计学意义(P＜0.05);干预组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间点均有细胞凋亡,Fas为阳性表达,程度较模型组减弱.与模型组比较有统计学意义(P＜0.05).结论:Fas参与了耳蜗I/RI后细胞凋亡的发生,丹参可能通过抑制Fas蛋白的表达使凋亡细胞减少而对I/RI后的耳蜗起保护作用.     

介绍一种内耳铸型用的合金

<正> 国内外介绍的内耳铸型标本,多采伍德(wood)氏合金,劳斯(Rose)氏合金,利普未兹(Lipowiz)氏合金等。但这些合金材料均难配齐。我们采用国产普通的牙科用易熔合金作灌注,获得成功,其方法简单,特介绍如下:将分离的颗骨用清水洗刷干净后,由外耳道用注射器注双氧水入耳内,利用双氧水能产生气泡的作用,可将耳内泥砂或草根等杂质松动,再用注射器注入清水,使杂质流出,然后     

活组织中的温度振荡的分析研究

在热疗的灌注法中,热的渗透形式相当复杂。一系列实验表明,当以恒定功率加热犬的大腿骨时,有四种不同的温度响应,它们是:过阻尼、阻尼振荡、振荡并自维持     

前庭蜗器教学的几点体会

前庭蜗器称为耳,不仅包括耳廓,而且还有耳道、迷路等许多部分。解剖学将人耳分为外耳、中耳、内耳三个部分。内耳是最复杂的部分,其管道多而复杂,通向多变,因此内耳又被称作迷路。又因内耳含有位觉感受器和听觉感受器,所以又将耳称为位听器。耳、尤其是内耳教学较难,学生不易掌握,如何使各专业、各层次的医学生学习较易,本文谈谈几点体会。1　充分利用挂图、模型、标本解剖学属形态学范畴,仅靠语言描述,难以使学生理解掌握其位置关系和形态结构。俗话说“百闻不如一见”,这可见其用眼观察的重要性。由于挂图只是平面显示,难以表达空间立体定…     

双重包埋法在内耳切片中的应用

内耳作为重要的听觉器官,由于其位置深在、内部结构复杂精细且含有大量腔隙,给制作内耳切片带来一定的难度。我们通过多次实验,综合石蜡和火棉胶包埋的优缺点,通过对双重包埋法的改进,摸索出操作简便易行、危害较小、     

热休克预处理对家兔肝缺血-再灌注损伤的影响

目的 :探讨热休克预处理对肝缺血 再灌注损伤的影响。方法 :随机将家兔分为对照组和热休克预处理组 ,复制肝脏缺血 再灌注模型 ,分别于缺血前、缺血 45min、再灌注 45min三次取血 ,赖氏法检测血清谷丙转氨酶 (ALT)活性。结果 :热休克预处理组缺血前的ALT活性稍高于对照组 ,但是缺血后及再灌注后显著低于对照组。结论 :热休克预处理对肝细胞有轻微的损伤作用 ,但是对缺血后和再灌注后损伤均有显著的保护作用。     

豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后Fas蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:研究豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后凋亡相关蛋白Fas蛋白表达,以及与细胞凋亡的关系.方法:健康豚鼠随机分成正常组、假手术组、模型组.组织学方法观察缺血再灌注不同时间点耳蜗各部位的组织学改变;免疫组织化学法检测内耳Fas的表达;原位凋亡法(TUNEL法)观察耳蜗缺血及不同时间段内再灌注的细胞凋亡情况.结果:正常组及假手术组没有或仅有个别部位出现细胞凋亡,Fas为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节在每个时间点上均有细胞凋亡,Fas为阳性表达.结论:Fas的过度表达可能是耳蜗缺血再灌注后细胞凋亡的重要原因.     

塑化标本的血管和神经着色法

<正>生物塑化标本已在解剖学教学和科研中得到越来越多的应用[1-8]。制作塑化标本,一般选择经调色乳胶或其它填充剂灌注过的或没有灌注过的标本,这两种标本在丙酮脱水、脱脂塑化后,其血管、神经颜色都很接近,不够清晰     

运动应激诱导HSP70表达与心肌缺血再灌注

尽 早恢复血流供应是挽救缺血心肌的根本途径 ,早在5 0年代就有人注意到再灌注所带来的损伤现象。随介入心脏学的广泛开展 ,再灌注损伤日益受到人们重视。许多科学工作者已在这方面做了大量的工作 ,尝试了许多药物 ,如 β受体阻滞剂、自由基清除剂等。由于再灌注损伤机制极其复杂 ,牵涉很多 ,疗效都不够理想。在这种情况下 ,人们就想寻找一种内源性的心肌保护途径 ,即激发心肌提高自身的防护能力。因生物界广泛存在的热休克蛋白(heatshockproteins ,HSPs)及其特殊的抗损伤能力引起科学家的注意 ,从而发现加强HSPs表达的诱导是一种很有前…     

家兔法与内毒素法检查生物材料热原的适用性研究

药品与生物材料在生物安全性评价方法上有着很大的区别。临床上广泛运用内毒素法检查药品热原,然而,运用细菌内毒素法进行部分组成成分较为复杂的生物材料的热原试验是否适当有待明确。本研究在2005版药典的基础上,分别运用内毒素法和家兔法对两种组织工程支架材料进行热原试验的比较研究,实验结果表明运用内毒素法得到的试验结果为阴性,运用家兔法得到的试验结果为阳性。这两种方法分别测定每种材料所得到的热原试验结果不相符合,表明对组成成分复杂的生物材料,含热原的因素较为复杂,用家兔法进行试验检测热原可能更加灵敏。     

内耳骨迷路标本的制作

<正>内耳埋藏在颞骨岩部骨质内,鼓室和内耳道之间,为构造复杂的管腔。由于颞骨岩部的骨质致密、坚硬,且其形态和方位不规则,所以内耳骨迷路标本的制作在解剖学技术中难度较大。我们采用湿骨经脱钙后雕刻的方法,制作内耳骨迷路的标本。由于该标本不仅能显示内耳迷路在颞骨内的位置及其形态特征,而且方便美观,形象逼真,立体感强,用于课堂教学,效果较好。现将其制作方法介绍如下。