液相色谱-串联质谱技术检测干血滤纸片类固醇激素谱方法建立研究

目的建立液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatographytandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测干血滤纸片(dried blood spots,DBS)中类固醇激素谱的方法。方法取含不同浓度类固醇激素(包括雄烯二酮、睾酮、17-羟孕酮、孕酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇)的2个DBS(直径3 mm),用含已知类固醇激素内标的1∶1甲醇/乙腈萃取,孵育震荡后氮气吹干,复溶后LC-MS/MS检测。评价方法的线性、精确度、准确度。收集7例21-羟化酶缺乏症患儿及23例正常婴幼儿DBS样本,LC-MS/MS测定样本中类固醇激素浓度。结果 7种类固醇激素批内和批间精确度为3.3%~10.9%,准确度为100.4%~116.5%,最低检测限为0.03~0.25μg/L,最低定量限为0.125~1.000μg/L;不同浓度的类固醇激素实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0.997~0.999。21-羟化酶缺乏症患儿DBS样本中雄烯二酮、17-羟孕酮、孕酮、21-脱氧皮质醇、皮质醇浓度均显著高于正常男性婴幼儿,具有统计学意义(P0.05)。结论本研究建立了LC-MS/MS测定DBS中类固醇激素谱的方法,具有较好的精确度、准确度及浓度线性关系,可用于临床类固醇激素检测,有助于先天性肾上腺皮质增生症的临床诊断及治疗效果评价,并有望用于此病的新生儿筛查。     

先天性肾上腺皮质增生症合并高磷性佝偻病

11β-羟化酶缺陷所致先天性肾上腺皮质增生症相当少见,在肾上腺生殖器综合征中不到10%。本文报告1例,且合并高磷性佝偻病,就目前所知尚无类似报道。病例阿尔及利亚籍7岁男孩,以性早熟和佝偻病入院。身长106cm,体重21kg,阴茎长7 cm,睾丸半径3 cm,生殖器和阴毛发育属Tanner第3期,上唇少许胡须,血压110/80。腕膝关节与肋骨骺部均有重度佝偻病改变,弓形腿,髋、膝、腕关节活动受限。长骨X线片有典型佝偻病变化,骨龄13岁。患儿无营养不良,钙和磷摄入正常,未曾接受任何治疗。确定肾上腺皮质11β-羟化酶缺陷诊断的生化检查为血11-脱氧皮质醇增高,尿17-羟和17-酮类固醇增加,血     

先天性肾上腺皮质增生症的盐皮质激素替代治疗对肾排酸的选择性作用

无论在实验上还是在人体,盐皮质类固醇的肾排酸作用业已证实。但在肾上腺皮质低功综合征时,醛固酮的直接作用尚未肯定。为此,作者对8例无亲缘关系的先天性肾上腺皮质增主症(CAH)小儿,就醛固酮在肾排酸调节中的选择性作用进行了研究。材料与方法8例21-羟化酶缺乏的CAH患儿,男5例,女3例;年龄1～11岁。均有盐水丢失,高钾血症、血浆肾素活性(PRA)增高和17-羟孕酮增高。在下述三组不同因素所致的代谢环境下,对肾脏酸碱平衡进行了研究。     

先天性肾上腺皮质增生症的诊断及治疗

先天性肾上腺皮质增生症(CAH)是一组因肾上腺皮质激素合成途径中酶缺陷引起的常染色体隐性遗传病,新生儿的发病率为1/16 000~1/20 000。CAH临床上可表现为两性畸形、假性性早熟或婴儿肾上腺危象,易漏诊或误诊。常见的酶缺陷包括21-羟化酶、11β-羟化酶、3β-类固醇脱氢酶1、7α-羟化酶缺陷等,其中类固醇21-羟化酶缺乏最常见,90%以上的CAH患儿为该酶缺乏所引起。其基础治疗主要为终生使用皮质激素类药物。作者将重点介绍对该疾病的诊断、筛查及治疗原则。     

临床医嘱指南

先天性肾上腺皮质增生症21-羟化酶缺乏 (失盐型 ) (以1个月 ,3kg为例 )长期医嘱临时医嘱新生儿护理常规一级护理母乳喂养病危通知氯化钠0.5g 加入母乳中3次 /d9α -氟氢可的松0.05mg2次 /d或醋酸脱氧皮质酮1mg 肌注2次 /d5 %葡萄糖盐液150ml静滴1次 /d氢化可的松10mg5 %葡萄糖液100ml静滴1～2次 /d空腹血糖血钠、钾、氯测定血气分析血促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇测定血肾素活性、醛固酮测定血睾酮、17 -羟孕酮、硫酸脱氢表雄酮测定24小时尿17 -酮类固醇测定左膝关节及左手、腕关节X线摄片 (正位片 )染色体检查注 :1.21 -羟化酶缺乏失…     

新生儿先天性肾上腺皮质增生症12例

目的探讨先天性肾上腺皮质增生症在新生儿期的诊断及治疗。方法分析新生儿先天性肾上腺皮质增生症12例的临床表现，结合血钠、钾、血17-羟孕酮(17-OHP)、睾酮(T)、雌二醇(E2)及肾素等检查进行诊断，并用激素替代治疗。结果诊断为21-羟化酶缺乏失盐型11例，单纯男性化1例。1例确诊后放弃治疗，余11例治疗好转出院；2例发生感染后出现失盐危象，第2次住院治疗；1例女性患儿病情稳定，2岁时行阴蒂短缩术。结论本病早期诊断及治疗可防止新生儿肾上腺危象、休克、后遗症发生及死亡。     

儿童肾上腺皮质癌40例研究[英]/Ribeiro RC

作者报道1966～1987年间收治的40例巴西儿童肾上腺皮质癌(ACC)。诊断以肿瘤病理检查为标准。38例术后确诊,2例尸解确诊。女性28例,男性12例,平均年龄3.9岁(1天～15.7岁)。生化评估由服用地塞米松前后检查患者24小时尿液的17—羟皮质类固醇(17-OH)、17—酮固醇类(17-KS)和血浆去氢表雄酮硫酸盐(DHA)作出。72.5%的患者于出现临床症状后≥6个月作出诊断,仅11例于6个月内作出诊断。由于肿瘤产生的类固醇影响,37例有男性化的表现,22例出现库兴综合征的体征及生化特征,2例单纯为库兴综含征体征,一些患者男性化明显而掩盖了库兴综合征。临床表现为多毛症(62.5%)、痤疮(47.5%)、高血压(47.5%)、多血症(42.5%)、满月脸(35%)、嗓音粗(32.5%)和癫痫发作(17.5%),     

先天性肾上腺皮质增生症诊断及救治(附21例临床分析)

先天性肾上腺皮质增生症（ＣＡＨ）属于肾上腺类固醇激素合成障碍的遗传性疾病。本症由于遗传缺陷致类固醇激素合成途径中一些必需酶缺乏而引起。其中２１羟化酶缺乏占ＣＡＨ的９０％以上，本文２１例均为２１羟化酶完全缺乏和部分缺乏，两者均表现为男性化和男性化伴失盐...     

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性腺轴病变可引起青春发育异常,但非性腺轴的内分泌疾病,也可由于直接或间接的影响引起青春发育异常,下面就最常见的进行讨论。1先天性肾上腺皮质增生症(CAH)不同类型的CAH均伴肾上腺皮质的雄激素合成过多或缺乏。其中发生高雄激素血症的类型主要为21-羟化酶和11-羟化酶缺陷。21-羟化酶缺陷时,该酶催化的前阶段的二个前体(中间产物)——孕酮和17-羟基孕酮(17-OHP)过度堆积并转向网状带合成雄激素,。患者雄激素的合成以雄烯二酮为主,但它能转化为睾酮和双氢睾酮与雄激素受体结合发挥雄激素的生物作用。同时,去氢表雄酮又能芳香化为雌激素…     

姐妹共患先天性肾上腺皮质增生症

目的探讨同胞共患先天性肾上腺皮质增生症(17α羟化酶缺乏)的临床特点及基因突变。方法回顾分析确诊的2例17α羟化酶缺乏症姐妹患儿临床资料,以及CYP17A1基因Sanger测序及MLPA检测结果。结果 2例患儿分别于4岁及10岁确诊,均有感染后低血钾,高促性腺激素性性腺功能减退表现。1例血压偏高。血钾1.9~4.0 mmol/L,17羟孕酮及脱氢表雄酮降低,增强CT提示肾上腺有不同程度的增粗。姐姐染色体为46,(XY)。2例患儿基因结果显示CYP 17A 1基因复合杂合突变,即来自父源的c.985_987 del TACins AA突变及母源的CYP 17A 1基因外显子1-7区域杂合缺失。结论先天性肾上腺皮质增生症(17α羟化酶缺乏)可在青春期前被发现,当临床出现不明原因低血钾及高血压,需要考虑本病可能。基因检查可以帮助诊断。     

迟发型21-羟化酶缺陷症

21-羟化酶缺陷症(21-OHD)占先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的大半,历来将该病作为主要的肾上腺疾病,进行了许多临床、内分泌学等方面的研究。特别是失盐型于生后不久即出现致命的电解质异常,早期诊治是不可缺少的。日本自去年将其作为新生儿筛查的疾病之一,普遍采用滤纸法测定血中17-羟孕酮(17-OHP)。与这些称之为典型的21-OHD的CAH相对应,把小儿后期或青春期以后开始出现男性化的,称为肾上腺类固醇合成异常症。最近,以迟发型或非典型肾上腺皮质增生症等各种命名的CAH引起了人们的注目。非典型的21-羟化酶缺陷症非典型的21-羟化酶缺陷症(NC21-OHD)与典型的21-OHD不同,该症于女孩的胎儿期     

HSD3B2基因突变致兄弟同患非典型先天性肾上腺皮质增生症并睾丸肾上腺残存瘤分析

目的分析2例罕见的由3-β羟类固醇脱氢酶缺陷导致的非典型先天性肾上腺皮质增生症(CAH)并睾丸肾上腺残存瘤(TARTs)兄弟的临床资料及其HSD3B2基因新突变。方法对华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2015年7月收治的患有CAH并TARTs的兄弟2例的临床资料进行回顾性分析,并进行HSD3B2基因突变检测。结果 2例均以睾丸不规则肿大就诊,肾上腺皮质功能示促肾上腺皮质激素(ACTH)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)显著升高,雄烯二酮(An)、睾酮(T)、17-羟孕酮(17-OHP)高于正常。基因分析显示:2例HSD3B2基因发现C.776 CT(p.Thr259Met)和C.674 TA(p.Val225Asp)杂合错义突变,其中C.776 CT遗传自父亲,其致病性已见报道;C.674 TA(p.Val225Asp)遗传自母亲,其致病性尚未见报道。患儿经糖皮质激素治疗后,肿瘤缩小,生化指标明显好转。结论首次报道由3-β羟类固醇脱氢酶缺陷导致兄弟同患非典型CAH并TARTs,发现了目前尚未报道的HSD3B2基因新突变:C.674 TA(p.Val225Asp)。TARTs可导致男性生育能力下降和不育,而早期发现早期治疗可有效改善患儿生殖功能,临床应高度重视CAH男性患儿TARTs的筛查。     

小儿类固醇性糖尿病

现在,儿科临床中常用大剂量类固醇治疗各种疾病,然而小儿类固醇性糖尿病报告尚少。本文复习了小儿类固醇糖尿病17例,发作共24次。诊断标准是小儿用类固醇治疗原发疾病后空腹血糖≥120mg/dl,尿糖阳性或阴性;高血糖和/或尿糖阳性。 17例中男7例,女10例,平均年龄11.8岁(2.8～19.5岁)有糖尿病家族史6例,但没有一例属第一级     

滋肾阴泻相火中药对环境内分泌干扰物染毒大鼠卵巢雌激素合成相关酶表达的影响

目的观察滋肾阴泻相火中药对壬基酚(NP)及双酚A(BPA)染毒大鼠卵巢雌激素合成相关系列酶基因及蛋白表达水平的影响,探讨所用中药拮抗环境内分泌干扰物(EEDs)拟雌激素活性的作用机制。方法 3周龄雌性SD大鼠30只,分为染毒组、治疗组及对照组。染毒组单纯喂饲NP或NP与BPA联合喂饲,治疗组以滋肾阴泻相火中药与染毒物同时喂饲,对照组喂饲溶剂玉米油,疗程15 d。疗程结束时,检测其子宫湿质量及脏器系数,测定其卵巢类固醇急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、芳香化酶(CYP19al)、17-羟类固醇脱氢酶(17-HSD)、17al羟化酶(CYP17al)、3-羟类固醇脱氢酶(3-HSD)的基因表达水平和StAR、CYP11A1、CYP19al蛋白表达水平,进行各组间相互对比。结果染毒组与对照组比较,子宫湿质量、脏器系数增加,卵巢StAR、CYP11A1、CYP19al的基因及蛋白表达水平均明显上调(Pa<0.05),17-HSD、CYP17al、3-HSD的mRNA水平差异无统计学意义;而治疗组与染毒组比较子宫湿质量、脏器系数降低,StAR、CYP11A1的基因及蛋白表达水平均显著下调(Pa<0.05),CYP19al、17-HSD、CYP17al、3-HSD的mRNA水平差异无统计学意义。结论 NP及BPA可诱导卵巢雌激素合成相关酶的表达,促进自身雌激素的生物合成,而中药治疗干预可显著拮抗染毒物质的这种诱导作用,明显抑制染毒动物自身雌激素的生物合成。这可能是中药有效拮抗EEDs拟雌激素活性的主要作用机制之一。     

泌尿生殖系统疾病

561430 尿无或轻微异常的急性肾小球肾炎26例分析曹绍基等临床儿科杂志 4(1):19～20,198626例中,男性15例,女性11例,学龄儿童多见(23例)。表现为浮肿,少尿和高血压。尿常规检查17例(65.4%)尿蛋白阴性,9例     

17α羟化酶缺陷症致男性性发育异常内外科联合治疗探讨

目的 探讨先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH) 17α羟化酶缺陷症(17α-hydroxylation deficiency,17OHD)致男性性发育异常(46,XY DSD)的临床诊断及内外科联合治疗方法.方法 回顾性分析2006年9月至2013年12月收治的10例该类患儿病例资料,社会性别均为女性,就诊年龄10～14岁,平均12.2岁.染色体均为46,XY,SRY基因(+).经糖皮质激素替代治疗后,根据患者病情、年龄、社会性别、患儿及家长意愿进行性别选择及外科手术治疗,评估其长期治疗效果.结果 10例应用糖皮质激素治疗1个月后,血钾均正常,血压正常(其中2例仍应用钙拮抗剂).血孕酮、ACTH较前均有不同程度下降,血COR、24 h UFC较前升高,差异有统计学意义(P＜0.05).血钠、T及E2水平治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05).10例患儿均矫治为女性,其中5例行腹股沟睾丸切除术,5例腹腔镜下腹腔睾丸切除术.除1例失访,余均长期坚持应用糖皮质激素,血钾、血压控制良好.其中2例进入青春期后加用雌激素,乳房均有所发育,行“人工阴道成形术”,效果满意.目前2例患者已有规律性生活,阴道健康评分及Rosen's FSFI(女性性功能指数)均在正常范围.结论 17α羟化酶缺陷症为先天性肾上腺皮质增生症的一种罕见类型,可导致男性性发育异常,外科手术结合内分泌治疗可以取得较好的疗效.     

多巴反应性肌张力障碍诊治进展

<正>多巴反应性肌张力障碍(DRD)是一组左旋多巴胺合成代谢通路上的酶活性缺陷引起的遗传性进行性肌张力障碍疾病,患病率约为1/100万,女性约为男性2～3倍。1 多巴胺代谢通路及发病机制GCH1基因位于Chr14q22~([3-4]),编码三磷酸鸟苷环化水解酶1(GTP-CH-1),GTP-CH-1是四氢生物蝶呤(BH4)合成的3个步骤中的第1个限速酶(图1)。BH4是酪氨酸羟化酶(TH)、色氨酸羟化酶和苯丙氨酸羟化酶的辅酶,参与了多巴胺和     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因启动子甲基化研究

目的 了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因启动子区甲基化改变特点,探讨甲基化改变与G6PD缺乏症的关系。方法 将2013年8月至2014年7月期间195例贫血查因或体检儿童分为G6PD缺乏组(130例)和对照组(65例)。荧光定量PCR检测G6PDmRNA表达情况。甲基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)结合重亚硫酸盐PCR测序法(BSP)等方法分析G6PDmRNA表达偏低的G6PD缺乏症患者的基因启动子甲基化改变情况,另对G6PDmRNA表达正常的44例女性标本(G6PD缺乏组7例和正常对照组37例)的G6PD基因启动子甲基化情况进行分析。结果 22例(16.9%,22/130)G6PD缺乏症患者的G6PDmRNA表达偏低,其中的16例男性均无甲基化、6例女性均存在部分甲基化。44例G6PDmRNA表达正常的G6PD缺乏组及对照组女性中,40例检测到部分甲基化,4例无甲基化(G6PD缺乏组1例,对照组3例)。结论 基因启动子区甲基化与男性G6PD缺乏症没有关联。女性人群G6PD基因存在部分甲基化与无甲基化,提示甲基化改变对女性G6PD缺乏症可能有一定影响。     

应用PDMS-GM量表指导脑瘫患儿粗大运动康复训练的效果观察

2005-04—2006-09我们对60例脑瘫(CP)患儿进行了分组对照训练,现将结果报告如下。60例CP患儿均来自本院脑损伤干预中心,纳入标准:(1)诊断符合1988年全国小儿脑瘫座谈会制定的标准及分型[1];(2)年龄2～4岁;(3)GMFCS分级Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级各20例。60例患儿中,按就诊先后顺序抽取GMFCS分级Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级各10例患儿作为观察组,其中男性17例,女性13例,平均年龄2·9岁。痉挛型脑瘫25例,徐动型4例,肌力低下型1例。同时,以另30例患儿(男性19例,女性11例,平均年龄2·9岁,痉挛型脑瘫26例,徐动型3例,混合型1例)为对照组。方法:对照组患儿采用常…     

自拟清热消肿方治疗小儿急性肾炎56例疗效观察

小儿急性肾炎以起病急、水肿、血尿、蛋白尿、高血压为主要临床表现 ,中医属水肿的“阳水”范畴。笔者于 1994年 1月至 1998年 12月运用清热利湿、活血止血方剂治疗小儿急性肾炎 5 6例 ,疗效满意 ,现报告如下。临床资料 :本组 5 6例 ,按全国儿科肾脏病科研协作组制定的诊断标准确诊。其中男性 34例 ,女性 2 2例 ;年龄最小为 2岁 ,最大为 14岁 ;病程 1～ 2周。水肿 ( ) 2 8例、( ) 17例、( ) 11例。中度高血压 2 4例、轻度 2 6例。尿常规检查 :蛋白 ( ～ ) 5 6例 ,红细胞 ( ～ ) 5 2例 ,管型( ～ ) 4 2例。发病前…