虎眼万年青总皂苷对大鼠肝癌变过程中Ki67及Flt-1表达的影响

目的 动态检测虎眼万年青总皂苷对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌变过程中肝组织中Ki67、血管内皮生长因子受体(Flt-1)表达的影响.方法 二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌变,虎眼万年青总皂苷干预,运用免疫组化方法观察并分析第12周末、14周末、18周末肝组织标本中Ki67、Flt-1的表达.结果 肝癌变过程中以12周模型组Ki67 LI表达最高,14周及18周模型组Ki67 LI逐渐降低,与12周模型组比较有统计学意义.虎眼万年青总皂苷作用的12周预防组Ki67 LI较低且与相应12周模型组有统计学意义.诱癌14周模型组Flt-1 LI表达最高, 12周及18周模型组Flt-1 LI相对低下,与14周模型组比较有统计学意义.虎眼万年青总皂苷作用的14周预防组、治疗组Flt-1 LI降低,且与模型组有统计学意义.结论 二乙基亚硝胺诱发的肝癌变过程中以肝损伤、硬化阶段肝细胞增生活跃,而虎眼万年青总皂苷干预此阶段的肝细胞增生.二乙基亚硝胺诱发的肝癌变过程中在肝癌发生阶段Flt-1表达较高,虎眼万年青总皂苷干预此阶段Flt-1表达.     

大鼠肝癌变过程中虎眼万年青总皂苷对自由基代谢的影响

目的 探讨大鼠肝癌病变过程中虎眼万年青总皂苷(OCA-TS)对自由基代谢的影响.方法 二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌动物模型,OCA-TS进行干预,用比色分析法动态检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、一氧化氮(NO)的含量.结果 肝损伤硬化阶段、肝癌的发生发展阶段MDA含量逐渐增高,OCA-TS干预组MDA含量降低;肝损伤硬化阶段SOD活性增高明显,OCA-TS干预此阶段的SOD活性;在肝损伤硬化阶段、肝癌的发生发展阶段GSH-Px活性逐渐降低,以肝癌发展阶段明显,OCA-TS具有提高GSH-Px的活力作用;肝癌变阶段NO含量明显降低,OCA-TS具有提升NO含量作用.结论 OCA-TS具有干预自由基代谢作用,抑制肝损伤硬化、肝癌的发生发展.     

虎眼万年青总皂苷的毒理实验研究

目的 观察虎眼万年青总皂苷对幼鼠的急性毒性作用.方法 按 Bliss法,根据所提取的虎眼万年青总皂苷不同剂量一次性灌胃后,逐日观察小鼠7 d,并记录动物毒性反应、死亡数,计算LD50和SLD50.结果 Wistar幼鼠的LD50为3.2 g/kg;SLD50为(3.2±0.196) g/kg.结论 虎眼万年青总皂苷有一定的毒性.     

虎眼万年青总皂苷对酒精所致急性肝损伤的治疗作用

目的:探讨虎眼万年青总皂苷对酒精所致的急性肝损伤小鼠的治疗作用.方法 :用乙醇回流方法制备虎眼万年青总皂苷;将小鼠随机分成空白对照组、模型组、阳性药物组和高、中、低剂量实验组.采用白酒灌胃的方法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,并给予小鼠虎眼万年青总皂苷进行治疗.检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力...     

虎眼万年青总皂苷诱导活化肝星状细胞凋亡机制研究

目的:探索虎眼万年青总皂苷诱导活化肝星状细胞(HSC)凋亡机制。方法:肝星状细胞培养至对数生长期,接种于6孔板,加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)至最终浓度为10ng/mL。采用蛋白免疫印迹测定虎眼万年青总皂苷对激活的t-HSC细胞总蛋白MMP-13、TIMP-1以及核蛋白中NF-κB p65的表达。结果:虎眼万年青总皂苷可诱导肝星状细胞的凋亡,通过激活NF-κB诱导MMP-13表达,最终诱导细胞凋亡。结论:虎眼万年青总皂苷可诱导活化肝星状细胞凋亡。     

虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响.方法 用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡与细胞周期变化;透射电镜观察细胞形态学变化.结果 虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;可诱导细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性,使细胞周期明显阻滞于G0/G1期;电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变.结论 虎眼万年青总皂苷可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与虎眼万年青总皂苷将癌细胞阻止于G0/G1期相关.     

虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨虎眼万年青总皂苷(Ornithogalum caudatum AIT saponins)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡的机制,为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供实验依据。方法用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡;Western Blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与Bad表达的变化。结果虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;能诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性;能下调Bcl-2蛋白的表达,升高Bax/Bcl-2的比值,其高剂量组具有显著统计学差异(P<0.01),能上调Bad蛋白的表达,其低、中、高剂量组具有显著统计学差异(P<0.01)。结论虎眼万年青总皂苷可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与升高Bax/Bcl-2的比值,上调Bad蛋白的表达相关。     

DEN诱发大鼠肝癌过程中肝组织基因表达谱的演变

目的:揭示肝癌诱发过程中肝组织基因表达谱的演变,为中医药防治原发性肝癌提供参考.方法:采用DEN诱发大鼠肝癌,分别于诱癌的第4周、8周、16周、20周(肝癌形成)切取肝(合肝癌)组织,常规提取RNA,Affymetrix Rat 230A GeneChip及技术检测大鼠肝组织基因表达的差异和演变.结果:在芯片的15710个基因中,正常组有9225个基因表达,诱癌4周表达增至9396个,8周增至9872个,16周增至10496个,20周有10420个.在肝癌诱发过程中,存在大量基因表达的消长以及高表达基因数的增加,其中部分已知基因的结果.结论:DEN诱发大鼠肝癌过程中基因组变化是十分复杂的,而且文献追踪表明,国内外对在这些基因的功能及其与肝癌发生、发展的关系大多不明确.因此,如何逐一找到那些起着关键作用的基因,进一步阐释其在肝癌的发生、发展和转归中的作用,及其与中医证候演变和相应治法的关系,是今后中医基础理论实验研究的重要方向.     

番荔枝总提取物对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝脏癌前病变的影响

目的探讨番荔枝总提取物对二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌的防治作用.方法按改良的Solt Farber氏方法制作大鼠肝脏癌前病变模型,利用免疫组化、血清和组织生化等检测方法,观察番荔枝总提取物对DEN诱发的肝癌形成的影响.结果番荔枝总提取物与提取物的二氯甲烷部位各组大鼠肝表面癌结节数、肝/体重比、肝组织匀浆和血清中谷胱甘肽-S-转移酶含量,以及血清γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶的含量明显低于模型组.免疫组化显示,模型组大鼠的肝脏组织中bax免疫组化表达很少,bcl-2免疫组化表达较多;而番荔枝总提取物组bax免疫组化表达较多,bcl-2免疫组化表达较少.结论番荔枝总提取物能抑制癌前病变,延缓DEN诱发大鼠肝癌的发展,但不能阻断DEN诱发大鼠肝癌的发生.     

绞股蓝总皂苷对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的防治作用

目的:探讨中药组分绞股蓝总皂苷对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的防治作用。方法:采用腹腔注射DMN诱导大鼠肝纤维化模型。在造模4周后,将造模大鼠随机分为模型组、绞股蓝总皂苷组(200 mg.kg-1)及对照药秋水仙碱组(0.1 mg.kg-1),每组10只,灌胃用药2周后取材。观察检测以下指标:①末次体重、肝脾比值;②肝组织羟脯氨酸含量测定;③肝功能指标:血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胺酰转肽酶(GGT)活性,血清白蛋白(Alb)、总胆红素(TBiL)含量;④肝组织天狼星红染色及HE染色;⑤肝组织脂质过氧化指标:超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。结果:模型组出现典型的肝纤维化病理改变,与正常组比较,模型组肝组织Hyp含量、血清ALT,AST,GGT活性及TBiL,MDA含量显著升高,同时血清Alb含量、肝组织SOD活性、GSH含量、GSH-Px活性显著降低;较之模型组,绞股蓝总皂苷肝纤维化程度显著减轻,肝组织羟脯氨酸含量显著降低(P<0.01),与秋水仙碱组效应相当。绞股蓝总皂苷组肝功能指标均有显著改善,同时能显著升高肝组织SOD,GSH-Px活性(P<0.05),降低MDA含量。结论:绞股蓝总皂苷对DMN诱导的大鼠肝纤维化有显著的治疗作用。     

丹皮酚对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌前病变的预防作用

目的:研究丹皮酚(Pae)对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌前病变的预防作用,并探讨其作用机制。方法:采用腹腔注射DEN诱发大鼠肝癌前病变模型。雄性wistar大鼠按照体质量随机分成3组:对照组、模型组、丹皮酚组。造模给药16周后处死大鼠,观察各组大鼠一般状况,进行肝脏病理组织学检查,检测肝功能指标ALT、AST、GST、TBIL,脂质过氧化指标LPO、SOD、INOS、GSH-PX。结果:病理组织学显示,丹皮酚可以显著降低肝细胞异型增生灶和异型增生结节数目;降低血清中异常升高的ALT、AST、TBIL、GST、INOS、LPO水平,升高血清中降低的SOD、GSH-PX水平。结论:丹皮酚对于大鼠肝癌前病变具有一定程度的预防保护作用,其保护机制可能与改善肝功能,提高抗氧化能力,抑制脂质过氧化反应有关。     

康艾注射液对大鼠肝纤维化的影响

目的:探讨康艾注射液抑制大鼠肝纤维化的作用。方法:选取雌性Wistar大鼠30只随机分成康艾注射液干预组、单纯造模组和空白对照组各10只,实验组以含0.01%二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)饮水为纤维化诱导剂,干预组在造模过程中应用康艾注射液(1 mL.kg-1,腹腔注射,每周1次)治疗,对照组腹腔注射等量生理盐水作对照,空白对照组给予正常食水作对照。大鼠在同样条件下饲养21周观察HE染色和VG特殊染色下肝脏组织的病理形态学变化。结果:HE染色后单纯对照组镜下见正常肝小叶结构破坏,被假小叶取代,可见较多硬化结节,而干预组的肝小叶结构破坏相对较轻,可见较少硬化结节;VG染色后,空白对照组的纤维化程度为(6.52±2.64)%,康艾注射液干预组的纤维化程度明显低于单纯造模组[(17.41±1.11)%vs(20.18±2.52)%],3组相比均有统计学意义(P<0.05)。结论:在DEN制备的大鼠肝纤维化模型中,康艾注射液在一定程度上可抑制肝纤维化的生长。     

三七总皂苷丹参注射液苦参碱对大鼠肝癌细胞CBRH-791生长的抑制作用

目的:观察不同浓度三七总皂苷、丹参注射液、苦参碱对体外培养大鼠肝癌细胞CBRH7919增殖的影响。方法:应用MTT比色法研究三七总皂苷、丹参注射液、苦参碱对体外培养大鼠肝癌细胞CBRH7919影响的量效关系。结果:在药物作用72h条件下,20mL/L的丹参注射液对CBRH7919细胞的体外抑瘤率均可达85%,IC50为12.5mL/L;而三七总皂苷低浓度对CBRH7919无抑制作用,在100mg/L以上浓度对CBRH7919细胞有抑制作用,140mg/L浓度的抑制达40.7%;苦参碱在10mg/L浓度下对CBRH7919无抑制作用,在50mg/L浓度以上对CBRH7919细胞有抑制作用,250mg/L的浓度下的抑制率为40.5%。结论:丹参注射液、三七总皂苷、苦参碱对体外培养的大鼠肝癌细胞CBRH7919增殖具有直接的抑制作用,并且呈浓度依赖性。     

黄芪总皂苷提取物对牛血清白蛋白致大鼠肝纤维化作用的影响

目的:观察黄芪总皂苷提取物对牛血清白蛋白(BSA)致大鼠实验性肝纤维化作用的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、秋水仙碱组(C组)、黄芪总皂苷提取物低剂量组(D组)、黄芪总皂苷提取物中剂量组(E组)、黄芪总皂苷提取物高剂量组(F组),每组10只.采用皮下多点注射牛血清白蛋白(BSA)免疫性诱导大鼠肝纤维化进行造模.造模后,C～F组分别按0.1 mg·kg-1·d-1,15,30,60 mg·kg-1 ·d-1剂量ig给药.55 d后,分别检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-c)的含量,并对肝组织进行病理学观察.结果:黄芪总皂苷提取物可使BSA免疫性诱导的肝组织纤维增生、变性和坏死明显减轻.黄芪总皂苷提取物各组大鼠血清ALT,AST,HA,LN,PC-Ⅲ,Ⅳ-C及肝组织羟脯氨酸含量与模型组比较均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).病理组织学观测结果显示,黄芪总皂苷各剂量组与模型组比较均有不同程度改善.结论:黄芪总皂苷对BSA所致实验性大鼠肝纤维化具有良好的治疗作用.     

白首乌苷对二乙基亚硝胺诱发实验性肝癌大鼠细胞因子产生的影响

目的:观察白首乌苷对二乙基亚硝胺诱发实验性肝癌模型大鼠细胞因子产生功能的影响。方法:二乙基亚硝胺诱发大鼠发生实验性肝癌后,应用不同剂量的白首乌苷进行治疗,观察其产生白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)的能力。结果:白首乌苷剂量在25mg/kg体质量时可增加大鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力;剂量在50mg/kg体质量时可增强大鼠脾脏淋巴细胞产生IL-2和IFN-γ的能力。结论:白首乌苷对二乙基亚硝胺诱发实验性肝癌大鼠细胞因子的产生具有明显的改善作用。     

黄芪总皂苷对慢性病贫血模型大鼠血液学及组织铁的影响

目的观察黄芪总皂苷(TSA)对慢性病贫血(ACD)模型大鼠血液学及组织铁的影响。方法经大鼠右后足皮内注射含卡介苗的完全弗氏佐剂复制ACD模型大鼠,造模成功大鼠随机分为模型组、高剂量TSA组、中剂量TSA组、低剂量TSA组和阳性药物组,另设空白对照组,各组给予相应的干预措施,观察各组大鼠血液学参数和肝、脾组织铁含量及肝组织内肝源性杀菌蛋白基因(Hamp)转录水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠HGB、HCT、MCV及MCH等血液学参数均降低,肝和脾组织铁含量明显增加,肝Hamp转录水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量TSA组能显著升高模型组大鼠HGB和HCT(P<0.05);TSA各剂量组均有降低大鼠脾组织铁含量的作用(P<0.05);TSA各剂量组对上述指标的影响均不及阳性药物组(P<0.05);与模型组比较,TSA各剂量组均能下调Hamp转录水平,差异有统计学意义(P<0.05),且优于阳性药物组(P<0.05)。结论黄芪总皂苷具有改善炎症引起的血液学指标降低的作用,这一作用的可能机制之一是下调Hamp基因转录本,抑制脾内铁的过度聚集。     

三七总皂苷对肝纤维化小鼠TNFα及IL-6活性的影响

目的:观察三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中TNFα及IL-6活性的影响.方法:用CCl4复制小鼠中毒性肝纤维化模型,ELISA法测定血清TNFα和IL-6,并行肝脏病理检测.结果:三七总皂苷能减轻肝纤维化程度,降低肝纤维化小鼠血清中TNFα和IL-6的水平.结论:三七总皂苷具有抗肝纤维化作用,其机理可能与降低血清中TNFα和IL-6的水平有关.     

柴胡总皂苷粗提物致大鼠肝毒性及氧化损伤机制相关性研究

目的:观察长期、大量给予柴胡总皂苷粗提物导致大鼠肝毒性损伤程度及与氧化损伤机制的相关性。方法:按45 d毒性试验方法,给大鼠灌胃柴胡总皂苷粗提物,按柴胡总皂苷计算,高、中、低剂量组分别为100,50,10 mg.kg-1,45 d后观察一般状况,检测肝功能相关指标,检测血和肝组织内脂质代谢情况、糖代谢、胆红素(TBIL)水平和肝组织病理检查;检测血中总巯基(-SH)的量和血、肝组织内丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的量和活性。结果:柴胡总皂苷粗提物可导致血中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性增高,肝脏重量和肝体比值增大,血和肝内TG含量增加,对血中胆固醇(CHO)和肝内糖原(Gn)影响不明显,仅高剂量组对TBIL有影响;病理组织学检查可见肝细胞损伤。可导致血中总-SH的量增加;血和肝内MDA水平、GSH含量增加,SOD,GSH-Px活性下降。上述变化随剂量的增加而逐渐加重,与蒸馏水对照组比较有明显差异。结论:柴胡总皂苷粗提物可导致大鼠明显的肝毒性损伤,其损伤途径与氧化损伤机制有关。     

三七总皂苷对脑出血大鼠凝血酶及神经功能的影响

目的：研究三七总皂苷对脑出血大鼠凝血酶及神经功能影响。方法：SD雄性大鼠200只随机分为空白组、假手术组、模型组、用药组,每组又有6 h,24 h,48 h,72 h,7天5个时间点。空白组每组5只,其余每组每个时间点10只大鼠。采用尾壳核注入胶原酶肝素生理盐水溶液法建立大鼠脑出血模型,治疗组给予三七总皂苷腹腔注射,每天一次。在相应时间点,采用改良的神经功能缺损评分（ Modified neurological severity score ,mNSS）对实验动物造模后各时间点神经功能缺损进行评价。结果：各时间点模型组mNSS和空白组假手术组比,明显升高,差异有统计学意（P＜0.05）,除6 h外,各时间点模型组和用药组比,用药组mNSS明显降低,差异有统计学意义（ P＜0.05）。测定纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间,纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间48 h模型组和用药组差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论：脑出血模型组中,6 h开始,mNSS明显增高,到48 h达到高峰,以后逐渐下降,三七总皂苷可以明显下调mNSS评分。纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间在模型组升高,用药组下降,说明三七发挥了发挥了活血行淤作用。     

楤木皂苷对大鼠肝纤维化的影响及机制研究

目的:研究楤木皂苷对大鼠肝纤维化的影响及其可能的机制。方法:采用皮下注射四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,楤木皂苷给药8周,MASSON染色观察胶原纤维增生情况,检测各组大鼠肝脾指数、血清肝功能、LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的变化。结果:楤木皂苷30 mg/kg、60 mg/kg可减少肝细胞变性、坏死和纤维增生程度,改善肝功能,降低血清中LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的含量。结论:楤木皂苷对大鼠肝纤维化有防治作用,其机制可能与保护肝功能、降低血清中LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的含量有关。