红细胞生成素对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制

目的 观察红细胞生成素（EPO）对糖尿病大鼠的肾脏保护作用,并探讨其发挥肾脏保护作用的可能机制。 方法 将实验大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病模型组（DM组）和EPO治疗组（DE组）。药物干预8周后,处死大鼠,检测尿白蛋白排泄率（UAER）、血清肌酐（Scr）、血细胞比容（Hct）。肾组织切片行HE、PAS染色,观察大鼠肾脏病理改变。化学比色法检测肾脏丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及总抗氧化能力（T-AOC）。免疫荧光及Western印迹法检测大鼠肾脏EPO受体（EPOR）的表达。免疫组织化学及Western印迹法检测大鼠肾脏NADPH氧化酶亚基（p47phox）、转化生长因子β1（TGF-β1）、纤连蛋白（FN）的表达。 结果 EPO可以减轻糖尿病大鼠肾脏病理及功能改变。各组大鼠肾脏均表达EPOR,但表达水平比较差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。与NC组相比,DM组大鼠p47phox、TGF-β1、FN蛋白表达增强（均P ＜ 0.01）;GSH-Px、SOD活性及T-AOC下降（均P ＜ 0.01）;MDA含量增加（P ＜ 0.01）。与DM组相比,DE组大鼠p47phox、TGF-β1、FN蛋白表达减弱（均P ＜ 0.05）;GSH-Px、SOD活性及T-AOC升高（均P ＜ 0.01）;MDA含量降低（P ＜ 0.01）。 结论 EPO可通过抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激,降低TGF-β1、FN表达,减轻糖尿病大鼠肾脏病理改变,发挥肾脏保护作用。     

夹竹桃麻素对高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激损伤的保护作用

目的 观察NADPH氧化酶特异抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）对高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激（OS）损伤的保护作用。 方法 自由饮用含有0.8%乙二醇的水4周建立高草酸尿症SD大鼠模型。大鼠按随机数字表法分为4个组：空白组、高草酸尿症组、apocynin干预组、apocynin对照组。后两组给予apocynin（0.2 g&#8226;kg-1&#8226;d-1）灌胃,对照组给予正常饮水。4周后检测大鼠肾脏OS 指标（尿H2O2和8-异前列腺素）,以及Ccr及肾脏/体质量比值。免疫组化观察NADPH氧化酶亚基p47phox在肾脏中的表达位置。RT-PCR和免疫印迹法分别检测肾组织NADPH氧化酶亚基p47phox、gp91phox、Nox-1 mRNA以及p47phox蛋白的表达水平。 结果 p47phox在各组肾脏中均有广泛的表达,包括肾皮质区、内髓区、外髓区等。与空白组比较,高草酸尿症组大鼠尿H2O2和8-异前列腺素水平显著升高,Ccr降低,肾脏/体质量比值增高（均P < 0.05）;肾脏p47phox、gp91phox和Nox-1 的mRNA表达均显著增加（均P ＜ 0.05）, p47phox蛋白表达也增多（P ＜ 0.01）。apocynin干预治疗可抑制肾脏p47phox、Nox-1 mRNA及p47phox蛋白的表达,但gp91phox mRNA表达未明显减少,而大鼠尿H2O2和8-异前列腺素水平下降,Ccr增加,肾脏/体质量比值减少,但仍高于对照组水平。 结论 NADPH氧化酶是高草酸尿症诱导大鼠肾脏OS损伤过程中活性氧形成的来源之一。使用apocynin抑制NADPH氧化酶活性可部分减轻肾脏的OS损伤程度,保护肾功能。     

NADPH氧化酶抑制剂apocynin对大鼠糖尿病肾小球细胞外基质代谢的影响

目的探讨NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA在糖尿病大鼠肾脏表达时间模式及抑制NADPH氧化酶活性对肾小球细胞外基质(ECM)代谢的影响。方法链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型随机地分为糖尿病非治疗组(DM),观察12周;NADPH氧化酶抑制剂apocynin治疗组(DM+Apo,0.2g·kg-1·d-1),疗程8周。用RT-PCR检测肾脏NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA的表达。免疫组织化学检测肾脏纤连蛋白(FN)表达。白明胶酶谱法(zymography)检测肾脏基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性。并测定Scr、尿蛋白量和肾重指数。结果DM组肾脏p22phoxmRNA的表达在4、6和8周时较正常对照组(C)明显升高(P<0.05);12周时降低至正常水平。DM+Apo组肾脏p22phoxmRNA的表达与DM组差异无统计学意义(P>0.05),但可显著逆转由糖尿病导致的肾小球体积、肾小球FN表达、肾小球ECM含量、Scr、尿蛋白量和肾重指数的升高(P<0.05),并显著提高肾脏MMP-9活性(P<0.05)。结论NADPH氧化酶的过度表达在糖尿病肾病(DN)发病的早期阶段起重要作用。抑制NADPH氧化酶活性的治疗措施可减少DN肾小球ECM积聚、延缓DN的发生和发展。     

肾炎防衰液对延缓慢性肾脏病抗氧化应激机制研究

目的:研究肾炎防衰液对延缓慢性肾脏病抗氧化应激的疗效及作用机制。方法:采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型,随机分为模型组、贝那普利组和肾炎防衰液组,另设假手术组;术后7 d、14 d、21 d分批取材,检测肾脏羟脯氨酸含量及T-AOC、总T-SOD和MDA含量,免疫组化法检测肾组织MCP-1蛋白及TNF-α蛋白的表达,Real time PCR法检测肾脏NADPH氧化酶p22phox mRNA的表达。结果:与模型组相比,肾炎防衰液组UUO大鼠肾组织中T-AOC、总T-SOD和MDA含量均升高(P0.05),肾组织MCP-1蛋白、TNF-α蛋白及NADPH氧化酶p22phox mRNA的表达均减少(P0.05)。结论:肾炎防衰液可以升高T-AOC、总T-SOD和MDA水平,降低MCP-1蛋白、TNF-α蛋白及NADPH氧化酶p22phox mRNA的表达,减轻大鼠肾间质纤维化的程度,从而验证了肾络癥瘕理论在治疗慢性肾脏病中的作用。     

奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏氧化应激的作用

目的 探讨奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏氧化应激的作用。 方法 健康C57小鼠分为假手术组（SHAM组）、慢性心力衰竭组（CHF组）和奥美沙坦酯治疗组（OLM组）。以冠状动脉左前降支结扎法建立慢性心力衰竭小鼠模型，其中奥美沙坦酯治疗组以10 mg/kg剂量每日胃饲，12周时观察各组小鼠心率、血压、心功能状况、Scr、BUN、血浆和肾脏血管紧张素（Ang）Ⅱ水平。实时PCR法检测肾脏gp91phox、p22phox和NOX4的表达。AZAN染色和二氢乙啶（DHE）染色观察肾组织病理变化。 结果 与SHAM组比较，CHF组和OLM组左室舒张末期内径（LVDd）和左室收缩末期内径（LVDs）显著增加（P ＜ 0.05）；短轴缩短率（FS）和射血分数（EF）显著降低（P ＜ 0.05）；CHF组收缩压、Scr和BUN显著增高，而OLM组以上指标较CHF组均显著降低（P ＜ 0.05）。与SHAM组比较，CHF组血浆和肾脏AngⅡ水平增高，gp91phox、p22phox和NOX4表达增高（P ＜ 0.05）；OLM组肾脏AngⅡ水平、gp91phox、p22phox和NOX4表达较CHF组均显著降低（P ＜ 0.05）。与SHAM组比较，CHF组肾脏AZAN染色和DHE染色阳性增强（P ＜ 0.05），而OLM组较CHF组显著降低（P ＜ 0.05）。 结论 慢性心力衰竭可使肾内NADPH氧化酶激活并导致肾小球间质纤维化，奥美沙坦酯通过抑制AngⅡ引起的氧化应激反应起到肾脏保护作用。     

NADPH氧化酶介导血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚

目的 探讨NADPH氧化酶在血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化以及细胞外基质积聚中的作用。 方法 体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞，静止24 h后，随机分为以下4组：正常对照组，AngⅡ（10^-7 mol/L）组，AngⅡ+ Los(洛沙坦,10 μmol/L)组及AngⅡ+DPI（NADPH氧化酶活性抑制剂，10 μmol/L）组。应用荧光染料（DCF）及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧（ROS）的产生。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚单位p47phox以及纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）1、α平滑肌肌动蛋白（SMA）、E钙黏蛋白（cadherin） mRNA的表达。Western印迹检测p47phox、α-SMA的蛋白表达。 结果 （1）外源性AngⅡ可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS的产生，刺激15 min后，ROS 的表达较对照组上升了(3.64±0.53)倍。DPI和洛沙坦可显著抑制AngⅡ刺激后ROS的产生（P < 0.05）。（2）AngⅡ刺激腹膜间皮细胞后， NADPH氧化酶亚单位p47phox mRNA和蛋白的表达均呈上升趋势。洛沙坦和DPI可阻断由AngⅡ诱导的p47phox表达上调（P < 0.05）。（3） AngⅡ诱导α-SMA表达的上调以及 E-cadherin mRNA的下调, 洛沙坦和DPI可部分逆转AngⅡ的这种作用。（4）AngⅡ刺激8 h后可明显上调PAI-1的mRNA表达，为正常对照组的（3.06±0.77）倍。 洛沙坦和DPI可明显阻断PAI-1的表达上调（P < 0.05）。 结论 NADPH氧化酶依赖产生的ROS介导了AngⅡ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚。阻断AngⅡ的作用及抑制NADPH氧化酶的表达和活性可作为防治腹膜纤维化的潜在治疗靶点。     

氧化应激及丝裂原活化蛋白激酶在醛固酮加盐诱导肾脏损害中的作用

目的 探讨氧化应激与丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs)在醛固酮加盐诱导肾脏损伤中的作用。 方法 SD大鼠随机分为以下5组: ⑴ 0.5%乙醇作为对照组； ⑵ 1%氯化钠+0.5%乙醇（氯化钠组）； ⑶ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇（醛固酮组）；⑷ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇+依普利酮（依普利酮组），⑸ 1%氯化钠+醛固酮+0.5%乙醇+超氧化物歧化酶模拟物tempol（tempol组）。实时定量PCR检测肾皮质NADPH氧化酶亚基p22phox、Nox-4 和 gp91phox mRNA水平。Western印迹检测肾皮质磷酸化ERK1/2、JNK及ERK5蛋白表达。 结果 与氯化钠组大鼠相比，醛固酮组大鼠的血压[（165±5）比（118±3） mm Hg]及尿蛋白量（24 h） [(101.0±24.0) 比 (9.1±3.0) mg]显著增高(P均 < 0.05)；肾皮质脂类过氧化反应产物（TBARS）水平明显升高[(0.23±0.02) 比 (0.09±0.01) nmol/mg 蛋白，P < 0.05]；肾皮质NADPH氧化酶亚基p22phox、Nox-4和 gp91phox mRNA表达显著升高[分别为氯化钠组的(2.3±0.2)、(4.3±0.8)和(3.0±0.3)倍，P < 0.05]；肾皮质ERK1/2、JNK与ERK5活性显著增高[分别为氯化钠组的(3.3±0.3)、(2.3±0.3)和(3.0±0.2)倍，P < 0.05]。依普利酮或tempol明显降低醛固组大鼠的血压、尿蛋白量（24 h） [依普利酮组和tempol组分别为(10.0±2.0)、(9.3±2.0) mg]以及肾皮质TBARS水平[依普利酮组和tempol组分别为(0.08±0.01)和(0.11±0.03) nmol/mg 蛋白] (P < 0.05)；并使肾皮质组织ERK1/2、JNK及ERK5活性降至接近对照组水平。 结论 氧化应激与MAPKs通路激活在醛固酮加盐诱导的肾脏损伤中发挥重要作用。     

NADPH氧化酶在次氯酸修饰白蛋白诱导血管内皮细胞炎性反应中的作用

目的 阐明次氯酸修饰白蛋白（HOCl-Alb）诱导血管内皮细胞炎性反应的机制。 方法 用体外制备的HOCl-Alb与人脐静脉内皮细胞共同培养;用光泽精增强化学发光法测定NADPH氧化酶活性;用免疫沉淀和Western印迹法测定p47phox磷酸化及p47phox与p22phox结合;用免疫荧光化学染色法观察p47phox膜迁移;分别用RT-PCR和Western印迹法测定细胞间黏附分子1（ICAM-1） mRNA和蛋白表达。为了解NADPH氧化酶在HOCl-Alb上调ICAM-1表达过程中的作用,在HOCl-Alb刺激细胞前,在细胞培养液中预先加入NADPH氧化酶特异性抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）,观察ICAM-1表达的变化。 结果 HOCl-Alb激活NADPH氧化酶具有剂量和时间依赖性,200 mg/L HOCl-Alb刺激15 min使NADPH氧化酶活性增加的量是牛血清白蛋白组的6.16倍（P ＜ 0.01）,并可诱导p47phox磷酸化和膜迁移,及其与p22phox结合。HOCl-Alb上调ICAM-1表达的作用可被夹竹桃麻素抑制,500 μmol/L 夹竹桃麻素对HOCl-Alb诱导的ICAM-1表达的抑制率为68.97%（P ＜ 0.01）。 结论 NADPH氧化酶是HOCl-Alb诱导ICAM-1高表达的重要途径,与血管内皮炎性反应关系密切。     

TGF-β1对大鼠腹膜间皮细胞ROS和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪的干预作用

目的:探讨TGF-β1对大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)活性氧(ROS)和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪注射液(AGI)对其的干预作用。方法:体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞至第二代,静止24h后,随机分为:正常对照组(A组),AGI(2g/ml)组(B组),TGF-β1(10ng/ml)组(C组),TGF-β1+AGI(2g/ml)组(D组,AGI预处理1h)。用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA的表达;Western印迹检测p67phox的蛋白表达。结果:TGF-β1可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS产生,刺激20min后,ROS的表达较对照组显著上升(P<0.05)。AGI可显著抑制TGF-β1刺激后ROS的产生(P<0.05);大鼠腹膜间皮细胞经TGF-β1刺激后,NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA和蛋白的表达均上升,AGI可抑制TGF-β1诱导的p67phox mRNA和蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1可诱导大鼠腹膜间皮细胞产生的ROS增加、NADPH氧化酶亚基p67phox表达上调;AGI可抑制NADPH氧化酶的表达和活性ROS的产生,从而为AGI防治腹膜纤维化提供了理论依据。     

NADPH氧化酶在转化生长因子β1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的探讨NADPH氧化酶在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）转分化中的作用。方法用TGF-β1（10μg/L）刺激NRK-52E细胞不同时间,观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI- 1）及Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）的表达。部分实验中细胞在TGF-β1刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI预处理1 h。用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧（ROS）的产生。用RT-PCR方法检测NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位mRNA的表达。α-SMA、E-cadherin、PAI-1及Col-ⅠmRNA及蛋白的表达分别采用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫化学检测。结果TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达,8 h及24 h时分别为对照组的2.43倍及3.59倍（P〈0.01）。TGF-β1可显著促进细胞ROS的产生,5 min时已是对照组的2.5倍（P〈0.05）。DPI预处理同时可显著逆转TGF-β1诱导NRK-52E细胞ROS的产生（P〈0.05）、α-SMA的表达上调、E-cadherin的表达下调以及PAI-1和Col-Ⅰ的表达上调。结论TGF-β1可促进NRK-52E细胞增加ROS的产生。ROS介导了TGF-β1诱导NRK-52E细胞的转分化,促进肾脏纤维化。     

Effects of NADPH oxidase inhibitor in diabetic nephropathy

BACKGROUND: We used apocynin to test the hypothesis that superoxide anion (O(-) (2)) from nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase underlies the development of diabetic nephropathy in the rat. METHODS: Rats received apocynin (16 mg/kg/day) from 2 to 8 weeks after inducing diabetes mellitus (DM) with streptozotocin. RESULTS: DM increased excretion of hydrogen peroxide (H(2)O(2)), lipid peroxidation products (LPO), nitric oxide products (NOx), and protein. The kidneys of rats with DM had increased expression of p47phox and gp91phox and endothelial nitric oxide synthase (eNOS), and increased mesangial matrix with expression of fibronectin and collagen I. Apocynin prevented the increase in excretion of H(2)O(2), LPO, and protein in diabetic rats, increased renal NOx generation, and prevented the increased renal expression of gp91phox and the membrane fraction of p47phox, and reverted the mesangial matrix expansion. CONCLUSION: Activation of NADPH oxidase with translocation of p47phox to the membrane underlies the oxidative stress and limited NO generation, despite enhanced eNOS expression in a model of diabetic nephropathy. Apocynin prevents these changes and the associated proteinuria.     

福辛普利钠对糖尿病肾脏病大鼠肾组织PAI-1表达的影响

目的观察福辛普利钠对糖尿病肾脏病（diabete kidney disease，DKD）大鼠PAI-I表达的影响。方法将45只Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组（A组）13只，糖尿病组（B组）16只，福辛普利钠干预组（C组）16只。采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。于第4、8、12周末各组随机选取4只大鼠处死并收集标本，记录体重、右肾重；检测血糖、血肌酐、血尿素氮、血胆固醇、血甘油三酯、24h尿蛋白排泄量。用逆转录PCR方法检测肾皮质PAI-1mRNA表达水平。结果造模成功，随时间增加，各组观察的指标有不同程度升高，但药物干预组与糖尿病组比较有不同程度下降。结论福辛普利钠可以抑制PAI-1 mRNA表达、延缓DKD的进展。     

4-苯基丁酸对糖尿病肾病大鼠的作用

目的 探讨化学分子伴侣4-苯基丁酸（4-PBA）对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 54只大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病肾病组（DN）和4-PBA治疗组（4-PBA）,每组各18只。在治疗第4、8及12周末分别检测各组大鼠肾质量指数（KI）、24 h尿蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（Scr）、尿素氮(BUN)、尿丙二醛（MDA）含量和超氧化物岐化酶（SOD）活性;观察肾脏病理改变;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox和硝基酪氨酸（NT）的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的KI显著增高（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）也显著增高（4.92±0.70 比 0.26±0.07、 5.29±0.83 比0.28±0.08、5.54±0.81比0.29±0.04,均P < 0.05）。12周时病理显示DN大鼠肾小球系膜细胞增生,系膜基质积聚;而与DN组大鼠比较,4-PBA治疗组大鼠KI显著降低（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）亦显著降低（4、8和12周分别为3.71±0.37、3.47±0.36和3.28±0.40,P < 0.05）,4-PBA能显著减轻肾脏的病理变化。在4、8和12周,与NC组大鼠比较,DN大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了154.72%、148.60%和91.95%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了118.00%、140.10%和177.82%（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达分别升高了45.29%、59.13%和89.28%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别增加了2.05倍、2.26倍和2.43倍;尿SOD活性分别下降了64.78%、71.29%和79.32%。与DN组比较,在8和12周时,4-PBA治疗组DN大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达均显著减少（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达显著减少（P < 0.05）,且与NC组差异已无统计学意义。另外,在4~12周,4-PBA治疗可显著减少DN大鼠尿中MDA含量,增加尿SOD活性（均P < 0.05）。 结论 4-PBA能显著抑制糖尿病大鼠肾脏病理变化,其机制可能与抑制肾组织氧化应激有关。     

Oxidative stress and nitric oxide synthase in rat diabetic nephropathy: effects of ACEI and ARB.

BACKGROUND: Angiotensin II (Ang II) can up-regulate nicotinamide adenine dinucleotide phosphate [NAD(P)H] oxidase, whose product superoxide anion (O2-) can interact with nitric oxide (NO) to form peroxynitrite (ONOO-). We tested the hypothesis that Ang II subtype 1 (AT1) receptor activation enhances oxidative stress and nitrotyrosine deposition in the kidneys of rats with diabetes mellitus (DM). METHODS: After two weeks of streptozotocin-induced DM, rats received either no treatment, an angiotensin-converting enzyme inhibitor (ACEI) or an angiotensin receptor blocker (ARB) for two weeks. At four weeks, renal expression of the p47phox component of NAD(P)H oxidase, endothelial nitric oxide synthase (eNOS), neuronal nitric oxide synthase (nNOS), and nitrotyrosine were evaluated by Western blot and immunohistochemistry and related to plasma lipid peroxidation products (LPO), hydrogen peroxide production in the kidney and 24-hour protein excretion. RESULTS: Immunoreactive expression of p47phox and eNOS were increased in DM with an increase in plasma LPO, renal hydrogen peroxide production and nitrotyrosine deposition. Expression of nNOS was unaltered. Treatment with either ACEI or ARB prevented all these findings and also prevented significant microalbuminuria. The treatments did not affect the elevated blood sugar, nor did DM or its treatment affect the blood pressure or the creatinine clearance. CONCLUSION: Early proteinuric diabetic nephropathy increases renal expression of the p47phox component of NAD(P)H oxidase and eNOS with increased indices of systemic and renal oxidative/nitrosative stress. An ACEI or an ARB prevents these changes and prevents the development of proteinuria, independent of blood pressure or blood sugar. This finding indicates a pathogenic role for AT1 receptors in the development of oxidative damage in the kidneys during early DM.     

乙酰肝素酶在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用

目的 观察糖尿病肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶（HPA）的表达，探讨其在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用。 方法 SD健康大鼠被随机分为健康对照组（n = 6）、糖尿病6周组(DM6w, n = 10)和糖尿病12周组(DM12w, n = 10)，采用一次性腹腔注射链脲菌素（STZ）的方法建立糖尿病大鼠模型。分别于造模后6周和12周末测定各组大鼠相对肾质量、血糖、尿素氮、血肌酐、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)等指标，并观察肾脏病理改变。RT-PCR和免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达变化，并分析其与蛋白尿发生的相关性。 结果 （1）DM6w和DM12w组大鼠的相对肾质量、血糖、尿素氮、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)与健康对照组相比明显升高, 差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。（2）DM6w和DM12w组大鼠HPA mRNA和蛋白表达比健康对照组均显著增高(P < 0.01)。（3）大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达与尿蛋白量(24 h)之间均呈正相关 (r = 0.783，P < 0.01；r = 0.793，P < 0.01)。 结论 HPA在糖尿病肾病中的表达升高可能参与了糖尿病肾病蛋白尿的发生。