TGFβ1、VEGF在自体移植静脉中的表达状况及意义

目的 探讨自体静脉移植后率生长因子β１（ＴＧＦβ１）和血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）表达的动态变化及其与内膜增生的关系。方法 １００只Ｗｉｓｔａｒ大鼠,分为１０组,第１组为对照组,第２～９组为自体静脉移植模型组。应用原位杂交和免疫组化方法,观察大鼠自体移植静脉后不同时期,移植静脉的内膜增生情况、ＴＧＦβ１ ｍＲＮＡ、ＴＧＦβ１和ＶＥＧＦ蛋白表达的变化动态。结果 自体静脉移植后２周,移植静脉内膜明     

自体血管移植后内膜增生与内皮素-1 mRNA表达的关系

我们采用原位杂交方法探讨内皮素(ＥＴ) 1ｍＲＮＡ与自体血管移植后内膜增生的关系 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1.动物分组及模型建立 :16 8只Ｗｉｓｔａｒ大鼠 (由哈尔滨医科大学提供 )随机分成 3组。Ｖ组 (静脉组 )采用质量分数为 1%戊巴比妥钠 30ｍｇ/ｋｇ体重腹腔注射麻醉。颈部旁正中切口 ,游离颈外静脉外侧分支长 1.0ｃｍ切断 ,放入肝素盐水弯盘中备用 (放置时间 15ｍｉｎ)。游离左颈总动脉长约 1.5ｃｍ ,两端分别放置动脉夹 ,切除颈总动脉约 1.0ｃｍ ,将切取的颈外静脉和颈总动脉断端行端端吻合 ,用 11 0无损伤线采用外翻结…     

前列腺素E1和重组人生长激素对肝缺血-再灌注损伤的保护作用

我们用兔肝脏缺血 再灌注损伤及肝切除模型 ,采用前列腺素Ｅ1 (ＰＧＥ1 )和重组人生长激素 (ｒｈＧＨ)单独及联合用药的方法 ,探索减轻肝脏缺血 再灌注损伤的新方法。一、材料和方法1 .动物及分组 :健康大耳白兔 48只 ,3 %戊巴比妥钠 (30ｍｇ/ｋｇ体重 )静脉注入麻醉 ,阻断第一肝门 40ｍｉｎ时切除左肝外叶 ,45ｍｉｎ后解除阻断。实验动物随机等分为 4组 :Ａ组 (对照组 ,1 2只) ,缺血前后静脉滴注生理盐水 (ＮＳ)0 .5ｍｌ·ｋｇ- 1 ·ｍｉｎ- 1 ;Ｂ组 (ＰＧＥ1 组 ,1 2只) ,缺血前后静脉滴注ＰＧＥ1 0 .5μｇ·ｋｇ- 1 ·ｍｉｎ- 1 ;Ｃ组 (…     

纤维蛋白原在移植静脉内膜增生中的作用

自体大隐静脉 (ＨＳＶ)被认为是血管移植术最合适的材料 ,但内膜增生 (ＩＨ)所致术后狭窄制约其应用。纤维蛋白原(ＦＧ)在其中的作用日益受到重视。我们采用ＩＨ模型来研究ＡＴＰ敏感性钾离子通道 (Ｋ ＡＴＰ)在ＦＧ和ＩＨ中的作用。1.资料与方法 :在 9例血管移植术中取正常ＨＳＶ(约 5ｃｍ) ,按Ｋａｒｅｎ方法行组织培养[1] 。将每条ＨＳＶ分 10片 ,随机取 1片行胎盼蓝染色。其余 9片分 3组 ,每组 3片。分别施加ＦＧ(0、2 5、5 0ｇ/Ｌ)和 30 μｍｏｌ/Ｌ格列奇特 (ＧＬ)。ＧＬ溶于二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)中 ,ＤＭＳＯ终浓度为 1%。各静脉…     

血管内皮细胞衬里腔静脉移植物的研究和应用

本研究共用实验犬１１１只。通过胶原酶消化法获取静脉源或大网膜血管内皮细胞，种植于人工血管后行犬肾下下腔静脉间置移植术。由于针织绦纶和ＰＴＦＥ人工血管实现了早期内皮化，抑制了种植血管内膜增生，提高了种植血管的远期通畅率。我们发现种植血管内膜分泌ＰＧＩ＿２功能较好，而分泌ＴＸＢ＿２较差；因而明确了建立远侧暂时性股动静脉瘘的重要性，筛选出了针织绦纶和ＰＴＦＥ人工血管最适于血管内皮细胞的种植。临床应用１０例，随访３～５年，效果良好。     

eNOS基因转染预防静脉移植血管再狭窄

目的 应用含牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因重组腺病毒(Ad5CMVNOSⅢ)转染静脉移植血管、观察eNOS基因预防静脉移植血管再狭窄的作用。方法 将21只杂种犬分为3组，手术对照组、Ad5CMVLac—Z(含大肠杆菌β半乳糖苷酶基因重组腺病毒)对照组和Ad5CMVNOSⅢ干预组。在犬颈静脉、颈动脉旁路血管移植术中分别应用Ad5CMVNOSⅢ病毒液或Ad5CMVLac—Z病毒液常温浸泡法感染静脉移植血管30分钟，术后28天病理切片观测移植血管新内膜增生状况。结果 与正常犬颈外静脉相比，手术对照组、Ad5CMVLac—Z对照组和Ad5CMVNOSⅢ干预组颈外静脉移植血管内膜／中膜比较均有不同程度增加(P＜0．05)，但Ad5CMVNOSⅢ组内膜／中膜比显著低于另外2个对照组(P＜0．05)，新内膜增生明显减轻。结论 Ad5CMVNOSⅢ感染静脉旁路移植血管对预防再狭窄有一定作用。     

左旋精氨酸对体外循环中内皮细胞及红细胞的保护作用

本实验旨在观察增加一氧化氮(ＮＯ)底物Ｌ 精氨酸 (Ｌ Ａｒｇ)对体外循环(ＣＰＢ)中的血管内皮细胞及红细胞的保护效果 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1.实验动物及方法 :10～ 15ｋｇ健康成年杂种犬 12条 ,雌雄不拘 ,随机分为两组 :对照组 (Ｃ组 ) ,Ｌ Ａｒｇ组 (Ｌ组 ) ,每组 6条。Ｃ组 :麻醉后开胸 ,肝素化后建立体外循环 (肝素剂量为 3ｍｇ/ｋｇ体重 ) ,体外循环机为Ｓａｒｎｓ5 0 0 0型 ,氧和器为科威 97型鼓泡式氧和器。体外循环预充液为 70 6代血浆、复方氯化钠各 5 0 0ｍｌ。以 6 0～ 80ｍｌ·ｋｇ-1·ｍｉｎ-1流量转机 ,血温控…     

血管内皮生长因子基因促心肌血运重建的实验研究

采用猪慢性心肌缺血模型 ,用携带人类血管内皮生长因子 16 5 (ＶＥＧＦ16 5 )ｃＤＮＡ(ｈＶＥＧＦ16 5 )的高效表达质粒载体ｐｃＤＮＤ3 1直接注入缺血心肌 ,评估ＶＥＧＦ基因促进心肌血运重建的疗效。1.材料与方法 :实验小型猪 11只 ,体重 (2 9 3± 4 3)ｋｇ。 (1)模型制备及方法见文献 [1]。术后 6周行冠状动脉造影时 ,确定左冠状动脉回旋支 (ＬＣＸ)狭窄 >95 %为选用模型。模型随机分为治疗组 (Ａ组 ,ｎ =6 )和对照组 (Ｂ组 ,ｎ =5 )。 2组猪均在全麻和辅助呼吸下 ,经左前外侧第 4肋间 2次开胸 ,显露心脏。将ｐｃＤＮＡ3 1 ｈＶＥＧＦ 5 …     

转染人血红素加氧酶-1基因抑制移植静脉血管内膜增生

目的　应用含人血红素加氧酶 - 1基因 (human Heme Oxygenase- 1,h HO- 1)的重组腺病毒 (Adeno- XTMh HO- 1,Ad- h HO- 1)转染静脉移植血管 ,观察 h HO- 1基因预防静脉移植血管内膜增生的作用。　方法　将 2 1只日本大耳白兔分为 3组 ,对照组 ,Ad- null组和 Ad- h HO- 1组 ,每组各 7只。在兔颈外静脉移植于颈总动脉的血管移植术前分别应用肝素生理盐水、Ad- null和 Ad- h HO- 1病毒液常温浸泡静脉移植血管 30 min。术后 2 8d病理切片观察移植血管内膜增生的情况 ,计算机图象分析仪计算新生内膜厚度、中膜厚度及二者比值 ;采用免疫组织化学染色方法 (S- P法 )观察术后 14 d、2 8d移植血管壁 h HO- 1蛋白表达情况。　结果　Ad- h HO- 1组内膜厚度、内膜厚度与中膜厚度比均显著低于Ad- null组和对照组 (P<0 .0 1) ,中膜厚度差别无统计学意义 (P>0 .0 5 )。 Ad- h HO- 1组静脉血管壁细胞 h HO- 1免疫组化染色阳性。　结论　 Ad- h HO- 1转染兔静脉旁路移植血管能够抑制内膜增生。     

泌尿生殖系肿瘤生长与转移的重要介质：血管内皮生长因子及其受体

1989年Ｃｏｎｎｏｌｌｙ等发现了一种可促进血管生成的内皮细胞有丝分裂原,命名为血管内皮细胞生长因子(ＶＥＧＦ)。近年来又有两种相关的血管内皮生长因子ＶＥＧＦＢ和ＶＥＧＦＣ被鉴定出来[1,2],三种ＶＥＧＦ基因在成人器官和血管生成中都有广泛表达。ＶＥＧＦ不但可直接作用于内皮细胞(ＥＣ),诱导ＥＣ出现短暂的胞浆钙浓度升高、形态改变、细胞分裂及细胞运动,而且在肿瘤血管形成中具有重要作用。一、ＶＥＧＦ及其受体的结构和功能ＶＥＧＦ是一个亲肝素以二硫键连接的糖蛋白同源二聚体,相对分子质量34000～45000,两个亚基相对分子质量均…     

异丙酚对大鼠血压和血浆心肌内皮素、一氧化氮、前列环素及血栓素A2的影响

异丙酚可致血压下降、心率减慢等心血管抑制作用。本实验旨在观察其对大鼠血压和血浆心肌ＮＯ、ＥＴ、ＰＧＩ2 、ＴＸＡ2 的影响 ,探讨它们之间的关系。材料和方法1 实验对象　 2 4只雄性 12～ 14周Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 2 5 0～ 330 ｇ ,随机分为三组 :Ａ组 (对照组 ) ,Ｂ组 (低剂量异丙酚 ) ,Ｃ组 (高剂量异丙酚 )。实验前禁食12ｈ。2 实验方法　 2 %戊巴比妥钠5 0ｍｇ ｋｇ腹腔注射麻醉 ,股动脉、股静脉穿刺置管 ,动脉经换能器接监护仪 ,静脉接微注泵。Ａ组静注生理盐水 1 2ｍｌ ｋｇ15ｓ注完 ,微泵持续注入盐水 12ｍｌ·ｋｇ 1 ·ｈ …     

血管内皮生长因子在乳腺癌组织中表达的特点

血管内皮生长因子 (ＶａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)是主要的肿瘤血管形成调节因子。ＶＥＧＦｍＲＮＡ含 4种异构体 (ＶＥＧＦ12 1、ＶＥＧＦ165、ＶＥＧＦ189、ＶＥＧＦ2 0 6) ,蛋白质为 46Ｋｄａ ,ＶＥＧＦ诱导血管生成后肿瘤易发生转移 ,患者预后不良 ,较少注意ＶＥＧＦ与肿瘤病理特征的联系。本研究以乳腺癌为模型 ,探讨ＶＥＧＦ表达与肿瘤生物学行为的关系。资料和方法1.标本来源 :连续收集我院普外科 1996年 12月至 1997年 6月的Ⅰ～Ⅳ期乳腺导管癌手术标本 30例 ,切取癌组织和癌旁组织各 …     

云芝多糖对乳腺不典型增生及血管生成的影响

国产云芝多糖 (ＩＰＰＶ)是从真菌云芝培养物提取的一种蛋白结合多糖 ,成分结构与日本产的云芝多糖ＰＳＫ (又名克癌星 ,Ｋｒｅｓｔｉｎ)极为接近。我们采用 7,12 二甲基苯并蒽 (ＤＭＢＡ )诱导ＳＤ大鼠乳腺不典型增生动物模型 ,探讨ＩＰＰＶ对乳腺不典型增生血管生成的影响 ,现报道如下。一、材料与方法1.材料 :38～ 45ｄ未交配雌性ＳＤ大鼠 5 5只 ,体重 80～ 12 0ｇ。三苯氧胺(ＴＡＭ )为芬兰Ｆａｒｍｏｓ药厂产品 ;ＩＰＰＶ系重庆市大新药业股份有限公司产品。ＤＭＢＡ购于瑞士Ｆｌｕｋａ公司 ,Ｈ ｒａｓ、ＦＶＩＩＩ ＲＡ、ＶＥＧＦ多…     

VEGF、VEGFR与皮肤肿瘤的研究进展

血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ) [1] ,又称为血管渗透性因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｆａｃ ｔｏｒ) [2 ] ,和血管增殖因子 (ｖａｓｃｕｌｏｔｒｏｐｉｎ) [3] 。至 2 0世纪 80年代末 ,ＶＥＧＦ被确认为有提高血管通透性和内皮细胞的最有效有丝分裂原[1] ,此后又有多种生长因子被确认与血管生长有关。然而正如 2 0 0 0年ＮＡＴＵＲＥ杂志著文认为[4 ] :“迄今为止 ,只有ＶＥＧＦ被确认具有高度特异 ,及有效的促新生血管形成作用”。而目前关于ＶＥＧＦ的…     

血管内皮生长因子基因心肌血运重建治疗冠心病

自 90年代初确认血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)具有特异性促进内皮细胞增殖、诱发新生血管生长 ,继而形成侧支循环的作用后 ,大量实验研究证实外源性ＶＥＧＦ基因治疗可明显改善缺血心肌的灌注及功能。 1997年临床上开始试用ＶＥＧＦ治疗终末冠心病 ,并取得了初步满意的临床结果〔1〕。新近实验表明 ,ＶＥＧＦ联合激光心肌血运重建 (ＴＭＬＲ)对改善缺血心肌的灌注和功能效果更佳〔2〕。现介绍此方面的研究与临床应用进展。ＶＥＧＦ与血管新生一、血管新生 :血管新生有 2种形式〔3〕:1.血管生成 ,即微血管通过“发芽”的方式形成新生毛细血管…     

一氧化氮对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

自体静脉移植术后由于其内膜增生(ＩＨ) ,其远期通畅率仅为 30 %～ 5 0 %。因此 ,如何抑制ＩＨ成为提高疗效的关键。我们建立大鼠自体静脉移植模型 ,通过大鼠口服一氧化氮 (ＮＯ)前体Ｌ 精氨酸 (Ｌ Ａｒｇ)来观察其对ＩＨ的影响。一、材料与方法1.动物及分组 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 30只 ,雄性 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,随机分为 ,Ａ :实验组 (Ｌ Ａｒｇ)组 ;Ｂ :Ｌ Ａｒｇ ＮＧ 硝基 Ｌ 精氨酸甲脂 (Ｌ ＮＡＭＥ)组 ;Ｃ :对照组。各10只。2 .给药方法 :参照Ｄｅｎｎｉｓ等[1] 方法 ,Ａ、Ｂ组术前 3ｄ开始用Ｌ Ａｒｇ灌胃 (Ｇｉｂ ｃｏ公司 ,1.…     

血清血管内皮生长因子与肿瘤

肿瘤血管形成在实体肿瘤生长及转移过程中起重要作用。肿瘤血管形成是生长刺激因子 (如ＶＥＧＦ ,ｂＦＧＦ)与抑制因子 (ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ ,ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ)相互作用的结果。测定肿瘤组织血管密度、ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ表达、血清或尿液中ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ浓度 ,有望成为判定肿瘤病期进展、转移及预后新的敏感指标[1] 。实体肿瘤生长在直径 >1ｍｍ时必须有ＶＥＧＦ等参与下的血管形成并网络化。目前 ,文献报道肿瘤组织ＶＥＧＦ、血管计数是肿瘤病期进展及预后的标志。血清ＶＥＧＦ(Ｓ ＶＥＧＦ)来源于肿瘤细胞。有资料报道Ｓ …     

人骨肉瘤OS-732血管生成活性及血管内皮生长因子抗体对骨肉瘤血管生成的抑制作用

我们应用鸡胚绒毛尿囊膜 (ＣＡＭ )模型 ,观察人骨肉瘤ＯＳ 73 2细胞血管生成特性 ,并给予血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)抗体 ,研究其对骨肉瘤血管生成及瘤细胞生长状态的影响 ,一、材料与方法1.ＣＡＭ制备及瘤细胞接种 :人骨肉瘤细胞株ＯＳ 73 2 ,购自北京积水潭医院骨科实验室。选取孵育至 9ｄ的胚蛋参考付生法[1] 的方法制备ＣＡＭ ,瘤细胞接种每只 5× 10 7个 /ｍｌ,共接种 10只。另10只设为空白对照组。于接种第 2～ 9天在解剖显微镜下观察接种区 5ｍｍ范围内血管变化。2 .组织切片的制备及免疫组织化学检测 :ＣＡＭ常规处理 ,行苏木素 …     

银杏叶提取物促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

研究显示 ,银杏叶提取物 (ｅｘｔｒａｃｔｏｆｌｅａｖｅＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ,ＥＧｂ)具有良好的神经保护作用[1 4 ] 。我们进行了ＥＧｂ对神经再生影响的研究。1.材料与方法 :雄性ＳＤ大白鼠 48只 ,随机分成损伤实验组 (ｎ =2 4)和对照组 (ｎ =2 4) ,ＥＧｂ由美国ＰＨＡＲＭＡＮＥＸＩＮＣ公司提供。制作坐骨神经挤压伤模型 ,术后对照组给予生理盐水 2ｍｌ灌胃 ,实验组给予ＥＧｂ 2 0ｍｇ (溶于 2ｍｌ生理盐水中 )灌胃。分别于术后第 2、4、6周作以下观察 :坐骨神经功能指数(ＳＦＩ) ;电生理检测 :用ＥｓａｏｔｅＰｈａｓｉｓ肌电仪测…     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸及抗KDR抗体对人肝癌细胞系HHCC的生长抑制作用

本研究采用ＶＥＧＦ反义寡核苷酸 (ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＯＤＮ)抑制ＶＥＧＦ分泌及抗ＫＤＲ抗体封闭ＫＤＲ的方法 ,观察它们对体外培养的肝癌细胞系ＨＨＣＣ细胞生长情况的影响 ,以探讨ＶＥＧＦ及其受体在肝细胞癌中的作用。材料与方法1.细胞株 :人肝癌细胞株ＨＨＣＣ由第四军医大学病理学教研室 86 3课题组保存并提供 ,培养于含 10 0ｍｌ/Ｌ胎牛血清的ＲＰＭＩ 16 40培养液中。2 .寡核苷酸及抗体 :ＯＤＮ由上海生工合成 ,ＰＡＧＥ电泳纯化。反义ＯＤＮ为针对ＶＥＧＦ第 3外显子单链区第 37 5 5共 19个碱基设计而成 ,…