熊果酸对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运及对PPAR-γ的基因及蛋白表达的影响

目的:观察不同质量浓度熊果酸(UA)对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞促进胆固醇流出的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)转运蛋白的表达,探讨可能作用机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,用20 mg·L~(-1)的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育48 h诱导成泡沫细胞,采用油红O染色,光镜下鉴定泡沫细胞形态变化,液体闪烁计数仪检测胆固醇的流出率,并用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及酶联免疫吸附(ELISA)测定PPAR-γ的基因及蛋白表达。结果:巨噬细胞经ox-LDL诱48 h后转化为泡沫细胞,与空白组比较,10,15,20,25 mg·L~(-1)质量浓度UA干预组泡沫细胞的胆固醇流出率上升(P0.01);10,15,20,25 mg·L~(-1)质量浓度UA干预组泡沫细胞内PPAR-γ的基因表达上调(P0.01),在一定质量浓度范围内呈剂量依赖性;10,15,20,25 mg·L~(-1)质量浓度UA干预组泡沫细胞内PPAR-γ的蛋白表达增加(P0.01),差异有统计学意义。结论:经20 mg·L~(-1)ox-LDL的诱导后,巨噬细胞分化为泡沫细胞,细胞内脂质大量增加,UA促进巨噬细胞内胆固醇流出,可能与上调细胞内PPAR-γ的表达有关。     

基于"异类相制"的雷公藤复方对小鼠精母细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨雷公藤复方单体成分对小鼠精母细胞凋亡及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法:建立体外培养小鼠精母细胞体系,实验分为空白组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+梓醇3 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+三七总皂苷12 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+草酸铵1.5 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+青藤碱0.75 mg·L~(-1)组。流式细胞仪测定药物作用24 h后精母细胞凋亡率,Western blot测定精母细胞Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达情况。结果:梓醇、三七总皂苷可减轻雷公藤甲素对小鼠精母细胞凋亡的诱导作用,与雷公藤甲素比较有明显差异(P0.05),草酸铵和青藤碱组与雷公藤甲素组相比无明显差异;雷公藤甲素促使Bax,Caspase-3蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,与正常比较差异显著(P0.01),雷公藤甲素配伍梓醇、三七总皂苷后Bax,Caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,与雷公藤甲素比较较有明显差异(P0.05)。而配伍草酸铵及青藤碱则差异不明显。结论:雷公藤甲素可引起精母细胞凋亡,并通过Bax/Bcl-2,Caspase-3系统启动精母细胞凋亡。而雷公藤复方组成中其他药物组分可不同程度抑制雷公藤甲素引起的精母细胞凋亡,减轻其雄性生殖毒性。     

脂质过氧化炎症损伤模型中参莲提取物对巨噬细胞功能的药效与机制探讨

目的:研究参莲(SL)提取物在脂质过氧化炎症损伤模型中,对巨噬细胞功能的作用和促进炎症消散的药效和药理机制。方法:利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)体外诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7细胞和人单核细胞THP-1造成脂质过氧化损伤模型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测不同质量浓度的SL提取物(2. 5,5. 0,10. 0,20. 0 mg·L~(-1))对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;流式细胞术检测巨噬细胞泡沫化形成;transwell实验检测SL提取物对THP-1趋化功能的影响;以及用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS),炎症消散因子5脂氧合酶(ALOX5)以及对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的磷酸化p65(p-p65)和磷酸化IκK(p-IκK)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,ox-LDL提高M1型巨噬细胞标志物TNF-α,IL-1β,i NOS的表达(P 0. 01),抑制M2型标志物IL-10的表达,促进泡沫细胞形成(P 0. 01),诱导THP-1向ox-LDL趋化,提高MCP-1分泌量(P 0. 01),抑制ALOX5的表达。与模型组比较,SL提取物可以降低TNF-α,IL-1β,i NOS的表达(P 0. 01),提高IL-10的表达(P 0. 05);能显著降低巨噬细胞吞噬脂质后泡沫化的形成(P 0. 01);能降低THP-1细胞MCP-1的分泌(P 0. 01),减少趋化的细胞数目(P 0. 01);促进炎症消散因子ALOX5的升高(P 0. 05),同时抑制p65和IκK磷酸化表达(P 0. 01)。结论:在脂质过氧化炎症损伤模型中,SL提取物具有诱导巨噬细胞M2极化,抑制巨噬细胞对ox-LDL的趋化和泡沫化的形成,提高ALOX5表达,促进炎症消散,从而改善脂质过氧化炎症损伤状态,上述功能与抑制NF-κB信号通路中p65和IκK磷酸化水平有关。     

银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

目的:观察银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞凋亡的影响并初步探讨可能机制。方法:体外培养ARPE-19细胞株,分为正常组(5.5 mmol·L-1葡萄糖),高糖组(30 mmol·L-1葡萄糖),银杏叶提取物组(30mmol·L-1葡萄糖+12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原-2(Bcl-2),白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关因子(Fas),Fas受体(Fas L)mRNA和蛋白的表达。Western blot检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化及核JNK表达变化。结果:高糖组吸光度A明显低于正常组(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组A明显升高(P0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常组,12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组细胞凋亡率明显降低(P0.05);与正常组比较,高糖组Bax和Caspase-3,Fas和Fas L表达升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组能降低Bax和Caspase-3的表达,升高Bcl-2表达水平,降低Fas和Fas L表达(P0.05);与正常组比较,高糖组JNK磷酸化及核JNK蛋白水平升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物降低JNK磷酸化及核JNK表达(P0.05)。结论:银杏叶提取物能通过JNK通路,抑制细胞凋亡,改善糖尿病视网膜病变。     

参莲提取物对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响

目的:探讨参莲(SL)提取物在炎症调节中发挥的治疗性作用及其机制。方法:分别以小鼠巨噬细胞Raw264.7和小鼠腹腔巨噬细胞为实验对象,利用脂多糖(LPS)诱导炎症模型,SL提取物低、中、高剂量(5,10,20 mg·L~(-1))药物处理24 h,另设空白组,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)含量及mRNA表达;使用蛋白质免疫印迹法(Western blot)对小鼠Raw264.7核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的p65及磷酸化p65(p-p65)蛋白表达情况进行检测,采用免疫荧光法对小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞NF-κB p65分子进行亚细胞定位观察SL提取物是否能够影响其入核。结果:与空白组比较,模型组小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1β含量及mRNA表达均显著升高,小鼠Raw264.7 p-p65/p65蛋白表达显著升高(P0.01),免疫荧光观察显示模型组Raw264.7及腹腔巨噬细胞均可见明显入核行为;与模型组比较,SL提取物低、中、高剂量组明显降低小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1β含量及mRNA表达(P0.05,P0.01),显著降低小鼠Raw264.7及p-p65蛋白(P0.01),SL提取物中剂量组可明显减弱Raw264.7及腹腔巨噬细胞入核行为。结论:SL提取物能够抑制巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与影响巨噬细胞炎性因子的分泌及NF-κB信号通路有关。     

基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L~(-1)oxLDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+10μg·L~(-1)EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L~(-1)ox-LDL+2.5×10~(-4)mol·L~(-1)Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L~(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L~(-1)Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L~(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L~(-1)Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L~(-1)ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μmol·L~(-1)L-NAME或300μmol·L~(-1)L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ+100μmol·L~(-1)L-NAME或300μmol·L~(-1)L-NMMA)。噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量。化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平。结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P0.05,P0.01),促进NO及eNOS的产生(P0.05,P0.01)。Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P0.05,P0.01),上调eNOS mRNA表达水平(P0.05)。结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关。     

小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞损伤的保护作用研究

目的:基于细胞水平研究小檗碱(berberine,Ber)对阿霉素(doxorubicin,DOX)所致心肌损伤的保护作用并探讨其抗氧化机制。方法:大鼠心肌细胞H9c2给药组分为:空白组,2μmol·L~(-1)DOX组,0.1μmol·L~(-1)Ber组,1μmol·L~(-1)Ber组,10μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+0.1μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+1μmol·L~(-1)Ber组,2μmol·L~(-1)DOX+10μmol·L~(-1)Ber组。各组给药不同时间后测定细胞体积及蛋白含量,RT-PCR法测定细胞心钠素(ANP),脑钠素(BNP)表达水平。以半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性为指标评价心肌细胞凋亡水平。DCFH荧光探针法测定细胞ROS水平,同时测定细胞内丙二醛(MDA)生成量,评价心肌细胞氧化损伤水平。结果:与空白组比较,各给药组心肌细胞体积增大,细胞内蛋白含量增加,ANP,BNP的mRNA水平上调,细胞内Caspase-3活性增强,导致细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,均具有明显的统计学差异(P0.01)。结论:小檗碱通过抗氧化作用降低阿霉素诱导的心肌细胞损伤。小檗碱与阿霉素合用后,浓度依赖的抑制阿霉素诱导的心肌肥大,并有效降低细胞内ROS水平,清除脂质过氧化物,逆转阿霉素诱导的心肌细胞凋亡。     

巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用

目的:研究不同亚型巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以THP-1细胞为研究对象,实验分为5组,分别为空白组,佛波酯(PMA)组,M2组,M1组及通心络组。采用PMA(5μg·L~(-1))分别联合白细胞介素(IL)-4(100μg·L~(-1)),脂多糖(LPS,200μg·L~(-1))诱导THP-1细胞分别向M2和M1型巨噬细胞极化并给以通心络(300 mg·L~(-1))进行干预,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测其标志分子IL~(-1)0,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),IL-6的表达。取巨噬细胞培养上清作为条件培养基培养内皮细胞,采用流式细胞仪检测内皮细胞凋亡率、蛋白免疫印迹方法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果:与空白组比较,M2组细胞培养上清中IL~(-1)0水平显著升高(P0.01);M1组细胞培养上清中IL~(-1)0水平显著降低,IL-6及TNF-α水平显著升高(P0.01);与M1组比较,通心络组细胞培养上清中IL~(-1)0水平升高,IL-6及TNF-α水平下降(P0.01)。与M2组内皮细胞比较,M1型巨噬细胞细胞培养的内皮细胞凋亡率显著升高(P0.01),促凋亡蛋白Caspase-3,Bax蛋白的表达明显升高(P0.05,P0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达显著降低(P0.01);与M1组比较,通心络组内皮细胞的凋亡率显著降低(P0.01),促凋亡蛋白Caspase-3,Bax蛋白的表达明显降低(P0.05,P0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达显著升高(P0.01)。结论:通心络可以抑制巨噬细胞向M1型极化。M2型巨噬细胞培养上清对内皮细胞的凋亡无明显影响,M1型巨噬细胞培养上清可以促进内皮细胞凋亡;通心络预培养的M1型巨噬细胞培养上清培养的内皮细胞凋亡率显著下降。     

人参四逆汤及其有效成分对戊巴比妥钠所致心肌细胞损伤模型的保护作用

目的:探讨人参四逆汤及其有效成分对戊巴比妥钠所致心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法:H9C2细胞经传代培养后,分别给予人参皂苷Rb20. 01,0. 1,1μmol·L~(-1),Re 0. 01,0. 1,1μmol·L~(-1),异甘草素(isoliquiritigenin,ISL) 20,40,80μmol·L~(-1),甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA) 10,20,40μmol·L~(-1),人参四逆汤10,100,400 mg·L~(-1),作用4 h,经0. 1%的戊巴比妥钠作用30 min后,检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH),脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA),Na+-K+-三磷酸腺苷(ATP)酶,Ca~(2+)-ATP酶活性,同时采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测过氧化物酶体增殖活化受体共激活因子~(-1)α(peroxisome proliferative activated receptor,PGC~(-1)α),B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) mRNA的表达情况。结果:人参四逆汤及其有效成分对心衰细胞模型有保护作用,与正常组比较,模型组细胞存活率显著下降,LDH,MDA含量显著升高,Na+-K+-ATP酶活性升高,Ca~(2+)-ATP酶活性显著降低,PGC~(-1)αmRNA表达下调,Bax,Caspase-3 mRNA表达(P 0. 01),证明模型成立。与模型组比较,各给药组显著升高细胞存活率,降低LDH,MDA含量,抑制Na+-K+-ATP酶活性,提高Ca~(2+)-ATP酶活性,上调PGC~(-1)αmRNA表达,抑制Bax,Caspase-3 mRNA表达(P 0. 05,P 0. 01)。结论:人参四逆汤及其有效成分对心衰细胞模型有显著保护作用,且其作用机制与抗氧化,改善线粒体能量代谢,抑制线粒体凋亡途径有关。     

药用植物短蕊万寿竹的组织培养研究

目的:更好的开发利用短蕊万寿竹。方法:以短蕊万寿竹的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,采用正交设计研究外源激素的种类和配比对诱导丛生芽和生根的影响。结果:最适的启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1),诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1),丛生芽的增殖系数达到6.88,最佳的生根培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 2.0 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1),生根率达到96%以上。结论:建立短蕊万寿竹的组织培养繁殖体系,为人工种植提供大量种苗。     

HPLC测定血浆中那格列奈及其人体药动学和相对生物利用度研究

 目的建立HPLC测定血浆中那格列奈,并研究其药动学及相对生物利用度。方法18名受试者随机等分成2组,先后单剂量po受试制剂或参比制剂后,采用HPLC测定血药浓度,计算药动学参数并进行方差分析,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果单次服用60 mg受试制剂或参比制剂后的药动学参数AUC_0～10,AUC_0～∞,ρ_max,t_max及t_1/2分别为(6.84±3.51)和(7.24±3.51)mg·h·L^-1,(6.95±3.45)和(7.38±3.58)mg·h·L^-1,(4.35±2.45)和(4.20±2.13)mg·L^-1,(1.02±0.48)和(1.16±0.51)h,(2.20±0.78)和(2.04±0.65)h。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(94.5±13)%。2种制剂的药动学参数无明显差异。结论HPLC能快速、准确测定人血浆中的那格列奈,受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

罗布麻宁及其苷在植物界中的分布及药理活性研究进展

现代生物医学研究表明,罗布麻宁为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶抑制剂,其作为工具药广泛用于呼吸、神经、心血管等系统疾病的机理研究。为了开发富含罗布麻宁及其苷的天然药物资源,本文综述了罗布麻宁及其苷在植物界中的分布情况,并对其药理作用进行概述。现有研究资料表明,罗布麻宁及其苷广泛分布于植物界,迄今已在60余科上百种植物中发现,集中分布于鸢尾科、玄参科、夹竹桃科等植物类群中。以上综述可为新药资源开发提供线索,并为罗布麻宁治疗疾病的深入机理研究提供参考。     

白头翁总皂苷及其主要成分抗肿瘤药效及其构效关系的研究

目的:研究探讨白头翁总皂苷及其4种主要成分的抗肿瘤活性,分析其构效关系。方法:采用体外对人肝癌细胞SMMC-7721和人结肠癌细胞HT-29进行体外抑瘤实验;采用人肝癌H22移植荷瘤小鼠进行体内抑瘤实验,观察分析白头翁总皂苷及其4种主要成分的抗癌药效。结果:体外抑瘤实验中,各主要成分均显示出明显的抑瘤活性,其中以白头翁皂苷B7抑瘤活性最强,其IC50为2.64μg·mL~(-1)(SMMC-7721细胞)和2.57μg·mL~(-1)(HT-29细胞),其他依次为白头翁皂苷B3、B9和B11。白头翁总皂苷也表现出了一定的抑瘤活性。体内抑瘤实验结果与体外实验结果基本一致,只是白头翁总皂苷在整体动物实验药效更强,提示白头翁总皂苷在体内复杂环境中的抑瘤作用更明显,体现了多成分多靶点作用的特点。4个单体构效分析表明,白头翁苷元上的23位羟基化不能增强抑瘤活性,24位侧链直链式糖活性低于非直链连接的糖,直链连接中4糖数量(葡萄糖-葡萄糖-鼠李糖-阿拉伯糖)(白头翁皂苷B9)的活性强于2糖的数量(鼠李糖-阿拉伯糖)(白头翁皂苷B11)。结论:白头翁皂苷成分中23位不是活性位点(药效团),24位所连接的糖的数量及其连接方式对其抑瘤活性有一定的影响。白头翁总皂苷体内活性强于体外的实验,提示总皂苷中其他成分在体内复杂环境下具有抑瘤的协同效应。     

非诺贝特与代谢物的HPLC测定及在大鼠小肠淋巴转运中的应用

 目的 建立高效液相色谱法同时测定大鼠血浆和淋巴液中非诺贝特(fenofibrate,FEF及代谢物非诺贝特酸(fenofibric acid,FEFA的浓度,应用于大鼠在体内的FEF小肠淋巴转运研究。 方法 建立麻醉大鼠肠系膜淋巴插管和颈静脉插管模型,经十二指肠内给予FEF混悬液30 mg·kg-1后收集血液和淋巴液样品。血浆和淋巴液样品经含内标物萘普生的蛋白沉淀剂直接沉淀蛋白后,采用HPLC测定。色谱柱为Calesil ODS柱(4.6 mm×150 mm,5 μm,流动相为甲醇-0.4％磷酸水溶液(pH 3.2 (82∶18,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为286 nm。 结果 FEFA、FEF和IS的保留时间为4.25、9.15和3.3 min;血浆中FEFA线性范围为0.2～50 μg·mL-1,淋巴液中FEFA、FEF线性范围均为0.1～25 μg·mL-1(r>0.999;低、中、高3个质控浓度在血浆和淋巴液中的日内和日间精密度RSD均小于9％,准确度均在95％～110％,萃取回收率均大于84％。将HPLC应用于大鼠在体内的FEF小肠吸收研究,血浆中仅能检测FEFA,于(5.67±2.08 h达峰浓度为(13.29±2.17 μg·mL-1,淋巴液中能同时检测到FEFA和FEF,分别于(4.75±0.96,(3.75±1.26 h达峰浓度为(4.35±0.97,(0.51±0.13 μg·mL-1。结论 本实验建立的 RP-HPLC-UV法专属性及重现性好,准确可靠,可用于大鼠血浆和淋巴液中FEF和FEFA的同时测定。FEF经小肠吸收后部分经肠系膜淋巴转运进入全身血液循环。     

基于ITS2序列及其二级结构对防己及其混伪品的鉴定

目的:利用核糖体DNA第2内部转录间隔区(ITS2)及其二级结构对传统中药材防己及其混伪品进行分子鉴定及聚类分析。方法:从Gen Bank上下载36条防己及其混伪品的ITS序列,利用Geneious R11.0.3进行序列比对,运用MEGA7.0计算种内、种间K2P遗传距离,构建邻接(NJ)系统进化树,同时利用ITS2数据库在线软件预测各样本的二级结构,并利用4Sale软件进行二级结构的比对,最终运用ProfDistS软件基于距离法构建了PNJ进化树。结果:各种间平均遗传距离均远大于种内平均遗传距离,NJ树显示防己及其混伪品聚为6个分支;混伪品与正品的二级结构均有一定的差异;PNJ进化树比NJ树显示出更多的分支和更高的分辨率。结论:虽然ITS2可以作为防己及其混伪品的DNA条形码,但是若包含ITS2二级结构所蕴含的系统发育信息,鉴定结果更加精准。     

五味降压方药效评价及血中暴露成分初探

目的: 研究五味降压方对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并对五味降压方起效的血中暴露成分进行研究。 方法: 五味降压方2.6 g ·kg^-1大鼠灌胃给药(相当于人临床日用量的12倍),每日1次,连续4周,每周测定大鼠血压1次;末次测定血压后,腹主动脉采血,分离血浆,反相高效液相色谱法建立五味降压方以及血中多成分指纹图谱,探明降压疗效反应呈现下的暴露成分。结果: 五味降压方从第2周起表现出明显的降血压作用(P<0.01);对血中多成分指纹图谱进行分析,发现五味降压方在降压疗效发生时,有紫外吸收成分进入血液。结论: 五味降压方药效反应明显,血中可见具有紫外吸收的暴露成分,其暴露成分的确切性质有待于通过化学研究工作进一步阐明。     

基于ITS2序列及二级结构对连钱草与其地方习用品及易混品的鉴别研究

目的 利用ITS2(Internal Transcribed Spacer 2)序列及其二级结构对传统中药连钱草与其地方习用品及易混品进行分类鉴定.方法 提取连钱草药材基原植物活血丹基因组DNA,扩增ITS序列并测序;同时从GenBank数据库中下载活血丹等共8个物种42条ITS序列,基于隐马尔可夫模型注释到ITS2序...     

肝素酶及其研究进展

 目的综述肝素酶及其研究进展。方法根据文献对近年来肝素酶的研究进展进行整理、分析、归纳。结果与结论肝素酶在医药工业领域有着重要的应用价值和前景。了解肝素酶的结构性质,优化肝素酶的发酵生产条件以及对重组肝素酶的研究对进一步拓宽肝素酶的生产和应用有着重要的意义。     

针灸效应复杂性的讨论

从针灸效应的作用因子和非线性层面,探讨了针灸效应的复杂性.研究认为,针灸作为一种对最复杂的生命体系-人体的治疗手段,其疗效是确切而肯定的.它通过物理性刺激,产生內源性生物效应,整体地调节人体的失衡状态,从而达到机体的自稳,其效应本身便具有复杂性.这种复杂性体现在其作用因子具有多要素性,且形成了复杂的层次,其效应具有非线性.换句话讲,针灸的治疗效应并不仅仅存在于组成经络、腧穴的结构中,还存在于各个作用因子在生命体的组合中.有鉴于此,结合现代复杂系统科学,建立着眼于临床的数据模型和软件平台,通过对病症和针灸治疗的模拟,找出针灸作用规律和优化方案是十分必要的.     

针灸效应复杂性的讨论

从针灸效应的作用因子和非线性层面，探讨了针灸效应的复杂性。研究认为，针灸作为一种对最复杂的生命体系一人体的治疗手段，其疗效是确切而肯定的。它通过物理性刺激，产生内源性生物效应，整体地调节人体的失衡状态，从而达到机体的自稳，其效应本身便具有复杂性。这种复杂性体现在其作用因子具有多要素性，且形成了复杂的层次，其效应具有非线性。换句话讲，针灸的治疗效应并不仅仅存在于组成经络、腧穴的结构中，还存在于各个作用因子在生命体的组合中。有鉴于此，结合现代复杂系统科学，建立着眼于临床的数据模型和软件平台，通过对病症和针灸治疗的模拟，找出针灸作用规律和优化方案是十分必要的。