UPLC-Q-TOF-MS法分析平卧菊三七抗补体活性及活性部位

目的运用UPLC-Q-TOF-MS技术分析平卧菊三七的抗补体活性及其活性部位。方法采用经典的体外抗补体活性测定方法对平卧菊三七70%醇提物的乙酸乙酯萃取部位和水部位进行抗补体活性测定。平卧菊三七甲醇提取物的分析采用Welch Ultimate UHPLC XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据。结果平卧菊三七乙酸乙酯萃取部位具有较强的抗补体活性,其CH_(50)为(0.003 5±0.000 3)mg/mL。鉴定了22个化合物,其中包括有机酸类10个、黄酮类7个、其他类5个。结论该方法简单,快速,可为进一步确定平卧菊三七抗补体活性的作用机制及作用靶点提供参考。     

HPLC-MS/MS法同时测定平卧菊三七水提物中9种主要有效成分

目的建立一种适合同时测定平卧菊三七Gynura procumbens水提物中9种主要有效成分(芹菜素、槲皮素、芦丁、杨梅素、绿原酸、原儿茶酸、对香豆酸、咖啡酸、山柰酚)的HPLC-MS/MS方法。方法 40 mg平卧菊三七水提物经甲醇(每次4 m L)超声提取2次,合并提取液并定容到10 m L。色谱分离采用Shim-pack ODS C18(150 mm×2.0 mm,4.6μm)分离柱,甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.2 m L/min。质谱检测采用负离子多反应监测模式,并以和厚朴酚为内标。结果所测9种主要有效成分在测定质量浓度范围内线性关系良好,r均大于0.999 5;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为91.0%~101.3%,RSD≤3.31%。结论建立的HPLC-MS/MS方法用于同时测定平卧菊三七水提物中9种主要有效成分,灵敏度高、专属性好。     

平卧菊三七提取物对2型糖尿病大鼠肝肾功能的影响

目的:观察平卧菊三七乙醇提取物(GPE)对2型糖尿病大鼠肝肾功能的影响。方法:将50只正常SD大鼠随机分为空白对照组,2型糖尿病模型组、二甲双胍组、格列苯脲组和GPE组,每组10只。空白对照组和2型糖尿病模型组灌胃蒸馏水,二甲双胍组灌胃500 mg/kg盐酸二甲双胍,格列苯脲组灌胃5 mg/kg格列苯脲,GPE组灌胃150 mg/kg GPE,自由饮水。连续灌胃给药42天后,主动脉取血。检测大鼠血清尿素氮、胆碱酯酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等含量。结果:与2型糖尿病模型组比较,二甲双胍组和GPE组大鼠血清胆碱酯酶活性、胆碱酯酶、尿素氮和乳酸脱氢酶水平均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:GPE对2型糖尿病模型大鼠肝、肾功能有保护作用,其作用机制可能与降低血清中胆碱酯酶活性,抑制尿素氮水平有关。     

土三七总酚酸抗氧化活性的研究

目的：探讨土三七总酚酸抗氧化活性。方法：在测定土三七中总酚酸的含量基础上,选用还原力、DPPH自由基清除率和多不饱和脂肪酸（PUFA）过氧化体系对不同浓度提取液进行体外抗氧化活性评价,同时以VC为阳性对照。结果：土三七总酚酸含量越高,其抗氧化活性越强,其中还原性和DPPH清除能力低于VC,而对PUFA过氧化体系的抑制效果则比vc的活性更强。结论：土三七总酚酸抗氧化活性与浓度呈正相关性,表明其抗氧化活性与酚酸类物质有关。     

藤三七多糖的体外抗氧化活性研究

目的研究藤三七多糖的体外抗氧化活性。方法采用H₂O₂/Fe²⁺反应体系、邻苯三酚自氧化反应体系测定藤三七多糖的体外抗氧化活性。结果在本实验设计条件下,藤三七多糖具有抗·OH和O^-₂·的双重功效,且具有一定的量效关系,对·OH和O^-₂·的最大清除率分别达到43.83%、35.42%。结论藤三七多糖有较强的体外抗氧化活性,可为藤三七多糖的开发利用提供参考。     

平卧菊三七的化学成分研究(Ⅰ)

目的研究平卧菊三七Gynura procumbens全草的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过NMR、MS等鉴定化合物结构。结果从平卧菊三七全草的70%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为槲皮素(1)、芹菜素(2)、木犀草素(3)、山柰酚(4)、黄芪苷(5)、山柰酚-5-O-(6″-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、7-甲醚黄芩素(7)、4-甲氧基肉桂酸(8)、苄基葡萄糖苷(9)、2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(11)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸乙酯(12)、3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(13)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(14)、原儿茶酸(15)和丁香酚苷(16)。结论化合物7、8、12、14和16为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物3、6、9~11和13为首次从该植物中分离得到。     

淡豆豉和黑豆乙醇提取物的促成骨细胞增殖活性及HPLC-MS分析

目的比较分析淡豆豉和黑豆乙醇提取物促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性及二者的化学成分。方法采用MTT法对淡豆豉和黑豆的乙醇提取物进行促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性的研究,并通过高效液相色谱-质谱联用技术对二者化学成分进行比较分析。结果淡豆豉和黑豆的乙醇提取物对大鼠成骨细胞的促增殖率分别可达到36.5%和28.2%,其主要有效成分为异黄酮类化合物,经液质联用分析共鉴定出15个黄酮类成分。结论黑豆发酵成淡豆豉后的成分变化主要体现在由苷类成分脱糖转化为苷元,含有量显著增加的大豆苷元和染料木素两种苷元主要由丙二酰大豆苷(大豆苷元-G-M)和丙二酰染料木苷(染料木素-G-M)脱丙二酰基和葡萄糖转化而来。     

植物抗氧化活性成分研究概况

自由基是带有未成对电子的分子或离子,具有很高的反应活性.它可对机体产生毒害,破坏生物大分子,影响细胞活性,主要损害细胞膜包括血管内皮细胞膜及亚显微结构,并引起一系列有害的生化反应.为了减轻自由基的危害、提高人群的生活质量,低毒的阻断自由基反应的抗氧化剂的研究工作就显得格外重要.本文总结了植物抗氧化的天然活性物质,重点介绍了其化学成分和具体功效.天然活性物质主要有:黄酮类、鞣质类、醌类、萜类、糖醇类等.其功效主要是调节和提高体内抗氧化酶活性,清除过氧化氢和羟自由基等.     

平卧菊三七化学成分研究(Ⅱ)

目的研究平卧菊三七Gynura procumbens(Lour.)Merr.全草的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、反相ODS等技术进行分离纯化;通过理化性质、核磁、质谱等方法鉴定化合物结构。结果从平卧菊三七乙醇提取物中分离得到了27个化合物,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、熊果酸(2)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、5-hydroxymaltol(4)、对羟基苯甲酸(5)、4-氨基肉桂酸(6)、(E)-2-hexenylβ-D-glucoside(7)、1-(3-indolyl)-2,3-dihydroxy-propan-1-one(8)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、3,4,5-三咖啡酰基奎宁酸甲酯(11)、芦丁(12)、橙皮苷(13)、3,4-dihydroxyphenylacetic acid methyl ester(14)、刺梨酸(15)、委陵菜酸(16)、2-methoxy-4-(2-propenyl)-phenyl-O-β-D-glucopyranoside(17)、negletein(18)、没食子酸-3-甲基醚(19)、caesalpiniaphenol D(20)、2,5-二羟基苯甲酸(21)、原儿茶醛(22)、isohematinic acid(23)、icariside B1(24)、dendranthemoside B(25)、4-甲氧基肉桂酸(26)、黄芩苷(27)。结论化合物4、6~9、11、13~27为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物1、2、10和12为首次从平卧菊三七中分离得到。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中刺五加、贯叶连翘提取物主要活性成分浓度及其药动学研究

目的 建立HPLC-MS/MS测定刺五加提取物、贯叶连翘提取物主要活性成分在大鼠血浆中药物浓度的方法,应用于刺五加提取物、贯叶连翘提取物及其联用时主要活性成分在大鼠体内的药动学研究,并使用DAS3.2.8软件对主要活性成分的药动学参数进行非房室模型拟合.方法 以Welch Ultimate XB-C18(2.1 mm×...     

决明子抗氧化作用的研究

目的研究决明子提取物的抗氧化作用。方法以光照核黄素体系产生超氧阳离子(O2-),测定决明子提取物对O2-的清除能力;以3种自由基生成体系诱导的红细胞膜脂质过氧化为模型,测定决明子提取物对脂质过氧化的抑制作用。结果决明子提取物显示了强的清除O2-能力,对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、过氧化氢(H2O2)及紫外线照射3种方法引起的细胞膜脂质过氧化均有抑制作用,其作用呈剂量依赖性。结论决明子提取物有较好的抗氧化作用。     

五味子水提工艺优化及液质联用测定方法研究

目的:以Plackett-Burman-Central Composite Design(PB-CCD)设计为基础,通过分析五味子的LC-MS/MS液质联用仪测出的谱图优选五味子的水提工艺。方法:以五味子醇甲及五味子酯甲的含量为指标,以浸泡时间、液固比、溶剂PH值、提取时间、提取次数、提取温度及浓缩温度为考察因素,采用PB-CCD优选水提工艺条件并进行含量测定分析。结果:选定最佳提取工艺为浸泡时间2 h,提取时间1 h,提取温度70℃,提取次数5次,溶剂pH值5.0,浓缩温度60℃。结论:PB-CCD优选五味子提取工艺方法简单,可为五味子的提取生产工艺提供参考。     

生脉注射液中木脂素类化学成分的分析研究

 目的 探讨生脉注射液中木脂素类化学成分分析方法。 方法 以五味子中间体化学成分研究为基础,采用液相色谱-质谱联用技术对8家生产企业的生脉注射液样品进行化学成分指认。 色谱条件：Agilent 6320 Ion Trap LC/MS液相色谱离子阱质谱联用仪,色谱柱Waters symmetry shield TM RP18（4.6 cm×25 cm,5 μm）,流动相：乙腈-10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液,检测波长203 nm;质谱参数：nebulizer：2 kPa;dry gas：12 mL·min^-1;dry temp 350 ℃;碰撞电压：1.0 V;正离子扫描模式。结果 通过比较五味子中间体及8家生产企业的生脉注射液样品发现,五味子中间体主要成分为木质素类,其中8家生产企业共有成分为五味子醇甲、戈米辛D,戈米辛J,当归酰戈米辛Q。 结论 建立了生脉注射液中木脂素类成分的检查方法,为研究注射剂物质基础及统一制法提供实验依据。     

抗痨清肺颗粒HPLC特征图谱及液质联用分析

目的建立抗痨清肺颗粒高效液相色谱(HPLC)特征图谱。方法采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-1%醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱(0~50 min,5%→15%乙腈;50~70 min,15%→25%乙腈;70~80 min,25%→40%乙腈;80~90 min,40%→65%乙腈;90~120 min,65%→95%乙腈),流速1.0 m L/min,检测波长290 nm,柱温30℃;采用液质联用(HPLC-MS/MS)技术进行色谱峰组分的鉴定。结果 10批样品相似度均0.995,确立了13个共有特征峰,对其中10个共有峰进行了来源归属,对其中8个共有峰进行了成分鉴别。结论建立的HPLC特征图谱可用于抗痨清肺颗粒的质量控制。     

宽叶缬草醚酯提取物体外抗氧化活性研究

目的 探讨缬草醚酯提取物体外抗氧化活性.方法 采用DPPH法、邻苯三酚自氧化法、水杨酸法,分别测定缬草醚酯提取物清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的能力.结果 样品中活性物质对于DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基等自由基半清除率浓度(IC50)分别为1.36,1.46和2.14 mg/ml.结论 在实验条件下,缬草醚酯提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子有较好的抑制作用.     

HPLC-MS/MS评价阿奇霉素颗粒剂的人体生物等效性

 目的建立一种改良的HPLC-MS/MS和简化的预处理方法,测定人血浆中阿奇霉素浓度,并对受试制剂与参比制剂进行生物等效性评价。方法24例男性健康志愿受试者进行双交叉试验,随机单剂量po阿奇霉素颗粒(500mg)受试或参比制剂后,血浆样品经简便的液液萃取后,采用多反应监测(MRM)进行HPLC-MS/MS分析。利用DAS软件计算主要药动学参数,并进行生物等效性评价。结果受试者单剂量po供试制剂和参比制剂后,主要药动学参数均无统计学差异。相对生物利用度(F)为(99.9±37.7)%。结论改进的测定方法灵敏准确,简便易行,适用于阿奇霉素血浆样品的测定。阿奇霉素颗粒试验和参比制剂生物等效。     

Effects of Extracts and Fractions of Gynura procumbens on Rat Atrial Contraction

There is currently a great deal of research interest in utilizing plant compounds against human diseases, including hypertension. The present study investigated the effects of different extracts and fractions from leaves of Gynura procumbens Merr. on rat atrial contraction in vitro. Isolated left and right atria, mounted in a 20-ml organ bath, were allowed to equilibrate for 15 min before the application of the extracts or fractions. The extracts (petroleum-ether extract (PE) and methanol extract (ME)) and the fractions (chloroform fraction (CHL), ethyl-acetate fraction (EA), n-butanol fraction (NB) and water fraction (WA) of the methanol extract) were tested at three concentrations (0.25, 0.5 and 1.0 mg/ml), with a β-adrenergic agonist (isoprenaline) as a control. All data on contraction responses were log-transformed and analyzed. When exposed to the different extracts, both atria tended to exhibit greater contractive responses with the NB whereas cardiac contractions had a tendency to be reduced with most other extracts. For a given extract, the contraction responses were particularly greater at 0.5 mg/ml for the right atrium and at 1 mg/ml for the left atrium. Further analysis focusing on the NB fraction revealed that positive inotropism was greater in left atria exposed to highly-concentrated F2 and F3 sub-fractions. Taken together, our results suggest that NB extracts and fractions from the G. procumbens-leaf methanol extract have positive inotropic activities and, hence, can be considered as an alternative/traditional medicine against increased blood pressure in humans or can be used in strategies aimed at finding antihypertensive biomolecules from an accessible source.     

谷精草提取物的抗氧化活性考察

目的:考察谷精草水提物和醇提物的抗氧化活性。方法:采用UV检测谷精草水提物和醇提物对超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的清除能力,通过普鲁士法测定提取物还原Fe3+的能力,并以丁基羟基茴香醚(BHA)为参比测定提取物对金属离子(Fe2+)的螯合能力。结果:谷精草水提物和醇提物对3种自由基均具有较强的清除作用,水提物的半数抑制浓度(IC50)分别为1.389,3.507,0.341 g·L-1,醇提物的IC50分别为0.792,5.525,0.192 g·L-1。提取物对Fe3+有还原能力,对金属离子(Fe2+)有较强的螯合能力,且随着提取液质量浓度的增加而增强,呈剂量效应关系。结论:谷精草水提物和醇提物均具有较强的抗氧化活性,在相对低质量浓度下醇提物的抗氧化作用比水提物强。     

HPLC-MS/MS研究阿奇霉素片人体药动学

 目的建立HPLC-MS/MS检测体内阿奇霉素血药浓度,并用于研究阿奇霉素片人体药动学。方法应用建立的HPLC-MS/MS方法测定人血清中阿奇霉素的浓度,并通过PKs软件进行房室模型拟合,计算主要药动学参数。结果阿奇霉素的线性范围为3.33～833μg·L^-1,方法回收率为100%～115%,日内、日间RSD值均小于6%,人po阿奇霉素500 mg后的药-时曲线均符合二房室开放模型,其主要药动学参数t_1/2α为(2.93±3.38)h,t_1/2β为(36.24±8.34)h,t_1/2ka为(0.61±0.34)h,ρ_max为(415.9±114.4)μg·L^-1,t_max为(1.812±0.650)h,AUC_0-t为(6 937±1 626)μg·h·L^-1,CL/F为(0.076±0.018 2)L·h^-1,Vd/F为(3.976±1.413)L,t_lag为(0.349±0.173)h,k₁₀为(0.110±0.039)h^-1,k₂₁为(0.067±0.025)h^-1,k₁₂为(0.223±0.109)h^-1。结论该法简便、灵敏、特异,适用于阿奇霉素片人体药动学研究。