抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及Akt信号机制

目的探讨抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及其可能的信号机制。方法分离、培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,以不同浓度抵抗素（15、50、100ng／ml）干预。荧光显微镜检测各组细胞中N0的生成,RT-PCR检测eNOS mRNA表达水平,Western blot检测Akt和eNOS磷酸化水平。结果15、50、100ng／ml抵抗素干预HUVECs 24h后,胰岛素刺激的内皮NO生成显著降低（三组分别为4．01±0．69、3．764±0．71、3．73±0．45,vs对照组P均〈0．05）,同时伴有内皮Akt和eNOS磷酸化水平的降低（us对照组P均〈0．05）,而eNOS mRNA表达无显著改变。结论抵抗素可通过P13K／Akt途径影响HuVECs eNOS磷酸化水平,进而调节内皮细胞NO生成,但该影响并非Akt依赖性。     

抵抗素对内皮细胞一氧化氮生成的影响及其AMPK信号机制

目的研究抵抗素对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）一氧化氮生成的影响及其信号机制。方法不同浓度人抵抗素（0-100ng／ml）干预HUVEC24h。DAF-2DA染色,激光共聚焦显微镜观察各组一氧化氮生成改变,Western-Blot检测各组eNOS、AMPK磷酸化水平改变。结果15、50、100ng／ml抵抗素干预HUVEC24h后,3组的一氧化氮生成分别为4．014-0．69、3．76±0．71、3．73±0．45,与对照组一氧化氮生成（4．89±0．58）相比显著降低（P〈0.05）;50ng／ml组添加AMPK特异激动剂A／CAR后,一氧化氮生成（5．08±0．70）显著升高（P〈0.01）。各抵抗素干预组的AMPK和eNOS磷酸化水平均明显降低;而添加AMPK特异激动剂AICAR后,伴随AMPK的激活,eNOS磷酸化水平也显著增高（P〈0．05）。结论抵抗素在内皮细胞可通过对AMPK的抑制进而导致eNOS失调,降低内皮一氧化氮的生成。     

有氧运动对冠心病患者内皮功能的影响

目的：观察有氧运动对冠心病患者内皮功能的影响。方法：入选60例平时缺乏运动的冠心病患者,随机均分为运动干预组和药物治疗组,运动干预组进行有氧运动,每周5次,每次30 min。药物治疗组给予美托洛尔、硝酸甘油等药物治疗。各组干预12周,干预前后采用酶联免疫吸附试验法测定血清细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和白介素-18（IL-18）水平,酶法测定一氧化氮（NO）水平。另选20例健康体检者作为正常对照组。结果：与健康人比较,冠心病患者血清ICAM-1[（246.43±39.32）ng/ml比（335.03±61.99）ng/ml]和IL-18[（230.60±29.15）pg/ml比（308.67±48.08）pg/ml]水平明显升高,NO[（80.34±13.22）μmol/L比（48.54±7.64）μmol/L]水平明显降低（P均〈0.01）。与治疗前比较,经12周运动干预后,ICAM-1[（333.47±57.29）ng/ml比（304.66±45.58）ng/ml]和IL-18[（310.82±47.37）pg/ml比（290.18±38.47）pg/ml]水平明显下降,NO[（49.88±7.90）μmol/L比（54.00±8.83）μmol/L]水平明显升高（P〈0.05）。运动干预与药物治疗效果相当（P〉0.05）。结论：长期规律有氧运动能够显著改善冠心病患者的内皮功能。     

阿司匹林抗高糖诱导内皮细胞衰老过程中对一氧化氮-一氧化氮合酶系统的影响

目的 探讨阿司匹林是否通过影响一氧化氮（NO）-一氧化氮合酶（NOS）系统发挥抗高糖诱导的内皮细胞衰老的作用. 方法 人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分别于正常糖浓度培养液（5.5 mmol/L）、高糖培养液（33 mmol/L）、含阿司匹林（0.01～1mmol/L）培养液及含L-NAME（300 μmol/L）培养液中培养48 h.采用β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色鉴定衰老细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧簇（ROS）水平.Griess法检测细胞总NO水平,荧光酶标仪检测细胞内NOS活性.Westernblot分析eNOS蛋白及eNOS人丝氨酸（Ser-1177）蛋白表达. 结果 高糖作用内皮细胞48 h后与正常糖浓度相比,SA-β-gal阳性细胞数明显增多.阿司匹林剂量依赖性地减少SA-β-gal阳性细胞数,降低ROS的水平,升高NO的水平、总NOS活性和eNOS Ser-1177蛋白表达（P＜0.05）.L-NAME（NOS的抑制剂）能完全抑制高糖环境下阿司匹林的上述作用（P＜0.05）.各组间eNOS总蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 高糖环境下阿司匹林通过提高细胞NOS活性而升高NO水平,降低氧化应激反应而发挥抗衰老作用.     

Hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤的抑制作用及其机制

目的：观察人工合成的生长激素释放肽hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤是否有抑制作用及可能的机制。方法：体外原代培养的大鼠胸主动脉内皮细胞,随机分为对照组、H2O2组及H2O2＋10-5 mmol/Lhexarelin组和H2O2＋10-7 mmol/L hexarelin组,通过光镜和电镜观察各组细胞的形态学变化。采用MTT比色法检测各组细胞活力的变化;用比色法检测内皮细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量;用硝酸还原酶法检测内皮细胞培养上清液中一氧化氮（NO）的含量。结果：光镜和电镜观察发现,H2O2可以诱导大鼠胸主动脉内皮细胞损伤及凋亡;而Hexarelin能减轻H2O2所诱导的内皮细胞损伤及凋亡。MTT比色法检测发现,H2O2能使内皮细胞的活力由（0.39±0.03）下降为（0.23±0.04）（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7 mmol/L hexarelin能减轻H2O2对内皮细胞活力的影响,内皮细胞的活力分别由（0.23±0.04）变为（0.30±0.02）和（0.29±0.02）（P〈0.01）。H2O2能诱导内皮细胞产生LDH,由（31.11±4.97）U/L上升为（157.48±7.33）U/L（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7mmol/L hexarelin能减少LDH的生成,由[（157.48±7.33）U/L下降为（55.12±6.11）U/L和（94.48±4.07）U/L（P〈0.01）。另外,H2O2能引起NO生成减少,由（29.38±6.14）μmol/L降为（17.24±7.51）μmol/L（P〈0.01）,而hexarelin能逆转H2O2引起的内皮细胞NO生成的减少,由（17.24±7.51）μmol/L变为（35.95±4.89）μmol/L和（19.73±2.50）μmol/L（P〈0.01）。结论：Hexarelin能够抑制H2O2所诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞的损伤及其凋亡,其机制可能与hexarelin抑制氧化应激反应及促进NO的产生有关。     

抗氧化剂PZ51对SHRsp血管内皮细胞作用

目的　研究抗氧化剂PZ5 1对SHRsp高血压发展的慢性过程中内皮细胞的作用及可能的机制。方法　 2 2只 8周龄SHRsp大鼠随机分为PZ5 1组和对照组 ,灌胃治疗 6周。用分光光度计测血浆NO、MDA浓度 ;免疫组化检测颈动脉eNOS蛋白表达 ;电镜扫描颈动脉内皮细胞。结果　PZ5 1组较对照组血浆MDA浓度显著降低 (7.88± 1 0 6vs 10 88± 1.73) μmol/L ,P <0 0 0 1、NO浓度显著升高 (4 0 0 2± 9.74vs 2 2 .2 2± 10 0 5 ) μmol/L ,P <0 0 0 1;颈动脉内皮eNOS蛋白表达显著增加 (8.2 5± 2 .36vs 4 .4 6± 3.14 ,P =0 0 2 6 ) ;电镜检查示PZ5 1组血管内皮细胞病变较对照组轻。结论PZ5 1对SHRsp血管内皮有保护作用 ,可能与其升高内皮细胞eNOS表达、增加血浆NO水平、抑制脂质过氧化有关。     

非诺贝特促进人内皮细胞内皮一氧化氮合酶复偶联的作用研究

目的探讨非诺贝特能否对脂多糖（LPS）诱导的血管内皮一氧化氮合酶（eNOS）脱偶联发挥保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,用非诺贝特预处理HUVECs 2 h,再与LPS共孵育24 h,采用高效液相色谱法检测细胞四氢生物蝶呤（BH4）的表达水平,ELISA检测细胞eNOS表达水平和细胞上清一氧化氮（NO）浓度,利用Confocal方法检测细胞内活性氧（ROS）产生水平。结果与对照组比较,单纯LPS刺激组内皮细胞BH4表达水平降低,伴有eNOS表达下调和NO水平降低,而内皮细胞内ROS产生增加（P均〈0.05）。与单纯LPS刺激组比较,非诺贝特预处理组内皮细胞BH4表达水平升高,同时伴有eNOS表达上调和NO水平增加,而内皮细胞内ROS产生降低（P均〈0.05）。结论非诺贝特通过上调BH4水平,对LPS诱导的血管内皮细胞eNOS脱偶联有逆转作用,这可能是其发挥血管内皮保护作用的机制之一。     

脂联素及内皮型一氧化氮合成酶与颈动脉斑块的关系

目的：探讨脂联素（APN）及内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）水平与颈动脉斑块的关系。方法：300例接受颈动脉超声检查的住院患者,根据颈动脉粥样硬化斑块指数分为正常对照组（0级,70例）、斑块1级组（80例）、斑块2级组（80例）、斑块3级组（70例）,根据斑块性质又分为软斑组（88例）和硬斑组（142例）,观察各组APN水平及eNOS和内皮素-1（ET-1）的变化。结果：（1）与正常对照组比较,斑块2、3级组患者APN水平明显降低[（90.91±9.66）μg/ml比（52.87±11.12）μg/ml、（50.67±10.31）μg/ml],斑块1、2、3级组患者eNOS水平明显下降[（12.35±1.08）U/ml比（9.27±1.24）U/ml、（6.68±1.03）U/ml、（4.92±1.12）U/ml],ET-1水平明显升高[（100.25±4.46）ng/L比（152.46±5.12）ng/L、（164.87±4.58）ng/L、（206.47±5.09）ng/L],P〈0.05～〈0.01;Spearman线性相关分析表明APN水平与颈动脉软斑呈明显负相关（r=-0.83,P〈0.05）;（2）ROC曲线表明APN、eNOS指标对颈动脉有无斑块形成有预测价值（曲线下面积为0.674,0.681,P均〈0.01）。结论：颈动脉粥样硬化斑块患者血脂联素、eNOS水平显著下降,对颈动脉斑块形成有预测价值。     

高尿酸血症大鼠血尿酸与血管内皮功能相关性的研究

目的：探讨高尿酸大鼠血尿酸与血管内皮功能的关系。方法：雄性SD大鼠36只,随机均分为正常对照组、模型组和别嘌醇治疗组。使用高酵母膏饲料联合氧嗪酸钾腹腔注射6周诱导大鼠高尿酸模型。别嘌醇治疗组除给予造模剂外同时以别嘌醇灌胃6周。定期测量大鼠收缩压。6周后处死大鼠,检测各组血清尿酸（SUA）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、收缩压（SBP）等的变化,用免疫组化法检测大鼠主动脉内膜层内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达量。结果：与正常对照组相比,模型组大鼠SUA水平[（45.1±5.6）μmol/L∶（216.0±6.2）μmol/L]显著升高（P〈0.001）,ET-1[（85.4±8.7）μg/L∶（163.1±7.2）μg/L]、SBP[（115.7±4.1）mm-Hg∶（156.0±3.8）mmHg]显著升高,血NO[（24.1±2.0）μmol/L∶（17.2±3.4）μmol/L]及主动脉内膜层eNOS[（48.3±4.2）∶（38.3±4.5）]表达量显著降低（P均〈0.05）;与模型组比较,别嘌醇组SUA[（44.8±4.3）μmol/L]、ET-1[（92.8±5.0）μg/L]、SBP[（119.2±4.3）mmHg]水平显著降低,血NO[（22.1±2.2）μmol/L]和主动脉内膜eNOS的表达量（46.1±4.2）明显升高（P均〈0.05）,别嘌醇组与正常对照组比较上述指标无明显差异（P〉0.05）。SUA与SBP、ET-1呈正相关（r=0.98、0.98,P均〈0.001）,与NO呈负相关（-0.70,P〈0.001）。结论：高尿酸血症与大鼠血管内皮功能紊乱密切相关。血一氧化氮的降低和内皮素-1的升高可能是发生高血压的重要原因之一。别嘌醇具有保护血管内皮功能的作用。     

一氧化氮和血管紧张素Ⅱ在原发性高血压中的作用

目的：探讨一氧化氮（NO）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）与原发性高血压（EH）的关系。方法：分别选择EH合并左室肥厚（LVH）患者（EH＋LVH组）、EH无LVH患者（EH组）及正常人（正常对照组）各30例,检测NO、AngⅡ水平,并进行组间比较分析。结果：（1）EH＋LVH组NO水平明显低于EH组、正常对照组[（37.24±11.27）μmol/L比（51.79±20.04）μmol/L比（80.25±20.58）μmol/L],且EH组NO水平明显低于正常对照组（P均〈0.01）;EH＋LVH组AngⅡ水平明显高于EH组、正常对照组[（198.37±93.54）ng/L比（139.87±56.39）ng/L比（57.34±18.85）ng/L],且EH组AngⅡ水平明显高于正常对照组（P〈0.05～〈0.01）;（2）直线相关分析显示收缩压、舒张压与NO呈负相关（r=-0.448、P=0.000;r=-0.249,P=0.018）,与AngⅡ呈正相关（r=0.491,P=0.000;r=0.265,P=0.012）,NO与AngⅡ呈负相关（r=-0.555,P=0.000）。结论：一氧化氮、血管紧张素Ⅱ参与了原发性高血压发病的病理生理过程。     

CCN 3对骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的影响

目的：探讨肾母细胞瘤过度表达基因（CCN3）对骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）向内皮细胞分化的影响。方法：以含50ng/ml血管内皮生长因子培养基诱导 BM-MSCs向内皮细胞分化作为阳性对照组,以含100ng/ml重组CCN3蛋白并50ng/ml血管内皮生长因子培养基诱导BM-MSCs向内皮细胞分化作为CCN3组,并以单纯完全培养基培养BM-MSCs为阴性对照组,采用细胞免疫荧光化学法和半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检查诱导16 d后假性血友病因子（vWF）表达以评价内皮细胞分化,以半定量 RT-PCR法检测 BM-MSCs 诱导分化前后Notch1基因mRNA表达。结果：BM-MSCs 诱导分化16d 后,阳性对照组可见部分细胞 vWF 荧光染色阳性, CCN3组阳性染色细胞明显多于阳性对照组,且 vWF mRNA 表达明显强于阳性对照组[吸光度（OD）值比：（0.550±0.090）比（0.358±0.080）,P＜0.01],阴性对照组未见阳性染色细胞;此外,诱导分化前,三组Notch1基因mRNA均呈低表达,组间两两比较无明显差异（P 均＞0.05）,诱导分化16d后阳性对照组和 CCN3组 Notch1基因 mRNA表达明显强于阴性对照组[OD值比：（0.232±0.047）、（0.352±0.029）比（0.132±0.033）,P均＜0.01],但与阳性对照组相比,CCN3组 Notch1基因 mRNA表达明显更高（P＜0.01）。结论：肾母细胞瘤过度表达基因通过激活 Notch1信号通路可增强骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的能力。     

白介素-7与原发性高血压血管内皮生长因子的相关性研究

目的：探讨白介素-7（IL-7）与原发性高血压血管内皮功能改变之间的关系。方法：50例实验组分为高血压病1级组25例，高血压病合并冠心病组25例。另设正常对照组20例。使用酶联免疫吸附法进行各组血清IL-7与血管内皮生长因子（VEGF）浓度测定，同时测定血糖、血脂，比较各组间检测指标的差异。结果：（1）高血压组血清IL-7含量（105．30土15．77）pg／ml及VEGF含量（13．58±3．55）ng／ml均高于正常对照组IL-7含量（70．14±6．45）pg／ml及VEGF含量（2．58±0．66）ng／ml（P均〈0．01）；（2）高血压病合并冠心病组，血清IL-7含量（119．62±6．41）pg／ml与VEGF含量（16．18±2．57）ng／ml，均高于高血压病1级组的IL-7（90．91±4．89）pg／ml与VEGF（6．98±2．25）ng／ml，以及正常对照组（P均〈0．01）；（3）高血压病1级组、高血压合并冠心病组的VEGF水平与IL-7浓度呈正相关（r=0．481，P〈0．05；r=0．558，P〈0．01）结论：血清IL-7水平升高与VEGF水平升高呈正相关，可能参与了原发性高血压的发生、发展。     

EECP对于改善高血压病伴IGT患者血管内皮功能以及PWV的影响

目的:观察增强型体外反搏(EECP)对于改善高血压病并发糖耐量减低(IGT)患者血管内皮功能以及脉搏波传导速度(PWV)的影响。方法:将80例高血压病伴IGT患者分为EECP组(44例)和对照组(36例)。两组患者均进行常规降血压治疗,EECP组在常规治疗基础上进行EECP治疗。测定两组患者治疗前后血压、肱踝脉搏波传导速度(ba PWV)以及血浆中内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的含量,并进行对比分析。结果:两组患者治疗后收缩压和舒张压比治疗前均有显著下降(均P0.01),但是两组间血压下降幅度并无明显差异。EECP组和对照组患者治疗后ba PWV均有显著下降,ET也有显著下降,NO则有显著上升。但是EECP组ba PWV、ET和NO较对照组改善的更为显著(均P0.05)。结论:EECP能有效改善高血压病伴IGT患者血管内皮功能以及PWV。     

TLR4/NF-κB信号通路在ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞分泌MCP-1中的作用

目的:探讨Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路在氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)中的作用。方法:取SD大鼠胸主动脉中膜培养血管平滑肌细胞,以2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L的TLR4中和抗体(TLR4阻断剂)、5μmol/L、10μmol/L、、20μmol/LPDTC(NF-κB特异性阻断剂)分别进行干预,并分别设置空白对照组和ox-LDL组,观察其对血管平滑肌细胞中ox-LDL诱导的MCP-1表达的影响。结果:与空白对照组比较,ox-LDL组VSMCs MCP-1mRNA及蛋白的表达明显升高(P<0.05);与ox-LDL组比较,用TLR4中和抗体预孵育后Anti-TLR4三组MCP-1mRNA[(1.23±0.21)比(0.81±0.02)、(0.75±0.01)、(0.49±0.01)]及其蛋白的表达[(0.64±0.05)ng/ml比(0.41±0.12)ng/ml、(0.32±0.07)ng/ml、(0.21±0.02)ng/ml]明显降低(P均<0.01),且呈浓度依赖性;用PDTC预孵育后PDTC三组MCP-1mRNA[(1.37±0.19)比(1.02±0.08)、(0.87±0.01)、(0.56±0.02)]及其蛋白的表达[(0.65±0.07)ng/ml比(0.51±0.07)ng/ml、(0.30±0.08)ng/ml、(0.19±0.02)ng/ml]亦明显降低(P均<0.01),且呈浓度依赖性。结论:氧化性低密度脂蛋白是TLR4的内源性配体;氧化性低密度脂蛋白通过或部分通过TLR4/NF-κB信号通路介导血管平滑肌细胞单核细胞趋化因子-1的表达。     

红芪多糖对高糖条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的研究红芪多糖（HPS）对高糖条件下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成和释放一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的影响及作用机制。方法从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组（30mmol／L葡萄糖）和HPS干预组。MTT比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin—V／PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的浓度,酶联免疫吸附（ELISA）法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、ET-1和c-Jun氨基末端激酶l（JNKl）mRNA的表达水平。组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法。结果高糖组在6h[（82．4±3．5）％]、24h[（68．2±1．4）％]、48h[（63．0±2．9）％]的细胞增殖率显著低于对照组（100％,P〈0．05）;HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50mg／L[（85．34-4．6）％]、100mg／L[（89．6±1．1）％]、200mg／L[（88．8±3．6）％]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义（均P〈0．05）;高糖组NO[（24．84±1．34）μmol／L]、NOS[（0．54±0．06）U／m1]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[（0．133±0．015）U／m1]和ET_l[1（0．740±0．070）ng／m1]含量则在各时间点均高于对照组,HPS干预组升高不同时间点HUVEC内NO[（23．20±0．55）p．mol／L]、NOS[（0．46±0．10）U／m1]、以及降低iNOS[（0．08±0．020）U／m1]和ET-1[（0．710±0．030）μg/L]的变化,P〈0．05,使其趋向正常水平;HPS可提高高糖所致内皮细胞eNOSmRNA的水平[（0．33±0．02）比（0．23±0．04）],降低ET-1mRNA的水平（2．28±0．31比2．79±0．29）;高糖组细胞内JNK1mRNA水平表达（2．95±0．05）较正常对照组（1．00±0．00）显著增加（P〈0．05）,而HPS干预组（1．45±0．05）则较高糖组（2．95±0．05）明显减少（P〈0．05）。结论HPS对体外高糖诱导HUVEC损伤具有保护作用,这一作用可能与抑制JNK信号通路有关。     

运动对高血压大鼠血浆尾加压素Ⅱ及前列腺素I2的影响

目的:研究运动对自发性高血压大鼠(SHR)血浆尾加压素Ⅱ(UⅡ)的影响。方法:雄性SHR16只,随机分为两组,即安静对照组(8只)和运动组(8只),另正常雄性Wistar大鼠(8只)作为正常对照组。SHR运动组进行8周游泳运动训练。8周后,分别测定3组鼠血浆UⅡ、前列腺素Ⅱ(PGI2)含量。结果:SHR游泳组大鼠血浆UⅡ含量较正常对照组显著性增加[(1.17±0.17)ng/ml∶(1.09±9.77)ng/ml,P0.05],SHR游泳组血压较SHR对照组显著下降[(157.6±7.06)mmHg∶(185.9±6.64)mmHg,P0.01],血浆PGI2含量较SHR对照组患者增加[(183.25±43.46)pg/ml∶(135.43±22.13)pg/ml,P0.01]。结论:适度运动能提高SHR血浆VⅡ、PGI含量,从而使舒血管物质增多,血压下降。     

人激肽释放酶重组腺相关病毒对人脐静脉内皮细胞的影响

目的:构建携带人激肽释放酶(kallikrein,KK)基因的重组腺相关病毒载体,并导入体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察其对缓激肽(BK)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响。方法:(1)将KK基因定向克隆入腺相关病毒载体质粒pAAV-MCS中,构建成pAAV-KK;(2)分别将pAAV-KK及pAAV-LacZ与另外两种质粒pHelper、pAAV-RC通过脂质体共同转染AAV-293细胞,包装出rAAV-KK和rAAV-LacZ重组腺相关病毒。将rAAV-LacZ原液稀释成不同浓度梯度并感染HT-1080细胞,通过β-半乳糖苷酶染色测定病毒感染滴度,并观察LacZ传代HT-1080细胞的表达情况;(3)将rAAV-KK感染HUVEC,检测其对缓激肽、NO、ET-1水平和eNOS基因表达的影响。结果:(1)成功构建了带有KK目的基因的重组腺相关病毒载体和带有LacZ报告基因的重组腺相关病毒载体(对照载体);(2)rAAV-LacZ重组病毒以感染滴度6.2×107I U/ml感染HT-1080细胞后,LacZ基因能够在连续传代的HT-1080细胞内稳定持续表达;(3)与空白组、LacZ组(对照组)相比,KK感染组的HUVEC细胞培养液中BK[(2.864±1.36)pmol/ml∶(2.782±1.48)pmol/ml∶(6.576±2.08)pmol/ml]、NO[(16.42±1.02)μmol/L∶(16.46±1.25)μmol/L∶(21.28±1.46)μmol/L]水平明显增加,eNOS基因[(0.353±0.031)∶(0.364±0.049)∶(0.423±0.038)]表达明显增强,ET-1[(262.91±17.85)pg/ml∶(263.56±15.87)pg/ml∶(199.48±16.99)pg/ml]水平显著下降(P均0.01)。结论:(1)成功构建了携带有人激肽释放酶基因的重组腺相关病毒,rAAV-KK感染体外培养的人脐静脉内皮细胞;(2)可使细胞分泌BK、NO,以及表达eNOS基因增加,ET-1减少,改善内皮细胞功能。     

缬沙坦改善高血压合并糖耐量异常患者内皮功能和炎症因子水平

目的：观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦治疗对原发性高血压（EH）合并糖耐量异常（IGT）人群血浆一氧化氮（NO）、内皮素（ET）及血浆炎症因子影响。方法：42例EH合并IGT患者口服缬沙坦80mg,1次／d,选择40例正常人作为正常对照组。检测治疗前后血糖,餐后2h血糖（2hPG）,胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）,血清炎症因子和NO水平的变化。结果：与正常对照组比较,EH＋IGT组血压、2hPG、HOMA—IR、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,内皮素水平明显升高,NO水平明显降低（P〈0．01）;与治疗前比较,缬沙坦治疗8周末血压[（163．95±8．0）／（99．10±11．8）mmHg比（132．93±10．7）／（82．14±9．5）mmHg]、2hPG[（9．10±1．10）mmol／L比（7．85±1．15）mmol／L]和HOMA-IR[（3．90±2．11）比（2．73±1．71）]、血浆ET[（47．84±7．79）ng／L比（31．84±4．5）ng／L]、TNF-α[（32．30±5．49）ng／L比（26．83±4．83）ng／L]和IL-6[（112．70±24．79）ng／L比（77．224-11．53）ng／L]水平显著下降,血浆NO显著上升[（38．1±7．36）μmol／L比（43．38±7．52）μmol／L],P均〈0．01。结论：缬沙坦可降低原发性高血压合并糖耐量异常患者血压、血糖、胰岛素抵抗、血浆内皮素、炎症因子水平,升高一氧化氮水平,改善血管内皮功能,抑制炎症反应。     

心房颤动患者血清基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子浓度的变化

目的：研究非瓣膜性心房颤动（NVAf）患者血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）与基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）的水平．探讨NVAf发生的可能机制。方法：采用定量酶联免疫吸附试验（ELISA）测定30例NVAf患者（房颤组）和30例正常人（正常对照组）血清MMP-2、TIMP-2的水平。结果：房颤组血清MMP-2水平（390．29±128．67ng／ml）明显高于正常对照组（291.80±104．15ng／ml）水平（P〈0．01）。房颤组血清TIMP-2水平（62．84±26．77ng／ml）明显低于正常对照组（115．22±45．00ng／ml）,P〈0．01,血清MMP-2水平与左房直径呈正相关（r=0．396,P〈0．01）。多因素非条件Logistic回顾模型中左房直径、MMP-2是NVAf发生的危险因素,TIMP-2是保护免于发生房颤的因素。结论：MMP-2与TIMP-2可能参与房颤的发生发展。