基于生物信息学分析POSTN基因在胃癌中的表达及免疫意义

目的：探讨骨膜蛋白（POSTN）在胃癌免疫和预后中的价值。方法：利用生物信息学方法分析POSTN在胃癌中的表达及其与胃癌患者生存预后的关系。比较TCGA胃癌队列中癌组织和正常组织中的免疫细胞分布。从TISIDB数据库提取POSTN相关免疫调节剂，并通过GO和KEGG通路富集分析POSTN相关免疫事件。基于POSTN相关免疫调节剂，采用Cox回归开发一个多基因风险预测模型，由此产生风险评分。使用受试者工作特征曲线评估模型的预测准确性。构建带有校准曲线的预后诺模图预测个体五年生存率。结果：POSTN在胃癌组织中的表达明显高于非肿瘤组织。POSTN高表达组总生存期比POSTN低表达组缩短。POSTN高表达与多数免疫细胞高免疫浸润水平呈正相关。基于46个POSTN相关免疫调节剂进行的KEGG路径分析显示，NF-κB信号通路和细胞黏附分子参与其中。风险评分可作为胃癌患者预后的独立预测因子。结论：POSTN在胃癌组织中高表达，其表达与胃癌患者总体生存相关。POSTN与肿瘤免疫浸润相关，提示POSTN可能是胃癌的潜在免疫治疗靶点。     

基于数据挖掘探讨BOLA2在肺腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨BOLA2在肺腺癌（LUAD）与正常肺组织中的表达差异及临床意义。方法：Oncomine探讨LUAD与正常肺组织中BOLA2表达差异。UALCAN数据库分析BOLA2在LUAD中的表达及与患者临床特征的关系。通过Kaplan-Meier和多因素Cox回归分析BOLA2表达水平与LUAD患者预后的关系。LinkedOmics数据库探讨BOLA2相关基因的表达及其KEEG通路。TISIDB数据库分析BOLA2表达与免疫浸润水平的关系。结果：在LUAD中，BOLA2表达明显高于正常组织，并与患者临床特征（吸烟、淋巴结转移等）相关。LUAD中BOLA2蛋白及甲基化水平升高。过表达的BOLA2与LUAD患者短生存期显著相关，是LUAD预后不良的独立危险因素。BOLA2与PPP4C、MRPL12等基因呈显著正相关，与KIAA1109呈显著负相关。BOLA2与其相关基因可能参与核糖体、蛋白酶体等通路过程。BOLA2表达与多种免疫细胞浸润（NK细胞、记忆CD4 T细胞等）相关。结论：BOLA2在LUAD中高表达，其可能影响免疫微环境并为预后不良的指标，有望成为LUAD精准治疗的潜在生物标志物...     

生物信息学分析SLC22A11在乳腺浸润癌进展中的作用和潜在调节机制北大核心CSCD

目的:探究溶质载体家族22成员11(SLC22A11)在乳腺浸润癌(BRCA)进展中的作用和可能的调节机制。方法:通过Oncomine、UALCAN、TCGA、TIMER和Kaplan-Meier Plotter数据库探究SLC22A11在BRCA组织中的表达,及其在BRCA患者预后中的作用和进展中的潜在机制。在TIMER数据库中探究SLC22A11表达水平与BRCA免疫细胞浸润间的关系。结果:在BRCA组织中SLC22A11 mRNA表达水平显著降低,而SLC22A11甲基化水平显著升高,两者表达水平呈负相关。SLC22A11表达水平降低与BRCA患者种族、性别、年龄、TNBC亚型、组织学亚型、Menopause状态、淋巴结转移和TP53突变相关。SLC22A11甲基化水平升高与BRCA患者种族、年龄、淋巴结转移和TP53突变相关。SLC22A11表达水平降低与BRCA患者总生存期和无复发生存期相关,且与BRCA患者无复发生存期相关的ER阳性、ER阴性、HER2阴性、淋巴结阴性、Basal-like型、Her-2过表达型、luminal A型和luminal B型相关。基因富集分析显示MAPK信号通路、细胞因子与细胞因子相互作用、ABC转运蛋白、JAK STAT信号通路、VEGF信号通路、MTOR信号通路、Calcium信号通路等富集于SLC22A11高表达组。SLC22A11表达水平与BRCA纯度、B细胞、CD8+T细胞和CD4+T细胞水平相关,且与免疫细胞标志物CD79A、CD19、STAT4表达水平等显著相关。结论:SLC22A11在BRCA组织中表达降低,提高SLC22A11表达水平有望改善BRCA患者预后。此外,SLC22A11表达水平与BRCA免疫细胞浸润及其标志物分子水平相关,提示SLC22A11有望成为BRCA患者治疗的新靶点。     

FOXL2NB在结直肠癌中的表达和临床意义

目的 分析叉头框L2旁基因(FOXL2NB)在结直肠癌(CRC)中的表达及临床意义，探讨FOXL2NB对CRC细胞的作用。方法 RT-qPCR和蛋白免疫印迹分析CRC组织和细胞中FOXL2NB的表达；Transwell和CCK-8实验探讨FOXL2NB在SW620细胞增殖和迁移的作用；Kaplan-Meier法和多因素Cox回归分析评估FOXL2NB对CRC预后的影响；基因集富集分析比较高、低风险组间分子信号通路差异，CIBERSORT R包计算CRC组织中FOXL2NB表达与免疫细胞浸润的关系，limma R包计算与FOXL2NB表达显著相关的分子。结果 FOXL2NB在CRC组织和细胞中的表达水平显著升高(P<0.05);敲低FOXL2NB可抑制CRC细胞的迁移及增殖；高水平的FOXL2NB与CRC患者不良预后相关(P<0.05),可作为CRC预后的独立风险因素(HR=2.27,95%CI=1.78～2.9,P<0.001);FOXL2NB高表达的CRC中细胞黏附分子和肿瘤免疫相关通路被显著富集，CD8⁺ T细胞和活化树突状细胞显著增多，M0...     

乳腺癌分子亚型中CAIX的表达及临床意义

目的：探讨乳腺癌各分子亚型中碳酸酐酶IX(carbonic anhydrase IX,CAIX)的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学检测CAIX在4种不同乳腺癌分子亚型中的表达水平并分析其与临床病理参数的关系。结果：CAIX在管腔A型、管腔B型、HER-2过表达型和基底样型乳腺癌中的阳性表达率分别为6.65%(28/421)、12.50%(7/56)、60.61%(40/66)和32.31%(84/260)。ER阴性的HER-2过表达型及基底样型乳腺癌组织中,CAIX的阳性表达明显高于ER阳性的管腔A型和管腔B型(P<0.001),并且HER-2过表达型乳腺癌组织CAIX的阳性表达率明显高于基底样型相比,差异有统计学意义。CAIX与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移、临床分期及高增殖指数相关(P<0.05),而与患者年龄、是否绝经及肿瘤大小无关。结论：CAIX在不同乳腺癌分子亚型中的表达具有明显差异,可能与ER阴性乳腺癌关系更密切,并在乳腺癌的侵袭、转移中发挥重要作用,可能成为乳腺癌浸润、进展及预后评估的指标。     

SARS-CoV功能性受体血管紧张素转换酶2在灵长类动物肾脏上皮细胞的表达(英)

目的：研究血管紧张素转换酶2 (ACE2) 在灵长类动物肾脏上皮细胞上的表达。方法：体外培养非洲绿猴肾细胞Vero E6,利用RT-PCR及免疫细胞化学的方法检测细胞ACE2的表达;利用免疫组织化学方法检测2例恒河猴和2例正常人肾组织ACE2的表达分布。结果：RT-PCR显示,从Vero E6细胞提取的总RNA经逆转录可检测出ACE2的扩增条带;免疫细胞化学方法检测到Vero E6细胞胞浆内反应明显阳性;ACE2主要分布在恒河猴和人肾组织近端肾小管上皮细胞的管腔膜和胞浆。结论：ACE2在灵长类动物肾脏上皮细胞的核酸水平和蛋白水平均有表达,主要位于细胞的管腔膜和胞浆;肾脏上皮细胞表达的ACE2为SARS-CoV的入侵提供了条件,有可能是SARS患者并发肾功能损伤的原因之一。     

B7-H3——肿瘤免疫治疗的新热点

B7-H3是新近发现的共刺激分子B7家族的一个新成员,在T细胞介导的免疫反应中起重要的调节作用。B7-H3蛋白质在正常组织、细胞中不表达或极低表达,却高表达于多种肿瘤组织,并与肿瘤的进展、患者的生存及预后密切相关。有研究发现该分子可能是通过与髓样细胞触发受体家族成员TLT-2结合发挥作用,但确切的作用机制尚不完全清楚。目前认为B7-H3在肿瘤免疫中的作用存在争议,一方面它可以发挥共刺激作用,增加IFN-γ及TNF-α等细胞因子的分泌,增强CTL活性,提高机体抗肿瘤免疫反应。另一方面,它还能够抑制CD4+T淋巴细胞活化以及IFN-γ及IL-4等细胞因子的产生,发挥共抑制作用。进一步研究B7-H3的生物学作用将为肿瘤免疫中T细胞介导的免疫应答调控提供新的免疫治疗前景。本文就B7-H3与肿瘤关系及其在肿瘤免疫中的作用作一综述。     

淋巴细胞共刺激信号和凋亡信号异常与RA免疫效应亢进的研究

目的：探究T淋巴细胞表面多种细胞信号分子所介导的细胞活化或凋亡信号在RA患者免疫功能紊乱中的作用。方法：采用流式细胞术检测RA患者外周血T细胞亚群及其表面共刺激分子cD154（cD40L）、CD30和凋亡受体CD95（Fas）的表达。结果：RA患者外周血T细胞亚群偏移，CD4^＋T细胞增加，CD8^＋T细胞减少；共刺激分子CD154在CD4^＋和CD8^＋T细胞上的表达均上调，但CD30分子的表达均降低，并以CD4^＋T细胞降低更为明显。同时，凋亡受体CD95分子在T细胞亚群上的表达均明显增加。结论：RA患者T淋巴细胞表面多种信号分子表达异常，共同导致了RA患者免疫功能紊乱。     

结直肠癌中SAA2表达与肿瘤免疫微环境的关系北大核心CSCD

目的:探究血清淀粉样蛋白2(SAA2)在结直肠癌中的表达及与肿瘤免疫浸润微环境的关系。方法:生物信息学和Western blot分析SAA2在结直肠癌中的表达水平;Log-rank法分析SAA2表达对总生存期的影响;CIBERSORT法分析肿瘤纯度得分、免疫得分及肿瘤组织中基质得分与SAA2表达的相关性;TISIDB分析SAA2与CD274等免疫分子的相关性;聚类分析鉴定结直肠癌中SAA2相关的信号通路。结果:SAA2在结直肠癌肿瘤组织中基因和蛋白均高表达;SAA2高表达的结直肠癌患者总生存期显著低于SAA2低表达组;结直肠癌肿瘤组织中SAA2表达水平与肿瘤组织中肿瘤细胞纯度和肿瘤免疫得分呈正相关,而与基质得分无显著相关性;SAA2与CD274等免疫抑制性分子呈正相关,而与趋化因子、细胞因子受体相互作用、自然杀伤细胞介导的细胞毒作用、抗原呈递等信号通路呈负相关。结论:结直肠癌肿瘤细胞中SAA2呈高表达,其高表达提示结直肠癌患者的不良预后,且SAA2高表达与免疫抑制微环境存在紧密联系。     

膜型/可溶型MHC Ⅰ类链相关分子A及其受体NKG2D在骨肉瘤中的表达及其意义

目的探讨膜型／可溶型MHCI类链相关分子A（MICA）及其受体NKG2D在骨肉瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学（LSAB法）检测膜型MICA（mMICA）在43例骨肉瘤组织中的表达;用流式细胞仪检测上述病例中的16例患者外周血淋巴细胞NKG2D的表达;用ELISA法检测患者血清中可溶型MICA（sMICA）的水平。结果骨肉瘤细胞广泛表达mMICA（37／43）,外周血淋巴细胞NKG2D的表达普遍下降,两者的表达水平均与骨肉瘤的分化呈正相关（P〈0．05）,与临床分期呈负相关（P〈0．05）。检测16例骨肉瘤患者血清中sMICA含量,其中5例升高,且与骨肉瘤的远处转移及临床分期呈正相关（P〈0．05）。结论（1）骨肉瘤细胞表达mMICA,外周血淋巴细胞NKG2D的表达以及血清中sMICA的含量与骨肉瘤的分化及临床分期相关,因此可望作为骨肉瘤病理诊断和估计预后的生物学指标。（2）MICA-NKG2D介导的免疫监视障碍可能促进了骨肉瘤的进展。     

小鼠止血带休克后肾组织ACE/ACE2表达变化及意义

目的: 通过观察小鼠止血带休克(TS)后,不同时点血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素转换酶2(ACE2)在肾脏的表达变化与肾损伤程度的关系,探讨ACE/ACE2表达失衡在TS后肾损伤中的作用。方法: 复制小鼠TS模型,Western blotting测肢体缺血再灌注后12 h内肾组织ACE和ACE2蛋白的表达;利用化学比色方法测定血清和肾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;制作肾病理切片,观察肾组织形态变化,并利用免疫组织化学方法观察ACE和ACE2的表达部位。结果: Western blotting结果显示,各时点与对照组比较,TS后ACE表达升高,ACE2表达降低;与对照组比较血清和肾MDA水平增高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05);HE病理切片显示,TS后各时点肾组织有充血、炎细胞浸润等不同程度损伤;免疫组化结果显示,ACE在肾小管上皮细胞胞浆表达,TS后表达明显增强;ACE2主要在肾小管上皮细胞管腔膜表达,TS后表达明显降低。结论: TS后肾组织ACE表达升高,ACE2表达降低,ACE/ACE2表达失衡可能与肾损伤有关。     

胰岛素受体亚型改变及相关通路活化在糖尿病小鼠肠上皮细胞过度增殖中的作用

 目的:探讨胰岛素受体亚型改变及其相关下游通路活化情况在糖尿病小鼠肠上皮细胞异常增殖中的作用。方法:用腹腔注射链脲霉素的方法制作糖尿病小鼠模型,采用增殖细胞核抗原标记法比较糖尿病小鼠及对照组小鼠肠上皮细胞的增殖情况。利用RT-PCR法测定胰岛素受体亚型表达比例在2组中的差异。采用real-time PCR及Western blot法分别从mRNA和蛋白质水平检测2组之间胰岛素受体相关通路各分子MEK1/2、ERK1/2、PI3K以及Akt的表达情况。结果:糖尿病组小鼠的小肠上皮细胞增殖指数显著升高(P<0.05),且细胞中胰岛素受体亚型IR-A/IR-B的比值也明显升高(P<0.05)。糖尿病小鼠肠上皮细胞中MEK1、MEK2和ERK1/2的mRNA水平及磷酸化蛋白水平均高于对照组(P<0.05)。结论:糖尿病小鼠肠上皮细胞过度增殖可能与其中胰岛素受体亚型IR-A/IR-B的比值增高及其相关MEK/ERK通路的激活有关。     

Brachyury在非小细胞肺癌高表达并与EMT及患者的不良预后相关

目的研究非小细胞肺癌中Brachyury表达的变化及其与患者预后的关系。方法收集115例NSCLC患者的标本及30例癌旁正常肺组织,应用免疫组织化学的方法观察Brachyury在非小细胞肺癌中的变化及其与EMT标志物E-cadherin及N-cadherin的关系,应用Western Blot结合RT-PCR方法检测肺癌组织中Brachyury蛋白与mRNA水平的变化结果 Brachyury在非小细胞肺癌中表达明显增加Brachyury的表达水平与Ecadherin呈正相关,但与N-cadherin呈负相关,Brachyury在非小细胞肺癌中的高表达与患者的不良预后密切相关。结论 Brachyury的表达与非小细胞肺癌的发生发展紧密相关。     

共刺激分子与类风湿性关节炎患者T细胞的平衡失控

共刺激分子和凋亡受体CD95(Fas)分子的异常表达与T细胞的异常活化及其亚群平衡偏移密切相关，本研究拟通过对类风湿性关节炎(RA)患者T细胞亚群上表面CD30和CD95分子表达的检测，探讨细胞信号分子在参与RA免疫紊乱中的作用。     

PLOD3：一种潜在的直肠癌预后生物标志物北大核心CSCD

目的：探讨PLOD3在直肠癌中的生物学功能及预后价值。方法：GEPIA2、GENT2、TIMER、HPA、K-M Plot、cBioPortal、UALCAN、NetworkAnalys、GeneMANIA、Metascape、DAVID和SurvivalMeth用于分析PLOD3基因在直肠癌中的预后价值和生物学功能。结果：与正常直肠组织相比，直肠癌中PLOD3基因的mRNA和蛋白呈显著高表达状态。高表达PLOD3与直肠癌患者较短的总生存期(OS)显著相关。PLOD3的表达水平与肿瘤免疫浸润细胞CD8+T呈负相关。基因突变分析结果显示直肠癌患者中PLOD3基因突变率约为10%。K-M生存分析发现在肿瘤突变负荷(TMB)高危组中，PLOD3的mRNA高表达与直肠癌患者较短的OS显著相关。功能富集分析(KEGG、GO)显示直肠癌中PLOD3的生物学功能主要包括蛋白质羟基化、胶原蛋白生物合成和修饰酶、赖氨酸降解、细胞修饰氨基酸代谢过程、脂肪酸氧化。直肠癌组织中PLOD3甲基化水平较对照组显著降低，高危组患者甲基化水平显著降低，高危组与较短的OS显著相关。结论：PLOD3是直肠癌预后新的生物标志物，为直肠癌的诊断、寻找潜在治疗靶点、个体化治疗及预后评估提供参考。     

COL4A1是胃腺癌患者预后不良的独立预测因素

目的：Ⅳ型胶原蛋白α1(COL4A1)已被报道可促进不同癌型进展，本研究探讨其在胃腺癌（STAD）中的表达、生物学作用及预后意义。方法：运用生物信息学方法，使用GEPIA、The HumanProtein Atlas、TCGA、LinkedOmics等数据库预测COL4A1在STAD中的表达、生物学作用及预后意义。基于TCGA数据库构建预测STAD患者预后的Nomogram模型。通过体外实验研究COL4A1对AGS增殖、迁移及对PI3K-AKT信号通路的影响。结果：(1)COL4A1在STAD组织中高表达；在结直肠癌、淋巴瘤、头颈部癌、胃癌、肝癌等组织中显著上调。COL4A1高表达患者的预后低于低表达患者（P<0.05）；(2)COL4A表达水平与B细胞水平呈负相关（P<0.05）；与CD4 T细胞、CD8 T细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及树突状细胞水平呈正相关（P<0.05）。COL4A1表达水平与较多药物敏感相关，如生物靶向治疗肿瘤药物（乐伐替尼、埃罗替尼、依鲁替尼）或治疗STAD患者常见化疗药物紫杉醇及奥沙利铂；(3)多因素Cox风险比例回归模型分析结果显示，CO...     

哮喘小鼠模型肺组织nuocytes和Th9相关分子受体表达水平的变化及意义

目的分析nuocytes转录因子RORα及其分泌的细胞因子受体特异性结合链和Th9特征性细胞因子在哮喘小鼠肺组织表达的变化,探讨nuocytes对Th9细胞极化的影响,了解哮喘时肺组织对nuocytes和Th9细胞的应答状态。方法采用qRTPCR法检测RORα、IL-4Rα、IL-5Rα、IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-9和IL-9R等m RNA表达水平;对2类细胞特征性细胞因子受体表达水平的相关性及其与Ig E的表达水平的关系进行统计学分析。结果在哮喘小鼠模型中,RORα、IL-5Rα、IL-13Rα2和IL-9、IL-9R的m RNA表达水平均明显升高;相关性分析发现,IL-9及其受体的m RNA水平与RORα、IL-5Rα和IL-13Rα2 m RNA水平呈明显正相关,肺组织总Ig E的水平也随之增加。结论在哮喘小鼠肺组织中nuocytes和Th9相关分子及其受体优势表达,反映肺组织对2类细胞的积极应答状态,其在哮喘炎症中的作用由此可见一斑。     

高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织缺氧诱导因子1α、 脂质过氧化物、血管紧张素转化酶的影响及其作用机制*

目的：分析高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、脂质过氧化物（LPO）、血管 紧张素转化酶（ACE）表达的影响及其机制。方法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和高压氧组;模 型组和高压氧组行精索静脉曲张手术造模,假手术组仅手术而不造模;假手术组和模型组大鼠手术或造模成功后 正常饲养,高压氧组采用高压氧进行干预治疗;取睾丸计重,行TUNEL法检测睾丸生精细胞凋亡;用免疫印迹 和实时荧光定量PCR法检测睾丸组织中HIF-1α、LPO、ACE及其mRNA表达;用ELISA 检测试剂盒测定睾丸组 织LPO、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、ACE表达水平。结果：高压氧组大鼠左侧、右侧和两侧 睾丸质量均明显高于模型组;高压氧组大鼠睾丸细胞凋亡率均明显低于模型组,睾丸组织LPO表达水平明显低于 模型组,而SOD、CAT、ACE表达水平均明显高于模型组;高压氧组大鼠睾丸组织HIF-1α、LPO蛋白和mRNA 表达均明显低于模型组,ACE蛋白和mRNA水平明显高于模型组。结论：高压氧对雄性SD大鼠精索静脉曲张干 预后可有效调节大鼠睾丸组织中HIF-1α、LPO和ACE的表达,进而减少睾丸细胞凋亡。     

SARS-CoV功能性受体血管紧张素转换酶2在灵长类动物肾脏上皮细胞的表达(英文)

目的:研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在灵长类动物肾脏上皮细胞上的表达。方法:体外培养非洲绿猴肾细胞VeroE6,利用RT-PCR及免疫细胞化学的方法检测细胞ACE2的表达;利用免疫组织化学方法检测2例恒河猴和2例正常人肾组织ACE2的表达分布。结果:RT-PCR显示,从VeroE6细胞提取的总RNA经逆转录可检测出ACE2的扩增条带;免疫细胞化学方法检测到VeroE6细胞胞浆内反应明显阳性;ACE2主要分布在恒河猴和人肾组织近端肾小管上皮细胞的管腔膜和胞浆。结论:ACE2在灵长类动物肾脏上皮细胞的核酸水平和蛋白水平均有表达,主要位于细胞的管腔膜和胞浆;肾脏上皮细胞表达的ACE2为SARS-CoV的入侵提供了条件,有可能是SARS患者并发肾功能损伤的原因之一。     

MutS同源蛋白2可介导Vγ9δ2T细胞对人宫颈癌细胞的杀伤北大核心CSCD

目的：探讨Vγ9δ2 T细胞识别的肿瘤相关新蛋白质配体人MutS同源蛋白2（hMSH2）在宫颈癌免疫中的作用与意义。方法通过特异性抗体阻断宫颈癌细胞表面异位表达的hMSH2分子,分析Vγ9δ2 T细胞杀伤功能变化及IFN-γ、TNF-α分泌情况;使用ELISA检测宫颈癌患者血清hMSH2水平;使用肿瘤组织芯片（ TMA）分析hMSH2在宫颈癌组织中的表达情况。结果 anti-hMSH2抗体封闭后,Vγ9δ2 T细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用显著降低,分泌IFN-γ减少,TNF-α分泌无明显变化;宫颈癌患者血清hMSH2水平略高于正常人;hMSH2在宫颈癌组织中存在异常的核浆分布。结论 hMSH2可促进Vγ9δ2 T细胞杀伤宫颈癌细胞及分泌IFN-γ,在宫颈癌固有免疫中具有重要意义。