基于Nrf2通路探讨阿里红三萜酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的作用

目的:探讨阿里红总三萜酸(Fomes officinalis Ames triterpenic acid,FOTa)对脂多糖(lipopolysac?charide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的预防作用及核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-relat...     

CDDO-Im对缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤修复的影响

目的:探讨合成三萜类化合物衍生物CDDO-Im激活核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)信号通路对缺血性脑卒中后大鼠神经功能损伤修复的影响并分析其作用机制.方法:成年雄性SD大鼠行大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusi...     

五桑饮增强SIRT1和Nrf2表达并减轻糖尿病小鼠肾损伤和纤维化

目的：探讨五桑饮减轻糖尿病诱导的小鼠肾损伤及相关机制。方法：小鼠经含高脂高糖饲料喂养后,腹腔注射链脲佐菌素,从而建立糖尿病模型,并随机分为糖尿病模型组和五桑饮治疗组,另设正常对照组。采用生化分析、HE、PAS和Masson染色观察五桑饮对糖尿病肾病小鼠肾功能、肾组织形态学和纤维化等相关参数的作用。采用TUNEL染色分析小鼠肾组织凋亡,DHE染色分析肾组织细胞内活性氧水平。比色法分析肾组织氧化应激指标,包括脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde, MDA）,抗氧化酶超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase, CAT）。RT-qPCR检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。采用Western blot法分析肾组织沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, SIRT1)和核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2, Nrf2)蛋白表达。...     

转录因子核因子E2相关因子2对长期中波紫外线照射诱导皮肤肿瘤的影响

背景：紫外线照射是引起皮肤肿瘤的重要环境因素,与其诱导氧化应激反应有关。核因子E2相关因子2是调节细胞内抗氧化应激反应的重要转录因子,胞浆蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1为其特异性受体,目前核因子E2相关因子2-胞浆蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1抗氧化系统与皮肤紫外线损伤的关系受到密切关注。 目的：观察中波紫外线照射所致皮肤DNA氧化损伤及光致癌作用,研究转录因子核因子E2相关因子2对长期中波紫外线照射诱导小鼠皮肤肿瘤形成的影响。 方法：取8周龄雌性核因子E2相关因子2基因敲除(Nrf2^-/-) BALB/c小鼠和野生型(Nrf2^+/+)BALB/c小鼠,以100 mJ/cm²剂量的中波紫外线照射小鼠背部4 h。另取Nrf2^-/-小鼠和Nrf2^+/+小鼠以300 mJ/cm²剂量的中波紫外线对小鼠背部进行长期照射,每周3次,连续36周。 结果与结论：Nrf2^-/-小鼠表皮内8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷阳性细胞数量显著高于Nrf2^+/+小鼠(P < 0.05),Nrf2^-/-和Nrf2^+/+小鼠中波紫外线长期照射诱导皮肤肿瘤数目和发生率接近(P > 0.05),且皮肤肿瘤组织病理学改变相似,提示核因子E2相关因子2对急性中波紫外线照射所致的DNA损伤具有抗氧化防护作用,在长期中波紫外线照射致癌过程中,转录因子核因子E2相关因子2的活性可能受到多种因素的调节,其具体机制有待于进一步研究。     

Nrf2靶向siRNA对小鼠神经干细胞增殖和分化能力的影响

目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)对小鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化能力的影响。方法:分离新生小鼠海马组织，培养NSCs,采用电穿孔法将Nrf2 siRNA序列转染至NSCs,分别用real time RT-PCR和Western Blot检测敲减效率；运用BrdU掺入实验、Tuj1免疫荧光染色和CCK-8法检测Nrf2靶向siRNA对NSCs的增殖、分化能力和细胞活力的影响。通过脑立体定位技术，在成年小鼠海马部位注射Nrf2抑制剂Brusatol,应用Western Blot检测Nrf2的蛋白表达水平；通过Ki67、DCX免疫荧光染色检测下调Nrf2对海马神经发生的影响。利用活性氧簇(ROS)水平测定法和real time RT-PCR分别检测活性氧水平和氧化应激相关通路超氧化物歧化酶(SOD1和SOD2)的表达。结果:Nrf2的siRNA序列转染至NSCs, real time RT-PCR结果显示siRNA的敲减效率为(54.56±7.05)%(P<0.01),Western Blot结果显示siRNA的敲减效率为(39.50±7.90)%(P<0.01)...     

乌司他丁对心肺复苏后兔脑组织氧化应激损伤的影响

目的: 观察乌司他丁(ulinastatin,UTI)对心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation, CPR)后新西兰兔脑组织氧化应激损伤的影响。方法: (1)建立新西兰兔心脏停搏(cardiac arrest,CA)模型,自主循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)后24 h内连续采血监测血浆丙二醛(malondialdehyde, MDA)和还原型谷胱甘肽 (glutathione, GSH)的水平;(2) 48只新西兰兔建立CA模型,ROSC后随机分为模型组(model组)和UTI治疗组,观察UTI对大脑皮层和海马内MDA、GSH含量和神经元凋亡的影响,观察UTI对大脑皮层核因子E2 相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2, Nrf2)表达的影响。结果: ROSC后2 h 血浆MDA达高峰,GSH降低到较低水平;UTI显著抑制ROSC后大脑皮层和海马MDA水平的升高,提高GSH含量。UTI促进了ROSC后脑组织Nrf2的表达。Model组大脑皮层及海马CA1~CA3区的凋亡神经元数明显多于UTI组。结论: UTI可升高ROSC后兔脑组织GSH水平,降低MDA含量,增加Nrf2的表达,减少神经元的凋亡。     

FGF-21和Nrf2对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响

目的:研究成纤维细胞生长因子21(FGF-21)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化炎症应答及氧化应激的影响,并探讨其抗肺纤维化的作用机制。方法:建立BLM诱导的小鼠肺纤维化的模型,40只小鼠随机分为对照组、BLM组及FGF-21(1、2及5 mg/kg)+BLM组。Western blot检测I型胶原蛋白(collagen I)、纤连蛋白(fibronectin)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。DCFH-DA染色检测活性氧簇(ROS)的生成。ELISA用于测定肺组织炎症因子的表达。试剂盒检测各组小鼠肺组织中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和羟脯氨酸(HYP)含量。结果:FGF-21处理显著降低BLM诱导的肺组织炎症介质肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的表达水平,减少ROS及MDA的含量,并增加抗氧化酶系统SOD和GPx的活性(P 0. 05)。同时,FGF-21下调BLM诱导的collagen I和fibronectin,并减少TGF-β1及HYP的含量。Nrf2沉默能够逆转FGF-21的抗纤维化作用。结论:FGF-21通过激活Nrf2信号抑制炎症应答进程,减轻氧化损伤,减少细胞外基质沉积,从而缓解BLM诱导的肺纤维化。这可能为肺间质纤维化治疗提供新的靶点。     

骨髓间充质干细胞改善APP/PS1模型小鼠认知功能的机制

背景:研究表明,骨髓间充质干细胞治疗可以有效填补阿尔茨海默病患者丢失的神经元,但具体的作用机制有待进一步明确。目的:探讨骨髓间充质干细胞对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的治疗作用及其机制。方法:选取APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,随机分为模型组和骨髓间充质干细胞组,每组10只,选取10只同月龄同性别野生型C57BL/6小鼠作为正常对照组。经鼻腔给予骨髓间充质干细胞(1×10⁶/次)或生理盐水,每周重复给药1次,持续给药2个月。使用水迷宫检测小鼠的认知功能,Western blot检测小鼠脑组织中病理标志相关因子、炎症信号因子、氧化应激蛋白的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞能有效改善阿尔茨海默病小鼠的认知功能障碍,增加APP蛋白表达,减少磷酸化Tau蛋白表达,降低Toll样受体2、一氧化氮合酶、核转录因子κB的表达,增加核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1的表达。结果表明,骨髓间充质干细胞具有治疗阿尔茨海默病的潜在作用,其机制可能通过核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1信号通路发挥抗炎、抗氧化作用。     

小白菊内酯对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用

目的:探讨小白菊内酯在帕金森病小鼠模型中抑制核因子NF-κB(nuclear factor kappa B)信号通路对多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法:将C57BL/6N小鼠随机分为模型组、干预组和对照组。通过行为学、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、核因子NF-κB、环氧合酶-2(COX-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达变化情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失、蛋白水平下降,NF-κB、COX-2和caspase-3阳性细胞大量表达,蛋白水平显著升高(P0.01)。抑制剂组小鼠上述变化明显减轻(P0.01)。结论:在MPTP所致PD模型小鼠中,小白菊内酯通过抑制核因子NF-κB信号通路减少凋亡蛋白caspase-3表达,从而发挥神经保护作用。     

子宫颈病变中Nrf2和Keap1蛋白的表达及与预后的关系

目的 探讨氧化应激蛋白核因子E2相关因子(nuclear factor E2-related factor,Nrf2)和Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-related protein 1,Keap1)在子宫颈病变中的表达及与预后的关系.方法 收集20例子宫颈上皮内病变和67例子宫颈癌(Ia期...     

Nrf2对香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞中IKKs表达的影响

目的:探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)刺激后人支气管上皮细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)的表达与IκB激酶家族(I kappa B kinases,IKKs)的关系。方法:培养人支气管上皮细胞,分为正常对照(control)组、CSE组、15-脱氧-前列腺素J2(15-deoxy-prostaglandin J2,15dPGJ2)预处理后CSE刺激(15d-PGJ2+CSE)组和Nrf2 siRNA转染后CSE刺激(Nrf2 siRNA+CSE)组。首先通过CSE刺激人支气管上皮细胞,再通过15d-PGJ2预处理和Nrf2 siRNA转染的方法来增加和降低Nrf2的水平,并用RT-PCR法及Western blot法观察各组细胞Nrf2与IKKs的表达。结果:支气管上皮细胞在CSE的刺激下,Nrf2和IKKα/β的mRNA表达水平均明显升高,蛋白表达水平亦明显增高(P0.05)。在支气管上皮细胞中,15d-PGJ2预处理可增加Nrf2的表达,而Nrf2 siRNA可成功抑制Nrf2的表达。Nrf2表达增加伴有IKKα/β表达明显降低;而Nrf2表达被抑制后,IKKα/β表达明显增加(P0.05)。这些变化在转录水平和翻译水平是一致的。结论:Nrf2能抑制CSE诱导的人支气管上皮细胞中IKKs的表达。     

尼莫地平对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺神经元的保护作用

目的:研究尼莫地平在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)模型小鼠中对黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法:雄性健康C57BL/6N小鼠随机分为对照组,腹腔注射生理盐水;模型组,腹腔注射MPTP(25 mg/kg);尼莫地平治疗组,每次注射MPTP前3 h灌胃给予尼莫地平(15 mg/kg)。观察各组小鼠行为学变化,免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化。结果:与对照组小鼠比较,MPTP模型组小鼠出现典型的PD症状,中脑黑质TH阳性神经元大量丢失,PGE2和TNF-α阳性细胞显著增多,蛋白水平明显升高;经尼莫地平治疗后,上述症状得到明显改善。结论:在MPTP所致PD小鼠模型中,尼莫地平通过抑制炎症因子PGE2和TNF-α的表达从而对多巴胺能神经元具有一定的保护作用。     

有氧运动可改善糖尿病肾病模型小鼠肾脏的氧化应激损伤

文题释义：核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)：属于转录因子亮氨酸拉链转录激活因子(CNC)家族成员,为细胞防御多种应激损伤的关键因子。Nrf 2 是诱导Ⅱ相酶基因表达的必需调节因子。 有氧运动：是指人体在氧气充分供应的情况下进行的耐久性运动,其特点是强度低、时间长、不中断、有节奏,能够改善胰岛素抵抗、降低血糖,对糖尿病具有一定的疗效。 背景：研究证实,长期有规律的有氧运动能够有效降低血糖,改善胰岛素抵抗,是治疗糖尿病肾病的重要措施,但有关其具体机制不明。 目的：探讨有氧运动对糖尿病肾病小鼠肾脏氧化应激损伤的影响及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路的关系。 方法：雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病组及有氧运动治疗组,每组8只。除正常对照组外,其他2组小鼠均采用多次小剂量腹腔注射链脲佐菌素(40 mg/kg,连续注射5 d)建立糖尿病小鼠模型(4周后24 h尿蛋白含量>30 mg提示糖尿病肾病造模成功)。糖尿病小鼠造模成功8周后,有氧运动治疗组小鼠进行为期8周的跑台有氧运动,1 h/d,5 d/周。治疗8周后,测量尾动脉收缩压、24 h尿微量白蛋白排泄率、血糖、血脂及血肌酐、血尿素氮水平;取肾脏组织匀浆,测定丙二醛水平及总超氧化物歧化酶活性;观察肾脏组织肾小球系膜区细胞外基质积聚情况,并检测肾脏组织活性氧水平及核因子E2相关因子2核蛋白和血红素氧合酶1蛋白表达。实验方案经河南省中医药研究院动物实验伦理委员会批准(批准号为HPHT2015019)。 结果与结论：①与正常对照组比较,糖尿病肾病组小鼠24 h尿微量白蛋白排泄率、血糖、血肌酐、尿素氮、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白-胆固醇以及尾动脉收缩压等指标水平显著增加,肾脏肾小球系膜区细胞外基质显著积聚,活性氧水平和丙二醛水平显著增加;与糖尿病肾病组比较,有氧运动治疗组上述各项指标显著降低;②与糖尿病肾病组比较,有氧运动治疗组小鼠总超氧化物歧化酶活性增强,肾小球系膜区细胞外基质积聚显著减少,肾脏组织细胞核蛋白核因子E2相关因子2和总蛋白血红素氧合酶1的表达上调;③结果说明,有氧运动能够降低糖尿病肾病小鼠肾脏氧化应激损伤,可能与Nrf2/HO-1通路激活有关。 ORCID: 0000-0003-1328-3575(刘晓晨) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

泛素连接酶dTraf2依赖环指结构域正调控果蝇Imd固有免疫反应

为探究果蝇肿瘤坏死因子受体相关因子2(drosophila tumor necrosis factor receptor-associated factor 2,dTraf2)对免疫缺陷(immune deficiency,Imd)信号通路的调控作用,构建dTraf2和dTraf2ΔR1NG表达载体以及转基因果蝇.利用...     

Mnk2和eIF4E在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨MAPK相互作用激酶-2(MAPK-interacting kinase-2,Mnk2)和真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)在食管鳞状细胞癌中的表达及其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系。方法:收集临床食管鳞癌石蜡标本98例及正常食管黏膜上皮组织20例,应用免疫组化SP法检测癌组织及正常食管黏膜组织中Mnk2和eIF4E的表达,并分析其与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果:Mnk2在食管癌组织中的阳性率68.4%(67/98),eIF4E的阳性率为61.2%(60/98),Mnk2与eIF4E表达呈正相关(P0.05),且Mnk2蛋白过表达与食管鳞癌的浸润深度、病理分期密切相关(P0.05)。结论:Mnk2在食管癌组织中的过表达与浸润深度、TNM分期有关,同时与eIF4E在食管癌的表达相关,两者在食管癌的发展中有协同作用。     

间充质干细胞源性外泌体抑制LPS诱导的星形胶质细胞氧化应激

目的:探讨间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠海马星形胶质细胞氧化应激的作用机制。方法:通过超速离心法提取人脐带间充质干细胞培养上清中的MSC-Exo,通过扫描电镜和Western Blot分析鉴定;使用MSC-Exo处理LPS诱导的分离培养的新生小鼠星形胶质细胞,并分为对照组(control)、LPS处理组(LPS)和LPS+MSC-Exo联合处理组(LPS+MSC-Exo);用细胞免疫荧光染色检测各组细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)、和核因子κB家族蛋白RelA(p65)的变化,用Western Blot方法检测星形胶质细胞中血红素氧化酶(HO-1)及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)的变化。结果:与control组比较,LPS组中Nrf2和p65核转移增多,HO-1表达量明显升高(P<0.05),而Keap1表达量明显下降,NF-κB信号p-p65/p65的比值明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,MSC-Exo抑制了Nrf2和p65核转移,HO-1表达量明显降低,而Keap1表达量明显升高,NF-κB信号p-p65/...     

泛素化在TRAF2介导的NF-κB信号通路中的作用

NF-κB(核因子κ增强子结合蛋白)是核转录因子家族成员,具有调节免疫、炎症和细胞存活的功能.它可被TRAF2(tumor necrosis factor receptor associated factor 2,肿瘤坏死因子受体相关因子2)等相关因子活化.TRAF2包含了N-端的环指结构域和C-端的高度保守结构域.它通过与肿瘤坏死因子受体超家族成员相互作用,介导了下游信号通路.而TRAF2的泛素化在过程中是关键的,鞘磷脂作为TRAF2的泛素化连接酶辅助因子,在TRAF2介导的NF-κB信号通路中发挥重要作用.     

右美托咪定减轻酒精诱导的小鼠急性肝损伤

目的:探讨右美托咪定(DEX)对酒精诱导的小鼠急性肝损伤的作用及机制。方法:50只昆明小鼠随机分为5组(n=10):生理盐水对照(NS)组、酒精性肝损伤模型(E)组、DEX低剂量(10μg/kg)治疗(E+L)组、DEX中剂量(50μg/kg)治疗(E+M)组和DEX高剂量(100μg/kg)治疗(E+H)组。各组动物乙醇灌胃后6 h处死,采集血和肝组织标本。测定各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及甘油三酯(TG)浓度;测定各组肝组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA测定小鼠肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的浓度;Western blot检测肝组织细胞色素P4502E1(CYP2E1)和核因子κB(NF-κB)的表达;HE染色观察肝组织病理学改变并进行肝损伤评分。结果:与NS组比较,E组血清的AST、ALT水平及TG含量升高,与E组比较,E+M组和E+H组血清AST、ALT水平及TG含量降低;与NS组比较,E组肝组织MDA含量升高,GSH含量和SOD活性降低,与E组比较,E+M组和E+H组肝组织MDA含量降低,GSH含量及SOD活性升高;与NS组比较,E组肝组织TNF-α和IL-1β含量升高,与E组比较,E+M组和E+H组肝组织TNF-α和IL-1β含量降低;与NS组比较,E组肝组织CYP2E1和NF-κB表达升高,与E组比较,E+M组和E+H组肝组织CYP2E1和NF-κB表达降低;肝组织病理学检查可见,DEX中、高剂量可明显减轻肝细胞变性和坏死及炎性细胞浸润程度。结论:右美托咪定通过抗炎及抗氧化作用对急性酒精性损伤的肝脏具有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制CYP2E1和NF-κB的表达有关。     

柚皮素通过调控AMPK/Nrf2/HO-1信号通路减轻糖尿病小鼠心肌损伤

目的:探讨柚皮素(naringenin,NAR)对糖尿病小鼠心肌的保护作用及对腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)信号通路的影响。方法:将50只C57BL/6小鼠随机分为正常组(N组)和模型组。模型组采用连续腹腔注射链脲佐菌素的方法建立1型糖尿病小鼠模型,成模后将其分为糖尿病组(D组)、低剂量NAR干预组(D+L-NAR组)、中等剂量NAR干预组(D+M-NAR组)和高剂量NAR干预组(D+H-NAR组),对干预组小鼠分别给予低、中、高剂量NAR灌胃,N组和D组给予与D+M-NAR组等体积的生理盐水灌胃。6周后处死小鼠,观察NAR对小鼠体重及血糖的影响;HE和Masson染色观察心脏形态学改变,测量心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);免疫组化观察心脏组织中白细胞介素6(interleukin...