神经小胶质细胞在EAE 脱髓鞘和髓鞘再生中的作用机制进展

炎性细胞浸润和脱髓鞘是中枢神经系统(CNS)的自身免疫性疾病---多发性硬化(MS)的主要病理特征,相关的病理研究多在其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)中开展。神经小胶质细胞(MG)是CNS 的主要免疫效应细胞,EAE 时它的激活在脱髓鞘和髓鞘再生中表现出复杂的作用。M1 型MG 是导致脱髓鞘的重要原因,抑制髓鞘再生;而M2型MG 可以促进髓鞘再生,抵抗脱髓鞘。本文综述MG 在EAE 脱髓鞘和髓鞘再生中的直接作用机制,及其通过星形胶质细胞产生的间接作用机制及进展。     

髓鞘修复与多发性硬化

多发性硬化（MS）是以中枢神经系统炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病,神经功能障碍与髓鞘和轴索损伤有关。MS动物模型研究认为：髓鞘修复是治疗MS极有前景的途径。中枢神经系统存在少突胶质细胞前体细胞（OPCs）,在髓鞘修复和再生过程起关键作用。由于MS病人OPC分化受抑制,因此,在髓鞘再生过程中调控OPCs分化是髓鞘修复的重点。另外,移植外源性的髓鞘形成细胞促进髓鞘修复和神经再生,是修复MS脱髓鞘和轴索损伤的重要途径。     

斑马鱼——髓鞘损伤与再生研究的理想动物模型

脱髓鞘疾病是以多发性硬化为主要表现的自身免疫性疾病,髓鞘脱失与再生的机制不明,利用动物模型进行深入研究是一个有效途径.新型模式动物——斑马鱼具有发育快速、胚胎透明、遗传学技术成熟等优势,通过构建转基因斑马鱼可以对细胞进行活体、动态观察和基因表达模式分析,是研究髓鞘损伤与再生的理想动物模型.     

淫羊藿总黄酮通过抑制小胶质细胞/巨噬细胞介导的氧化应激反应促进髓鞘再生

目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)通过抑制小胶质细胞氧化应激(OS)促进髓鞘再生的作用及机制.方法:BV2、原代小胶质细胞和骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)以1×106个/ml接种于6孔板,贴壁后加入LPS、TFE 37℃孵育24 h:C57BL/6小鼠用含0.2％ CPZ饲料喂养6周诱导脱髓鞘模型,4周末TFE治疗组小...     

脑损伤后小胶质细胞极化现象的研究进展

小胶质细胞(MG)是中枢神经系统(CNS)中重要的神经胶质细胞,在生理状态和病理情况下均发挥重要作用。激活的MG主要是阿米巴样表型,具有吞噬、产生营养因子和促炎介质等多种功能。长时间的MG活化会损伤周围的神经元和少突胶质细胞。激活的MG被分为M1和M2表型,不同类型的MG具有不同的功能。本文对MG表型转化在神经系统疾病发展中的作用及其机制的研究进展进行综述,为寻找更加有效的神经疾病治疗靶点和效果通路提供理论依据。     

Olig对少突胶质细胞介导脱髓鞘大鼠髓鞘再生的影响

目的 探讨Olig在少突胶质细胞介导的脱髓鞘大鼠髓鞘再生中的作用。方法 40只健康Wistar大鼠,随机分成正常组、模型对照组、模型组、实验组,用形态学观察和免疫组织化学检测Olig1和Olig2的表达。结果 正常组Olig1位于少突胶质细胞的胞质,模型组胞核表达明显增多,实验组Oligl又重新转移至胞质;正常组Olig2表达位于胞核,模型组中有少量表达于胞质。 结论 在Olig1和Olig2同时缺失时,导致全脑不能形成少突胶质细胞,严重影响髓鞘的再生。     

多发性硬化患者抗髓鞘碱性蛋白抗体的检测及其意义

目的 检测多发性硬化(MS)患者抗髓鞘碱性蛋白(MBP)抗体并探讨其意义.方法 采用ELISA方法测定56例多发性硬化患者急性期血清和脑脊液配对标本的抗髓鞘碱性蛋白抗体,30例其它神经疾病(OND)患者及36例正常人(NC)为对照.结果 以OND组患者OD值为标准,测得MS患者脑脊液抗MBP抗体,其阳性率为26.8%,与OND组比较有显著性意义;以NC组OD值为对照,MS患者血清抗MBP抗体阳性率为78.6%,OND组抗MBP抗体阳性率为50%,与NC组均有显著性意义,MS患者与OND组患者抗MBP抗体阳性率比较亦有显著性意义.结论 多发性硬化患者脑脊液和血液中均可检测到抗MBP抗体,可为临床诊断和治疗提供指导.     

死亡受体6负性调控少突胶质细胞的存活、成熟和髓鞘形成

少突胶质细胞(oligodendrocyte)的存活和分化对发育过程中中枢神经系统(central nervous system,CNS)轴突髓鞘的形成和CNS脱髓鞘疾病(如多发性硬化)中髓鞘的修复均有至关重要的作用。Mi等的研究发现,死亡受体6(death receptor 6,     

重组人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白的表达、纯化及免疫原性

目的: 建立人少突胶质细胞糖蛋白细胞外Ig样结构域(MOG^Igd)的硫氧还蛋白(TrxA)融合表达系统,探讨表达产物MOG^Igd-TrxA融合蛋白的免疫原性。方法: (1)应用RT-PCR方法,以人脑组织的总RNA为模板扩增出编码MOG^Igd的cDNA序列,将MOG^Igd cDNA克隆到TrxA融合表达载体pET32a(+)中,重组质粒pET32a-MOG^Igd经表型筛选、酶切鉴定及测序鉴定后,转化至BL21(DEB)trxB^-宿主菌中经异丙硫代钠-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并通过金属鳌合亲和层析柱进行纯化。(2)C57BL/6小鼠分为MOG^Igd-TrxA组(MOG组)、硫氧还蛋白组(TrxA组)及正常对照组(NC组),12只／组,各组以相应抗原乳剂免疫小鼠制作实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型后观察其临床神经功能和组织病理学改变(HE染色和髓鞘Luxol fast blue染色)评价模型质量。结果: (1)成功获取高产量32 kD MOG^Igd-TrxA融合蛋白,以包涵体形式表达,纯化后纯度达95％左右。(2)MOG组小鼠75％(9/12)发病,于免疫后第(12.14±2.04)d发病,呈慢性非缓解型病程;发病动物组织切片HE染色和髓鞘染色显示不同程度炎性细胞浸润和髓鞘脱失。结论: 成功建立人MOG^Igd的TrxA融合表达系统,表达产物MOG^Igd-TrxA融合蛋白可作为免疫原诱导EAE动物模型。     

沉默肝脏X受体β表达对BV2小胶质细胞极化的影响

目的探讨沉默肝脏X受体β(LXRβ)对BV2小胶质细胞M1/M2表型变化和炎症因子释放的影响。方法通过RNA干扰技术沉默小鼠小胶质细胞株(BV2)中LXRβ的表达。实验分为siRNA-NC组(siRNA无关序列对照组)、siRNA-LXRβ组(转染siRNA-LXRβ质粒)。转染siRNA-LXRβ后,免疫荧光方法检测LXRβ和Iba1的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测LXRβ、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)、小胶质细胞M1型标记物(COX-2、iNOS、CD68)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的mRNA水平表达。流式细胞术(flow cytometry)检测小胶质细胞M1型标记物(MHCⅡ、CD36)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的表达水平。结果对BV2细胞分别转染24 h、48 h后发现,48 h的siRNA-LXRβ组的LXRβ蛋白及mRNA水平均显著低于NC组(P<0.001)。沉默LXRβ的表达后BV2细胞表现为胞体变圆变大,呈阿米巴样活化状态,炎症因子相关基因TNF-α、IL-6的mRNA表达水平显著升高(P<0.01),同...     

小胶质细胞与NG2胶质细胞相互作用研究进展

小胶质细胞是大脑的固有免疫细胞,在中枢神经系统的发育和稳态中起着重要的作用。NG2胶质细胞被认为是少突胶质细胞的前体细胞。近年来的研究表明,NG2胶质细胞与其他神经胶质细胞也存在广泛的相互作用,参与大脑神经免疫反应。加强对小胶质细胞和NG2胶质细胞之间相互作用的认识将有助于发现大脑中免疫调节的新途径,有利于神经炎症和神经退行性疾病的治疗,本文将对这两种细胞之间的相互作用进行综述。     

嗅鞘细胞移植实验性自身免疫性脑脊髓炎后髓鞘碱性蛋白的表达和小胶质细胞的捕获

目的:研究嗅鞘细胞(OECs)移植实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)后髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)的表达及小胶质细胞捕获OECs情况。方法:用新生近交系Wistar大鼠嗅球培养出OECs,经荧光染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记后注入同系EAE Wistar大鼠侧脑室,免疫组化检测OECs髓鞘碱性蛋白(MBP)、单核巨噬细胞诱导分子1(ED1)和CFSE共表达情况。结果:培养OECs不表达MBP,经侧脑室移植后在EAE大鼠脑内出现多量MBP+CFSE+细胞,同时在大脑广泛区域及血管周围间隙出现多量ED1+CFSE+细胞,与对照组相比差异显著。结论:OECs在EAE环境下表达MBP分子,其抗原能被脑内小胶质细胞或巨噬细胞捕获。     

地塞米松对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠髓鞘保护作用的研究

目的:分析地塞米松对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠炎症反应、髓鞘脱失及髓鞘再生的影响,探讨地塞米松治疗多发性硬化的新作用。方法:应用MOG35-55免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型。小鼠随机分为正常对照组、EAE组及地塞米松组,观察各组临床症状;采用HE染色、LFB染色、透射电镜扫描及免疫组化染色方法,检测免疫后第13、20、30 d各组小鼠脊髓组织炎症反应、髓鞘脱失及髓鞘再生情况。结果:地塞米松显著降低EAE小鼠发病率、延缓起病时间、减轻疾病严重程度。各个时间点地塞米松组脊髓组织炎性细胞浸润、髓鞘脱失及轴索变性程度较EAE组明显减轻。免疫后第20、30 d,EAE组Olig2阳性细胞数较正常对照组明显增加;免疫后各时间点,地塞米松组Olig2阳性细胞数较正常对照组均明显增加,第13、20 d较EAE组明显增加。结论:地塞米松可增加脊髓组织Olig2表达、促进髓鞘再生,这可能为地塞米松治疗EAE及多发性硬化的效应途径。     

多发性硬化中microRNA-55对中枢神经系统细胞的影响

多发性硬化(MS)是一种慢性炎症自身免疫性脱髓鞘疾病,其发病机制复杂,相关中枢神经系统细胞的功能状态与MS发病过程的不同阶段息息相关.miR-155作为炎症介质常见的转录调控因子,通过影响中枢神经系统细胞的增殖、迁移、活化以及信号交流等过程在MS的发病机制中发挥作用.笔者围绕近年来星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞...     

显示小胶质细胞和少突胶质细胞镀银法的改良

在中枢神经系统的神经胶质细胞中,小胶质细胞和少突胶质细胞无论在正常的生理活动或损伤的修复过程,均有重要的作用。目前尚有一些未定论的问题需待解决。因此,对这两种细胞的研究也就显得尤为重要。虽然显示小胶质细胞和少突胶质细胞的方法较多,但这些方法在具体应用时常有一些不尽人意之处。为了满足教学和科研的要求,我们对多种显示方法进行了摸索和对比,并选定Penfield氏改进的Del Rio-Hor-lega氏法进行了重要的研究和改进。(1)在进入碳酸银溶液之前,用DAB(3.3’-diaminobenzidine)和H_2O_2处理;(2)增加碳酸银配方中碳酸钠的浓度至饱和;(3)将原法中碳酸银作用的时间和温度延长和提高。经过改良后的方法,稳定,显出率和成功率高,是显示小胶     

米诺环素对糖尿病大鼠脊髓小胶质细胞极化的影响

目的:研究米诺环素对糖尿病大鼠脊髓小胶质细胞极化的影响。方法:27只成年雄性SD大鼠分为对照组(control)、糖尿病组(DM)、米诺环素处理组(minocyline),利用腹腔注射链脲菌素(STZ)方法制备糖尿病大鼠模型,检测大鼠的血糖及体重变化,免疫荧光染色检测大鼠脊髓Iba-1的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脊髓肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)的水平变化,Western Blot检测大鼠脊髓CD68、精氨酸酶-1(Arg-1)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达变化。结果:STZ注射成功制备了糖尿病大鼠模型;免疫组化染色显示糖尿病模型大鼠脊髓Iba-1阳性细胞增多; ELISA检测结果显示糖尿病组大鼠脊髓组织中M1型小胶质细胞特异性细胞因子(TNF-α和IL-6)水平增加,米诺环素处理组大鼠脊髓组织中M2型小胶质细胞特异性细胞因子(TGF-β和IL-10)水平增加;Western Blot结果显示STZ组大鼠脊髓CD68表达上调,MAG和MBP表达降低,而米诺环素...     

小胶质细胞M2型极化相关的调节分子研究进展

<正>中枢神经系统(central nervous system,CNS)的固有免疫反应是对损伤、炎症以及退行性疾病产生的首要免疫应答。多种CNS疾病,如创伤、脑炎、帕金森病(Parkinson's disease,PD)、阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)、多发性硬化(multiple sclerosis,MS)等,其发展转归与CNS的免疫与炎症变化有着密切联系。由于免疫与炎症反应的双刃剑效应,对CNS的免疫炎症的调控一直难以解决,而近年来对CNS定居的非专职免疫细胞-小胶质细胞的极化现象研究为CNS固有免疫反应的调节带来新的解题思路。     

小胶质细胞的发育和功能

小胶质细胞(microglia)广泛分布在中枢神经系统(central nervous system,CNS),从数量上小胶质细胞占中枢神经系统中整个胶质细胞数目的5%～20%。关于小胶质细胞的起源,目前仍有争议。少数人认为,小胶质细胞起源于外胚层。也有人认为,小胶质细胞来源于骨髓造血干细胞。Hortega的经典见解认为,此种细胞来源于中胚层,是胚胎发育后期开始形成血管时侵入脑内的。小胶质细胞是CNS固有的免疫成分细胞,正常情况下处于静止状态,缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力。小胶质细胞活化是CNS在许多病理条件下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态、免疫表型与功能等一系列的变化。     

小胶质细胞的发育和功能

小胶质细胞（microglia）广泛分布在中枢神经系统（central nervous system,CNS）,从数量上小胶质细胞占中枢神经系统中整个胶质细胞数目的5%～20%。关于小胶质细胞的起源,目前仍有争议。少数人认为,小胶质细胞起源于外胚层。也有人认为,小胶质细胞来源于骨髓造血干细胞。Hortega的经典见解认为,此种细胞来源于中胚层,是胚胎发育后期开始形成血管时侵入脑内的。小胶质细胞是CNS固有的免疫成分细胞,正常情况下处于静止状态,缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力。小胶质细胞活化是CNS在许多病理条件下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态、免疫表型与功能等一系列的变化。