小檗碱对2型糖尿病大鼠巨噬细胞MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的： 探讨小檗碱对2型糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞（AM）和腹腔巨噬细胞（PM）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。 方法：SD大鼠随机分成4组，正常对照组、高脂组、糖尿病组、小檗碱治疗组。治疗12周后，测定各组大鼠血清葡萄糖、胰岛素和血脂含量，并检测肺泡和腹腔巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）含量、MMP-9和TIMP-1的基因表达水平。结果：糖尿病组大鼠血糖、血胰岛素、血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）浓度明显高于对照组，AM和PM内ox-LDL浓度、MMP-9 mRNA表达明显高于对照组；而TIMP-1 mRNA的表达低于对照组。小檗碱治疗组大鼠血糖、血胰岛素、LDL、TC、TG浓度低于糖尿病组，AM、PM内MMP-9 mRNA的表达低于糖尿病组，而TIMP-1 mRNA的表达高于糖尿病组。 结论：小檗碱具有降低血糖、调节血脂、防治2型糖尿病动脉粥样硬化的作用，其机制可能与其减少ox-LDL生成，直接下调巨噬细胞中MMP-9的表达有关。     

磷脂酰肌醇3激酶对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡和转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3-K）对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖、凋亡和转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响.方法 以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及PI3-K特异性抑制剂wortmannin作为工具药,分别将TNF-α、TNF-α＋wortmannin接种ASMC,置37℃,5%CO2培养箱中培养.逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测PI3-Kp85α、TGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测PI3-Kp85α、PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,Sandwich ELISA检测NF-κB活性,四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法测定ASMC增殖,AnnexinV/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡,ELISA测定TGF-β1蛋白质含量.结果 （1）培养的ASMC PI3-K p85α的阳性定位在胞浆.TNF-α组ASMC PI3-Kp85α mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（2）TNF-α组ASMCNF-κB活性与对照组相比显著增高（P＜0.01）,TNF-α＋wortmannin组NF-κB活性与TNF-α组相比显著降低（P＜0.01）;（3）TNF-α组ASMC的增殖反应与对照组及TNF-α＋wortmannin组相比显著增加（P＜0.01）;TNF-α组细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,TNF-α＋wortmannin组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组（P＜0.01）.（4）TNF-α组ASMC的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（5）TNF-α组ASMC的TGF-β1的mRNA表达水平、培养液上清TGF-β1的蛋白质含量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）.结论 PI3-K可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β1的表达和分泌,NF-κB作为PI3-K的下游信号参与此过程.     

甘氨酸对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响

目的：探讨甘氨酸对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及其机制。方法:诱导分化3T3-L1脂肪前体细胞为成熟的脂肪细胞，肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导建立脂肪细胞的胰岛素抵抗模型，以罗格列酮为阳性对照，观察甘氨酸干预后胰岛素受体底物-1（IRS-1）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因的表达。结果:正常对照组脂肪细胞IRS-1mRNA和PPARγ mRNA的表达最强；TNF-α组IRS-1mRNA和PPARγ mRNA表达显著低于正常对照组；TNF-α加罗格列酮组与TNF-α加甘氨酸组相似，IRS-1mRNA和PPARγ mRNA表达显著高于TNF-α组。结论:甘氨酸对TNF-α诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗具有抑制作用，其机制与其增强IRS-1、PPARγ基因的表达有关。     

基质金属蛋白酶抑制剂-1减轻糖尿病小鼠视网膜损伤

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)对糖尿病小鼠视网膜的保护作用及机制。方法将96只6~8周龄C57bl小鼠随机分为对照组、糖尿病组和TIMP-1干预组[糖尿病造模后第1和2个月玻璃体腔注射5μL TIMP-1(1 mg/L)各1次]。5个月后进行视网膜灌注铺片检测渗漏,Western blot和RT-q PCR分别检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和环氧合酶-2(COX-2)mRNA及蛋白表达,用生化法检测视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果对照组视网膜无渗漏,糖尿病组视网膜渗漏明显高于TIMP-1干预组(P0.01)。糖尿病组视网膜MMP-9、VEGF、TNF-α、COX-2 mRNA与蛋白表达水平以及MDA含量均明显高于对照组(P0.01),TIMP-1干预组则显著回降(P0.01),但仍高于对照组(P0.01);糖尿病组视网膜SOD、GSH-Px活性明显低于对照组(P0.01),TIMP-1干预组则显著回升(P0.01),但仍低于对照组(P0.01)。结论 TIMP-1能够通过减少氧化应激与VEGF表达对糖尿病小鼠视网膜起保护作用。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠肾脏结构和功能的影响

目的：研究银杏叶提取物（GBE）对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏结构和功能的影响。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、高脂组、糖尿病组（高脂饮食+STZ造模）及糖尿病GBE治疗组（GBE 8 mg·kg-1·d-1），8周后处死大鼠,检测体重、肾重、尿量、24 h尿蛋白和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平；电镜观察肾脏超微结构；RT-PCR法测定基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、Ⅳ型胶原的基因表达水平。结果：糖尿病组大鼠肾皮质TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达高于正常对照组，MMP-9 mRNA表达低于正常对照组，肾重指数、尿量、24 h 尿蛋白、NAG均高于对照组。电镜下见肾小球基底膜增厚，厚薄不均匀，足细胞突起肿胀，变短，并可见足突融合，球囊壁层细胞内线粒体扩张，肾小球内胶原纤维增多。而糖尿病GBE治疗组肾小球基底膜及足细胞病变明显较轻，肾皮质MMP-9表达高于糖尿病组，Ⅳ型胶原mRNA表达低于糖尿病组，尿量、24 h尿蛋白、NAG均低于糖尿病组。TIMP-1 mRNA表达无明显差异。结论：GBE可改善2型糖尿病大鼠肾脏的结构和功能，其作用机制与降低TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达，升高MMP-9 mRNA表达，阻止ECM的堆积有关。     

机械牵张对兔角膜成纤维细胞细胞外基质基因表达的影响

目的 研究机械牵张与白介素-1β（IL-1β）联合作用对兔角膜成纤维细胞细胞外基质相关基因表达的影响。方法 对原代提取的兔角膜成纤维细胞进行牵张幅度15%、频率0.1 Hz的周期性牵张12、24、36 h,同时给予IL-1β处理,采用实时荧光定量PCR检测细胞基质金属蛋白酶（MMPs）、基质金属蛋白酶的组织抑制剂（TIMP-1）和I型胶原α1（Collagen Iα1）mRNA表达变化水平。结果 IL-1β单独作用可以诱导角膜成纤维细胞MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表达;MMP-1和MMP-3 mRNA表达随时间而降低,MMP-9、TIMP-1、Collagen Iα1 mRNA则随时间而增加;IL-1β与机械牵张联合作用使MMP-1、MMP-3、MMP-9 mRNA表达水平上调,TIMP-1和Collagen Iα1 mRNA表达下调,且具有时间依赖。单独机械牵张使Collagen Iα1 mRNA表达下降,IL-1β与机械牵张联合作用使其表达进一步下调,且具有时间依赖性。结论 机械牵张与炎性因子联合作用可加剧角膜组织破坏,促进角膜膨隆的发生发展。     

柴胡皂甙d对狼疮肾炎小鼠尿蛋白含量及肾组织IL-6、IL-10、 TNF-α、IFN-γ mRNA表达的影响

目的：观察柴胡皂甙d (SSd) 对新西兰黑色品系和白色品系杂交的子一代（NZBWF1）狼疮肾炎小鼠尿蛋白含量及肾组织IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ mRNA表达的影响。方法：将雌性NZBWF1小鼠分为3组：① SSd治疗1组（SSd剂量2 mg·kg^-1·d^-1)；② SSd治疗2组（SSd剂量4 mg·kg^-1·d^-1)；③对照组；共治疗6周。小鼠尿蛋白含量用考马斯亮蓝法检测，小鼠肾组织IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ mRNA表达用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测。结果：实验2周、4周以及6周末，与对照组相比，SSd治疗1组和SSd治疗2组尿蛋白含量明显降低(P<0.05)；与SSd治疗1组相比，SSd治疗2组尿蛋白含量显著降低(P<0.05)。实验6周末，SSd治疗1组和SSd治疗2组肾组织IL-6和IL-10 mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05)；SSd治疗2组IL-6和IL-10 mRNA表达水平显著低于SSd治疗1组(P<0.05)。SSd治疗1组、SSd治疗2组和对照组相比，肾组织TNF-α、IFN-γ mRNA表达水平之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论：SSd可以降低NZBWF1狼疮肾炎小鼠尿蛋白含量并抑制肾组织IL-6、IL-10 mRNA的表达，而对肾组织TNF-α、IFN-γ mRNA的表达无影响。     

RGDS四肽促进大鼠肝星状细胞胶原降解机制的研究

目的：观察精-甘-天冬-丝氨酸（RGDS）四肽对纤维连接蛋白（FN）刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及其组织抑制因子（TIMP-1）表达的影响。方法：应用体外细胞培养技术，用RT-PCR检测HSC MMP-13mRNA水平；原位杂交和Western blot技术分别检测上述细胞TIMP-1 mRNA和蛋白水平。结果：RGDS四肽干预2h组MMP-13 mRNA的表达强度明显上调，同时TIMP-1 mRNA表达受抑制；RGDS四肽干预24h组TIMP-1蛋白表达受抑制。结论：RGDS四肽诱导HSC MMP-13表达，抑制其TIMP-1表达是其抗肝纤维化的作用机制之一。     

塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中TNF-α表达的影响

目的研究塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、骨性关节炎组（OA组）和塞来昔布治疗组,每组10只。利用膝关节注射4％的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。：采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数（MAI）,Westernblot方法检测关节软骨中TNF-α蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测TNF．仅mRNA的表达变化。结果对照组关节无任何异常变化,OA模型组随着造模的时间延长,关节出现了’重度红肿现象,与OA模型组比较,给药组的关节炎症反应呈现消退现象。术后8周检测关节软骨中TNF-α蛋白及mRNA表达的变化,结果发现TNF．仪蛋白及mRNA在对照组大鼠关节软骨仅有微量表达,而在OA组大鼠关节软骨表达则显著升高（P〈0．01）;与OA组相比,塞来昔布治疗组大鼠关节软骨中TNF-α蛋白及mRNA表达均显著降低（P〈0．01）。结论塞来昔布很可通过下调TNF-α的表达参与骨关节炎的发病机制。     

二甲双胍抑制OLETF大鼠肝组织TNF-α表达

目的 观察自发胰岛素抵抗的OLETF大鼠糖脂代谢异常的同时肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平的变化以及二甲双胍治疗对TNF-α表达水平的影响。方法 以野生型的LETO大鼠作为对照（LETO组）,OLETF大鼠分为OLETF组和OLETF/M组（二甲双胍 100mg/kg·日）。治疗22周,测定肝组织三酰甘油含量,用Western blot方法测定肝组织TNF-α蛋白表达水平,用定量PCR方法测定TNF-αmRNA的表达水平。结果 与LETO组大鼠相比OLETF组大鼠空腹血糖、胰岛素以及三酰甘油、游离脂肪酸的水平显著升高,肝组织三酰甘油含量增加。同时,OLETF组大鼠肝组织TNF-α蛋白表达水平为LETO组大鼠的1.57倍（P<0.05）, TNF-αmRNA表达水平是LETO组的1.67倍（P<0.05）。经二甲双胍治疗,OLETF/M组大鼠的空腹血糖、胰岛素、游离脂肪酸及肝组织三酰甘油含量明显下降。OLETF/M组大鼠TNF-α的表达水平也显著受抑,其中蛋白表达水平较OLETF组下调59%（P<0.05）、mRNA水平下调45%（P<0.05）。结论 抑制肝脏TNF-α表达是二甲双胍发挥改善胰岛素敏感性及肝脏脂肪变作用的重要纽带。     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

过表达Sirt1调节胶原蛋白诱导的关节炎细胞因子平衡

目的研究过表达去乙酰化酶1(Sirtl)对2型胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)小鼠细胞因子的影响。方法构建CIA模型,用携带Sirt1基因的重组腺病毒感染CIA小鼠,观察关节炎指数的变化。ELISA测定促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-17以及抑炎因子IL-4和IL-10的含量。实时定量PCR(qRT-PCR)测定基质金属蛋白酶13(MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达。Western blot法检测p65和乙酰化p65蛋白的表达。结果与对照组相比,Ad-Sirt1感染组降低了小鼠关节炎指数,同时显著降低了IL-1β、TNF-α和IL-17的含量,增加了IL-4和IL-10的含量。Ad-Sirt1感染组下调了MMP-13的mRNA表达,上调了TIMP-1的mRNA表达。Ad-Sirt1感染组使p65蛋白乙酰化水平下降。结论过表达的Sirt1有调节CIA小鼠关节炎细胞因子平衡的作用。     

PPARγ激动剂对RSV感染的A549细胞TLR3、TNF-α表达的抑制作用

目的 探讨 A549细胞呼吸道合胞病毒（RSV）感染后Toll样受体3（TLR3）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α） mRNA和蛋白表达及PPARγ激动剂15-脱氧前列腺素J2（15d-PGJ2）和罗格列酮的干预作用.方法 建立RSV感染的细胞模型,将传代培养的细胞随机分成6组：15d-PGJ2干预组（A）、罗格列酮干预组（B）、RSV组（C）、PDTC组（D）、GW9662组（E）及对照组（F）.各组在培养12、24和48 h后收获上清液和细胞,实时荧光RT-PCR检测TLR3和TNF-α mRNA表达,Western Blot检测TLR3蛋白表达,ELISA法检测上清中TNF-α蛋白水平.结果 与F组相比,各时间点C组TLR3和TNF-α mRNA及蛋白表达均明显升高（均P＜0.01）;与C组相比,A组、B组和D组TLR3和TNF-α mRNA及蛋白表达均明显降低（均P＜0.01）.15d-PGJ2和罗格列酮对TLR3和TNF-α mRNA和蛋白表达的抑制作用在12 h最明显;同一时间点A组和B组TLR3和TNF-α mRNA和蛋白的表达量均呈剂量依赖性下降.结论 RSV感染后TLR3和TNF-α mRNA及蛋白表达升高;罗格列酮和15d-PGJ2能以剂量依赖性方式抑制TLR3和TNF-α mRNA和蛋白表达.     

碘化钠对人甲状腺细胞IL—6，IFN—γ和TNF—α基因表达的影响

本研究以10^-4M碘化钠（NaI)刺激单层培养的人Graves病（GD）甲状腺滤泡上皮细胞（TEC），采用定性及半定量PCR技术检测刺激前后白介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在细胞中的表达水平。结果表明：（1）3例GD组织均含有IL-6及IFN-γmRNA,2例检测到TNF-α基因表达；（2）基础状态下，3例TEC均表达IL-6基础，2例表达TNF-α，而所有样本均无IFN-γmRNA;（3）NaI不能诱导TEC产生IFN-γmRNA，对IL-6mRNA的表达亦无明显影响；（4）1例TNF-α阴性的TEC样本，经NaI刺激后，可表达mRNA，2例原含有TNF-α的TEC经刺激后，其mRNA的表达水平显著增加。提示碘可通过诱导或增强TEC表达TNF-α，导致自身免疫性甲状腺疾病的发生与发展。     

首发精神分裂症PBMCNF-κB活性及其mRNA表达与IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达的关系

目的：探讨首发精神分裂症患者外周血单个核细胞（PBMC）NF-κB的活性及其mRNA表达与IL-β、IL-6、TNF-α mRNA表达的相互关系，为临床应用NF-κB调节剂提供理论依据。方法：应用NF-κB活性ELISA试剂盒，检测精神分裂症组和健康对照组PBMC中NF-κB活性，并采用RT-PCR方法，测定两组PBMC中NF-κB mRNA表达及IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达。结果：①精神分裂症组PBMC中NF-κB的活性及NF-κB mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（P〈0．05）；②精神分裂症组PBMC中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（均P〈0．05）；③在精神分裂症组及对照组中，PBMC中NF-κB的活性与其mRNA表达量无明显相关（均P〉0．05）；④在精神分裂症组和对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-1β、TNF-α mRNA均呈正相关（均P〈0．05）；无论是在精神分裂症组或对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-6 mRNA均无明显相关（均P〉0．05）。结论：精神分裂症患者PBMC中NF-κB mRNA表达及活性均增高，对NF-κB活性的检测更能反映NF-κB的转录调控功能情况；活化的NF-κB对IL-1β、TNF-α的基因转录起了重要的调控作用。     

前列腺间质细胞中雌二醇对MMP-2，MMP-9及其组织抑制因子表达的影响

目的： 研究雌二醇(E2)对前列腺间质细胞中基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9）及其组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2和雌激素受体α、β（ERα、ERβ）的影响。方法： 实时定量PCR法检测E2在前列腺间质细胞中对MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA水平的影响；半定量RT-PCR法检测E2对ERα、ERβ mRNA水平的影响。酶谱电泳法检测MMP-2、MMP-9的活性。Western blotting检测E2在前列腺间质细胞中对ERα蛋白水平的影响。结果： 前列腺间质细胞中有MMP-2和ERα mRNA的表达，未检测到MMP-9 mRNA；培养液中检测到MMP-2前体（pro-MMP-2），未检测到其活性形式，也未检测到MMP-9前体及其活性形式。用E2处理间质细胞后MMP-2 mRNA水平降低，pro-MMP-2蛋白量减少，雌激素受体抑制剂ICI 182.780可抑制此作用。E2对TIMP-1,2 mRNA表达无显著影响。E2能够增加前列腺间质细胞中ERα mRNA及其蛋白表达的水平。结论： E2能够通过ERα下调前列腺间质细胞中MMP-2的表达。     

食管放射损伤时组织MDA含量以及IL-1β、TNF-α mRNA表达的实验研究

目的观察家兔食管放射损伤时食管组织MDA含量以及细胞因子IL-1β、TNF-αmRNA表达的变化。方法对家兔食管进行照射后第1、4、7天观察食管组织的病理组织学改变,并检测食管组织中丙二醛（MDA）含量以及白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF-α）mRNA表达的变化。结果照射后7天内食管组织中MDA含量均增高（P〈0.05）;IL-1β、TNF-α mRNA在照射后7天内均有增高表达。结论脂类过氧化反应与细胞因子IL-1β、TNF-α均参与食管放射损伤的发生过程。     

敲低金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)抑制TGF-β1诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成

目的探讨敲低金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞生长的影响。方法将MRC-5细胞分为空白组、 TGF-β1组、转染阴性对照小干涉RNA的TGF-β1组和转染TIMP-1小干涉RNA(siTIMP-1)的TGF-β1组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布, ELISA检测上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量, Western blot法检测TIMP-1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 1型胶原蛋白(Col1)和β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果转染siTIMP-1组的MRC-5细胞TIMP-1蛋白水平明显降低。与空白组相比, TGF-β1组细胞活力明显升高、 G0/G1期细胞百分比明显降低、 S期和G2/M期细胞百分比明显升高, TNF-α含量明显升高,α-SMA、 Col1和β-catenin的蛋白水平均明显升高。与TGF-β1组相比,敲低TIMP-1水平后,细胞活力明显降低、 G0/G1期细胞百分比明显升高、 S期和G2/M期细胞百分比明显降低, TNF-α含量明显降低,α-SMA、 Col1和β-catenin蛋白表达均明显降低。转染阴性对照小干涉RNA的细胞与TGF-β1组各项指标均无明显差异。结论敲低TIMP-1水平可抑制MRC-5细胞增殖活性、减少胶原蛋白合成及TNF-α释放,可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

人参皂甙改善Hsp70、Bax及EAAS表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用的实验研究

目的观察人参皂甙对大鼠脊髓缺血再灌注损伤中热休克蛋白70(Hsp 70)、细胞凋亡基因(Bax)的表达及兴奋性氨基酸的含量的影响,探讨其作用与机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、损伤组、人参组、甲强龙组。术前30分钟,前两组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,人参组给予人参注射液,甲强龙组给予注射甲基强地松龙。空白组打开腹腔但不夹闭腹主动脉,余3组制作脊髓缺血再灌注损伤模型。4组分别于术后0.5、1、4、8和12小时检测脊髓组织中的Hsp70、Bax及兴奋性氨基酸的含量,并系统地进行大鼠神经功能学变化观测。结果空白组各观测时点Hsp70、Bax未见阳性表达。其余3组伤后0.5小时,Hsp70及Bax开始升高,4小时达到高峰值。人参组及甲强龙组Hsp70及Bax的含量在1、4、8、12小时较损伤组明显降低(0.05)。伤后0.5小时开始出现Bax阳性表达,12小时内持续增多。人参组及甲强龙组在1、4、8、12小时时点差异无显著意义(P0.05)。3组兴奋性氨基酸于0.5小时后开始上升,并在4小时达到高峰值,人参组及甲强龙组在1、4、8、12小时较损伤组明显降低(0.05),人参组及甲强龙组在1、4、8、12小时时点差异无显著意义(0.05)。大鼠神经功能学变化观测结果显示,各时间点甲强龙组和人参组均明显高于损伤组(0.05),而甲强龙组与人参组间无显著差异。结论人参可以降低脊髓缺血再灌注损伤中脊髓的Hsp70及Bax的表达,降低兴奋性氨基酸的含量,减轻炎症反应。人参皂甙作用与甲强龙相当,且避免了甲强龙的副作用。     

橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响

目的：研究橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响。方法：构建重症肺炎大鼠模型，分为SD组、Control组、Model组（肺炎模型）、Hesperidin-L组（12 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-M组（24 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-H组（36 mg/kg橙皮苷治疗），检测肺组织湿干重比（W/D），对肺组织病理损伤程度评分，计数肺泡灌洗液中炎症细胞数目，qRTPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA水平，ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量，Western blot检测肺组织中Bax、ccaspase-3、Bcl-2、p-STAT3、p-JAK2、STAT3、JAK2、JAK1和p-JAK1蛋白表达水平，TUENL染色检测肺组织中细胞凋亡水平。结果：与Control组相比，Model组大鼠肺组织病理评分升高，W/D升高，肺泡灌洗液中单核巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、白细胞数目均升高，肺组织中炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达水平和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均...