肝硬化大鼠肝切除术后肠内营养联合白介素-6应用研究

目的探讨肠内营养联合白介素-6在肝硬化大鼠肝切除术后的作用。方法6只正常大鼠作为正常对照组,将24只肝硬化大鼠随机分为术前组6只,肝切除术后1d组6只,肝切除术后行肠内营养（EN）5d组6只,肝切除术后行EN＋IL-65d组6只。测定大鼠肝功能、免疫功能、炎症反应和脂质过氧化。结果与EN5d组比较,EN＋IL-65d组血清ALB、IGF-1显著升高（P〈0.05）,外周血CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、NK细胞显著升高（P〈0.05）,外周血CD8＋显著下降（P〈0.05）,血清IFN-γ、TNF-α、MDA显著下降（P〈0.05）,血清SOD活性显著升高（P〈0.05）。结论EN＋IL-6可以加快肝硬化大鼠肝切除术后肝功能的恢复,促进肝脏蛋白合成,改善术后免疫功能低下,减轻炎症反应和脂质过氧化损伤。     

大鼠肝癌免疫微环境中Treg与IL-10水平的变化及意义

目的：探讨大鼠肝癌免疫微环境中Treg的数量与IL-10表达水平的变化及意义。方法40只雄性Wistar大鼠随机分成三组,肝癌模型组（20只）、生理盐水组（10只）、空白对照组（10只）,肝癌模型组大鼠按100 mg/kg给予腹腔注射DEN（二乙基亚硝胺）诱导肝癌模型。光镜下观察肝组织病理改变,流式细胞术检测肝组织CD 4＋CD 25＋Treg的百分率,应用免疫组织化学SABC法检测肝组织Treg和IL-10的表达水平,并对Treg和IL-10的变化及意义进行研究。结果成功制备大鼠诱导性肝癌模型,在镜下观察到纤维化、癌结节和癌细胞形成。流式细胞术检测显示肝癌模型组肝癌组织中Treg占CD 4＋T细胞的比例为（14.32±4.84）%,显著高于空白对照组的（5.64±6.10）%和生理盐水组的（7.95±3.55）%,差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组化法检测肝癌模型组肝癌组织中Treg和IL-10的表达高于空白对照组和生理盐水组（P＜0.05）。CD 4＋CD 25＋Treg与IL-10的水平呈明显正相关（P＜0.05）。结论大鼠肝癌免疫微环境中IL-10和Treg相互作用,共同参与了对肝癌免疫微环境的免疫抑制调节作用。     

直肠癌患者肿瘤原位免疫与外周血T淋巴细胞亚群及肿瘤分化程度的相关性

目的研究直肠癌患者肿瘤微环境中T淋巴细胞的表达情况,探讨肿瘤原位免疫与机体整体免疫状况及肿瘤分化程度的相关性。方法选取临床确诊的直肠癌患者20例,采用流式细胞仪检测患者术前和术后3、7 d外周静脉血中CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞亚群表达情况和CD4＋/CD8＋比值;免疫组化法检测患者手术标本中的肿瘤、癌旁和正常肠壁组织中CD3＋、CD8＋T细胞浸润情况;分析肿瘤原位免疫与外周血T细胞免疫的相关性,探讨肿瘤微环境中细胞免疫与肿瘤分化程度的关系。结果患者外周血中CD3＋、CD4＋T细胞亚群均显著低于对照组（均P〈0.01）,CD8＋T细胞亚群水平则明显高于对照组（P〈0.05）,且基本稳定。CD3＋、CD4＋T细胞亚群及CD4＋/CD8＋比值在术后3 d时均明显下降（均P〈0.05）,术后7 d时基本恢复术前水平。直肠癌组织内CD3＋、CD8＋细胞所占比例均明显高于癌旁和正常组织（均P〈0.05）。肿瘤组织中CD3＋、CD8＋细胞浸润比例与患者术前和术后7 d外周血CD3＋、CD8＋T细胞亚群水平成正相关（P〈0.05）。肿瘤分化程度不同的患者间CD3＋、CD8＋细胞浸润水平差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论直肠癌组织内的CD3＋和CD8＋T淋巴细胞有免疫监视、控制微小转移灶和术后残留肿瘤的发展、改善患者预后的作用。外周血T淋巴细胞状况可间接评判患者的预后。     

大肠癌CD133（＋）、Musashi-1（＋）干细胞与临床病理学因素及MGMT、ERCC1、TS关系的研究

目的探讨大肠癌CD133（＋）、Musashi-1（＋）干细胞与临床病理因素及MGMT、ERCC1、TS的关系。方法应用免疫组织化学方法（SP法）检测42例大肠癌组织的CD133、CD138、Musashi-1、MGMT、ERCC1、TS蛋白,对各指标之间的相关关系及其与临床病理学因素之间的关系进行分析。结果①CD133与组织类型、Dukes分级、静脉侵袭、远处转移及毛细血管密度（MVD）等有关（P〈0.05）;CD138、Musachi-1与组织类型、浆膜侵犯、静脉侵袭、淋巴管侵袭、淋巴结转移、远处转移及MVD等有关（P〈0.05）,CD138并与神经纤维间隙侵袭（NI）有关（P〈0.05）;CD133与CD138的表达呈负相关（P〈0.01）,与Musashi-1的表达呈正相关（P〈0.01）。②MG-MT、ERCC1与组织类型有关（P〈0.05）;TS与组织类型、Dukes分级、淋巴管侵袭、淋巴结转移有关（P〈0.05）;MGMT表达与ERCC1、TS表达呈负相关（P〈0.01）,ERCC1表达与TS表达呈正相关（P〈0.01）。③CD133、Mu-sashi-1的表达均与MGMT的表达呈负相关（P〈0.01）,与TS、ERCC1的表达呈正相关（P〈0.01）。结论①CD133（＋）、Musashi-1（＋）细胞在大肠癌的浸润与转移中起重要协同作用。②CD133（＋）、Musashi-1（＋）细胞与MGMT、TS、ERCC1耐药基因蛋白的表达具有密切关系,后者在大肠癌的侵袭中也具重要作用。     

肝癌组织中巨噬细胞和自然杀伤细胞的免疫组化研究

目的：探讨巨噬细胞（MФ）、肝自然杀伤（NK）细胞在原发性肝细胞癌（HCC）及肝硬化组织中的数量、分布规律及其与患者预后的关系，为HCC患者临床预测提供新思路。方法：应用免疫组化S-P法检测60例HCC，62例单纯性肝硬化，23例正常肝组织MФ标记物CD68和NK细胞标记物CD57的表达，并分析阳性细胞数量与临床各参数的关系。结果：①各组MФ平均数从高到低为依次为癌旁组织、肝硬化、正常肝、HCC（P〈0．05）；NK细胞平均数从高到低依次为HCC、癌旁组织、正常肝、肝硬化（P〈0．05）。②HCC中MФ细胞数量随分化程度降低而减少（P〈0．05）；NK细胞数量与组织学分级无明显关系。③HCC和癌旁组织中MФ细胞分布与临床TNM分期无关；HCC中NK细胞随着临床分期的发展有下降的趋势（P〈0．05）。④癌组织中15个月内有转移组的MФ细胞数少于无转移组（P〈0．05）；15个月内转移复发组癌和癌旁组织的NK细胞计数均明显少于无转移复发组（P〈0．01）。⑤在癌组织中MФ、NK细胞数呈线性正相关（r=0．344，P〈0．05）。结论：有转移瘤发生的HCC患者MФ和NK细胞数量明显少于无转移组；MФ数量与HCC分化程度密切相关；MФ和NK细胞计数可能是反映机体抗肿瘤免疫状态和生物学行为以及判断患者预后的重要指标。     

正常人外周血自然杀伤T细胞（CD3^＋CD16^＋CD56^＋）比例

目的：探讨正常人外周血中自然杀伤T（NKT）细胞（CD3^＋CD16^＋CD56^＋）比例的95%参考值范围。方法：取141名正常成年人和30例肺癌患者外周血,直接双色荧光抗体染色,溶血洗涤后用流式细胞仪检测NKT细胞和T细胞各亚群的数量。分析获取的结果以百分位数计算95%的正常值范围。结果：141名正常人外周血NKT细胞（CD3^＋CD16^＋CD56^＋）的百分率平均数为4.16%,标准差为4.13%,以百分位数法获得95%参考值范围为（0.78～11.71）%;18～30岁组、31～50岁组和51～70岁组的NKT细胞（CD3^＋CD16^＋CD56^＋）比例的平均数分别为4.64%,3.91%和3.57%,差异无统计学意义（P〉0.05）;30例肺癌患者组与正常组该项指标的差异亦无统计学意义（P〉0.05）。同时检测到正常人CD3^＋细胞、CD3^＋CD4＋细胞、CD3^＋CD8＋细胞、CD3^＋CD4＋/CD3^＋CD8＋比值以及NK细胞（CD3-CD16^＋CD56^＋）的比例均与大多数报道的正常值相似。结论：正常人外周血中NKT细胞（CD3^＋CD16^＋CD56^＋）比例的95%参考值范围是（0.78～11.71）%,平均数为4.16%,中位数为2.97%,虽然NKT细胞比例随年龄增加而减少,但两者之间无直线相关关系。未发现肺癌组患者NKT细胞比例与正常人有显著性差异。     

不同证型复感儿与免疫指标的相关性研究

目的探讨非急性感染期肺脾气虚证、脾虚肝旺证复感儿与免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）等免疫指标的相关性,为不同证型的复感儿提供微观辨证指标,以促进中医辨证理论的现代化研究。方法检测150例肺脾气虚证和150例脾虚肝旺证复感儿非急性感染期血清IgA、IgG、IgM及CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋等水平,另选220例健康儿童作为对照分析。结果 1与健康儿童对照组相比较,肺脾气虚证和脾虚肝旺证复感儿IgA和IgG水平均降低（P〈0.05）,CD4＋细胞百分率降低（P〈0.05）,CD8＋细胞百分率增高（P〈0.05）,CD4＋/CD8＋比值降低,且具有统计学意义（P〈0.01）,其余指标均无统计学意义（P〉0.05）;2两中医证型组组间相比较,免疫球蛋白和T淋巴细胞亚群等微观指标均无统计学意义（P〉0.05）。结论肺脾气虚证、脾虚肝旺证复感儿非急性感染期体液免疫功能低下,细胞免疫功能紊乱,肺脾气虚证、脾虚肝旺证复感儿与免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群等免疫指标间存在一定关联,但不具备正负相关性。     

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例的影响

目的探讨α-MSH对EAE发病保护作用及免疫学机制。方法 40只雌性豚鼠随机分为正常对照组、EAE对照组和EAE高、低剂量治疗组。采用粗制髓鞘碱性蛋白（cMBP）诱发急性EAE,EAE高、低剂量治疗组自造模前7d始分别按1mg/（kg.d）及0.25mg/（kg.d）予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察豚鼠神经功能障碍评分变化,并用流式细胞方法测定CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例。结果 EAE高、低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,高剂量治疗组降低更明显（P〈0.05）。EAE对照组豚鼠发病高峰期外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例较正常对照组下降（P〈0.01）,高、低剂量治疗组CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例较EAE对照组升高（P〈0.01,P〈0.05）以高剂量治疗组升高最显著（P〈0.05）。EAE各组豚鼠发病高峰期外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例与高峰期神经功能障碍评分呈负相关（r=-0.83,P〈0.05）。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过增加外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg比例,增强对活化的自身反应性T细胞的抑制,发挥调节作用的。     

贲门癌组织中CD3^＋T细胞的数量与临床病理指标间的关系

目的探讨贲门癌中CD3^＋ T细胞数量与贲门癌临床病理指标间的关系。方法用免疫组化Elivision法对42例贲门癌、18例癌旁组织以及12例正常贲门黏膜组织中的CD3^＋ T细胞进行染色，并分析其与临床病理指标间的关系。结果（1）标本中CD3^＋ T细胞平均数量从高到低依次为癌旁组织，癌组织和正常黏膜（P〈0．05）。（2）贲门癌中CD3^＋ T细胞平均数量与患者的年龄、性别、肿瘤的组织类型及分化程度无相关性（P〉0．05）。（3）贲门痛中CD3^＋ T细胞平均数量与肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况呈明显负相关（P〈0．05）。结论CD3^＋细胞的数量与肿瘤浸润深度和淋巴结转移情况呈负相关，CD3^＋ T细胞可能在延缓贲门癌的病情进展方面起到一定作用。     

复发性口疮溃疡期免疫功能的变化及其意义

目的探讨复发性口疮（RAU）的免疫学发病机理。方法测定85例RUA患者的外周血T细胞亚群CD8＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD3＋、NK、CD19,血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,及补体C3、C4的含量,并与85例正常对照组做比较。结果RAU患者患病期外周血CD8＋、CD3＋、NK值较正常组高（P〈0.01）,CD4＋值、CD4＋/CD8＋比值较正常组低（P〈0.01）,CD19值较正常组略高,但差异无显著性（P〉0.05）;RAU患者血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4均高于对照组（P〈0.01）。结论RAU的发生与患者全身和局部免疫状态关系密切,提示需要通过治疗改善患者机体免疫功能。     

CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义

目的研究CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义。方法免疫组织化学技术检测二乙基亚硝胺（DEN）诱发的大鼠肝癌发生过程中CD90的动态表达。结果 DEN诱发肝细胞癌诱癌率为100%,大鼠肝癌癌变过程大致分为肝细胞损伤期、增生硬化期和癌变期3个时期。在正常大鼠肝组织,无CD90阳性细胞表达。随着肝癌的发生发展,CD90阳性表达细胞逐渐增多,主要分布于汇管区周围。进入癌变期,CD90阳性细胞数量增多,弥漫分布。结论 CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达逐渐增高,认为其与肝癌的发生发展密切有关。     

T淋巴细胞亚群在非病毒性肝病中的应用

目的 探讨T淋巴细胞亚群在非病毒性肝病中的应用价值。方法 用流式细胞术检测2017年6月1日至2018年5月30日在昆明市第三人民医院收治的180例非病毒性肝病患者外周血T淋巴细胞亚群, 与笔者建立的参考区间进行比较分析, 有差异的指标进一步用统计学方法分析。结果 酒精性肝硬化患者CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD8+/淋巴细胞低于健康成年人, 差异有统计学意义 (P<0.05) , CD4+/CD8+高于健康成年人 (P<0.001) ;原发性胆汁性肝硬化患者CD3+CD4+/淋巴细胞、CD4+/CD8+高于健康成年人 (P<0.001) 。对有差异的指标进行ROC曲线分析, 在酒精性肝硬化中CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD8+/淋巴细胞、CD4+/CD8+的曲线下面积 (AUC) 分别为0.80、0.82、0.66、0.74;在原发性胆汁性肝硬化中CD3+CD4+/淋巴细胞、CD4+/CD8+的曲线下面积 (AUC) 分别为0.80、0.81。结论 T淋巴细胞亚群可以作为酒精性肝硬化和原发性胆汁性肝硬化的辅助诊断指标。     

原发性干燥综合征患者T细胞亚群及CD4~+CD25~+ T细胞检测的意义

目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在原发性干燥综合征(PSS)患者中的检测意义。方法用流式细胞仪检测18例PSS患者以及20例健康体检者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节T细胞水平。结果 PSS患者与正常对照组比较,CD3+CD4+细胞亚群的百分率明显升高(P<0.05);CD4+/CD8+与对照组比较有明显升高(P<0.05);CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分率明显降低(P<0.01),其它T细胞亚群无明显变化。结论 PSS患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的。T细胞亚群的比例异常与疾病的病程和临床表现相关联。CD3+CD4-CD8-和CD4+CD25+调节性T细胞水平降低导致机体自身免疫反应抑制功能减弱,免疫耐受状态被打破,可能是引发PSS发生发展的重要因素。     

前列腺癌患者免疫功能及其与前列腺癌临床病理特点的关系

目的 探讨前列腺癌患者免疫功能及其与前列腺癌临床病理特点的关系。 方法 选择桐乡市第一人民医院泌尿外科2014年1月—2016年12月前列腺癌患者60例作为前列腺癌组，健康体检者60例作为对照组。采用流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、自然杀伤细胞(natural killer cells，NK)。 结果 前列腺癌组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于对照组(P<0.05)，CD8+、NK细胞高于对照组(P<0.05)。前列腺癌体积<60 mL患者CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+和体积≥60 mL比较差异无统计学意义(P>0.05)。前列腺癌中低分化患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于高分化患者(P<0.05)，CD8+、NK细胞高于高分化患者(P<0.05)。前列腺癌Ⅲ~Ⅳ期患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)，CD8+、NK细胞高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。前列腺癌有淋巴结转移患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于无淋巴结转移患者(P<0.05)，CD8+、NK细胞高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。 结论 前列腺癌患者存在免疫功能低下，前列腺癌患者的免疫功能低下程度和前列腺癌分化程度、临床分期和淋巴结转移有关，与肿瘤体积无关，前列腺癌分化程度越低、临床分期越高、有淋巴结转移者免疫功能低下程度越高。      

CD3+CD16+CD56+自然杀伤T淋巴细胞与移植肾免疫状态的关系

目的 探讨肾移植患者CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞(NKT)在外周血中的表达与移植肾免疫状态的关系,以及钙调磷酸酶抑制剂(CNI)不同的血药浓度下NKT细胞的水平。 方法 将92例肾移植患者根据CNI血药浓度水平及有无排斥反应分为3组：正常血药浓度的无排斥组（A组,58例）、低血药浓度的无排斥组（B组,8例）、排斥组(C组,26例),10例正常人群作为对照组(D组),采用流式细胞术检测各组外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD16+CD56+自然杀伤（NK）和CD3+CD16+CD56+NKT细胞及人白细胞抗原（HLA）抗体的水平。结果 A、B、C、D组CD3+CD16+CD56+NKT细胞的百分数分别是（4.29±2.57）%、（4.31±2.08）%、（1.23±1.06）%、（3.98±2.26）%。A、B组与D组比较,NKT细胞百分数、NK细胞百分数及CD4+/CD8+无差异,HLA抗体阳性比率无显著升高;C组NKT细胞的百分数与正常对照组相比降低(P＜0.05),NK细胞、CD4+/CD8+均显著高于D组(P＜0.05),HLA抗体阳性比率显著升高。结论 肾移植后排斥反应时NKT细胞低表达,出现HLA抗体;无排斥反应时NKT细胞表达正常,不受低血药浓度的影响。CD3+CD16+CD56+NKT细胞在抑制移植肾免疫激活中起着重要作用。     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

脉冲高容量血液滤过对脓毒症患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的：探讨脓毒症患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的水平和意义以及脉冲高容量血液滤过（PHVHF）对它们的影响。方法：将2008年1月-2010年11月在安徽省立医院ICU住院的脓毒症患者40例按照疾病严重程度分为3组：脓毒症组14例,严重脓毒症组15例,脓毒症休克组11例。其中行PHVHF患者25例。40例脓毒症患者在入选当天和d5行流式细胞术检测血中CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例和CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋/CD8^＋水平。同时选取20例健康人为对照组。结果：健康对照组CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率为（0.39±0.23%）;脓毒症组为（1.72±0.59%）;严重脓毒症组（2.72±0.22%）;脓毒性休克组（3.55±0.51%）,后3组间两两比较有显著性差异（均P〈0.05）。脓毒症组CD3^＋、CD4^＋和CD4^＋/CD8^＋较正常对照组显著升高（P〈0.05）。严重脓毒症组和脓毒症休克患者CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋较正常对照组显著降低（均P〈0.05）。与死亡组比较,生存组PHVHF能更有效地降低CD4＋CD25＋Treg细胞的异常表达（P〈0.05）,上调CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋/CD8^＋水平。结论：CD4^＋CD25^＋Treg细胞在脓毒症的免疫发病机制中可能起着重要作用,随病情加重,免疫抑制加强。PHVHF可调整脓毒症患者T细胞亚群比例,改善其免疫抑制状态,可作为脓毒症免疫调节治疗的手段之一。     

人结直肠癌组织CD4+、CD8+ T淋巴细胞与患者预后的关系

目的：探讨人结直肠癌组织CD4+、CD8+ T淋巴细胞与患者预后的关系,并评估其预测价值。方法：收集2012年1月至2014年1月浙江中医药大学附属杭州第三医院肛肠科收治的行手术切除并经病理证实的109例结直肠癌患者临床病理资料及术后标本。免疫组织化学检测结直肠癌组织中的CD4+、CD8+ T淋巴细胞水平,并依此高低分组。运用Kaplan-Meier生存曲线分析比较其临床特征和预后。同时,采用Cox比例风险回归模型对可能影响患者预后的临床因素进行单因素和多因素分析。结果：免疫组织化学结果显示,CD8+ T细胞浸润高水平78例,低水平31例;CD4+ T细胞浸润高水平56例,低水平53例。结直肠癌组织中CD4+、CD8+ T淋巴细胞水平与肿瘤分期、浸润深度密切相关（P＜0.05）。随访分析显示,高水平CD8+及CD8+/CD4+结直肠癌患者的DFS和OS预后较好（P＜0.05）。高水平CD4+结直肠癌患者的DFS、OS与低水平组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。Cox回归模型分析示肿瘤分期、淋巴结转移、CD8+及CD8+/CD4+均为结直肠癌患者术后DFS和OS预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。结论：CD8+及CD8+/CD4+水平对判断结直肠癌患者的预后有较好的参考价值。     

血清VEGF、TK-1和T淋巴细胞亚群与乙型肝炎病毒相关性肝病发生和进展的关系

目的探讨血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、可溶性胸苷激酶-1(TK-1)和T淋巴细胞亚群与乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病的发生和进展的关系。方法选择HBV相关性肝病病人188例,其中单纯乙型肝炎(乙肝)52例,肝纤维化40例,肝硬化56例,肝癌40例。另选择30名健康体检者为对照组。采用PCR法检测HBV-DNA负荷量,常规生化法检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,ELISA法检测VEGF和TK-1水平,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比和CD4+/CD8+。结果单纯乙肝组、肝纤维化组、肝硬化组、肝癌组的HBV-DNA负荷量及ALT、AST水平差异均无统计学意义(P>0.05)。肝癌组、肝硬化组、肝纤维化组、单纯乙肝组、对照组VEGF和TK-1、CD4+/CD8+水平逐渐降低;各组CD3+、CD4+和CD8+水平差异均无统计学意义(P>0.05)。HBV相关性肝病病人血清中VEGF与TK-1呈明显正相关关系(r=0.745,P<0.01),VEGF与CD4+/CD8+呈明显负相关关系(r=-0.217,P<0.01),TK-1与CD4+/CD8+呈明显负相关关系(r=-0.208,P<0.01)。结论HBV相关性肝病病人血清中VEGF、TK-1和CD4+/CD8+水平与疾病的发生和进展相关,VEGF和TK-1表达升高、CD4+/CD8+下降可能参与了乙肝、肝纤维化、肝硬化和肝癌的发生和进展。     

恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的检测及临床意义

目的：研究CD4⁺CD25^high Foxp3⁺调节性T细胞(Tregs)在恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在肿瘤发病中的作用及临床意义。方法：采用流式细胞术检测61例不同分期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比,进一步分析CD4⁺CD25⁺及CD4⁺CD25^highT细胞中表达Foxp3⁺T细胞的百分比,并与正常对照组(n=32)进行比较。结果：与正常对照组比较,Ⅰ及Ⅱ期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比均无明显变化(P>0.05),Ⅲ及Ⅳ期恶性肿瘤患者均明显增高(P<0.05),随肿瘤恶性程度增高,CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞的百分比也逐渐增高;恶性肿瘤患者CD4⁺CD25⁺ 及CD4⁺CD25^high Foxp3⁺T细胞表达水平较正常对照组均增高,组间比较差异均有显著性(P< 0.01)。结论:恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞增高可能是恶性肿瘤发病及免疫机制异常的主要原因之一,定期检测外周血中上述指标的变化,有利于了解恶性肿瘤患者的病情变化及预后判断。