Survivin、PTEN和Cx43基因在皮肤基底细胞癌中的表达

背景与目的：探讨Survivin、PTEN和Cx43基因与皮肤基底细胞癌（basal cell carcinoma,BCC）的相关性。材料与方法：采用免疫组织化学S-P法分别检测35例皮肤BCC、10例正常皮肤组织中Survivin、PTEN和Cx43蛋白的表达;运用核酸分子原位杂交技术检测Cx43mRNA的表达。应用图像分析系统采集分析图像,分别检测BCC和正常皮肤组织中各项检测指标的表达水平（阳性面积）和表达强度（光密度）。结果：Survivin蛋白在正常皮肤中呈阴性表达,在BCC中呈弱阳性表达,其差异有统计学意义（P〈0．05）;PTEN蛋白在正常皮肤组织中呈强阳性表达,在BCC中呈阳性或弱阳性表达,其差异具有统计学意义（P〈0．05）。而Cx43蛋白和Cx43mRNA在正常皮肤组织中的表达均呈强阳性,而在BCC组织中均呈阳性或弱阳性,差异均具有统计学意义（P均〈0．01）。相关性分析显示,BCC组织中,PTEN蛋白的表达与Cx43蛋白呈正相关（r=0．519,P〈0．01）,Cx43蛋白的表达与Cx43mRNA也呈正相关（r=0．732,P〈0．01）。结论：PTEN蛋白、Cx43蛋白和Cx43mRNA在BCC中的低表达;Survivin蛋白在BCC中的高表达,可能在BCC发生发展的过程中发挥重要作用。     

Cx43、Survivin、PTEN在皮肤瘢痕及瘢痕癌组织中的表达

 目的 探讨皮肤瘢痕上皮癌变的相关因素。 方法 对正常皮肤、皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织用免疫组织化学法 （SP法）检测Survivin、PTEN、 Cx43蛋白的表达,用原位杂交法检测Cx43mRNA的表达。 结果 （1）Survivin在正常皮肤呈阴性表达,在皮肤瘢痕呈阳性表达,在瘢痕癌呈强阳性表达,其 表达逐渐增强,瘢痕和瘢痕癌组与正常皮肤组比较差异有统计学意义（P<0.01）;（ 2）PTEN,Cx43和Cx43mRNA在正常皮肤、皮肤瘢痕、瘢痕癌组织中的表达逐渐减弱,依次为强 阳性、阳性、阴性,瘢痕和瘢痕癌组与正常皮肤组比较差异有统计学意义（P<0.01,P <0.05）。（3）Cx43和Cx43mRNA在瘢痕癌与瘢痕中的表达有统计学意义（P<0.05 ）。 结论 Survivin的高表达,PTEN和连接蛋白43的低表达与皮肤瘢痕癌变有相关性。     

Cx43蛋白和Cx43 mRNA在皮肤瘢痕及瘢痕癌组织中的表达

背景与目的:探讨皮肤瘢痕被覆上皮癌变的可能因素.材料与方法:用免疫组织化学S-P法和原位分子杂交技术检测皮肤瘢痕癌组织、皮肤瘢痕被覆上皮、正常皮肤上皮组织中Cx43蛋白和Cx43 mRNA的表达.结果:Cx43蛋白和Cx43 mRNA在正常皮肤组织上皮表达为强阳性、在皮肤瘢痕被覆上皮为阳性,在皮肤瘢痕癌组织为阴性或弱阳性,其表达水平和表达强度在上述组织中依序逐渐降低,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05),且Cx43蛋白和Cx43 mRNA在皮肤瘢痕癌组织中的表达水平呈正相关(r=0.733,P＜0.05).结论:Cx43蛋白和Cx43 mRNA的低表达,可能与皮肤瘢痕癌的发生有关.     

表皮肿瘤survivin和PTEN蛋白的表达及其意义

目的观察survivin和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌（BCC）、脂溢性角化病（SK）等表皮肿瘤中的表达情况,探讨其发病机制。方法采用免疫组化和流式细胞术检测survivin和PTEN蛋白在30例SK和15例皮肤BCC皮损中的表达情况,并以20例正常皮肤组织作为对照。结果（1）在30例SK皮损中,19例survivin蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中无1例表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;30例SK皮损中,16例PTEN蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中14例有PTEN表达,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在15例BCC中,13例survivin蛋白阳性表达,高于正常组织（20例中均无survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中19例有survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）;而PTEN蛋白仅在4例BCC中有表达,低于正常组织（20例中有13例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中有17例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）。（3）survivin和PTEN蛋白在SK、BCC中的表达呈显著负相关（r=-0.546,P〈0.05）。结论皮肤SK和BCC的发生、发展可能与survivin基因和PTEN基因的异常表达有关。     

CyclinA、C-myc在皮肤瘢痕及瘢痕癌组织中的表达及意义

目的探讨CyclinA、C-myc在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达及意义。方法以病理性皮肤瘢痕、皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照。采用免疫组织化学（SP法）分别检测CyclinA、C-myc蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测CyclinA mRNA的表达,所有数据输入计算机后运用SPSS 16.0软件包进行统计学分析。结果（1）CyclinA、CyclinA mRNA在正常皮肤和皮肤瘢痕上皮中的表达呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。瘢痕癌组的表达（平均吸光度和阳性面积）与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）;但正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）C-myc蛋白在正常皮肤中的表达呈弱阳性,在皮肤瘢痕上皮中呈阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。且两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）相关分析显示,在皮肤瘢痕癌中,CyclinA 与CyclinA mRNA(r=0.766,P＜0.01)、CyclinA与C-myc蛋白(r=0.804,P＜0.01)的表达均呈正相关。结论（1）CyclinA及其mRNA、C-myc的高表达,可能与皮肤瘢痕癌的发生有关;（2）C-myc蛋白的高表达与皮肤瘢痕上皮癌变有相关性。（3）在瘢痕癌中CyclinA同时存在蛋白水平和基因水平的异常表达。     

皮肤瘢痕和瘢痕鳞状细胞癌中Cx26基因表达及突变的意义

目的探讨Cx26基因表达及突变在皮肤瘢痕及瘢痕鳞状细胞癌（以下简称瘢痕鳞癌）中的意义。方法采用免疫组织化学SP法及原位杂交技术检测15例皮肤瘢痕和22例瘢痕鳞癌中Cx26蛋白及mRNA的表达。分别从14例皮肤瘢痕和瘢痕鳞癌石蜡包埋组织中提取DNA,运用PCR扩增及测序的方法进行突变筛查。利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理。结果（1） Cx26蛋白、Cx26mRNA在正常皮肤表皮中阳性,在皮肤瘢痕上皮呈强阳性表达,在瘢痕鳞癌组织中呈弱阳性或阴性表达。正常皮肤组、皮肤瘢痕组及瘢痕鳞癌组两两比较,其表达（阳性面积和平均吸光度）差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）测序后未发现瘢痕鳞癌中有Cx26基因突变。结论Cx26蛋白及其mRNA的高表达,对瘢痕上皮增生具有促进作用;其表达下降与瘢痕鳞癌的发生有关;基因突变位点有待进一步探讨。     

皮肤瘢痕癌组织中MDM2的表达及意义

目的：检测皮肤瘢痕癌组织中MDM2蛋白和mRNA的表达并探讨其作用机制。方法：以皮肤瘢痕癌、病理性瘢痕为研究对象,正常皮肤作为对照。采用免疫组化和原位杂交法,分别检测MDM2蛋白和mRNA的表达,运用图像分析系统检测3组标本的表达指标（平均光密度和阳性面积）。结果：在皮肤瘢痕癌组织中MDM2蛋白和mRNA的表达呈阳性或强阳性,在皮肤病理性瘢痕组中呈弱阳性或阳性,在正常皮肤组织中呈阴性或弱阳性。组间两两比较差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论：皮肤瘢痕癌的发生可能与MDM2蛋白和mRNA的高表达有关。检测MDM2蛋白和mRNA表达水平,有可能预测皮肤病理性瘢痕早期癌变。     

β-catenin和PTEN蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达和意义

目的 探讨β-连环素(β-cat)和PTEN蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达和意义.方法 采用免疫组化S-P法检测30例皮肤鳞状细胞癌组织和15例正常皮肤组织中β-cat和PTEN蛋白的表达.结果 皮肤鳞状细胞癌(SCC)中β-cat蛋白的异常表达率和PTEN蛋白的阳性表达率分别为63.33%(19/30)、46.67%(14/30),与正常皮肤中20%(3/15)和100%(15/15)相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05).SCC中低分化组的β-cat的异常表达率和PTEN的阳性表达率分别高于和低于高分化组(P＜0.05).SCC中β-cat蛋白的异常表达和PTEN蛋白的阳性表达之间存在负相关性(r=-0.536 P＜0.05).结论 β-cat蛋白的异常表达和PTEN蛋白的表达缺失与SCC的发生和分化密切相关,PTEN蛋白的阳性表达有助于维持β-连环素的正常表达,PTEN蛋白的表达缺失可导致β-连环素的异常表达,并导致SCC的发生.     

胃癌组织中间隙连接超微结构改变及间隙连接蛋白-43的表达及其意义

目的 观察胃癌组织中间隙连接结构的改变,并检测Cx43蛋白及mRNA在组织中的表达,为胃癌的发病机制研究提供新的思路,同时也为药物治疗提供潜在的作用靶点。方法 通过透射电子显微镜技术观察正常胃与胃癌组织中间隙连接的变化;利用Western blot和 RT-PCR技术检测Cx43在正常胃与胃癌组织中的表达水平。结果 胃癌组织超微结构中细胞间隙连接破坏,分化越差破坏越严重,在正常胃组织中Cx43蛋白及mRNA的表达高于胃癌组织中的表达（P<0.05）,在胃癌组织中高-中分化者Cx43蛋白及mRNA表达高于低分化者（P<0.05）,胃癌组织中TNM分期Ⅰ/ⅡCx43蛋白及mRNA表达高于Ⅲ/Ⅳ期的表达（P<0.05）,胃癌组织中浸润深度未侵及浆膜层者Cx43蛋白及mRNA的表达高于侵及浆膜层者（P<0.05）,胃癌组织中无淋巴结转移者Cx43蛋白及mRNA的表达高于有淋巴结转移者(P<0.05）,Cx43蛋白及mRNA在不同年龄和性别组中的表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 间隙连接超微结构的改变同Cx43蛋白及mRNA的异常表达与胃癌的发生、发展有关,这为胃癌的发病及靶向治疗提供了新的方向。     

Skp2与P27bpi在基底细胞癌及其临床病理特征中的表达

目的 检测S期激酶相关蛋白2（Skp2）与激酶抑制蛋白1（P27kip1）在基底细胞癌（BCC）中的表达,进而探明两者在BCC发生发展中的作用及其相关性,以及与临床病理特征的关系,并初步探讨Skp2与P27kip1在BCC 临床分型中的作用,尤其在硬化型中的作用.方法用免疫组织染色SP两步法检测50例BCC及30例正常皮肤组织中Skp2与P27kip1的表达情况,并结合患者的年龄、性别及临床分型等进行综合分析.结果 Skp2定位于胞核或胞质,而P27kip1只定位于胞核.Skp2在BCC中呈高表达,而P27kip1呈低表达,与正常皮肤组织对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.Skp2和P27kip1的异常表达与BCC的临床分型有关（P＜0.05）,而与患者性别、年龄等因素均无关（P＞0.05）.在BCC中,Skp2的阳性表达与P27kip1的阳性表达呈负相关（r=-0.624;P＜0.05）;但在BCC的硬化型中,两者无相关性（P＞0.05）.结论 Skp2与P27kip1在BCC中的阳性表达呈负相关,提示在BCC的发生及发展中两者可能起协同作用,并可能为将来的治疗提供靶点.Skp2在硬化型BCC组的表达高于结节型及浅表型BCC组,而P27kip1则相反,提示Skp2与P27kip1可能参与皮肤BCC的分型,且可能成为BCC分型的预测因子,从而为不同类型BCC手术切缘的设计提供生化指标依据.     

间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达及与食管鳞癌浸润和转移关系

 目的探讨间隙连接蛋白Cx26和Cx43的表达在食管鳞状细胞癌发生、发展以及浸润和转移中的作用。方法通过RT-PCR、免疫组织化学技术联合检测Cx26和Cx43在42例食管鳞状细胞癌组织、17例癌旁不典型增生组织以及42例相应正常食管黏膜组织的表达情况。结果在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜中Cx26、Cx43 mRNA相对表达量及蛋白阳性表达率均低于正常食管黏膜和癌旁不典型增生组织。Cx26、Cx43蛋白和mRNA阳性表达率均随癌组织浸润深度的加深而明显降低,在有淋巴结转移的癌组织均明显低于无淋巴结转移组癌组织。Cx26、Cx43在食管鳞癌组织中mRNA相对表达量均随分化程度降低呈下降趋势。Cx26与Cx43 mRNA表达和蛋白表达之间均呈正相关关系。结论Cx26、Cx43基因抑制食管鳞癌发生、发展及浸润、转移,是早期预测食管鳞癌发生和浸润转移的有效指标。     

细胞间隙连接基因connexin32、connexin43及其蛋白在肝癌细胞系中的表达

为了探讨细胞间隙连接ｃｏｎｎｅｘｉｎ（ｃｘ）基因及其蛋白产物在肝癌细胞系的表达及意义,应用核酸分子原位杂交和流式细胞仪分析技术,研究肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ中,间隙连接基因ｃｘ３２、ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达规律。原位杂交显示,ｃｘ３２、ｃｘ４３ｍＲＮＡ在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和ＱＺＧ中均呈强阳性。流式细胞仪分析,Ｃｘ３２蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为１．９％、１．７％和９９．０％,Ｃｘ４３蛋白阳性细胞计数率分别为７．３％、２．３％和９９．１％。Ｃｘ３２、Ｃｘ４３蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１中阳性细胞计数率与ＱＺＧ相比,有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ｃｘ３２、ｃｘ４３基因在转录后水平的调控异常所导致的蛋白表达降低与ＨＣＣ的发生密切相关。     

间隙连接蛋白 43在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：探讨间隙连接蛋白43（connexin43,Cx43) 在舌癌中的表达及意义。方法：对6例正常舌上皮、24例不同分化程度舌癌的石蜡包埋切片用定量免疫组化检测Cx43蛋白的表达,同时应用流式细胞仪和免疫细胞化学对舌癌细胞株（Tca8113)Cx-43蛋白的表达进行检测。结果：正常 舌上皮中Cx43蛋白定位于棘细胞层的胞膜上,Cx-43阳性表达的 面积和灰度值在正常舌上皮和高分化舌癌之间无显著性差异（P＞0．05）,但Cx43阳性表达的面积随着舌癌细胞分化程度的下降显著降低（P＜0．01）,而且在舌癌组织中Cx－43异常表达于细胞浆。流式细胞仪 和免疫细胞化学检测可见舌癌细胞中Cx43弱表达,细胞阳性率仅为4．8％,而正常舌上皮则为92．3％。结论：该结果提示Cx43表达的改变与舌癌的进展和分化相关。     

肝细胞癌中PTEN、Cx43及VEGF蛋白的表达

背景与目的:肿瘤抑制基因PTEN、间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)及血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达在肿瘤发生和进展中发挥重要的作用。本研究目的是观察肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中PTEN、Cx43及VEGF蛋白的表达及其关系,探讨它们在HCC发生和发展中的作用。方法:免疫组化链酶素抗生物素-过氧化物酶(SP)法研究47例HCC组织中PTEN、Cx43及VEGF的表达情况。结果:PTEN、Cx43、VEGF在HCC组织中总的阳性率分别为76.6%、42.6%、70.2%。随着肿瘤病程进展,PTEN和Cx43阳性率降低(P均<0.05),而VEGF阳性率显著增高(P=0.001)。与肝内血管癌栓组相比,PTEN在无肝内血管癌栓组的阳性率显著增高(P=0.006)。肝硬化组Cx43阳性率明显低于无肝硬化组(χ2=4.7135,P=0.03)。PTEN阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度及肝硬化背景组无显著性差异。Cx43阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度及肝内血管瘤栓组无显著性差异。VEGF阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度、肝硬化及肝内血管癌栓组无显著性差异。相关分析表明:PTEN阳性率与Cx43阳性率正相关(CramersV=0.3949,P=0.023);PTEN阳性率与VEGF阳性率负相关(CramersV=0.3937,P=0.024);Cx43阳性率与VEGF阳性率无明显相关(CramersV=0.3072,P=0.06     

The expression of gap junctional proteins during different stages of mouse skin carcinogenesis

The loss or alteration of gap junctional intercellular communication(GJIC) has long been proposed to play an important role in theprocess of carcinogenesis. In this study we examined the expressionof three gap junction proteins, connexins (Cx)26, 43 and 31.1,in mouse hyperplastic skin, papillomas and squamous cell carcinomas(SCC). Tumors were induced in SENCAR mice by either of two initiation/promotionprotocols: 7,12-dimethylbenz-[a]anthracene (DMBA)/12Otetradecanoyl-phorbol-13-acetate(TPA) or DMBA/benzoyl-peroxide (BzPo). Keratinocytes in adultmouse skin expressed Cx31.1 and Cx43 but did not express Cx26.Skin hyperplasia induced by one topical application of TPA wasaccompanied by hyper-expression of both Cx26 and Cx43. In addition,TPA significantly inhibited the expression of Cx31.1. Afterrepetitive application of TPA for 3 weeks to initiated mouseskin, a similar Cx profile was found to that after a singleTPA application. Connexin 26 and Cx43 were hyper-expressed inmost of the papillomas studied (20–40 weeks after initiation).However, in some late papillomas, immunostaining revealed afocal loss of Cx26. Immunostaining of mouse skin SCC revealeddecreased Cx43 and Cx26 levels in 65% and 85% of cases respectively.The high levels of Cx26 and Cx43 mRNA in most of the SCC didnot correlate with the decreased abundance or disappearanceof Cx26 and Cx43 immunoreactive spots from tumor plasma membranes.Thus, the expression of these two connexins in SCC was impairedat the post-translation level. Cx31.1 expression was stronglyinhibited during all stages of carcinogenesis. Taken together,our results suggest that three different connexin genes aredifferentially regulated during mouse skin carcinogenesis andthe decrease of connexin expression may be an important markerof skin tumor progression.     

Clinical significance of vascular endothelial growth factor and connexin43 for predicting pancreatic cancer clinicopathologic parameters

Vasiformation is essential for the growth and metastasis of tumor. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and connexin43 (Cx43) are important regulatory factors of vasiformation. This study aimed to find out the expression features of VEGF and Cx43 and their significance in pancreatic cancer. The expression levels of VEGF and Cx43 protein in the samples, which came from 100 patients of human pancreatic cancer tissues and adjacent normal pancreatic tissues, were examined by using immunohistochemical streptavidin–peroxidase (S–P) method, Western-blotting, and RT–PCR analyses. Compared with adjacent normal pancreatic tissues, RT–PCR showed that the expression of VEGF mRNA was significantly higher in pancreatic cancer tissues (0.788 ± 0.290, P < 0.01) and Cx43 mRNA was significantly lower in pancreatic cancer tissues (0.403 ± 0.204, P < 0.01). The expression of VEGF protein was higher in pancreatic cancer tissue (0.745 ± 0.254, P < 0.01) by Western-blot, and Cx43 protein was obviously lower in pancreatic cancer tissues (0.373 ± 0.164, P < 0.01). The immunohistochemical S–P method showed as follows: the positive expression rate of VEGF and Cx43 protein was 77 and 48% in pancreatic cancer tissues and 15 and 100% in adjacent normal pancreatic tissues; expressions of VEGF were related to tumor size, TNM stage, and lymph node metastasis (P < 0.05); there was a close relation between the expression of Cx43 and histological grades, TNM stage, and lymph node metastasis (P < 0.05). This present study suggests that VEGF is overexpressed and the expression of Cx43 is lower in pancreatic cancer. The expression of VEGF and Cx43 is significantly correlated with TNM stage and lymph node metastasis. Furthermore, VEGF and Cx43 may play an important role in the occurrence, development, and metastasis of pancreatic cancer. To examine VEGF and Cx43 may be of value in judging the malignancy degree and the prognosis of pancreatic cancer.