喉癌组织中CDK2和VEGF的表达及其意义

目的：探讨喉癌组织中CDK2和VEGF的表达情况。方法：应用免疫组织化学SABC法,选择53例喉鳞癌组织为实验组,38例声带息肉为对照组,检测CDK2和VEGF的表达并进行分析。结果：实验组的CDK2和VEGF表达阳性率分别为79％和87％,而对照组的表达阳性率分别为24％和11％,对比差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论：喉癌组织中CDK2和VEGF的表达与喉癌发生发展、预后密切相关,对于早期预测喉癌发生及预后有重要的临床意义。     

肝细胞癌中P^16和CDK4表达异常的研究

用免疫组化方法检测２９例人肝细胞癌及其癌旁组织中Ｐ＾１６蛋白和ＣＤＫ４表达的改变。结果，肝癌和癌旁组织中Ｐ＾１６蛋白阳性率分别为４８．２８％，和１００％，肝癌的Ｐ＾１６蛋白表达率明显低于癌旁组织的表达率，Ｐ〈０；０１，共有２２例，肝癌Ｐ＾１６蛋白表达异常。     

肝细胞癌中促癌miRNA调控网络分析与验证

目的 构建肝细胞癌中生存相关的促癌miRNA与其靶基因的调控网络并对关键miRNA-靶基因进行实验验证。方法 利 用OncomiR和Oncolnc获取肝癌中生存相关的miRNA,并进行表达分析和生存分析;利用miRNet预测miRNA的靶基因,通过GEPIA2、Ualcan分别对靶基因进行生存和表达分析,通过Starbase进行miRNA-靶基因共表达分析,利用Cytoscape软件构建miRNA-靶基因网络,通过Enrichr进行靶基因富集分析,利用String数据库进行蛋白互作网络构建。将NC,hsa-miR-1226-3p的mimic或inhibitor,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,另取转染后48 h样品利用Q-PCR检测靶基因表达情况;将NC,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,48 h后用 Werstern blot检测靶基因蛋白表达情况;将 NC+p-GCDH-WT质粒,NC+p-GCDH-MUT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-WT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-MUT质粒分别转染HepG2细胞,48 h后利用多功能酶标仪检测荧光素酶活性;将NC,hsa-miR-221-5p mimic,pEGFP N1-GCDH质粒,hsa-miR-221-5p mimic+pEGFP N1-GCDH质粒分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果 从OncomiR和Oncolnc数据库中分别得到223个（P<0.05）和146个（P<0.05）在肝癌中与生存相关的miRNA,两者交集为131个;结合表达分析和生存分析的结果共鉴定出 48 个促癌 miRNA;miRnet 共预测出 10 278 个靶基因,通过生存和表达分析符合预期的为 44 个,miRNA-mRNA共表达分析后的结果显示 27 个靶基因符合预期。通过 Cytoscape软件构建的 miRNA-靶基因网络包含了 25个促癌miRNA和27个抑癌基因。富集分析结果显示靶基因集中作用于脂肪酸代谢通路。验证实验显示,转染hsa-miR-1226-3p的mimic和inhibitor,hsa-miR-221-5p的mimic和inhibitor后,其对应的靶基因mRNA或蛋白水平均显著改变（P<0.05）;hsa-miR-221-5p mimic 和 p-GCDH-WT 质粒共转可显著降低其荧光素酶的活性（P<0.05）;pEGFP N1-GCDH 质粒和 hsa-miR-221-5pmimic共转可显著恢复其对细胞活力,以及细胞迁移、侵袭能力的影响（P<0.05）。结论 通过综合分析鉴定了肝癌中的促癌miRNA并构建了其调控网络;脂肪酸代谢可能是肝细胞癌中促癌miRNA发挥作用的重要的靶标信号通路之一。hsa-miR-221- 5p/GCDH轴是肝癌进展的重要分子机制。     

皮肤瘢痕癌中CDK4、CDK6蛋白的表达及意义

目的探讨细胞周期素依赖激酶CDK4、CDK6蛋白在皮肤瘢痕癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测正常皮肤表皮、皮肤病理性瘢痕被覆上皮和瘢痕癌组织中CDK4、CDK6蛋白的表达。结果CDK4、CDK6蛋白在皮肤瘢痕癌组中呈阳性或强阳性表达,在皮肤病理性瘢痕组中呈弱阳性表达,在正常皮肤组中呈阴性或弱阳性表达。瘢痕癌组分别与正常皮肤组和皮肤病理性瘢痕组比较,差别有统计学意义(P<0.01)。结论 CDK4、CDK6蛋白的过表达可能与瘢痕癌的发生具有相关性。     

CDK2蛋白在胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶2（cycle protein dependent activating enzyme 2,CDK2）在胆管细胞癌中的表达及临床意义。方法收集武汉大学人民医院病理科2002/2008年胆管细胞癌存档蜡块40例,其中男性20例,女性20例。另取胆管细胞癌周围正常组织5例作对照。采用免疫组织化学方法检测各组中CDK2蛋白的表达,利用HPIAS-1000图像分析系统测定各组中CDK2蛋白表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果胆管细胞癌中CDK2蛋白呈高表达,对照组中CDK2蛋白呈低表达,两组CDK2表达的平均光密度及阳性面积率有显著性差异（P〈0.05）。结论CDK2蛋白在胆管细胞癌的发生和发展过程中起了重要作用。     

肝细胞癌组织中microRNA表达谱研究

目的 检测人肝癌组织和对应的肝硬化组织microRNA表达的差异谱,为研究microRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供实验基础.方法 Trizol法提取25例配对的肝癌和肝硬化组织总RNA,microRNA芯片分析肝癌和肝硬化组织中差异表达microRNA,实时定量PCR验证芯片的结果 .结果 肝癌与肝硬化组织间差异表达的microRNA共12个,其中3个表达上调,9个表达下调.实时荧光定量PCR结果 与芯片一致.结论 肝癌和肝硬化组织存在差异表达的microRNA,这些上调和下调表达的microRNA可能参与了肝癌的发生.     

Gas2基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的　探讨Gas2基因在HCC中的表达规律及与HCC中细胞凋亡和增殖的关系。方法　对 36例癌、癌旁肝组织及 8例正常肝组织 ,应用石蜡切片原位杂交技术观察Gas2mRNA在HCC中的表达。TUNEL技术检测凋亡细胞 (APOP) ,免疫组织化学方法检测PCNA的表达作为细胞增殖的参数。结果　肝癌、癌旁及正常肝组织中均有半数以上病例有Gas2mRNA表达 ,但肝癌组阳性积分显著高于癌旁和正常肝。Gas2mRNA表达高的组织内见较多凋亡细胞 ,以不同病理特征分组中 ,Gas2mRNA阳性积分与APOP阳性分值多呈现一致性。Gas2mRNA表达与细胞增殖无明显相关。结论　Gas2mRNA在癌内表达明显较高 ,其阳性表达与细胞凋亡关系较密切 ,Gas2基因有可能通过影响细胞的凋亡状况而在HCC的生长过程中起作用。     

甲状腺癌中CyclinE及CDK2的表达及意义

目的探讨CyclinE和CDK2蛋白的表达与甲状腺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测甲状腺癌49例、甲状腺腺瘤26例、结节性甲状腺肿29例、正常甲状腺组织10例中CyclinE和CDK2蛋白的表达,并结合临床资料进行分析。结果 CyclinE和CDK2蛋白在甲状腺癌组的阳性表达率分别为61.22%（30/49）、75.51%（37/49）,明显高于甲状腺腺瘤组、结节性甲状腺肿组及正常甲状腺组的表达率（P〈0.01）。甲状腺癌组中的CyclinE、CDK2蛋白表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小及淋巴结转移情况无相关性（P〉0.05）。CyclinE与CDK2在甲状腺癌中的表达呈正相关（r=0.6524,P〈0.01）。结论CyclinE和CDK2在甲状腺癌中呈高表达状态,提示两者可能与甲状腺癌的发生发展有关。二者联合检测或许能作为临床诊断及判断甲状腺肿瘤细胞增殖活性的参考指标。     

结肠癌及癌旁组织中P16和CDK4的表达

目的：研究结肠癌及癌旁组织中P16和CDK4的表达,了解其与结肠癌的关系。方法：用免疫组织化学方法检测50例结肠癌和相应癌旁组织中P16和CDK4的表达。结果：1.结肠癌旁组织中P16阳性表达率明显高于癌组织;随着Dukes分期越高、淋巴结的转移、癌组织分化程度越低、组织浸润深度越深P16阳性表达越来越低。2.结肠癌旁组织中CDK4低表达,而结肠癌组织中CDK4高表达;Dukes分期越高、结肠癌恶性度越高、癌组织分化程度越低、组织浸润深度越深CDK4的阳性表达率越高;伴有淋巴结转移的CDK4阳性表达率较无淋巴结转移的阳性表达率高。结论：P16和CDK4可能与结肠癌的发生密切相关。     

实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中CDK4基因的表达

目的：应用实时荧光定量PCR法检测原发性肝细胞癌中CDK4基因的表达。方法：提取手术切除人肝癌和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织及癌旁组织中cDK4的表达水平。结果：20例肝细胞癌标本中有18例肿瘤组织中CDK4基因表达明显高于癌旁肝组织，其中7例高出4倍以上。结论：实时荧光定量PCR可以准确定量测定基因的表达；CDK4基因在肝细胞癌的发生、发展中可能起重要作用。     

EZH2 mRNA在肝细胞癌中的表达及其意义

摘要 目的 研究EZH2在肝细胞癌中的表达及其意义。方法 采用RT-PCR方法检测42例肝癌患者EZH2的mRNA表达情况。结果 EZH2 mRNA在肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中的表达分别为61.9%(26/42) 28.6%(12/42)和22.2%(2/9)。EZH2 mRNA在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P＜0.05）和正常肝组织（P＜0.05）。EZH2 mRNA在肝癌组织中的阳性表达率与病理分级有关（P＜0.05）,而与肿瘤大小、HBV感染、AFP水平、是否伴有静脉癌栓和/或肝内外转移以及是否伴有肝硬化无明显相关(P＞0.05)。结论 对EZH2的检测可能有助于判断肝癌的恶性程度,并且可以作为肝癌潜在的一个治疗靶点做进一步深入研究。     

精氨酸酶2在肝细胞癌组织中的表达及临床病理意义

目的 研究精氨酸酶2(Arg-2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及临床病理意义.方法 收集113例HCC组织及癌旁肝组织,其中29例伴有癌旁异型增生结节(DN),另取12例正常肝组织.运用蛋白质印迹分析法检测Arg-2蛋白在15例HCC组织、癌旁肝组织和12例正常肝组织中的表达;运用免疫组织化学方法检测Arg-2在113例HCC、癌旁肝组织及DN中的表达情况,并分析其与HCC各临床病理特征间的关系以及鉴别诊断价值.结果 蛋白质印迹分析结果显示,Arg-2在正常肝组织和癌旁肝组织中均不表达,在HCC组织中表达升高(P＜0.01);免疫组织化学结果显示,Arg-2阳性表达于肝癌细胞质内,阳性率为77.0％(87/113),其表达与HCC组织学分级相关(P＜0.05);Arg-2在低级别DN中无表达,在高级别DN中阳性表达率为14.3％(2/14),而在高分化HCC中阳性表达率为66.7％(8/12),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Arg 2在HCC中高表达,并且与HCC组织学分级相关,其可能参与HCC的发生、发展过程.检测Arg-2表达有助于鉴别高分化HCC与DN.     

肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义

目的 探讨肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义。方法 应用免疫组织化学Elivision法检测58例肝细胞癌及癌旁组织HSP70和bcl-2表达,并作HE染色,进行肝癌组织学分级（Ⅰ-Ⅳ级,Edmondson-Kondo标准）。结果 58例肝癌中Ⅰ级7例,Ⅱ级28例,Ⅲ级18例。Ⅳ级5例,癌旁有肝硬化改变者47例（81．0％）;HSP70阳性反应产物呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞质,部分细胞同时出现核及胞膜着色。癌组织HSP70阳性率（70．7％）及阳性强度明显高于癌旁肝组织（37．9％）,肝癌分化越差,HSP70表达越强。另外,癌旁肝硬化组织中增生的小胆管上皮细胞内HSP70呈普遍中度阳性表达;癌旁肝组织的bcl-2阳性率为77．6％,呈簇状和／或片状分布,癌组织中bcl-2阳性率为19．0％,且阳性细胞数明显少于癌旁组织,多呈碎点状。结论 HSP70表达水平可反映肝癌细胞的增殖及恶性程度,有一定诊断和预后价值;肝癌和癌旁组织bcl-2染色对比显示肝癌细胞发生发展过程中抑凋亡机制减弱;HSP70可能参与肝癌及癌旁细胞的凋亡调控。     

Expression of Angiopoietin-2 Gene and Its Receptor Tie2 in Hepatocellular Carcinoma

The relationship of angiogenesis and solid tumoris one hot spot in tumor researching field.Tumor isconsisted of tumor cells and vessels. Tumor inducesand promotes angiogenesisand vice versa. Angiogen-esis promotes tumor development and provides path-ways for tumor metastasis[1,2 ] .Anti- angiogenesis isconsidered one potent anti- tumor therapy. Hepato-cellular carcinoma( HCC) is characteristic of highblood infusion,high vascular metastasis and recur-rence. Angiogenesis may play an important …     

黑色素瘤抗原-1基因在肝细胞癌中的表达

目的 检测黑色素瘤抗原－１（ＭＡＧＥ－１）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,为用ＭＡＧＥ－１基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗提供依据。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对４５例ＨＣＣ患者组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－１ｍＲＮＡ表达情况进行了研究,对６例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物的目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定,并以测序证实为ＭＡＧＥ－     

胃癌组织中HpcagA基因表达

目的　了解胃癌组织 Hpcag A基因感染状况 ,探讨Hpcag A基因与胃癌的关系 .方法　采用 Warthin- Starry银染和原位 PCR方法 ,检测慢性浅表性胃炎 (CSG) 35例、慢性萎缩性胃炎 (CAG) 4 0例和胃癌 (CG) 35例的胃粘膜 Hp及cag A基因感染状况 .观察非癌患者胃粘膜炎症反应程度 .结果　慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、癌组织、癌旁胃粘膜组织 Hp检出率分别为 5 7% ,6 2 % ,0 %和 5 4 % ;cag A基因检出率分别为 2 0 % ,5 0 % ,2 9%和 4 6 % ,萎缩性胃炎、癌旁组 cag A基因检出率显著高于浅表性胃炎组 (P<0 .0 1) .非癌患者胃粘膜单个核细胞、分叶核细胞浸润程度 cag A+组较 cag A-组、Hp+组较 Hp-组显著增多 (P<0 .0 1) ,且 cag A+组还较 Hp+组明显增多 (P<0 .0 5 ) .结论　萎缩性胃炎、胃癌患者 cag A菌株感染率显著高于慢性浅表性胃炎组 . cag A菌株引起更严重的炎症反应 .说明 Hpcag A菌株感染与萎缩性胃炎、胃癌关糸密切     

三叶因子2和N-myc下游调节基因1在不同子宫内膜组织中的表达

目的探讨三叶因子2(TFF2)和N-myc下游调节基因1(NDRG1)在不同子宫内膜组织中的表达,为早期诊断子宫内膜癌提供新的生物学指标。方法收集珠海市人民医院经手术切除并经病理检查确诊为子宫内膜癌组织157例,另选择同期经手术切除并经病理检查确诊的子宫内膜不典型增生组织30例及其他病因手术切除的正常子宫内膜20例,分别检测其TFF2和NDRG1蛋白的表达情况,并分析TFF2和NDRG1蛋白的表达与子宫内膜癌临床病理因素的关系。结果与正常子宫内膜和子宫内膜不典型增生组织比较,TFF2在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著降低(P<0.05),但NDRG1在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著升高(P<0.01)。TFF2在Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著高于Ⅲ^Ⅳ期(P<0.05);高、中分化子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著高于低分化组织及其他类型(P<0.01)。与深肌层浸润的子宫内膜癌比较,浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高(P<0.05);与有淋巴结转移的子宫内膜癌比较,无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高(P<0.01)。而高、中度分化的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于低分化及其他类型(P<0.05)。浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于深肌层浸润(P<0.01),与无淋巴结转移的子宫内膜癌比较,有淋巴结转移的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著升高(P<0.01)。结论在子宫内膜组织中,TFF2表达的缺失及NDRG1蛋白的高表达可能与子宫内膜癌的发生发展有重要关系,有望在子宫内膜癌的早期诊断、判断是否存在侵袭转移等临床评估中发挥作用。     

肝细胞癌组织中ZEB-1的表达及意义

目的 探讨ZEB-1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法和蛋白质印迹分析法检测ZEB-1在62例HCC组织、48例相应癌旁肝硬化组织和10例正常肝组织中的表达,并分析其与HCC临床病理特征的关系.结果 免疫组化结果显示ZEB-1在HCC组织及癌旁肝硬化组织中呈阳性表达,阳性率分别为93.5％(58/62)和83.3(40/48).蛋白质印迹分析显示ZEB-1蛋白在HCC组织中的表达高于相应癌旁肝硬化组织和正常肝组织(P＜0.05).ZEB-1在HCC组织中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、有无发生转移、有无门脉癌栓及有无术后复发等因素相关(P＜0.05),与肿瘤直径、肿瘤数目、血清AFP水平等因素无关(P＞0.05).结论 ZEB-1的高表达与肝癌的发生、发展密切相关,并且有可能参与HCC细胞的上皮间质转化而促进肝癌的侵袭和转移.     

肝细胞癌组织GRIM-19和STAT3蛋白的表达

目的 探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导的细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)和信号转到子与转录激活子3(STAT3)蛋白在肝细胞癌中的表达、相互关系及在肝细胞癌发生发展中的意义.方法 应用免疫组化方法检测GRIM-19和STAT3在31例肝细胞癌组织和癌周肝组织、20例肝硬化组织及10例正常肝组织的表达水平.结果 肝硬...