再生水有机提取物雌激素效应研究

目的 研究天津市某再生水厂各处理单元水体的雌激素效应。方法 采用反相C-18固相萃取柱提取各处理单元水样中目标物质,采用人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖试验和基因重组酵母试验检测水样有机提取物的雌激素效应。结果 2项试验中各处理单元水样有机提取物均表现出雌激素效应,且在一定范围内,呈现出明显的剂量．效应关系。二级出水、混凝后出水、连续膜过滤后出水和O3处理后出水均在相当于原水1．00ml的浓度水平时表现出对MCF-7细胞最强的增殖效应,最大相对增殖效应依次为33．87％,19．49％,20．42％和16．24％。而且上述水样有机提取物均在相当于原水20ml的浓度水平时具有最高β-半乳糖苷酶活力(8．15,7．50,6．07和5．33)。结论 天津市某再生水厂现有处理单元对水体雌激素效应具有有限的去除作用,但最终出水仍具有一定的雌激素效应。     

自来水及水源水有机提取物类雌激素活性研究

为了检测自来水及水源水有机提取物的类雌激素活性 ,应用环境雌激素基因重组酵母、细胞增殖和子宫增重等三项短期生物学实验进行测定。结果发现 :水样有机提取物在相当于原水量 50ml时两项体外实验均检出雌激素活性 ,原水量 2 50ml时细胞增殖效应达到最大 ,以后随原水量增大细胞增殖效应逐步减弱。原水量 12 50ml时酵母菌β -半乳糖苷酶活性最强 ,以后随原水量增大 β -半乳糖苷酶活性逐步减弱。水厂水源水有机提取物低、中剂量组受试小鼠子宫湿重增加 ,与对照组比较有统计学意义 ,高剂量组湿重减少。提示水源水有机提取物具有类雌激素活性。采用这三项实验组成的生物学检测程序具有一定的灵敏度 ,且较快速、方便。     

加氯消毒对水中有机提取物致人胎肝细胞DNA损伤的影响

目的探讨自来水加氯消毒对水中有机提取物致细胞DNA损伤的影响。方法于2007年7月(夏季)和2008年3月(春季)采集以长江为水源的某水厂的水源水、经加氯消毒处理后的出厂水和末梢水,以人胎肝细胞(L-02)为靶细胞,采用单细胞凝胶电泳技术,检测水样有机提取物诱导细胞DNA损伤的效应。水样有机提取物设4个染毒浓度(1.2、6、30、150ml/ml),阳性对照为苯并(a)芘(200μmol/L),溶剂对照为二甲基亚砜(DMSO,10μl/ml)。结果春季水源水、出厂水和末梢水以及夏季出厂水和末梢水水样有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较溶剂对照组明显增加。春夏两季加氯消毒后的出厂水和末梢水有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较水源水明显增强。春季的水样有机提取物对细胞DNA的损伤作用高于夏季。结论水源水、出厂水和末梢水有机提取物均能引起L-02细胞的DNA损伤,氯化消毒增加了水源水的遗传毒性,春季水样的遗传毒性大于夏季。     

狼毒大戟总提取物对乳腺癌细胞增殖及周期的影响

目的:观察狼毒总提取物对乳腺癌细胞增殖及周期影响。方法:CCK-8法测定该药对MCF-7、MDAMB-231、SK-Br-3细胞株增殖影响,流式细胞术检测狼毒总提取物对MCF-7细胞周期影响。结果:狼毒总提取物对细胞IC50浓度分别为227ug/ml、793ug/ml、1034ug/ml。药物作用随着药物浓度提高。MCF-7周期检测,G0/G1期期比例下降、S期比例上升。结论:狼毒提取物对MCF-7、MDA-MB-231、SK-Br-3细胞生长均有抑制作用。主要研究了MCF-7细胞抑制机制,提示狼毒大戟总提取物抑制MCF-7细胞G_2/M期到G_0/G_1其转换。     

某自来水厂水源水有机提取物的雌激素样活性研究

[目的]了解某自来水厂水源水有机提取物的雌激素样活性。[方法]用固相萃取法富集水样,分低、中、高剂量染毒组（体外试验为每毫升染毒量分别相当于10、100、1000mL水源水中有机提取物的剂量;体内试验为每千克体重灌胃量相当于2、5、10、25L水源水中有机提取物的剂量）、阴性对照组和雌二醇阳性对照组,通过体外人乳腺癌（MCF-7）细胞增殖试验、报告基因试验和初断乳大鼠子宫增重试验对水源水有机提取物的雌激素样活性进行研究。[结果]体外细胞增殖试验中,高剂量组较阴性对照组出现细胞增殖效应（P〈0．05）,细胞增殖率为（130．85±13．68）％;而报告基因试验中,中剂量组检测到荧光强度增加（P〈0．05）,相对荧光强度为（207．67±12．40）％。子宫增重试验中,相当于低、中、高剂量染毒组大鼠子宫湿重和黏液重脏器系数与阴性对照组相比差异无统计学意义。[结论]体外试验表明水源水中含有雌激素样活性物质,但体内试验尚不能确定该水源水具有明确的雌激素样活性。     

葡多酚对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究

目的研究葡多酚(GPC)对人乳腺癌(MCF-7)细胞增殖活性的影响及雌激素受体(ER)的调节作用。方法将GPC与MCF-7细胞共同培养,共设肿瘤细胞对照组、高、中、低(200、100、10μg/ml)剂量GPC组、ER阻断剂对照组(ICI10-6mol/L)和ER阻断剂(ICI10-6mol/L)+GPC(200μg/ml)6个组。用MTT法测定各组乳腺癌细胞的增殖活性水平,用免疫组化方法检测乳腺癌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和Bax蛋白的表达水平。结果与肿瘤细胞对照组比,高剂量GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平和PCNA阳性表达率降低,Bax蛋白阳性表达率升高(P<0.05);ER阻断剂+GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平、PCNA阳性表达率,均较高剂量GPC组升高,Bax蛋白阳性表达率降低,各项差别均有显著性意义(P<0.05)。结论GPC可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡;其作用与ER调节有密切关系。     

地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应

目的探究地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应。方法于2010年6—8月,采集某江流域18个采样点水样并提取有机物。将处于对数生长期的人B淋巴母细胞悬液分别暴露于0(对照)、250、500、1 000 ml/ml水样有机提取物培养24 h;采用CCK-8活细胞计数试剂盒和彗星试验分别研究水样有机提取物对细胞存活率的影响及其DNA损伤效应,并检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量的变化,以评价水样有机提取物的氧化损伤效应。结果与对照组比较,除250 ml/ml采样点5、11、12水样外,各采样点水样有机提取物在各暴露剂量下对人B淋巴母细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.01);且随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞的存活率呈下降趋势。与对照组相比,采样点4、5、6水样有机提取物在250、500、1 000 ml/ml剂量下对人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量无明显影响,采样点9、11、12和15水样有机提取物仅在1 000 ml/ml剂量下导致人B淋巴母细胞尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);其余各采样点水样有机提取物在500、1 000 ml/ml剂量下均可导致人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。与对照组相比,采样点16水样有机提取物在500 ml/ml剂量下对人B淋巴细胞内ROS含量无显著影响(P0.05),其余各采样点水样有机提取物在250~1 000 ml/ml剂量范围内均可显著诱导人B淋巴细胞内ROS的产生,差异有统计学意义(P0.01);除采样点15外,随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞中ROS的含量均呈上升趋势。结论该流域江水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA有显著的损伤效应,可能与细胞内ROS含量增加有关。     

饮用水有机提取物对正常人肝HL-7702细胞的毒性

目的 研究饮用水有机提取物对正常人肝(HL-7702)细胞所致的毒性作用.方法 采集某水厂水源水和管网末梢水水样,富集并提取有机物.调整HL-7702细胞悬液密度为2×105/孔,分别加入终浓度为0(对照,二甲基亚砜)、1.25、5、20 ml原水有机提取物/ml,每24h更换一次培养液,培养72 h.测定细胞的存活率...     

川芎嗪对乳腺癌MCF-7细胞AKT、Bcl-2蛋白活性表达的影响

目的:研究川芎嗪(TMP)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响并探讨其可能的作用机制。方法:对乳腺癌MCF-7细胞分别施以0,0.5,1.0,2.0 mg/ml浓度TMP处理24、48、72 h,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,Western Blot法检测AKT、Bcl-2蛋白的表达情况。所有数据均采用SPSS18.0,P0.05差异具有显著性,P0.01差异极具显著性。结果:与对照组相比,TMP对MCF-7细胞的增殖有抑制作用,且呈现一定的浓度、时间相关性(P0.01)。同时TMP可下调Bcl-2及AKT蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:TMP可能是通过调节Bcl-2、AKT蛋白的表达达到抑制MCF-7细胞增殖及诱导凋亡的效果。     

雌二醇与不同孕激素联合对人乳腺癌细胞增殖的影响

目的探讨雌二醇/孕激素联合方案对人乳腺癌细胞MCF-7和MCF-7/PGRMC1(WT-12)增殖的影响。方法 MCF-7细胞,用表达PGRMC1的质粒稳定转染到MCF-7细胞,使其成为MCF-7/WT-12乳腺癌细胞。雌二醇浓度(10-10M,10-12M,10-14M)与孕酮、合成孕激素安宫黄体酮、炔诺酮序贯联合加入上述两种人乳腺癌细胞进行培养6天,MTT法分别测定MCF-7、MCF-7/WT-12肿瘤细胞的生长增殖情况。结果单纯雌二醇在高浓度10-10M下,明显刺激细胞生长,这种生长不受加入各种孕激素的影响。单纯雌二醇在低浓度下10-12M、10-14M下对MCF-7及MCF-7/WT-12细胞刺激增殖作用轻微或没有明显刺激细胞增殖的作用,然而,加用炔诺酮则可激发细胞明显的增殖反应,而增加安宫黄体酮和孕酮则显示中性作用,无激发反应。MCF-7/WT-12细胞的增殖反应更明显。结论雌二醇在表达孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)的MCF-7细胞中能明显诱发细胞增殖的增加,且表现为剂量依赖性。在低的雌二醇浓度下,某些孕激素可能启动了一种强增殖信号。关于HRT低剂量雌二醇致乳腺癌风险增加的可能性,可能与用某些特殊的孕激素有关。