硒与脱碘酶及其研究技术（二）

硒与脱碘酶及其研究技术（二）西安医科大学李综述徐光禄审校关于Ⅰ型酶中硒参入的机制，根据既往对硒参入蛋白质机制的研究，有两种可能性。一种为翻译后修饰学说，一种为直接参入学说。前者认为，在预防缺硒性肝坏死方面，Ｈ２Ｓｅ、ＨｅＳｅＯ３和硒蛋氨酸具有同等效力...     

硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响

用四种硒水平饲料和两种碘一饮水饲养大鼠观察了其甲状腺激素代谢。硒组间肝脏、肾脏Ⅰ型脱碘酶活力、血精Ｔａ含量差异显著；两碘组间甲状腺重量、甲状腺过氧化物酶活力。甲腺碘含量、肾脏ＩＤⅠ及大脑Ⅱ型脱碘酶活力差异明显；Ⅰ－组中甲状腺ＩＤ Ⅰ活力与血清三碘甲腺原氨酸含量呈显著正相关。     

硒对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺Fas/FasL表达的影响

目的 研究适碘条件下不同硒摄入水平对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠甲状腺细胞凋亡蛋白Fas/FasL表达的影响.方法 将32只雌性Lewis大鼠按数字表法随机分成4组,分别设为对照组(C组),模型组(M组),补硒+模型组(Se++M组),低硒+模型组(Se-+M组),在适碘条件下(含10.90 mg/kg)对各组先施加不同水平的硒(Se++M组2 mg/kg,C与M组0.20 mg/kg,Se-+M组0.02 mg/kg)干预2周后,再采用猪甲状腺球蛋白免疫大鼠建立EAT模型,取甲状腺组织制成石蜡切片,采用免疫组织化学检测、比较Fas/FasL表达情况的差异.结果 EAT大鼠甲状腺Fas及FasL较对照均出现表达增加,其中Fas的表达有随补硒水平的升高而下降的趋势,Se++M组吸光度值(0.036±0.004)与M组(0.059±0.006)相比,Fas表达明显受到抑制(q=11.591,P=0.000),与Se-+M组(0.050±0.005)相比,Se++M组Fas呈较低表达水平(q=7.055,P=0.000);但补硒对FasL的表达无明显影响.结论 补硒能减少Fas在甲状腺细胞中的表达,对自身免疫性甲状腺疫病的发展具有抑制作用.     

硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响──Ⅱ．硒碘营养状态对大鼠甲状腺激素代谢的影响

用四种硒水平饲料和两种碘含量饮水饲养大鼠观察了其甲状腺激素（ＴＨ）代谢。硒组间肝脏、肾脏Ⅰ型脱碘酶（ＩＤⅠ）活力、血清Ｔａ含量差异显著；两碘组间甲状腺重量、甲状腺过氧化物酶（ＴＰＯ）活力。甲状腺碘含量、肾脏ＩＤⅠ及大脑Ⅱ型脱碘酶（ＩＤⅡ）活力差异明显；Ⅰ－（不加碘）组中甲状腺ＩＤⅠ活力与血清三碘甲腺原氨酸（Ｔａ）含量呈显著正相关。提示硒缺乏通过ＩＤⅠ影响ＴＨ代谢继而影响大脑ＩＤⅡ活力并可加重碘缺乏的效应；低碘时甲状腺ＩＤⅠ在维持循环Ｔａ含量中起重要作用；碘缺乏有可能增加硒缺乏的效应；硒、碘对ＴＨ代谢的影响可能在一定程度上取决于自身和对方的营养状态。     

不同硒水平饲料对大鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和脱碘酶活性的影响

为了解不同饲料硒水平对大鼠肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶和脱碘酶活性的影响及确定它们发挥最佳活性时的最低饲料硒水平。５４只体重为５０～６０ｇ的雄性断孔Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成９组，分别喂以９种含硒水平为０．０１，０．０２，０．０３，０．０４，０．０５，０．０６，０．１，０．２和５ｍｇ／ｋｇ的不同饲料。实验持续２０周。９组动物２０周的体重增长除５ｍｇ／ｋｇ饲料组与０．１、０．２ｍｇ／ｋｇ饲料组之间有差异外，其余均没有显著性差异。谷胱甘肽过氧化物酶的活性随着饲料硒水平的升高而升高，当饲料硒含量为０．１，０．２和５ｍｇ／ｋｇ饲料时，活性达到最高。因此它发挥正常活性范围的最低饲料硒需要量为０．１ｍｇ／ｋｇ。９个组脱碘酶的活性（ｎｍｏｌ／ｍｉｎ．ｇ）在０．０５至０．２ｍｇ／ｋｇ饲料时活性最高，在５ｍｇ／ｋｇ饲料时酶活性降低，发挥最佳活性最低饲料硒需要量为０．０５ｍｇ／ｋｇ。     

硒与甲状腺和甲状腺激素代谢

１９８７年以来，硒与甲状腺和甲状腺激素的关系，主要在三个方面取得了令人瞩目的进展。１）开展了硒缺乏在碘缺乏发病中的作用研究，设想粘肿型克汀病的发生与低硒有关胎儿及新生儿期的缺碘、缺硒、导致过氧化物生成的增加和抗氧化作用的降低，是引起甲状腺病变的主要原因。２）低碘可引起血浆Ｔ４的升高及Ｔ３的下降，该作用是通过特异性地降低组织中脱碘酶活性发挥作用的。３）Ⅰ型脱碘酶是另一种具有生物学活性的含硒蛋白质，亚     

碘对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2型细胞因子表达的影响

目的　研究不同碘水平饮食对实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)大鼠甲状腺的Th1型细胞因子IFN -γ和Th2型细胞因子IL - 10表达的影响 ,进一步探讨碘在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)发病中的作用机理。方法　雌性Lewis大鼠用低碘饲料和含不同浓度的KI水喂养 ,即分为低碘 (LI)、适碘 (NI)和高碘 (HI)组。EAT诱发组用Wis tar大鼠Tg免疫 ,诱发EAT的形成 ,观察大鼠甲状腺病理改变、血清中Tg自身抗体水平和甲状腺IFN -γ和IL -10mRNA的表达水平。结果　 (1)EAT诱发的HI组大鼠甲状腺炎细胞浸润明显 ,接近重度炎症 ,NI组大鼠甲状腺为近炎症恢复期 ,而LI组呈轻度炎症。 (2 )EAT诱发组的HI、NI和LI大鼠血清中抗Tg自身抗体平均水平明显高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 1。 (3)EAT诱发组中的HI组大鼠甲状腺IFN -γ和IL - 10mRNA的表达 ,均明显高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 5。NI组大鼠甲状腺IL - 10mRNA和LI组甲状腺IFN -γmRNA的表达均高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 5。结论　EAT诱发组中的HI组大鼠甲状腺有较高水平的IFN -γ和IL - 10mRNA的表达 ,出现明显炎症和抗炎症反应 ;NI组大鼠仅Th2型细胞因子IL - 10较高水平表达 ,甲状腺炎症处于恢复期 ;LI组大鼠有较高水平IFN -γ的表达 ,甲状腺炎症反应较轻 ,其病程发展缓慢     

硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响──Ⅰ．硒碘营养状态对大鼠组织谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响

用四种硒水平饲料和两种碘含量饮水饲养大鼠观察其组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰｘ）活力。发现：硒含量和除垂体外所检组织的ＧＰｘ活力的差异硒组间均达高度显著水平；两碘组间大脑硒含量及血浆、肾脏、大脑ＧＰｘ活力差异明显；各组织硒含量及ＧＰｘ活力受硒和碘水平影响的程度和趋势有所不同。提示硒碘营养水平对各组织硒含量及ＧＰｘ活力产生不同的影响；硒的影响依赖于碘营养水平，而碘的影响又依赖于硒的营养状态。     

硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响：Ⅰ.硒…

用四种硒水平饲料和两种碘含量饮水饲养大鼠观察其组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶活力。发现；硒含量和除垂体外所检组织的ＧＰｘ活力的差展硒组间远达高度显著水平；两碘组间大脑硒含量及血浆、肾脏、大脑ＧＰｘ活力差异；组织硒含量及ＧＰｘ活力受硒和碘水平影响的程度和趋势有所不同。     

Bcl-2家族参与碘诱发自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺细胞凋亡

目的研究Bcl-2家族成员在高碘诱发实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)小鼠甲状腺细胞凋亡中的作用,初步探索自身免疫性甲状腺炎的发病机制。方法选取24只4～5周龄雌性NOD-SCID小鼠,随机分为4组,每组6只:对照组、高碘组、聚肌胞苷-聚胞苷酸[Poly(I:C)]组、高碘联合Poly(I:C)组,对照组和Poly(I:C)组自由饮用蒸馏水,高碘组和高碘联合Poly(I:C)组自由饮用0.05%NaI水,持续16周,Poly(I:C)组和高碘联合Poly(I:C)组第11周和第15周的周一、三、五每天腹腔注射一次1μg/μL Poly(I:C) 100μL。16周末取血清和甲状腺,分别利用ELISA法和病理学HE染色法验证EAT模型,TUNEL法和细胞色素C(Cyt-C)免疫组化法检测甲状腺滤泡细胞凋亡情况,real-time qPCR法检测Bcl-2家族成员在小鼠甲状腺中的mRNA表达水平。结果高碘饲养联合Poly(I:C)腹腔注射NOD-SCID小鼠建立了EAT模型;甲状腺滤泡上皮细胞凋亡程度和Cyt-C表达水平与炎症成正相关。高碘组和高碘联合Poly(I:C)组中Bcl-2家族促凋亡成员Noxa、PUMA、Bid的mRNA表达水平显著高于对照组和Poly(I:C)组(P<0.05)。结论线粒体细胞凋亡途径参与高碘诱发EAT的甲状腺细胞凋亡过程,细胞凋亡可能受到Bcl-2家族促凋亡成员Noxa、PUMA和Bid表达上调的调控。     

碘对自身免疫性甲状腺炎大鼠抗氧化能力影响

目的 探讨不同碘水平对实验性自身免疫甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠抗氧化活性的影响。方法 选择雌性Lewis大鼠,随机分为4组;于实验第8周处死动物,观察大鼠甲状腺组织的病理变化,测定甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状组甲状腺腺微粒体抗体(TMAb),肝和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 各造模组织出现淋巴细胞浸润,高碘时以甲状腺滤泡扩张、融合为主,低碘时以增生为主;高碘+造模组大鼠的TGAb和TMAb水平分别为(75.00±15.44)%,(72.15±15.00)%,明显高于造模组的(63.01±12.36)%,(60.62±11.24)%和低碘+造模组的(58.87±9.57)%,(57.89±9.67)%(P<0.05);低碘组EAT大鼠肝组织GSH-Px和SOD活性最低,分别为(122.01±10.34),(522.81±54.62)U/(mg.prot)(P<0.05)碘过量时脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性最低,为(412.09±115.71)U/(mg.prot)(P<0.05)。结论 碘缺乏和碘过量均能够加重EAT大鼠甲状腺的炎性损伤和氧化损伤,其中碘缺乏对EAT大鼠作用明显。     

碘剂对自身免疫性甲状腺病大鼠甲状腺功能影响

目的观察补充碘剂对自身免疫性甲状腺病大鼠甲状腺功能的影响。方法采用皮下注射甲状腺球蛋白诱发实验性自身免疫性甲状腺炎动物模型(EAT),通过饮水中给予碘剂观察对大鼠甲状腺重量、形态学改变、促甲状腺激素(TSH)和甲状腺激素谱以及甲状腺自身抗体滴度变化。雌性Wisrar大鼠分为A空白对照组、B抗原免疫组、C碘剂喂养组及D抗原免疫加碘剂组。免疫组大鼠给予猪甲状腺球蛋白100μg/只,与全弗氏佐剂(CFA)乳化后皮下注射,第2周后给予不完全弗氏佐剂(IFA)乳化抗原加强免疫。碘剂干预组给予0.05%碘化钠溶液喂养。分别于第0,2,4,6,8周内眦静脉采集血样。结果D组甲状腺绝对及相对重量显著高于A、B组。P<0.05,略高于C组;C组高于A、B组,但P>0.05。B组小叶间散见淋巴细胞浸润;碘剂组滤泡异质性改变,小叶间少量淋巴细胞浸润;D组甲状腺滤泡灶性萎缩、炎症细胞浸润明显,范围较广,滤泡周围可见纤维组织增生。第8周B组FT3、FT4高于A、B组;D组升高更为显著。P<0.01。B组大鼠血清TgAb、TmAb自第2周开始升高,至第4周达到最高水平,随后略有下降,但仍然显著高于对照组;C组抗体水平缓慢升高,第8周时升高达到高峰;D组抗体水平升高最快,而且维持时间更长,P<0.01。结论碘剂可以加重EAT大鼠甲状腺病理损害,升高甲状腺自身抗体滴度,     

甲状腺功能异常与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄妇女常见疾病之一,与甲状腺功能关系密切。甲状腺功能异常可致月经紊乱、不孕、卵巢囊性变与代谢紊乱等,可能加重已存在的多囊卵巢综合征。而在多囊卵巢综合征患者中,以自身免疫性甲状腺炎为主的继发性甲状腺功能紊乱发生率明显增加。目前,由于多囊卵巢综合征病因尚未阐明,甲状腺功能异常是否导致多囊卵巢综合征及在多囊卵巢综合征发生机制中所起作用并不清楚,尚需进一步研究证实。甲状腺功能异常与多囊卵巢综合征的关系对疾病预防和诊断具重要作用。     

缺锌及补锌对大鼠甲状腺激素的影响

目的了解锌缺乏及补锌对大鼠甲状腺激素的影响。方法将出生后断乳1周的SD大鼠随机分为缺锌组、配喂组、对照组、补锌组和高锌组,缺锌组、对照组、高锌组分别用缺锌饲料(Zn含量<1mg/kg),常锌饲料(Zn含量为50mg/kg)和高锌饲料(Zn含量为150mg/kg)喂养8周,补锌组用缺锌饲料喂养3周后改用高锌饲料喂养5周,配喂组用常锌饲料喂养,给料量按缺锌组前一天实际进食量添加。8周后处死,用极谱法测定血清中锌的含量,用放射免疫法测定血清中FT3、FT4的含量。结果缺锌使大鼠血清中锌含量显著降低,血清中FT3含量下降,补锌后恢复正常,缺锌对FT4无影响。结论缺锌引起甲状腺激素FT3下降,而FT4不受影响。     

碘对环孢霉素A抑制免疫性甲状腺炎拮抗作用

目的研究碘过量对环孢霉素A(Cyclosporin A,CsA)抑制实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)形成的拮抗作用,进一步探讨碘在自身免疫性甲状腺炎发病中的作用。方法给予Lewis大鼠不同碘摄入量,EAT诱发组和EAT+CsA组均用猪Tg进行免疫诱发EAT形成,EAT+CsA组于首次免疫后的第10 d开始腹腔注射CsA,5 mg/(kg.d),非EAT对照组不做任何处理,末次免疫后2周处死各组大鼠并取材。观察大鼠甲状腺组织的病理改变和炎细胞浸润程度,采用放射免疫法检测血清中甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)和T3、T4水平。结果(1)不同碘摄入量的EAT组和EAT+CsA组的大鼠甲状腺组织均有不同程度的炎性细胞浸润,非EAT对照组大鼠甲状腺未见明显炎性细胞浸润。EAT组大鼠甲状腺的炎症反应重于EAT+CsA组,诱发EAT的2组甲状腺的炎症反应随碘摄入量的增加而加重。(2)EAT组和EAT+CsA组的血清中自身抗体TG-Ab和TPO-Ab水平均高于对照组(P<0.05),EAT+CsA组的TG-Ab和TPO-Ab水平均低于EAT组,2组自身抗体水平亦随着碘摄入量的增加有升高趋势。(3)100倍碘水平的各组T4水平下降,各组的血清T3含量比较差异无统计学意义。结论增加碘的摄入量会明显加重EAT的炎症反应,促进EAT的形成和发展;CsA对EAT的形成及甲状腺自身抗体的产生有一定的抑制作用,碘过量可以拮抗CsA的这种作用,且随碘摄入量的增加拮抗效应增强;碘摄入过多可以抑制甲状腺激素的合成和释放。     

经口摄入高硒高镉对大鼠血液和组织中硒含量影响的研究

选用4周龄SD大鼠,经口染毒高硒(5.68mm/kg)、富硒(0.73mm/kg)和(或)高镉(33.3mg/kg)12周,并分别在实验的第3、6、9、12周末各处死一批大鼠,研究经日摄入高硒高镉对大鼠血液和心、肝、肾、肺、脑、脾等组织中硒含量的影响。结果表明:与单独的高硒组相比,同时摄入高硒高镉组大鼠血液和组织中硒含量显著降低,肝、肾尤为明显,降低了硒在大鼠体内的蓄积。提示在高硒高镉地区,镉对地方性硒中毒的发生、发展可能产生有益影响。     

碘过量和硒对EAT大鼠血脂水平影响

目的探讨碘过量对实验性自身免疫性甲状腺炎(Experiment autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠血脂的影响及不同硒水平的干预作用。方法雌性Lewis大鼠随机分为对照、造模、造模+高碘补硒、造模+高碘适硒、造模+高碘低硒组。猪甲状腺球蛋白免疫建立EAT模型。检查大鼠甲状腺病理改变,测定各组甲状腺自身抗体、甲状腺激素及血脂水平。结果各组甲状腺自身抗体及甲状腺激素水平均明显高于对照组;造模组甘油三酯(TG)水平(1.09±0.29)mmol/L明显低于对照组(1.93±0.59)mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平(1.23±0.12)mmol/L则明显高于对照组(0.93±0.21)mmol/L;造模+高碘适硒组总胆固醇(TC)水平(2.36±0.24)mmol/L及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平(0.92±0.21)mmol/L均明显低于造模组(2.87±0.10),(1.42±0.15)mmol/L;相同高碘水平下,血脂水平随着补硒量的减少呈上升趋势。结论大鼠在EAT及碘过量伴EAT时有血脂代谢紊乱,相同高碘水平下低硒时加重甲状腺的炎症破坏并伴有血脂的升高。     

低硒高镉对大鼠体内抗氧化作用影响的研究

用控制硒、镉含量的饲料喂养生长期Ｓ．Ｄ大鼠，观察低硒高镉对大鼠体内抗氧化作用的影响。结果表明：低硒使大鼠组织中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性降低，脂质过氧化产物（ＬＰＯ）含量升高；加镉组大鼠组织中ＧＳＨ－Ｐｘ活性比不加镉组低，ＬＰＯ含量比不加镉组高；而同时饲以低硒高镉饲料时，组织中ＧＳＨ－Ｐｘ活性进一步降低．ＬＰＯ含量更加升高。提示低硒高镉在大鼠抗氧化作用中呈现相加作用。     

不同碘营养状态对克汀大鼠脑内T4 5′-和5-脱碘酶活性的影响

目的研究不同碘营养状态下克汀大鼠脑内T4 5′-和5-脱碘酶活性的变化.方法复制Wistar克汀大鼠,通过饮水中含碘量不同分为低碘组、适碘组、高碘组、正常对照组,每组2或3窝(31～42只),选用20 d龄的仔鼠进行实验,测定4组动物模型甲状腺功能状态及脑T4 5′-和5-脱碘酶活性.结果低碘组TT4和FT4均低于正常对照组,均为正常对照组的3.5% ,FT3高于正常对照组74.0%;适碘组TT4和FT4高于正常对照组14.5%和27.7%;高碘组TT4和FT4均低于正常对照组,仅为正常对照组的61.86%和62.0%,TT3低于正常对照组,FT3显著高于正常对照组84.9%.低碘组脑组织中T45′-脱碘酶活性相当于每克组织每小时(1.95±0.32 ) ngT3/μgT4,显著高于正常对照组(1.59±0.23),5-脱碘酶活性相当于每克组织每小时(1.38±0.21) ngrT3/μgT4,低于正常对照组(2.02±0.26),高碘组T45′-和5-脱碘酶活性每克组织每小时(1.12±0.19)ngT3/μgT4和(1.73±0.36)ngrT3/μgT4,低于正常对照组.结论 5′-脱碘酶活性在低碘时活性升高,在高碘时活性降低;5-脱碘酶在低碘和高碘时活性均降低.