某市饮用水有机提取物对小鼠肝细胞DNA损伤的研究

目的研究某市生活饮用水有机提取物对小鼠肝原代细胞所致的DNA损伤作用。方法采用小鼠肝原代细胞彗星试验分别对某市南郊水厂的水源水、出厂水、自来水的有机提取物的致突变性进行检测。结果该市水源水、出厂水和自来水对小鼠肝原代细胞均产生了不同程度的DNA损伤作用,但出厂水和自来水引起肝细胞DNA损伤作用的阈值更低(在本研究为100m1)。结论该市生活饮用水的水源水和氯化消毒后饮用水都受到不同程度的有机致突变物的污染,氯化消毒后饮用水比水源水的致突变性更强,可能是由氯化消毒副产物的致突变性所致。     

绿茶浸出液对水中有机污染物致DNA损伤的抑制作用

目的探讨绿茶浸出液能否抑制水中有机污染物对细胞DNA的损伤。方法 固相萃取水中有机物,用绿茶浸出液与有机提取物以不同方式处理(同时处理、绿茶预处理、绿茶后处理)大鼠肝细胞后,采用单细胞凝胶电泳实验检测细胞,观察DNA迁移长度及拖尾细胞百分率,并检测培养液中丙二醛含量。结果同时处理组和绿茶预处理组的结果显示绿茶浸出液浓度在0.5、5、50μg/ml时可缩短DNA迁移长度,与水样对照组比较,差异有非常显著意义(P<0.01),拖尾细胞百分率和培养液中丙二醛含量的变化与此一致;后处理组细胞损伤明显加重,分水样对照组比较,差异有显蓍性(P<0.01)。结论绿茶浸出液对水中有机提取物致肝细胞DNA的损伤有保护作用,且在一定的浓度范围内呈剂量一反应关系。机制可能是抑制水中有机提取物对细胞的氧化损伤。     

某市水中有机提取物对人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用

目的 了解某市生活饮用水及源水对人外周血淋巴细胞DNA断裂损伤.气相色谱固定相GDX－102吸附水中有机物，单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤。结果 相同剂量时，地面水及以地面水为源水的自来水比深层地下水及以深层地下水为源水的自来水对细胞DNA损伤严重；各水样对细胞DNA损伤级别有显著的剂量－反应关系。结论 某市各水源水及自来水中有机提取物对人外周血淋巴细胞DNA存在不同程度断裂损伤作用。     

地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应

目的探究地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应。方法于2010年6—8月,采集某江流域18个采样点水样并提取有机物。将处于对数生长期的人B淋巴母细胞悬液分别暴露于0(对照)、250、500、1 000 ml/ml水样有机提取物培养24 h;采用CCK-8活细胞计数试剂盒和彗星试验分别研究水样有机提取物对细胞存活率的影响及其DNA损伤效应,并检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量的变化,以评价水样有机提取物的氧化损伤效应。结果与对照组比较,除250 ml/ml采样点5、11、12水样外,各采样点水样有机提取物在各暴露剂量下对人B淋巴母细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.01);且随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞的存活率呈下降趋势。与对照组相比,采样点4、5、6水样有机提取物在250、500、1 000 ml/ml剂量下对人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量无明显影响,采样点9、11、12和15水样有机提取物仅在1 000 ml/ml剂量下导致人B淋巴母细胞尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);其余各采样点水样有机提取物在500、1 000 ml/ml剂量下均可导致人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量增加,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。与对照组相比,采样点16水样有机提取物在500 ml/ml剂量下对人B淋巴细胞内ROS含量无显著影响(P0.05),其余各采样点水样有机提取物在250~1 000 ml/ml剂量范围内均可显著诱导人B淋巴细胞内ROS的产生,差异有统计学意义(P0.01);除采样点15外,随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞中ROS的含量均呈上升趋势。结论该流域江水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA有显著的损伤效应,可能与细胞内ROS含量增加有关。     

微囊藻毒素与饮用水有机提取物联合致HepG_2细胞DNA损伤的研究

目的探讨微囊藻毒素(MC-LR)与管网末梢水有机提取物联合致HepG2细胞DNA损伤的作用。方法于2007年7月采集某市的管网末梢水,分别选用XAD-2、XAD-8大孔吸附树脂以及两者等体积配制的复合树脂(简称XAD-2/8)富集为100、10和30ml/ml的有机物。应用彗星试验,研究MC-LR与管网末梢水有机提取物联合致HepG2细胞(1×105个/孔)DNA损伤的作用。结果与溶剂对照组相比,0.5μg/mlMC-LR染毒组可使HepG2细胞Olive尾矩值显著增加(P0.01)。较高浓度(0.1、0.5μg/ml)MC-LR与经XAD-2树脂富集的有机物(100ml/ml)联合染毒时,所诱导的HepG2细胞Olive尾矩值较之相应的单独作用组显著增加(P0.01);0.05、0.1、0.5μg/mlMC-LR与经XAD-8树脂富集的有机物(10ml/ml)联合染毒时,所诱导的HepG2细胞Olive尾矩值较之相应的单独作用组显著增加(P0.01);较高浓度(0.1、0.5μg/ml)MC-LR与经XAD-2/8树脂富集的有机物(30ml/ml)联合染毒时,所诱导的HepG2细胞Olive尾矩值较之相应的单独作用组显著增加(P0.01)。运用析因分析统计学方法,发现MC-LR与3种树脂富集的饮用水有机提取物存在交互作用(P0.01)。结论饮用水有机提取物与MC-LR之间存在协同作用,MC-LR可以极大地增强饮用水中有机物的致DNA损伤作用。     

污水有机提取物对小鼠脾细胞的DNA损伤作用

目的 探讨污水有机提取物对小鼠脾细胞的DNA损伤作用.方法 于2004年春季(4月)和秋季(10月)采集某市污水灌溉地区水样.将1只健康8周龄清洁级雄性昆明小鼠处死,调整脾脏细胞悬液密度为2×106/ml,分别加入终浓度0(溶剂对照)、0.312 5、0.625、1.25ml/L的污水有机物提取液,于37℃染毒2 h,...     

氯乙烯致大鼠肝细胞DNA损伤与DNA修复基因表达

目的　研究氯乙烯 (VCM)对大鼠肝细胞DNA的损伤作用 ,及对DNA损伤修复酶 [O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (MGMT)、X线修复交叉互补基团 1(XRCC1)和X线修复交叉互补基团 3(XRCC3) ]表达的影响 ;探索VCM所致DNA损伤的修复机制。方法　采用腹腔注射VCM染毒 ,实验组按不同染毒剂量分为 3个剂量组 ,分别为低剂量 5mg kg、中剂量 10mg kg和高剂量 2 0mg kg ,染毒12周 ,以单细胞凝胶电泳 (彗星试验 )测DNA损伤 ,免疫组化法测DNA损伤修复酶的表达。结果　低、中和高剂量组大鼠肝细胞DNA损伤细胞百分率分别为 11.75 %、12 .38%和 17.6 3% ,均高于对照组(5 .6 7% ) ,且中、高剂量与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。MGMT和XRCC1表达随染毒剂量增加而减少 ,而XRCC3的表达随染毒剂量的增加而增加。VCM致DNA损伤与XRCC3表达有相关关系 (r=0 .4 38,P =0 .0 6 7)。结论　VCM可导致肝细胞DNA发生损伤 ,且存在剂量 -反应关系 ;DNA损伤修复酶参与修复VCM所致的DNA损伤。     

饮水氯化消毒副产物--3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮的DNA损伤作用研究

目的 研究饮水氯化消毒副产物——3—氯—4—二氯甲基—5—羟基—2(5氢)—呋喃酮(MX)的DNA损伤作用。方法 以人肝肿瘤细胞株HepG2为靶细胞，MX设10、30、100、300μmol／L(终浓度)4个剂量，以二甲基亚砜为溶剂对照，H2O2为阳性对照，应用单细胞凝胶电泳试验(彗星试验)研究MX对HepG2的DNA损伤作用。结果 MX在30、100、300μmol／L3个剂量均可引起HepG2 DNA链断裂，DNA迁移长度随MX浓度的增加而增加，且与溶剂对照相比差异均有显著性。结论 饮水氯化消毒副产物——MX对HepG2有明显的DNA损伤作用。     

养殖污水有机提取物对小鼠睾丸细胞的DNA损伤作用

目的 探讨养殖污水中有机污染物的遗传毒性.方法 雄性健康昆明种小鼠按体重随机分组,每组6只;分别于春、秋季采集天津市某污水养鱼池的养殖污水,以其有机提取物原液（25.00 L/kg）、1/2原液剂量（12.50L/kg）、1/4原液剂量（6.25L/kg）经腹腔注射染毒小鼠,连续3 d;以DMSO为阴性对照,环磷酰胺为阳性对照.通过非荧光染色彗星试验检测养殖污水有机提取物所致小鼠睾丸细胞DNA损伤作用.结果 春、秋季养殖污水有机提取物各染毒剂量组小鼠睾丸细胞拖尾率和平均尾长与阴性对照组比较,差别均有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）,且拖尾率、平均尾长与染毒剂量之间均呈剂量-反应关系（r=0.829～0.942,P均＜0.01）.结论 养殖污水中含有可引起小鼠睾丸细胞DNA损伤的有机污染物,这些污染物有可能通过食物链对人群健康产生潜在危害.     

温室土壤有机物提取物分析及其致DNA损伤作用

目的评价温室土壤有机物污染情况,并探讨其致DNA损伤作用。方法于2010年5月,采用气相色谱-质谱(GC-MS)法对某蔬菜大棚土壤和对照(非污染)区土壤样品中有机提取物(extractable organic matter,EOM)的主要成分进行检测分析。将40只健康10周龄清洁级雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为阴性对照(DMSO-植物油体积比为6∶4)组、阳性对照(100 mg/kg环磷酰胺腹腔注射)组和温室土壤EOM低剂量(0.5 g/ml)、中剂量(1.5 g/ml)和高剂量(3.0g/ml)染毒组,每组8只。采用经口灌胃方式,每天一次,连续染毒4周。采用彗星试验检测小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤。结果温室土壤样品检出的主要污染物为胺类、烷烃类、苯系物、多环芳烃和邻苯二甲酸酯类,其种类及含量均多于对照区土壤。与阴性对照组比较,1.5、3.0 g/ml EOM染毒组小鼠外周血淋巴细胞头尾光密度比以及各剂量EOM染毒组小鼠外周血淋巴细胞尾长和Olive尾矩均较高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着EOM染毒剂量的升高,小鼠外周血淋巴细胞尾长、头尾光密度比和Olive尾矩均呈剂量依赖性升高(P<0.05)。结论温室土壤除受烷烃类和胺类等有机污染外,其多环芳烃、苯系物、烯烃类和邻苯二甲酸酯类等污染亦较严重。温室土壤EOM具有致DNA损伤作用。     

经氯化处理的生活污水的有机提取物对DNA的损伤

目的 了解氯化后生活污水中有机提取物对DNA的损伤作用,为今后防治其危害提供科学依据.方法 于2006年3月,采集甲大学、某饭店、乙大学的生活污水氯化前、后水样,采用其有机提取物对BALB/C小鼠分别进行彗星试验(0.04、0.2、1.0、5.0 mg/ml)、微核试验(高、中、低剂量组分别相当于提取物原液、20%原液、5%原液)和Ames试验(0.01、0.1、1.0、10、100μl/皿),检测水样有机提取物对DNA的损伤作用.结果 彗星试验显示,氯化前甲大学、某饭店、乙大学1.0、5.0 mg/ml组和氯化后甲大学0.04～5.0 mg/ml 组、某饭店0.2～5.0 mg/ml组、乙大学1.0、5.0 mg/ml组小鼠脾脏细胞头部染色体DNA含量百分比低于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).氯化后各染毒组小鼠脾脏细胞头部染色体DNA含量百分比低于氯化前.微核试验显示,氯化前甲大学、某饭店高剂量组雌性小鼠和甲大学、某饭店高、中剂量组雄性小鼠以及氯化后甲大学高、中剂量组、某饭店高、中、低剂量组雌、雄性小鼠骨髓细胞微核率高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Ames试验显示,氯化前某饭店100μl/皿组TA98-S9和甲大学、某饭店10、100μl/皿组TA98 S9以及氯化后某饭店10、100μl/皿组TA98-S9和甲大学、某饭店1.0～100μl/皿组TA98 S9的回变菌落数是空白对照组的2倍以上,且均呈一定的剂量-反应关系;而甲大学、某饭店、乙大学有机提取物对TA97、TA100、TA102均未引起阳性反应.结论 氯化后生活污水的有机提取物对DNA有损伤作用,且强于氯化前.     

小鼠肝细胞彗星实验对饮用水氯化消毒副产物诱变性研究

目的 用小鼠肝细胞彗星实验检测生活饮用水氯化消毒前后的诱变性。方法 采用彗星实验分别对泸州市南部水厂的水源水、出厂水、自来水的有机浓集物的诱变性进行检测。结果 水源水的有机浓集物的彗星实验在高剂量组(相当于原水样量500ml)才出现阳性，而出厂水、自来水的望星实验在较低剂量组(相当于原水样量100m1)呈阳性反应。结论 水源水和氯化消毒饮用水都能诱导动物细胞DNA损伤，说明水源水和氯化消毒饮用水里存在致突变物质，2者对人类健康都存在潜在的威胁，但经氯化消毒过后的饮用水其消毒产生的氯化副产物比水源水具有更强的致突变性。     

武汉市饮用水中有机提取物对HepG2细胞DNA的损伤作用

目的研究武汉市生活饮用水中有机提取物对人肝肿瘤HepG2细胞DNA损伤作用。方法用XAD-2/8复合树脂(XAD-2和XAD-8树脂等体积混合)等比富集武汉市生活饮用水中有机污染物,应用慧星试验检测有机提取物的遗传毒性。结果该市不同水源、不同水文期下饮用水中有机提取物对HepG2细胞均产生不同程度的DNA损伤作用。同一水文期不同水源比较,在剂量10和30ml/ml下,汉江水源末梢水有机提取物致DNA损伤程度大于长江水源(P0.05);同一水源不同水文期时比较,在剂量10和30ml/ml下,枯水期有机提取物致DNA损伤程度大于丰水期(P0.05)。结论武汉市主要水源汉江和长江的氯化饮用水有机提取物对HepG2细胞DNA均有损伤作用,损伤作用的严重程度从大到小为汉江水长江水,枯水期丰水期。     

饮水氯化消毒副产物的氯乙酸类化合物的DNA损伤效应

目的研究二氯乙酸(DCA)和三氯乙酸(TCA)的DNA损伤效应.方法分别以10、20、40μg/ml DCA和10、20、40、80 μg/ml TCA染毒V79细胞和昆明种小鼠肝原代细胞,染毒1 h后进行彗星试验.电泳结束后,溴化乙啶(EB)染色,在荧光显微镜下观察、计数拖尾细胞的尾长.结果DCA在10～40 μg/ml、TCA在10～80 μg/ml时,各试验组V79细胞的平均尾长均大于阴性对照组尾长,差异均有统计学意义(均P＜0.01).DCA为20～80μg/ml、TCA为10～80μg/ml时,各试验组肝原代细胞的平均尾长均大于阴性对照组尾长,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论DCA和TCA可以造成哺乳动物细胞DNA链断裂损伤,其致癌作用可能通过损伤DNA引发,均可能属遗传毒性致癌物.     

某鱼塘养殖污水有机提取物的遗传毒性

目的评价养殖污水有机提取物的遗传毒性.方法健康昆明种小鼠,按体重随机分组,每组8只,雌雄各半.以养殖污水有机提取物原液、1/2原液、1/4原液、1/8原液对小鼠染毒,分别相当于25、12.5、6.25、3.125L/kg,以DMSO为阴性对照,环磷酰胺(40 mg/kg)为阳性对照,连续染毒3天.应用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验、小鼠外周血淋巴细胞彗星试验对养殖污水有机提取物进行遗传毒性检测.结果养殖污水有机提取物原液、1/2原液组小鼠PCE微核率均高于阴性对照组,差别均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);各剂量组小鼠外周血淋巴细胞拖尾率均高于阴性对照组(P＜0.01),原液、1/2原液组彗星平均尾长均高于阴性对照组,差别均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论养殖污水中含有机致突变物质,可能对人体健康产生潜在的危害.