生物人工肾小管治疗肾功能衰竭的研究进展

利用生物学与工程学原理制造出一种能模拟人体器官功能的装置，在这种装置中种植有成活的肾小管细胞并使其持续发挥相应的生效应，从而替代肾功能衰竭者丧失的肾小管功能。     

生物人工肾小管对多器官功能衰竭细胞因子及存活时间的影响

目的研究用细胞株(LLC-PK1)构建的生物人工肾小管装置(RAD)对多器官功能衰竭(MOF)猪白介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)α及存活时间的影响。方法ARF并MOF猪随机分为3组:(1)RAD组(A组,n=5):将RAD与血滤器相连,行连续静脉静脉血液滤过(CVVH)治疗24h;(2)假RAD组(B组,n=5):将RAD换为无细胞的假RAD,余与A组同;(3)未治疗组(C组,n=6)。观察血压、肝肾功能、血气、血IL-10、TNF-α(用特异性猪IL-10、TNF-α抗体检测)和生存时间。结果(1)A组治疗24h低血压状况显著改善;4～20h精神状态明显好转。(2)血IL-10(pg/ml)的峰值A组明显高于B、C组(241.40±86.64比106.30±9.69、102.59±10.21,P<0.05)。(3)血TNF-α(pg/ml)A组治疗后较治疗前明显降低(415.30±34.83比526.67±40.08,P<0.05);B、C两组无明显变化。(4)A组生存时间为(110.25±18.69)h,明显长于B组(81.20±11.76)h和C组(74.96±23.00)h(P<0.05),A组比B、C组分别延长了35.8%、47.1%。结论用RAD治疗明显改善了MOF猪低血压,升高血IL-10、降低TNF-α及延长存活时间。     

生物人工肾小管治疗肾功能衰竭的研究进展

利用生物学与工程学原理制造出一种能模拟人体器官功能的装置 ,在这种装置中种植有成活的肾小管细胞并使其持续发挥相应的生物效应 ,从而替代肾功能衰竭者丧失的肾小管功能。     

生物人工肾小管辅助装置体外构建及研究进展

近年来,随着血液净化技术的进步,肾衰竭患者的总体预后大为改善,但是血液净化技术仍局限于肾小球功能的替代.随着组织工程、生物材料技术、细胞技术的发展,生物人工肾小管辅助装置通过生物学与工程学的结合能够模拟肾小管的生理功能.本文介绍了生物人工肾小管辅助装置的构建及研究现状.     

生物人工肾小管对β_2微球蛋白重吸收功能的研究

目的：探讨应用人肾近曲小管上皮细胞株（HK2）构建的生物人工肾小管辅助装置（RAD）体外对β2微球蛋白（β2-MG）的清除作用及机制。方法：A组以HK2体外培养后植入F60血液滤过器内腔构建的RAD后用含β2-MG的置换液体外模拟液体滤过,B组以上述条件构建的RAD用不含β2-MG的置换液模拟液体滤过,C组用含β2-MG的置换液对无细胞植入的F60滤器模拟液体滤过,对各组测定不同时间点的β2-MG滤过率,并应用免疫荧光法观察滤过后A、B组HK2细胞Megalin与β2-MG的蛋白表达。结果：A组β2-MG滤过率在各时间点均明显高于C组（P〈0.05）;C组β2-MG滤过率在第4h较同组前期各时间点明显降低（P〈0.05）。免疫荧光显示A组Megalin与β2-MG同步表达,B组则仅见Megalin表达。结论：以HK2细胞构建的RAD可显著提高β2-MG的滤过率,其功能在4小时内可稳定维持,作用机制可能与Megalin的内吞作用相关。     

生物人工肾小管体外构建及对氨基酸、钠离子、肌酐转运功能的研究

目的探讨体外构建生物人工肾小管(RAD)的方法及5h内RAD在体外对肌酐(Cr)、葡萄糖(Glu)、钠离子(Na )和天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸的转运功能。方法采用猪肾近曲小管上皮细胞株(LLC-PK1)体外培养,然后植入FH66血液滤过器内腔继续培养两周构建RAD。测定RAD对Na 、Cr、葡萄糖及4种氨基酸的转运功能,并与未植入LLC-PK1的滤过系统做对照,并观察哇巴因、根皮苷对转运的特异性抑制作用。结果RAD组肌酐滤过率明显低于对照组(P<0.01)。RAD组Na 、葡萄糖、氨基酸的滤过率在哇巴因及根皮苷作用后明显低于对照组(P<0.01);去除药物抑制因素后,滤过率又能恢复,与对照组比较差异有显著性意义。结论体外构建的RAD具有对氨基酸、葡萄糖、钠离子、肌酐的选择性转运功能,且能在5h内稳定维持。     

应用MTS方法检测生物人工肾小管的细胞活性

目的:探讨应用MTS方法在生物人工肾小管(RAD)构建过程中测定血液滤器中肾小管上皮细胞活性的可行性.方法:采用人肾近曲小管上皮细胞株(HK2)体外培养,然后按不同浓度植入6孔板,应用MTS方法测定490 nm吸光度(OD)值,判断其测定值与细胞数量之间的关系.然后将培养的HK2细胞植入FH66血液滤过器内腔继续培养构建RAD,在培养过程中每隔3 d用MTS方法测定一次OD值,并与无细胞植入的空白滤器作对照.结果:HK2细胞数在105～106范围内,与OD值呈正相关关系,相关系数(r)为0.985,P<0.01.各时间点RAD组MTS测定均值与对照组相比均有统计学意义(P<0.01,n＝5).RAD组MTS测定值随培养时间的延长而增加,提示RAD在培养过程中细胞增殖.结论:MTS方法能较好地反映RAD内的细胞活性,能在RAD培养过程中作为一种简便有效的手段监测滤器内的细胞活性.     

连续性血液净化在肾综合征出血热患者中的治疗时机及预后分析

目的：探讨连续性血液净化（CBP）在肾综合征出血热（HFRS）患者中的治疗时机及预后。方法：回顾性分析我院近10年以来行连续性血液净化治疗的322例肾综合征出血热患者，按RIFLE标准分为AKIⅠ期、Ⅱ期和Ⅲ期，并对不同AKI分期患者行连续性静-静脉血液滤过（CVVH）治疗前和治疗24h后的APACHE Ⅱ评分、SOFA评分、平均动脉压、氧合指数指标、患者死亡率进行比较。结果：AKI Ⅱ期和AKI Ⅲ期较AKIⅠ期患者的机械通气率、缩血管药物使用率、肝脏衰竭率、ARDS发生率，全身炎症反应和中枢神经系统症状发生率都显著提高（P〈0.05）。与CVVH治疗前相比，CVVH治疗24h后平均动脉压和氧合指数均明显升高（P〈0.05），APACHE Ⅱ评分和SOFA评分在AKIⅠ期和Ⅱ期患者显著降低（P〈0.05），在AKI Ⅲ期患者中变化则差异无统计学意义（P〉0.05）。AKI Ⅲ期患者的医院死亡率显著高于AKIⅠ期和AKI Ⅱ期患者（P〈0.05），AKI Ⅰ期和AKI Ⅱ期患者死亡率则差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：对合并AKI、MODS的HFRS患者早期行CBP治疗可以改善患者预后。     

生物人工肾小管上皮种子细胞的建立

目的 利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。 方法 制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog，用rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞,然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的肾小管上皮细胞中的表达，再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对肾小管细胞HKC生长的影响。 结果 rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞后，RT-PCR检测表明hNanog基因能在肾小管上皮细胞中稳定表达；同时，小管上皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强（P < 0.05）。光镜下观察发现，转染的小管上皮细胞的形态无明显改变。 结论 利用hNanog基因提高生物人工肾小管种子细胞的增殖能力，可为生物人工肾的快速构建及应用提供一种新的方法。     

内皮素与急性肾小管坏死

内皮素是目前已知体内最强的缩血管物质，它有着广泛的生物学效应。肾脏既是其合成、代谢及排泄的器官，又是其作用的靶器官，它在调节肾脏血液循环及泌尿功能稳态中有重要作用。近年研究认为，内皮素在急性肾小管坏死时局部表达增加，通过其血液动力学效应及引起肾小管上皮细胞内钙超载，介导了急性肾小管坏死时肾功能衰退及肾小管损伤，参予了急性肾小管坏死的发病。     

急性肾衰竭伴多脏器功能障碍综合征临床特征分析

目的：了解急性肾衰竭（ARF）伴多脏器功能障碍综合征（MODS）发病情况及临床特征。方法：对2003年1月~2007年12月间住院的ARF患者进行回顾性分析。结果：伴MODS的ARF多见于老年,发病率占总ARF的62.3%,病死率45.5%;随着功能障碍脏器数量的增多,ARF病死率明显升高。引起伴MODS的ARF的原因中以感染性疾病、休克、严重创伤、外科大手术后（以胆道疾病、恶性肿瘤手术）多见。结论：MODS是影响疾病预后的重要因素,伴MODS的ARF多见于老年且发生比例高,病死率亦高,对于伴MODS的ARF患者应进行早期预防性及充分透析治疗,以改善ARF的预后。     

多器官功能障碍患者血sTNFRⅠ的动态变化

目的研究MODS患者sTNFR Ⅰ的变化,及其与预后的关系.方法应用ELISA方法,对2002年11月至2003年3月长海医院中心ICU符合MODS条件的24例病人进行不同时段血sTNFR Ⅰ、TNF-α的检测,并设立正常对照组.结果各实验组患者(MODS存活组、MODS死亡组)在入ICU当时至第3天sTNFR Ⅰ及TNF-α与正常对照组比较均有明显差异(P＜0.01),MODS存活组和MODS死亡组血sTNFR Ⅰ差异均明显(P＜0.01).第1天血sTNFR Ⅰ与模拟APACHEII评分在MODS存活组呈正相关(r=0.62,P＜0.01),MODS死亡组呈负相关(r=-0.65.P＜0.01).患者伤后第1天血sTNFR Ⅰ＞450pg/ml提示MODS发生,但预后尚好,灵敏度、特异度均高.结论监测重症患者血液内sTNFR Ⅰ的动态变化对患者伤情判断、预后具有重要临床意义.     

��֢���������׵ļ��������

重症急性胰腺炎 (ｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ,ＳＡＰ)是一种既有胰腺及胰周病变 ,又极易并发远隔脏器损害的急腹症。其临床过程凶险 ,治疗上需要多学科的专业理论和技术 ,为此已有许多国家和地区把ＳＡＰ病人早早地移送到多学科交叉的ＩＣＵ进行加强医疗。ＩＣＵ的主要任务是阻断病情加重因素和防治多脏器功能障碍综合征 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｏｒｇａｎｄｙｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＭＯＤＳ)。1　阻断病情加重因素1 1　胰腺微循环障碍的监测和治疗由于胰腺小叶的血供是由独支小叶内动脉供给 ,并且与相邻小…     

多器官功能障碍患者血s_TNFR I的动态变化

目的:研究 MODS 患者 sTNFR I 的变化,及其与预后的关系。方法:应用 ELISA 方法,对2002年11月至2003年3月长海医院中心 ICU 符合 MODS 条件的24例病人进行不同时段血 sTNFR I、TNF-α的检测,并设立正常对照组。结果:各实验组患者(MODS 存活组、MODS 死亡组)在入 ICU 当时至第3天 sTNFR I 及TNF-α与正常对照组比较均有明显差异(P<0.01),MODS 存活组和 MODS 死亡组血 sTNFR I 差异均明显(P<0.01)。第1天血 sTNFR I 与模拟 APACHEII 评分在 MODS 存活组呈正相关(r=0.62,P<0.01),MODS 死亡组呈负相关(r=-0.65,P<0.01)。患者伤后第1天血 sTNFR I>450pg/ml 提示 MODS 发生,但预后尚好,灵敏度、特异度均高。结论:监测重症患者血液内 sTNFR I 的动态变化对患者伤情判断、预后具有重要临床意义。     

连续性血液净化在合并急性肾损伤的MODS患者中的治疗时机探讨

目的：探讨连续性血液净化（CBP）在合并急性肾损伤（AKI）的多脏器功能障碍综合征（MODS）患者中治疗的时机。方法：回顾性研究2006年1月～2009年12月我院重症监护病房（ICU）及急诊重症监护病房（EICU）行CBP治疗合并AKI的MODS患者84例,记录CBP治疗时一般情况、急性生理学和慢性健康状态评分（APACHEⅡ）、序贯性器官衰竭评分（SOFA）、升压药及呼吸机的应用,记录开始治疗的不同原因（氮质血症、液体负荷、少尿、高血钾、酸中毒）。开始治疗时血尿素氮≤25mmol/L的患者为早期干预组,血尿素氮〉25mmol/L为晚期干预组,比较两组的各项临床参数及院内病死率。结果：84例患者存活33例,死亡51例,总死亡率为60.7%。开始CBP治疗原因以氮质血症及少尿居多,分别为95.2%和78.6%。早期干预组的病死率为32.0%,晚期干预组的病死率为72.9%（P=0.000）。结论：对合并AKI的MODS患者需把握CBP治疗时机,早期治疗可改善预后。     

无肝素血液透析救治急性肾功能衰竭的疗效观察

目的观察无肝素血液透析(血透)对有出血或有出血倾向的急性肾功能衰竭(ARF)患者，或合并多脏器功能障碍综合征(MODS)患者的临床疗效。方法对24例伴有出血或出血倾向的ARF或合并MODS的患者(观察组)，每天无肝素血透3h；另24例条件相似的患者用低分子肝素抗凝血透作为对照(对照组)。结果观察组患者BUN和SCr均有明显降低，电解质紊乱得到纠正，血流动力学稳定，临床症状能很快控制，出血症状明显好转，治疗有效率为91．7％，与对照组比较，疗效无显著性差异。结论对于高危出血ARF患者，宜选用每天无肝素血透治疗，可改善尿毒症症状、维持血流动力学稳定及避免出血的危险。     

暴发性急性胰腺炎的外科治疗策略探讨

目的:[探讨暴发性急性胰腺炎(FAP)的临床病程和外科治疗手段。方法:观察、分析我院外科从2000年1月至2003年12月采用手术或非手术疗法救治42例FAP的临床特点、病程演变趋势和治疗效果。对于经有效复苏治疗,病人情况不稳定、脏器功能无好转的病人,及时行外科手术等干预治疗。早期手术的主要目的是小网膜囊及腹膜后减压引流,建立有效的胰周灌洗引流系统。结果:42例FAP病人中存活了29例,存活率为69.0%(29/42);其中35例行手术治疗,存活27例,存活率为77.1%(27/35),7例行非手术治疗,存活2例,存活率为28.6%(2/7)。有37例出现二个或二个以上的脏器功能障碍,占88.1%;最常累及的是心血管(54.8%)、肺(76.2%)及肾脏(57.1%);腹腔间隔室综合征(ACS)在FAP中的的发生率也很高,占59.5%(25/42),存活14例,存活率为56%(14/25)。高龄(P﹤0.01)、APACHEII评分高(P﹤0.01)、SOFA评分高(P﹤0.05)、Balthazar评分高(P﹤0.01)都是FAP预后不良的指标。手术治疗有助于提高存活率(P﹤0.05)。结论:FAP病人需要在急性反应期内尽早手术治疗,结合重症加强治疗有利于提高救治成功率。合并腹腔间隔室综合征的病人预后更凶险,需要更积极的手术治疗和更细致严密的综合治疗。     

多脏器功能衰竭治疗1例报告

病例 患者,男,31岁,主因"呕吐、腹泻,伴无尿9 d"于2003年1月9日入院.     

一种新型生物人工肝系统对急性肝衰竭犬的治疗效果

我们在构建了 1种新型生物人工肝(BAL)系统并建立了 1种犬急性肝衰竭(ALF)新模型的基础上 ,应用新型BAL系统对ALF犬进行治疗 ,以评价新型BAL对ALF犬提供肝支持作用的有效性和安全性。一、材料和方法1.ALF犬模型的制作 :杂种犬 2 5条 ,体重 10～ 15kg ,雌雄不限。行门腔分流及胆总管结扎切断术 ,术前、术后 14d采血 ,全自动生化仪测定ALT、AKP、TBi,干式生化分析仪测定氨 (NH3 ) ,HPLC测定支链氨基酸 /芳香氨基酸比(BCAA/AAA) [1] 。2 .猪肝细胞分离和培养 :中国实验用小型猪 5头 ,体重 7～ 9kg ,雌雄不限。采用原位胶原酶…     

胚胎后肾间充质细胞移植对急性肾小管坏死肾功能的修复作用

目的：将体外培养的胚胎后肾间充质细胞,通过尾静脉注射移植给急性肾小管坏死的模型大鼠,观察是否改善对肾功能起修复作用。方法：（1）体外培养、扩增及生物学鉴定大鼠胚胎后肾间充质细胞株（RIMM-18）;（2）通过皮下注射总量为900mg/kg庆大霉素,建立急性肾小管坏死的大鼠模型;（3）除空白组外,将造模大鼠随机分为3组：①移植组：造模后通过尾静脉注射移植培养的RIMM-18细胞1～6×107/ml;②培基组：造模后通过尾静脉注射等量的无血清培养基;③急性肾小管坏死组（ATN组）：皮下注射总量为900mg/kg的庆大霉素×3d。（4）留取标本：分别于成模后1d、4d、1周、2周及4周杀鼠,留取尿和血标本;（5）生化指标检测：BUN、Scr、尿蛋白、尿肌酐、β2-MG、NAG和RBP等。结果：（1）RIMM-18细胞体外生长良好,保持间充质细胞特性。（2）皮下注射总量900mg/kg的庆大霉素3d成模。（3）移植组大鼠毛发有光泽、脱毛少,体重及尿量的恢复较快,死亡率下降。（4）各组大鼠生化指标比较：移植组尿蛋白于4d时达峰值,2周时下降接近正常;而培基组和ATN组于1周达峰值,持续至4周降至正常。移植组、培基组和ATN组于1周、2周时其值分别为（1.37±0.10）mg/L、（1.97±0.21）mg/L、（2.05±0.19）mg/L,（0.56±0.07）mg/L、（1.59±0.07）mg/L、（1.66±0.11）mg/L,移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。BUN、Scr、NAG、RBP及β2-MG变化规律类似。（5）肾脏病理：移植组4d时肾小管病变最显著,培基组和ATN组则于1周时肾小管病变最明显,恢复较移植组慢。肾小管Paller氏评分显示于1周、2周、4周时移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：胚胎后肾间充质细胞通过尾静脉移植能改善ATN的肾功能。