原花青素处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性

目的 观察原花青素处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性.方法 分别比较去细胞处理、原花青素去细胞联合处理、戊二醛处理和新鲜未处理带瓣牛颈静脉管道管壁、瓣膜的厚度、大体形态、组织学特点、含水量、热皱缩温度及断裂强度,并进行可溶性蛋白含量的测定.结果 原花青素去细胞联合处理组牛颈静脉带瓣管道较未处理组的管壁、瓣膜厚度[管壁:(0.81±0.17) mm比(0.79 ±0.14) mm,瓣膜:(0.23±0.07) mm比(0.21 ±0.05) mm,P＞0.05]、组织含水量[管壁:(85.30 ±2.13)％比(88.10±2.93)％,瓣膜:(87.30±2.67)％比(91.40±3.41)％,P＞0.05]无明显变化;管壁、瓣膜断裂强度[管壁:(10.32±1.07)N比(6.83±1.03)N,瓣膜:(7.49±0.81)N比(3.21 ±0.57)N,P＜0.05]和热皱缩温度[管壁:(85.30±1.21)℃比(70.40 ±0.32)℃,瓣膜:(87.30±2.67)℃比(70.70±0.61)℃,P＜0.05]明显提高,与戊二醛处理组比较差异无统计学意义(P＞0.05)原花青素去细胞联合处理组可溶性蛋白的含量较未处理组明显减少[管壁:(0.041 ±0.011)％比(0.178 ±0.037)％;瓣膜:(0.096±0.017)％比(0.311 ±0.063)％;P ＜0.05].结论 原花青素去细胞联合处理牛颈静脉带瓣管道材料具有较好的生物学特性.     

染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性

目的评价染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性。方法 2009年7月至2010年7月,第四军医大学西京医院采用不同方法处理牛颈静脉带瓣管道,选用年龄2~6岁、体重200~400 kg秦川黄牛的牛颈静脉带瓣管道40根,按随机数字表法分为4组,每组10根。戊二醛处理组（GA组）：用戊二醛处理牛颈静脉带瓣管道;去细胞处理组（DC组）：将牛颈静脉带瓣管道进行去细胞处理;去细胞＋染料介导光氧化联合处理组（DP组）：将牛颈静脉带瓣管道进行去细胞＋染料介导光氧化联合处理;对照组（CO组）：不作固定处理。比较4组牛颈静脉带瓣管道管壁的大体形态、组织学特点、瓣膜厚度、组织含水量、热皱缩温度和断裂强度,并测定可溶性蛋白含量。结果 DP组牛颈静脉带瓣管道的管壁和瓣膜厚度、组织含水量与CO组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）,但管壁和瓣膜厚度均小于GA组（管壁：0.8±0.1 mm vs.1.1±0.1 mm,瓣膜：0.2±0.1 mm vs.0.3±0.1 mm,P〈0.05）,管壁和瓣膜组织含水量均大于GA组（管壁：86.1%±2.2%vs.70.4%±2.8%,瓣膜：87.1%±2.5%vs.72.1%±3.1%,P〈0.05）;DP组管壁和瓣膜热皱缩温度、断裂强度与GA组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但管壁和瓣膜热皱缩温度（管壁：84.7±1.4℃vs.70.4±0.3℃,P〈0.05;瓣膜：85.7±1.5℃vs.70.7±0.6℃,P〈0.05）和断裂强度（管壁：10.4±1.1 N vs.6.8±1.0 N,P〈0.05;瓣膜：8.0±0.9 N vs.3.2±0.6 N,P〈0.05）大于CO组。结论去细胞＋染料介导光氧化联合处理牛颈静脉带瓣管道具有较好的生物学特性。     

去细胞牛颈静脉带瓣管道支架生物学与生物力学特性的初步研究

目的比较去细胞牛颈静脉带瓣管道支架与新鲜牛颈静脉组织的生物学和生物力学特性。方法取新鲜牛颈静脉48条,采用随机数字表法分为对照组和实验组,每组24条。对照组为新鲜牛颈静脉组织和实验组为去细胞牛颈静脉组织,采用脱氧胆酸钠+Triton-X-100方法去除瓣膜及血管壁细胞成分。检测两组瓣膜及血管壁的组织厚度、吸水率、保水率、断裂强度及组织伸长率。结果实验组瓣膜及血管壁中内皮细胞、成纤维细胞去除完全,无细胞核碎片;瓣膜及血管壁胶原纤维和弹力纤维呈波浪状排列、整齐,结构完整;瓣膜、血管壁的基因组脱氧核糖核酸含量分别较对照组下降97.58%和97.25%。实验组瓣膜及血管壁的厚度、吸水率、保水率较对照组均轻度增加,但差别无统计学意义(P>0.05)。两组瓣膜及血管壁的断裂强度及组织伸长率差别无统计学意义(P>0.05)。结论去细胞牛颈静脉带瓣管道支架的生物学和生物力学特性稳定,为种植受者细胞的组织工程右心带瓣管道研制提供了可靠的天然纤维支架材料。     

可降解生物材料人工胸壁重建犬胸壁缺损的实验研究

目的采用甲壳素短纤维增强聚己内酯(PCL)制备的人工胸壁,构建犬胸壁缺损与重建动物模型,探讨可降解生物材料人工胸壁重建胸壁缺损的可行性。方法实验犬8只,建立面积10cm×10cm的犬胸壁缺损动物模型,用甲壳素短纤维增强PCL板修复胸壁骨性缺损,通过X线、胸部CT及组织学动态观察人工胸壁的植入状况及胸壁组织的再生过程。结果所有实验犬无手术死亡和围手术期死亡,无胸壁塌陷及反常呼吸,无感染,无严重并发症。人工胸壁材料与周围胸壁肋骨及肌肉组织结合好,界面良好,固定牢靠。术后6个月甲壳素短纤维增强PCL板被纤维组织包裹。结论甲壳素纤维增强聚己内酯复合材料具有良好的生物相容性、可降解性和适宜的力学强度,能够对胸壁提供有效的支撑作用,易塑形和任意修剪,可透过X线,是一种很有前景的胸壁缺损修复材料。     

带瓣牛颈静脉作为右室肺动脉连接管道的研究

许多心脏疾病，如法洛四联症、肺动脉闭锁、右室双出口等以及主动脉病变行Ross手术者，均需重建右室肺动脉连接，常用的材料有自体心包、异种材料、同种异体主动脉带瓣管道、人工材料如Gore-tex片、人工合成的带瓣管道。这些材料均存在局限性，Gore-tex片一般不能重建瓣膜结构；自体心包构造带瓣的结构，效果不理想；由于右心系统压力低，血流速度慢，     

环氧交联去细胞牛颈静脉带瓣管道的血液相容性实验研究

目的评价环氧化合物（PC）交联去细胞牛颈静脉带瓣管道（BJVC）的血液相容性,探讨其在心血管外科和组织工程中的应用前景。方法选取本地健康杂种犬20只,采用随机数字表法分为实验组（n=10）和对照组（n=10）。实验组用PC交联的去细胞BJVC,对照组采用戊二醛（GA）交联的BJVC。运用兔血进行体外溶血实验计算溶血率,绘制时间-吸光度曲线;采用人全血测定D-二聚体和补体C3a des Arg水平评价其体外血液相容性。采用PC和GA制备的BJVC重建犬右心室-肺动脉连接,两组犬饲养10个月后,观察有无血栓形成评价其体内血液相容性。结果实验组溶血率（0.23%）低于对照组（0.35%）,符合医用生物材料的国家标准（〈5%）。实验组的凝血时间曲线较对照组平缓。实验组D-二聚体水平低于对照组,两组差异有统计学意义（0.10±0.01μg/ml vs.0.12±0.02μg/ml,t=3.277,P=0.004）,但均在正常范围内。实验组补体C3a des Arg水平低于对照组,两组差异有统计学意义（0.74±0.09μg/ml vs.1.02±0.19μg/ml,t=4.183,P=0.001）。犬右心室-肺动脉连接重建术后10个月每组各有8只生存,各有2只死于心室颤动。对照组3例有血栓形成,实验组无血栓形成。结论与GA交联相比,PC交联的BJVC体外、体内血液相容性均具优势,临床应用前景良好。     

脱细胞猪肺动脉带瓣管道的支架材料研究

目的研究心血管组织在经过适当脱细胞处理后的组织结构和生物学特性。方法对带瓣猪肺动脉管道进行脱细胞处理，所得组织和作为对照的新鲜天然组织分别进行HE染色、ETVG染色、免疫组化染色及扫描电镜检查，并测定各种大分子物质的含量；在小鼠皮下移植6周后测定组织钙含量及钙定位染色。结果脱细胞后的组织内未见细胞结构，基质结构基本保持。胶原和弹性蛋白含量增加。脱细胞后的组织在小鼠皮下移植后钙含量较天然组织明显下降。结论经过合适的脱细胞处理后，可以去除几乎所有的细胞成分，基本保留的基质结构，能显著减轻在异种移植时引起的钙化。     

国产牛颈静脉带瓣管道重建右室流出道临床应用

目的总结国产牛颈静脉带瓣管道在右室流出道重建手术中的应用和术后早期临床随访结果。方法2004年2月至2005年3月，14例病人（男6例，女8例；年龄5个月～22岁；体重8～40k）使用了完整牛颈静脉带瓣管道重建右室流出道。记录术后并发症，术后1个月用心脏超声对移植的牛颈静脉进行功能评价。结果住院期间均无栓塞等带瓣管道相关并发症发生，恢复顺利，出院。术后1个月超声检查示重建的右室流出道通畅，4例移植管道存在轻度瓣膜反流。结论国产牛颈静脉带瓣管道易于获取，型号较齐全，移植后早期临床疗效满意，可作为一种右室流出道重建的替代材料，但其中、远期疗效仍须持续随访观察。     

戊二醛结合肝素处理牛颈静脉带瓣管道防钙化性能研究

牛颈静脉带瓣管道(BJVC)是近年用于复杂先天性心脏病右室流出道重建的新型生物带瓣管道[1]。我们应用戊二醛(GA)结合肝素方法对BJVC进行处理,采用大鼠皮下包埋方法,观察该方法的抗钙化性能。一、材料与方法1.BJVC试片制备:自动物屠宰场获取8条新鲜牛颈静脉,浸入生理盐水。剔除外周筋膜组织,将牛颈静脉纵向剪开分成两半,分A、B两组。两组均在其瓣窦处,剪取包含一个瓣叶及管壁试片,大小为1cm×1cm。A组浸入1%鱼精蛋白液内1h蒸馏水冲洗。放入0.625%GA液中,固定时间为120mim,温度25℃。蒸馏水冲洗。将试片浸入1%肝素盐水液中(24h,45℃)…     

丁二醇改性戊二醛鞣制的牛颈静脉带瓣管道重建犬右室流出道

戊二醛固定的生物材料存在易钙化，具有细胞毒性作用及耐久性差等缺点，我们用2，3-丁二醇对戊二醛固定的牛颈静脉改性处理，将其连接于犬的右室-肺动脉间进行长期观察，旨在评价这种改性方法对血流动力学性能的影响。     

生物型人工食管的实验研究

目的 生物型人工食管重建食管，探索解决术后吻合口瘘及晚期狭窄的途径。方法 30只中国杂种犬经右侧开胸切除胸段食管，并以8cm长生物型人工食管进行重建，观察愈合过程。结果 30只犬存活率81．5％（22／27），围手术期存活率93．3％（28／30）。吻合口瘘发生率6．7％（2／30）。术后平均28．8d人工食管脱落，术后60－75d出现不同程度狭窄，13例狭窄经扩张而缓解，5例需放置支架。病理结果显示新生食管由纤维结缔组织构成，其内面覆盖鳞状上皮,上皮下可见血供。结论 生物型人工食管植入后，可短暂替代食管，并由机体修复为有上皮组织爬覆的纤维结缔组织新生食管，新生食管的后期狭窄经妥善的内科治疗可缓解，故人工食管可望成为有效的食管重建方式之一；解决植入长度及减轻狭窄是今后研究的重点。     

三维支架与肋软骨细胞体外及体内培养构建组织工程化气管

目的 探索建立适合替代气管的组织工程化气管模型.方法 分离2月龄新西兰兔肋软骨细胞并传代二次后,以5×107/ml浓度分别种于PLGA和涤纶支架,体外环境中培养2周.将支架-软骨细胞模型植入裸鼠脊柱两侧皮下,培养4、6、8周后取出,HE染色、PAS染色、扫描电镜等观察软骨组织发育、新生毛细血管、整体组织结构层次.结果 种植软骨细胞的支架经体外和体内培养,软骨细胞及基质生长分泌旺盛,支架与上皮间存在紧密的纤维连接,含有丰富的新生毛细血管.涤纶-软骨细胞模型和PLGA-软骨细胞模型可以形成完整的组织结构.结论 肋软骨细胞种植于PLGA和涤纶支架材料上,经体外及体内培养构建的组织工程化气管模型符合气管替代要求.

Abstract：

Objective To investigate the effect of a tissue engineered trachea for replacement fabricated using three dimensional scaffold and chondrocytes by in vitro and in vivo culturing. Methods Rib chondrocytes were isolated and expanded to two passages, then seeded in PLGA or Dacron scaffold at density of 5 × 107/ml. Cultured in vitro for two weeks, the chondrocytes-scaffold model was planted under dorsal skin between nude mice's spine. Histology of cartilage, neovascularization and organizational structure were observed with HE staining, PAS staining and electron microscopic scan were performed after 4,6,8 weeks in vivo. Results Organized structure were observed in both PLGA-chondrocyte model and dacron-chondrocyte model with cartilage formation, neovascularization and tight fibrous connective tissue between scaffold and skin after in vitro and in vivo culture. Conclusion Tissue engineered trachea fabricated using rib chondrocytes and PLGA or dacron scaffold with in vitro and in vivo culture meets the requirement of trachea replacement.     

用肺组织瓣重建胸段气管的动物实验与临床应用

目的 探讨用肺组织瓣重建胸段气管的可行性。方法 健康犬15只,切除其长6～8个气管软骨环、周径1／2以上的气管前、后壁,内置镍钛合金网架。游离邻近带血管蒂的肺组织瓣,缝合修补气管壁之缺损。分别于术后2～12个月处死动物,观察气管缺损部位的修复情况,并取材行光学显微镜及电镜检察。临床上用此方法治疗4例患者,其中1例右主支气管因瘢痕狭窄闭锁,1例主气管下段混合瘤恶变,2例左主支气管类癌。结果 实验犬呼吸道通畅、无狭窄及肉芽组织形成,用于修复的肺组织瓣和金属网架表面覆盖有较完整的假复层纤毛柱状上皮。临床治疗的4例患者,均顺利恢复正常呼吸功能,随访疗效稳定。结论 肺组织瓣是较理想的胸段气管重建材料。     

辛伐他汀间断给药对去卵巢大鼠成骨作用的初步实验观察

目的了解辛伐他汀间断给药对骨形成的作用。方法70只SD雌性大鼠,随机分为去卵巢手术组实验组,50只和假手术组对照组,20只,术后30d,两组各处死10只动物,以确立骨质疏松动物模型制备成功。假手术组另10只动物作为正常对照组A组。实验组40只动物重新分为4组,每组各10只动物单纯去卵巢组B组;雌激素组阳性对照组C组,给予尼尔雌醇0.1mg/kg·d;钙制剂组D组,给予碳酸钙10mg 维生素D32IU/kg·d辛伐他汀组E组,服用辛伐他汀5mg/kg·d,连续给药14d,停用28d再给药14d。于术后30d通过胃肠灌注给药,3个月后取材进行骨密度测量和骨计量学测定。结果E组动物服用辛伐他汀后,骨矿含量(46±11.34)mg和骨密度值(41.8±8.38)mg/cm2明显高于B组(34±5.16mg、31.6±7.04)mg/cm2和D组P<0.05但B、D两组比较差异无显著性意义P>0.05。骨组织计量学结果显示,E组骨体积(52.18%±3.42%)、类骨质表面(44.16%±3.99%)、骨重建时间(9.91±1.09d均高于B组P<0.01;同时骨吸收表面明显增加(30.62%±3.32%,P<0.01)。结论辛伐他汀间断给药具有刺激骨形成作用,但同时也有明显的促进骨质吸收作用。