GnRH/M2与mGM-CSF/βhCG融合蛋白致敏树突状细胞疫苗抗小鼠前列腺癌的作用

目的 探讨分别负载GnRH/M₂融合蛋白和m G M - C S F / β h C G融合蛋白的树突状细胞（dendritic cells, DCs）及与多西他赛（DTX）联合应用治疗小鼠前列腺癌的效果,及其抗肿瘤作用机制。方法 用GnRH/M₂融合蛋白与mGM-CSF/βhCG融合蛋白分别致敏DC,获得DC疫苗,流式细胞仪检测DC成熟度。测量各组小鼠肿瘤生长体积和重量、检测免疫小鼠脏器指数和脾细胞增殖,脾细胞对癌细胞特异性杀伤活性及小鼠外周血内细胞因子IFN-γ浓度,观察各组对荷瘤小鼠的抑瘤效果。结果 与0.9%氯化钠溶液对照组比较,单独用药对荷瘤小鼠肿瘤均具有抑制作用,差异有统计学意义（P<0.05）,联合应用组抗肿瘤效果均优于DC疫苗单独应用组（P<0.01）。结论 两种DC疫苗均能与多西他赛发挥协同抗前列腺癌作用,抑瘤效果显著增强。且联合应用也能有效抑制前列腺癌细胞RM-1荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

大鼠胰腺癌细胞裂解物修饰的树突状细胞疫苗在大鼠胰腺癌模型中的抗肿瘤作用

观察经大鼠胰腺癌细胞裂解物修饰的树突状细胞（DC）疫苗对大鼠胰腺癌皮下移植瘤的免疫治疗作用。方法：大鼠胰腺癌细胞注入SD大鼠胰腺被膜下,形成肿瘤,将肿瘤取出后切碎,植入同种大鼠的腋窝皮下,建立皮下移植瘤模型;将大鼠胰腺癌细胞反复冻融4次,提取出裂解物,与SD大鼠骨髓来源的DC共培养72 h,制成DC疫苗。根据DC致敏情况分为DC疫苗组、DC组、裂解物组与对照组,分别注入大鼠皮下移植瘤体内,每组5只。每两天测一次肿瘤长径与横径,共8次,观察大鼠的生存期。结果：随着时间延长,DC疫苗组肿瘤大小呈递减趋势;DC组、裂解物组、对照组肿瘤大小呈递增趋势;DC疫苗组与对照组之间肿瘤大小差异有统计学意义（P<0.05）;DC组、裂解物组与对照组之间肿瘤大小差异无统计学意义（P>0.05）;DC疫苗组与DC组、裂解物组之间肿瘤大小差异有统计学意义（P<0.05）;DC疫苗组大鼠生存期为（55.6±9.4）d,明显长于其他各组（P<0.01）。结论：大鼠胰腺癌细胞裂解物修饰的DC疫苗有可能诱导胰腺癌皮下移植瘤大鼠产生高效的免疫应答反应,发挥抗肿瘤作用。     

IL-18基因修饰增强肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞的抗肿瘤效应

目的:观察经肿瘤细胞裂解物致敏的白细胞介素18(IL-18)基因修饰的树突状细胞(DC)体内诱导的抗肿瘤免疫应答反应.方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞经IL-18重组腺病毒感染后(IL18-DC),再经Hepal-6肝癌细胞裂解物冲击致敏后通过皮下注射用于荷瘤小鼠的治疗.用ELISA检测细胞因子,4 h51Cr释放法检测NK细胞活性及CTL杀伤活性.结果:致敏IL18-DC组体内诱导NK细胞活性与未致敏IL18-DC组无明显差别(P＞0.05),但明显高于致敏DC组和DC组(均P＜0.01);致敏IL18-DC组体内诱导特异性CTL杀伤活性明显高于IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P＜0.01);致敏IL18-DC组免疫治疗作用明显优于未致敏IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P＜0.01).结论:肿瘤细胞裂解物致敏的IL-18基因修饰的DC疫苗进行体内免疫治疗,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肿瘤基因治疗开辟了新的途径.     

CpG ODN协同MAGE-3 抗原肽致敏DC疫苗对膀胱癌细胞BIU-87 的抑制作用

目的：探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸（CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN）免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene -3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法：采用Ficoll 法从健康志愿者HLA-A2 型外周血中分离单个核细胞,常规方法诱导培养制备成熟DC。MTT法检测不同方式（MAGE-3、CpG ODN、MAGE-3+CpG ODN 和无关抗原对照）致敏DC 对T 淋巴细胞增殖和CTL 对靶细胞BIU-87 的杀伤作用。CpGODN+MAGE-3 抗原肽致敏DC抗裸鼠BIU-87 膀胱癌细胞移植瘤治疗7、11 d 测定移植瘤质量变化,MTT和Western blotting 法分别检测移植瘤细胞的增殖水平及其凋亡蛋白表达的变化。结果：CpG ODN+MAGE-3 抗原肽致敏DC能够促进T淋巴细胞增殖（P<0.05）,并显著提高活化T淋巴细胞的CTL对靶细胞BIU-87 的杀伤活性（P<0.05）。体内实验表明,致敏DC治疗7、11 d 的各组移植瘤质量均明显降低（均P<0.05）,移植瘤的增殖能力下降也较明显（P<0.05）;与其他致敏DC方式相比较,尤以CpG ODN+MAGE-3 致敏DC组在治疗11 d 时的移植瘤质量降低非常显著（P<0.01）,且明显促进荷瘤小鼠脾脏单个核细胞的增殖能力（P<0.01）;该组在治疗第3 天起移植瘤组织Bcl-2 表达水平明显降低、Bax水平明显升高（均P<0.05 或P<0.01）。结论：CpG ODN能促进MAGE-3 抗原肽致敏DC对膀胱癌BIU-87 细胞的抑制作用,为膀胱癌DC疫苗的临床应用提供了实验依据。     

cEGFR-rFc融合DNA疫苗抗小鼠黑素移植瘤的效果

目的:构建cEGFR-rFc融合DNA疫苗, 观察其对小鼠黑素移植瘤的抑制作用.方法:以异种同源鸡EGFR(chicken EGFR,cEGFR)膜外部分与兔疫球蛋白IgG的Fc段(rabbit IgG Fc,rFc)为基础构建真核表达载体pVAX1/cEGFR-rFc,脂质体法转染黑素瘤B16 细胞,免疫荧光法检测融合蛋白在B16细胞中的表达;以融合DNA疫苗免疫C57BL/6J小鼠,Western blotting法检测融合蛋白在小鼠体内的稳定表达.疫苗免疫小鼠接种B16黑素瘤细胞,14 d后处死部分小鼠,取出瘤体称重,计算抑瘤率;同时观察小鼠荷瘤后的生存率;ELASIA法检测DNA疫苗免疫小鼠血清抗EGFR抗体滴度,流式细胞仪测定小鼠脾细胞淋巴细胞亚群.结果:成功构建融合DNA疫苗pVAX1/ cEGFR-rFc,重组载体转染B16细胞后能检测到融合蛋白显著表达,疫苗免疫小鼠后能检测融合蛋白体内稳定表达.融合DNA疫苗能够延缓小鼠黑素移植瘤的生长,抑瘤率为54%(P<0.01);能延长荷瘤小鼠的生存期(疫苗组小鼠接种瘤细胞后30 d的生存率为40%);融合DNA疫苗诱发小鼠产生高滴度抗EGFR抗体(效价1∶1 000)和T细胞免疫(疫苗组小鼠脾脏CD8 T淋巴细胞数目显著增加, P<0.01).结论:cEGFR-rFc融合DNA疫苗能产生有效对抗黑素瘤B16细胞的免疫效应.     

TNF-α诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡及其对小鼠B16细胞移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨TNF-α对小鼠B16黑色素瘤(MM)细胞凋亡的诱导及其对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.方法:用不同浓度的TNF-α直接作用于培养的小鼠B16黑色素瘤细胞,36h后,采用流式细胞仪(FCM)及原位末端标记法(TUNEL法)检测B16细胞的凋亡率.动物实验观察TNF-α小量瘤体内注射对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.结果:在1000、3000、5000及10000U/mL TNF-α作用下,B16细胞的凋亡指数均明显高于空白对照组(P＜0.01),随着TNF-α浓度增加,B16凋亡细胞数呈增加趋势.动物实验结果显示,TNF-α治疗3周后,治疗组荷瘤小鼠MM移植瘤的体积和重量明显低于对照组(P＜0.01).结论:TNF-α能够诱导小鼠B16黑色素瘤细胞发生凋亡,且小剂量TNF-α瘤体内注射能显著抑制小鼠移植性MM的生长.     

GM-CSF膜修饰B16.F10黑素瘤细胞疫苗对小鼠种植肿瘤的抑制作用

目的:研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)膜修饰小鼠黑素瘤B16.F10细胞制备的疫苗对小鼠种植肿瘤的抑制作用.方法:采用生物素-链亲合素-GM-CSF融合蛋白技术制备GM-CSF膜修饰B16.F10黑素瘤细胞疫苗,将BALB/c小鼠随机分为GM-CSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组、GM-CSF与B16.F10细胞混合疫苗组、B16.F10细胞疫苗组、GM-CSF组、生理盐水组.各组于第1天和第7天分别进行免疫接种,第14天皮下注射0.2 ml B16.F10细胞(1×106个细胞)进行攻击,观察各组小鼠无瘤率和生存期;攻击后24 d 用ELISA法检测小鼠脾细胞INF-γ分泌水平.结果:接受B16.F10细胞攻击后第60天和第90天,GM-CSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组小鼠均未成瘤,存活率为100%;GM-CSF与 B16.F10细胞混合组无瘤率分别50%和40%,存活率分别为70%和40%;B16.F10细胞疫苗组无瘤率均为20%,存活率分别为80%和20%;GM-CSF组和生理盐水组无瘤率为0,无小鼠存活.GM-CSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组的IFN-γ分泌量比其他组明显升高(P<0.01).结论:GM-CSF膜修饰B16.F10肿瘤细胞疫苗可以激发BALB/c小鼠特异性抗肿瘤免疫反应,有效防止B16.F10肿瘤细胞的攻击.     

小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株的建立与生物学特性分析

目的:构建表达香菇珊瑚红色荧光蛋白(discosomasp red fluorescent protein,DsRed)的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株,并检测其生物学特性.方法:用GenEscortTMⅡ转染试剂将pDsRed质粒导入小鼠黑色素瘤B16F10细胞,G418加压培养联合极限稀释法建立稳定、高水平表达DsRed的单克隆细胞系.FCM检测B16F10和B16F10-Red细胞的细胞周期.比较B16F10-Red和B16F10细胞的克隆球形成能力和小鼠体内致瘤能力.结果:稳定表达DsRed的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株基本保持了其亲代细胞的特征,能在C57BL/6小鼠腹部皮下形成肿瘤并继续生长和转移.结论:B16F10-Red细胞株构建成功,其移植瘤模型成瘤率和转移情况同B16F10肿瘤相比无明显差别.     

肺癌细胞致敏树突状细胞疫苗的体内外抗肿瘤作用

目的:研究以NCI-H460肺癌细胞致敏的树突状细胞(Dendritic cells,DCs)疫苗的抗肿瘤作用。方法:将IL-18基因转染的NCI-H460细胞及未转染NCI-H460细胞与DC融合作为转染融合DC组及融合DC组疫苗,以NCI-H460细胞RNA冲击的DC为冲击DC组疫苗,以未冲击的DC为DC组疫苗。以MTT法检测4组DC疫苗刺激T细胞增殖的作用,用ELISA法测定DC疫苗上清液中IL-12的含量,用LDH法测定DC疫苗对NCI-H460细胞的杀伤作用。裸鼠皮下接种NCI-H460细胞及DC疫苗,观察成瘤时间及裸鼠存活情况;荷瘤裸鼠瘤内注射DC疫苗,比较肿瘤体积。结果:4组DC疫苗均能刺激T细胞增殖,刺激作用强度为转染融合DC组>融合DC组>冲击DC组>DC组;4组均能分泌IL-12,转染融合DC组IL-12的分泌量高于融合DC组,冲击DC组高于DC组;转染融合、融合、冲击DC和DC组疫苗对NCI-H460细胞的杀伤率分别为79.73%、50.68%、35.81%及4.05%。转染融合组裸鼠移植瘤成瘤时间[(12.82±2.85)d]长于冲击DC组[(8.52±1.97)d](P<0.05)和DC组[(8.33±1.63)d](P<0.01);移植瘤内注射疫苗后的肿瘤体积比较,转染融合组<融合组<冲击DC组相似文献   

磷酸钙纳米颗粒修饰的甲胎蛋白和树突状细胞疫苗对小鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的 探讨转染小鼠带有信号肽的AFP_1 cDNA和去掉信号肽的AFP_2 cDNA树突状细胞(DC)在体外的免疫活性,以及其对Balb/c小鼠皮下移植瘤的抑制作用.方法 应用磷酸钙纳米颗粒将带有信号肽的AFP_1 cDNA和去掉信号肽的AFP_2 cDNA 真核表达载体pcDNA3.1转染DC,将DC疫苗与同源小鼠脾淋巴细胞混合培养,采用酶联免疫吸附(ELISA)法,检测上清液中干扰素γ(IFN-γ)的表达情况.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,检测AFP_1/DC和AFP_2/DC刺激同基因小鼠脾淋巴细胞增殖能力及诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤能力.观察AFP_1/DC和AFP_2/DC对Balb/c小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用.结果 AFP_2/DC能明显促进脾淋巴细胞增殖并提高CTL的特异性杀伤作用.AFP_1/DC和AFP_2/DC瘤内注射均可显著抑制肝癌移植瘤的生长,但AFP_2/DC的抑制作用更明显,治疗2周后,AFP_2/DC组小鼠肿瘤体积为(726.7±298.2)mm3,明显小于AFP_1/DC组[(1486.2±457.2)mm~3]和空质粒对照组[(2137.2±547.2)mm~3,P<0.05].AFP_2/DC组和AFP_1/DC组的抑瘤率分别达79.2%和39.7%,而空质粒对照组和空白对照组的抑瘤率为0.AFP_2/DC组和AFP_1/DC 组小鼠的生存时间分别为(58.5±4.2)d和(45.2±4.8)d,较空质粒对照组[(30.6±6.2)d]显著延长(P<0.05).结论 AFP_2/DC 疫苗在体外能够诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫效应,在体内具有抑制Balb/c小鼠皮下移植瘤生长的作用.     

肿瘤特异性个体化多靶点DC-CIK 治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效与安全性

目的：评价肿瘤特异性个体化多靶点树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床疗效和安全性。方法：回顾性分析2019 年10 月1日至2022 年10 月31 日东部战区总医院生物治疗科行肿瘤特异性个体化多靶点DC-CIK 治疗晚期NSCLC患者的临床资料。统计NSCLC患者的临床疗效和不良反应,分析治疗前后血清中肿瘤标志物的变化,FCM检测患者治疗前后的淋巴细胞亚群和各种细胞因子的表达情况,用质谱仪检测治疗前后靶点的变化。结果:共入组52 例晚期NSCLC 患者,其中女性21例、男性31例;年龄32~71岁,平均年龄（50.97±10.72）岁,中位年龄47.5岁。经DC-CIK 治疗后,CR 0例,PR 0例,SD 27 例,PD 25 例。与治疗前比较,DC-CIK 治疗后：（1）CEA和CYFRA21-1水平无显著改变,CA125 水平显著低于治疗前（P<0.01）;（2）治疗后患者淋巴细胞亚群无显著变化;（3）治疗后患者外周血IL-2、IL-4、IFN-γ 和TNF-α水平显著升高（均P<0.01）,IL-6、IL-10 及IL-17 水平无明显变化（;4）治疗后靶点数下降明显。DC-CIK 治疗过程中无严重不良反应发生。结论:晚期NSCLC患者行肿瘤特异性个体化多靶点自体DC-CIK 治疗是安全的,能使患者产生抗肿瘤免疫反应并得到一定的临床获益。     

Fludarabine and melphalan conditioning with tacrolimus as GVHD prophylaxis for allogeneic stem cell transplant recipients is an effective reduced-intensity combination regimen compared to the conventional regimen

Background  As a reduced-intensity stem-cell transplantation (RIST) regimen, the combination of fludarabine and melphalan (FM) with an appropriate immunosuppressant reduces nonrelapse mortality (NRM). Methods  We retrospectively compared the efficacy of a RIST regimen with FM with that of a conventional stem cell transplantation (CST) regimen. Eighty-two consecutive hematological patients who underwent allogeneic stem-cell transplantation (SCT) at our hospital were enrolled. Preparation for RIST consisted of 25 mg/m² fludarabine and melphalan 70 mg/m². The conventional regimen employed high-dose cyclophosphamide and total-body irradiation (12 Gy) or busulfan and high-dose cyclophosphamide. Graft-versus-host disease (GVHD) prophylaxis for RIST consisted of tacrolimus alone or in conjunction with short-term methotrexate for unrelated donors. Results  Of the 82 patients, 42 received the conventional CST regimen (median age, 35 years) and 40 received the RIST regimen (median age, 51 years). The probability of NRM was 17% (7/42) in the CST group and 8% (3/40) in the RIST group. Grade II to IV GVHD occurred in significantly more CST patients (38%) than RIST patients (28%). However, the overall survival was the same in the two groups (43%). Conclusion  The RIST regimen with FM incorporating tacrolimus and methotrexate demonstrated low TRM incidence and moderate control of GVHD and had efficacy comparable to that of the CST regimen, despite the advanced age of the RIST patient group.     

A method to generate mature dendritic cells from cryopreserved PBMC

To established methods for cryopresserving peripheral blood mononuclear cells(PBMCs)and producing DCs from cryopresserved PBMCs.Methods:Mature DCs were generated from cryopreserved PBMCs by using IL-4,GM-CSF,TNFα,IL-1β,IL-6,pgE2 and LPS.The phenotype of the resultant DCs was investigated by flow cytometry.The functions of the resultant DCs were verified by Elispot assay.Results:The resultant DCs expressed high levels of HLA ABC,HLA DR,costimulatory molecules and the DC maturation marker CD83.The mature DCs we generated from frozen PBMCs were able to prime CD8 T cells into long term IFN-γ producing peptide specific CTL.Conclusion:The DCs we developed from cryopreserved PBMC were fully mature and had the capability to stimulate immune reaction.Thus,we developed a method to generate functional mature DC from cryopreserved PBMC.     

造血干细胞移植后淋巴细胞增殖症患者单个核细胞来源DC负载EBV抗原肽制备DC-CIK

目的：以造血干细胞移植后并发淋巴细胞增殖症（posttransplant lympholiferative disorder, PTLD)患者外周血单核细胞培养诱导DC,负载抗原肽后制备DCCIK（cytokineinduced killer cell）,为探索新的PTLD治疗方法奠定基础。方法: 分离造血干细胞移植后EBV（EpsteinBarr virus)感染致PLTD患者外周血单个核细胞,贴壁细胞培养诱导DC,悬浮细胞诱导CIK;负载EBV抗原肽LMP2后建立DCCIK共培养体系。流式细胞仪分析共培养前后细胞的免疫表型,ELISA检测共培养前后细胞上清IFNγ的分泌水平,基因扫描仪分析T细胞受体(T cell receptor, TCR)β家族基因谱。结果: 成功制备负载EBV抗原肽的DCCIK,HLADR+CD86+DC细胞从诱导前的12.5%增加到91.17%;DCCIK共培养14 d后,两例患者的CIK数量分别增加了5.3和6.8倍;CD3+、CD8+、CD3+CD8+以及CD3+CD56+ 细胞比例在DCCIK共培养后均明显升高(均P<005)。抗原肽负载的DCCIK共培养体系中IFNγ的分泌水平明显高于未经抗原肽负载的DC组\[（1 332.6±92.38）pg/ml vs (693.42±62.41) pg/ml,P<0.01）\]。DCCIK培养后细胞的TCRβ家族基因在5.2家族出现单克隆表达峰。结论：EBV抗原肽负载后DC可诱导DCCIK共培养体系中CD3+CD8+以及CD3+CD56+ 细胞扩增,并分泌高水平IFNγ,为临床应用DCCIK对移植后EBV感染致PTLD患者进行过继性细胞免疫治疗提供实验基础。     

CLINICAL SIGNIFICANCES OF THE EXPRESSION OF METALLOTHIONEIN IN FIVE TYPES EPITHELIUM CELL CANCER

Objective： To study the expressions of （CSC）, bladder transitional cell cancer metallothionein and the significances in cervical squamous cell cancer （BTC）, esophageal squamous cell cancer （ESC）, gastral tubular adenocarcinoma （GC） and large intestinal tubular adenocarcinoma （LIC）. Methods： lmmunohistochemical method was used to examine the expression rates of MT in five types of cancer tissue. Results： The expression rates of MT were 75.00% （24/32） in ESC, 52.27% （46/88） in GTC, 59.46% （44/74） in LIC, 64.86% （48/74） in BTC and 58.57% （41/70） in CSC respectively. The positive rates of MT expression were higher in low differentiation and deep muscular group than those in medium or high differentiation and superficial muscular invasion group （P〈0.05）. Conclusion： The expression of MT is related to differentiation degree and invasion degree.     

A child case of CD34, CD33, HLA-DR, CD7, CD56 stem cell leukemia with thymic involvement

It has been reported that the CD56⁺/CD7⁺/CD3⁻ phenotype of natural killer (NK) cells develop from the CD34⁺/HLA-DR⁻ bone marrow (BM) mononuclear cell population in long-term BM culture (LTBMC). An HLA-DR⁻/CD33⁺/CD56⁺/CD16⁻ myeloid/natural killer cell acute leukemia has been described. We report here a 7-year-old boy who developed stem cell acute leukemia with superior vena cava syndrome secondary to thymic involvement. Surface marker analyses revealed that the leukemia cells showed CD34⁺/HLA-DR⁻/CD33⁻/CD7⁺/CD56⁺ phenotype. When stimulated with phorbol ester in vitro the leukemic cells morphologically differentiated to myeloid cells developing CD13, CD15 and CD56 antigens. Our results suggest that CD34⁺/HLA-DR⁻/CD7⁺/CD56⁺ stem cell leukemia may arise from transformation of a pluripotent precursor cell, which could differentiate to both myeloid and NK cell lineages.     

氨磷汀与峰龄多糖对人外周血粒-巨噬祖细胞的化疗保护作用

目的　观察氨磷汀 (amifostine ,化学代号 :WR 2 72 1)和峰龄多糖 (fenglingpolysaccharide ,FLPS)对人外周血粒 -巨噬祖细胞 (CFU GM )及HL60白血病细胞的化疗保护作用。方法　应用Ficoll分离单个核细胞 (MNC) ;甲基纤维素半固体培养法测定CFU GM集落 ;XTT法测定HL60细胞存活率 ;WR 2 72 1及FLPS处理的MNC ,与VP 16作用后 ,测定CFU GM集落产率 ,研究WR 2 72 1和FLPS对CFU GM的保护作用。结果　经WR 2 72 1和FLPS处理的MNC与VP 163 7℃作用 14h后 ,CFU GM集落产率均明显高于VP 16对照组 ,CFU GM集落数在VP 16对照组、空白对照组、WR 2 72 1 VP 16组、FLPS VP 16组和WR 2 72 1 FLPS VP 16组分别为每 1× 10 5个MNC 3 0 .9± 2 2 .5、83 .2± 43 .8、64 .6± 41.2、5 5 .3± 3 3 .5和 78.3± 48.2 ,与VP 16对照组相比 ,P值均 <0 .0 1;WR 2 72 1处理后的HL60细胞对VP 16的敏感性增强 ,IC50 由 5 2 .5 μg/ml下降为 40 .5 μg/ml ;VP 16对FLPS处理前后的HL60细胞的作用无明显改变。结论　WR 2 72 1和FLPS对人外周血CFU GM具有明显化疗保护作用。WR 2 72 1能增强HL60细胞对VP 16的敏感性。FLPS对HL60细胞的化疗损伤无保护作用     

Beneficial effect of KYP-2047, a propyl-oligopeptidase inhibitor,on oral squamous cell carcinoma

Oral squamous cell-carcinoma (OSCC) is a common cancer which arises from the alveolar ridge, buccal mucosa, and tongue. Among OSCC, the incidence of tongue squamous cell-carcinoma (TSCC) is growing all over the world. Oral carcinogenesis has been linked to genetic mutations, chromosomal aberrations and viral factors. Apoptosis and angiogenesis play a key role in the development of oral cancer. Therefore, it is very important discover new therapeutic strategies to counteract oral cancer progression. This study aimed to investigate the effect of KYP-2047 in an in vitro model of TSCC and in vivo CAL27-xenograft model. Our results demonstrated that KYP-2047 was able to reduce TSCCs cell viability at the concentrations of 50 μM and 100 μM. Additionally, KYP-2047 was able to increase Bax, Bad and caspase-3 expression, whereas Bcl-2 and p53 expression were reduced. Moreover, KYP-2047 significantly reduced vascular-endothelial-growth-factor (VEGF) and endothelial-nitric-oxide-synthase (eNOS) expression. In the vivo xenograft model, KYP-2047 at doses of 1 and 5 mg/kg significantly reduced tumor burden and tumor weight, decreasing also angiogenesis markers VEGF and eNOS. Moreover, KYP-2047 increased Bax and reduced Bcl2 expressions. Thus, KYP-2047 could represent a potential therapeutic treatment to counteract tongue oral-cancer growth, thanks its abilities to modulate angiogenesis and apoptosis pathways.     

树突细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞抗肝癌免疫活性的研究

目的　探讨树突细胞 (DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞 (TIL)体外对肝癌细胞的杀伤活性。方法　从肝癌患者外周血获取DC ,应用粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM -CSF)、白细胞介素 -4 (IL -4 )和肿瘤抗原激活DC ,然后用DC激活TIL ,观察TIL在体外对自体肝癌细胞和Hep3B细胞的杀伤活性。 结果　DC激活的TIL对自体肝癌细胞具有很强的杀伤活性 ,杀伤率为89 .39%± 3.0 5 %,明显高于未经DC激活的TIL、DC激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率(分别为 5 5 .2 3%± 1.5 3%、5 4.89%± 1.48%和 3.6 5 %± 0 .2 6 %)。而它们对Hep3B细胞的杀伤活性则相对较低。 结论　肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫活性。     

Hsa-miR-34a作为肾癌早期诊断指标的临床探讨

目的:探讨hsa-miR-34a作为肾癌早期诊断分子指标的可行性.方法:选择27例肾细胞癌患者的肿瘤组织及相匹配的正常组织进行高通量的real-time PCR检测鉴定,数据采用SPSS17.0作统计学处理,分析hsa-miR-34a在肾癌组织与相匹配的正常组织的表达差异性.并结合临床数据进行分析.结果:hsa-miR-34a在肾细胞癌组织中表达显著上调(P＜0.05).hsa-miR-34a的表达与肾癌患者的病理核分级及临床分期呈显著正相关.结论:hsa-miR-34a的表达异常可能与肿瘤侵袭性有关,提示hsa-miR-34a可能可以作为肾癌的早期诊断的重要分子指标.