茶多酚在树鼩肝癌形成中的化学预防作用

目的探讨茶多酚对黄曲霉素B1(AFB1)和乙型肝炎病毒(HBV)诱发树鼩肝细胞癌作用的影响.方法成年树鼩分成三组:A组(AFB1 HBV 茶多酚组)、B组(AFB1 HBV组)和C组(空白对照组),实验期间定期抽血检查HBV感染标志和进行剖腹手术取肝组织活检,观察各组肝癌发生率、肝癌出现时间、HBV感染持续时间,并采用免疫组化方法检测肝癌形成过程中p53、bcl-2、bax、survivin、GSTA1、SOD1、IL-2和SCF等蛋白在各组各时段的表达情况.结果在实验第90、105、120、135、150、165周各个时段中,A组的肝癌发生率均低于B组;A组首例肝癌出现时间及肝癌平均出现时间均晚于B组;A组HBV感染标志(HBsAg,HBeAg和HBcAb)的平均持续时间短于B组;在诱癌中期(实验第60周)及肝癌组织内突变型p53、凋亡抑制基因bcl 2和survivin蛋白的表达率均为A组低于B组.但上述差异在统计学上大部分无显著性.结论茶多酚对黄曲霉毒素B1和HBV诱发树鼩肝癌有一定程度的保护作用;可以促进树鼩体内的HBV感染标志的消除.茶多酚可能是通过促进终致癌物的解毒、抗氧化作用、提高免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡等途径起到预防树鼩肝癌的作用.     

HBV和AFB1在树鼩肝癌发生中的作用

目的 :探讨乙肝病毒 (HBV)和黄曲霉毒素B1(AFB1)在肝癌形成中的作用及机理。方法 :用免疫组化、原位杂文及印迹杂交检测树鼠句肝和肿瘤组织。结果 :两次实验中 ,感染HBV又摄入AFB1的A组树鼠句肝细胞癌(HCC)发生率分别为 5 2 94%和 6 6 7% ;单纯感染HBV的B组分别为 11 1%和 0 ;只摄入AFB1的C组分别为 12 5 %和 30 % ;空白对照组D均无HCC发生。A组HCC的发生率均显著高于各组 (P <0 0 5 )。癌前病变r GT灶的个数及面积也如此。IGF Ⅱ的过表达与HCC发生密切有关 ;HBV和AFB1可协同激活ras基因 ;c myc主要参与HCC的演进 ,CDK4参与了HCC的发生和演进过程。这两种基因的改变与HBV感染有关。结论 :HBV能诱发肝癌前病变和肝癌 ,并与AFB1有协同致肝癌作用。在树鼠句肝癌形成过程有多种基因的改变     

用原位杂交对树鼩肝组织乙型肝炎病毒DNA定位及其与黄曲霉毒素B_1在肝癌发生中的作用

用生物素标记的HBV DNA探针对经83～158周实验的55只树鼩肝组织的福尔马林固定、石蜡包埋的切片进行原位分子杂交研究。在45只接种过人HBV的树鼩中,有30只在肝细胞检出HBV DNA。这55只树鼩,有41只摄入了AFB_1,其中肝细胞HBV DNA阳性的A组22只,有10只发生了HCC;19只HBVDNA阴性的B组,只发生2例HCC,两组差别显著(P<0.05)。未接触过AFB_1的14只树鼩中,肝细胞HBVDNA阳性的8只(C组),发生1例HCC;而HBV DNA阴性的6只(D组)无HCC发生。提示HBV和AFB_1在诱发树鼩HCC中起协同作用;并支持HBV感染与HCC存在病因学关系的观点。该实验HBV DNA阳性物质主要分布于癌外肝细胞胞浆内,少数位于肝细胞核。癌组织内HBV DNA阳性率低于癌外肝组织。与在人肝癌研究的结果一致。表明树鼩是研究HBV致癌分子机理的较好的模型。     

茶多酚在树肝癌形成中的化学预防作用

目的　探讨茶多酚对黄曲霉素B1(AFB1)和乙型肝炎病毒(HBV)诱发树肝细胞癌作用的影响。方法　成年树分成三组:A组(AFB1+HBV+茶多酚组)、B组(AFB1+HBV组)和C组(空白对照组),实验期间定期抽血检查HBV感染标志和进行剖腹手术取肝组织活检,观察各组肝癌发生率、肝癌出现时间、HBV感染持续时间,并采用免疫组化方法检测肝癌形成过程中p53、bcl- 2、bax、survivin、GSTA1、SOD1、IL -2和SCF等蛋白在各组各时段的表达情况。结果　在实验第90、105、120、135、150、165周各个时段中,A组的肝癌发生率均低于B组;A组首例肝癌出现时间及肝癌平均出现时间均晚于B组;A组HBV感染标志(HBsAg,HBeAg和HBcAb)的平均持续时间短于B组;在诱癌中期(实验第60 周)及肝癌组织内突变型p53、凋亡抑制基因bcl -2和survivin蛋白的表达率均为A组低于B组。但上述差异在统计学上大部分无显著性。结论　茶多酚对黄曲霉毒素B1和HBV诱发树肝癌有一定程度的保护作用;可以促进树体内的HBV感染标志的消除。茶多酚可能是通过促进终致癌物的解毒、抗氧化作用、提高免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡等途径起到预防树肝癌的作用。     

广西黄曲霉毒素B1高污染区210人CYP3A7基因多态性检测

背景与目的:了解广西黄曲霉毒素B1(AFB1)高污染区人群细胞色素P450 3A7(CYP3A7)基因的多态性,及其基因型与肝细胞癌易感性之间的关系.材料与方法:选取黄曲霉毒素B1高污染区人群210例,其中肝细胞性肝癌患者97例,设为肝细胞性肝癌组(HCC组);HBV阳性而无其它疾病者38例,设为HBV阳性组;HBV阴性且无疾病者75例,设为HBV阴性组.取各组对象抗凝全血标本用酚-氯仿法提取DNA进行PCR扩增,并用限制性片段长度多态性检测CYP3A7*IA和CYP3A7*1C等位基因.结果:所检测的210份样本CYP3A7均为*1A/*1A型,未检测到*1C等位基因.结论:未检测到CYP3A7高表达*1C等位基因,推测CYP3A7在AFB1诱发的HCC发生中所起的作用小.     

不同因素诱发的树齮肝癌组织的基因表达差异

背景与目的：以往用基因芯片技术筛选肝癌相关基因的研究一般以癌旁组织作为对照与肝癌组织比较,但肝癌的癌旁组织常含有肝炎、肝硬化、增生结节等病变。为了探讨肝癌发生的分子机制及有关的基因改变,本研究用树鼩动物模型对病因不完全相同的两组动物的肝癌和其自身的癌发生前活检肝组织进行基因表达水平的比较。方法：实验树鼩分两组,黄曲霉紊B1(aflatoxin B1,AFBl)组单纯喂AFBl,HBV AFBl组先感染人乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV),然后喂AFB1。实验期间定期抽血检查HBV感染标志,并剖腹取肝组织活检。动物出现肝癌后,两组各取2例肝癌组织及其冷冻保存的癌发生前活检肝组织,用cDNA微阵列技术检测、比较各例肝癌组织和其相应癌发生前活检肝组织的基因表达水平,分析不同病因的两组肝癌组织的差异表达基因的异同。结果：肝癌发生率在AFB1组和HBV AFB1组分别为73．3％和77．8％。两组肝癌组织都有较大量的基因发生表达水平的改变,但在AFB1组以上调改变为主,在HBV AFB1组以下调改变为主。在受测的588个(16个功能组)已知与人类肿瘤有关的基因中,两组有相同改变的基因共11个,它们主要分布在3个功能基因组,即凋亡相关蛋白组,DNA合成、修复和重组蛋白组以及生长因子、细胞因子和趋化因子组。结论：HBV对单纯AFB1引起的基因表达改变有一定影响。     

乙型肝炎病毒与黄曲霉毒素B_1在树鼩肝癌癌前病变发生的作用

流行病学资料表明,AFB_1、HHBV感染及饮用污染水,有协同致肝癌作用。虽然已有人对感染了土拨鼠肝炎病毒(WHV)的土拨鼠进行长期观察,证实WHV感染与土拨鼠肝癌的发生有密切关系,但尚未见用酶组织化学方法对AFB_1及HBV在肝细胞癌前病变过程中作用的研究报道。本研究用能感染HHBV的最低等的灵长类树鼩进行实验,用酶组织化学方法,以被普遍认为是肝细胞癌前病变的γ-谷氨酰转肽酶阳性肝细胞增生灶(γ-GT灶)为观察指标,研究HHBV感染在AFB_1致树鼩肝癌过程中的生物学作用。     

树鼩肝癌形成过程中p53和Bax的蛋白表达及其二者间的关系

目的:动态研究在树鼩肝癌形成过程中p53和Bax的蛋白表达以及它们之间的关系.方法:利用免疫组织化学S-P法,对实验组35例树鼩肝癌形成过程第30周、60周的肝癌组织及13例同期的空白对照组树鼩肝活检组织,进行p53、Bax蛋白的检测.结果:p53、Bax基因在树鼩HCC形成过程中,它们的表达均呈递增趋势.结论:p53、Bax基因的表达无明显依存关系.动态观察Bax的表达对预测肝癌有一定作用.     

广西乙肝病毒/黄曲霉毒素B1双暴露人肝细胞癌中PTEN mRNA表达及突变的初步研究

目的探讨乙肝病毒/黄曲霉毒素B1双暴露相关肝细胞性肝癌(HCC)中PTEN基因的突变特点及其mRNA的表达水平。方法 108例HCC来自广西不同地区样本,按照乙肝病毒与黄曲霉毒素的暴露情况,分为4个亚组:A组:HBV(+)/AFB1-DNA(+),共48例;B组:HBV(+)/AFB1-DNA(-),共27例;C组:HBV(-)/AFB1-DNA(+),共19例;D组:HBV(-)/AFB1-DNA(-),共14例。采用PCR联合基因直接测序法,检测108例肝癌组织中PTEN基因第4、5、8外显子的突变情况。同时采用RT-PCR法检测其基因mRNA的表达状况。结果①PTEN基因第4、5、8外显子测序结果未发现发生在外显子上的突变。但在第4外显子与第4内含子交界处有61例发生大片段的缺失,缺失率为56.4%。②PTEN缺失率在A、B、C、D组中分别为60.4%、62.9%、47.3%和46.6%,其差异在4个亚组间均无统计学意义(P>0.05)。③PTEN mRNA在4个亚组中的表达半定量灰度值分别为:A组:0.54±0.13;B组:0.59±0.16;C组:0.97±0.16;D组:0.92±0.13。其中,A、B组分别与C、D组相比,其差异均具有统计学意义(PAC=0.002,PAD=0.032,PBC=0.000,PBD=0.011)。结论在广西乙型肝炎病毒/黄曲霉毒素B1的双暴露肝细胞癌中,PTEN mRNA的表达下调是一个常见的分子生物学事件,PTEN mRNA表达下调可能主要与HBV感染有关。AFB1对PTEN mRNA的表达下调可能有协同作用。     

广西黄曲霉毒素高危区肝癌p53基因序列改变

目的　检测广西肝细胞癌 p53基因的序列改变。方法　 4 0例肝细胞性肝癌 ( HCC)分两组 :一组 2 6例 ,来自广西扶绥地区已知 HCC、黄曲霉毒素 ( AFB1)和乙型肝炎病毒 ( HBV)高危区 ;对照组 14例 ,来自广西玉林地区 ,该地 HCC和 HBV高危 ,但 AFB1可能低 ,因居民以低 AFB1的大米为主食。第七外显子直接测序。 p53蛋白和 HBs Ag免疫染色。结果　扶绥组 16/ 2 6例 ,占 61.5% ,2 4 9密码子第三号位 G→ T颠换 ,形成公认的突变热点。玉林组仅在贵港地区 p53突变集中在热点 ,为 3/ 5例 ,其他地区第七外显子突变点则分散在不同位点。全组 38/ 4 0例 HBs Ag( ) ,占 95%。结论　除启东和南部非洲外 ,世界上第三个 AFB1高危区肝癌 p53基因出现特异突变位点。已知肝癌 p53基因突变发生在这热点则提示该地 AFB1高污染。 HBV常伴随这些基因改变。     

B cell and B cell-related pathways for novel cancer treatments

B cells are recognized as the main effector cells of humoral immunity which suppress tumor progression by secreting immunoglobulins, promoting T cell response, and killing cancer cells directly. Given these properties, their anti-tumor immune response in the tumor micro-environment (TME) is of great interest. Although T cell-related immune responses have become a therapeutic target with the introduction of immune checkpoint inhibitors, not all patients benefit from these treatments. B cell and B cell-related pathways (CCL19, −21/CCR7 axis and CXCL13/CXCR5 axis) play key roles in activating immune response through humoral immunity and local immune activation via tertiary lymphoid structure (TLS) formation. However they have some protumorigenic works in the TME. Thus, a better understanding of B cell and B cell-related pathways is necessary to develop effective cancer control. In this review, we summarize recent evidences regarding the roles of B cell and B cell-related pathways in the TME and immune response and discuss their potential roles for novel cancer treatment strategies.     

乙型肝炎病毒

乙型肝炎病毒研究现状 乙型肝炎病毒的特征 乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属成员的原型病毒,与其相似的病毒还存在于灵长类体内及土拨鼠、地松鼠体内。在各种鸟类或禽类中发现的嗜肝DNA病毒,是正嗜肝DNA病毒属的近亲,归于禽嗜肝DNA病毒属。     

MicroRNA expression distinguishes between germinal center B cell-like and activated B cell-like subtypes of diffuse large B cell lymphoma

Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is an aggressive malignancy that accounts for nearly 40% of all lymphoid tumors. This heterogeneous disease can be divided into germinal center B cell-like (GCB) and activated B cell-like (ABC) subtypes by gene expression and immunohistochemical profiling. Using microarray analysis on prototypic cell lines, we identified microRNAs (miR-155, miR-21 and miR-221) that were more highly expressed in ABC-type than GCB-type cell lines. These microRNAs were over-expressed in de novo DLBCL (n = 35), transformed DLBCL (n = 14) and follicular center lymphoma cases (n = 27) compared to normal B cells. Consistent with the cell line model, expression levels were higher in DLBCL cases with an ABC-type immunophenotype than those that were GCB-type (p < 0.05). Moreover, using multivariate analysis we found that expression of miR-21 was an independent prognostic indicator in de novo DLBCL (p < 0.05). Interestingly, expression levels of both miR-155 and miR-21 were also higher in nonmalignant ABC than in GCB cells. As we also demonstrate that expression of microRNAs can be measured reliably from routine paraffin-embedded biopsies of more than 8-years-old (p < 0.001), we suggest that microRNAs could be clinically useful molecular markers for DLBCL as well as other cancers.     

Expression of B cell activation antigens on normal and malignant B cells

In an attempt to relate the functional events of B cell activation with changes in cell surface molecules, we have used a panel of monoclonal antibodies directed against cell surface antigens expressed on activated but not resting B cells, to determine a sequence of activation antigen expression following anti-immunoglobulin stimulation. Within the first 24 hr of culture with anti-Ig, resting splenic B cells were induced to express B5 and interleukin-2 receptor (IL-2R) and subsequently express T9 and BB1 by 48 hr. Maximum antigen expression was seen by day 3 with the majority of cells expressing B5, IL-2R, T9, and BB1, and fewer numbers of cells expressing Blast-1 and Blast-2. By day 6, the expression of these antigens significantly decreased. Dual fluorochrome staining of anti-Ig activated B cells demonstrated heterogeneity of activation antigen expression, suggesting the existence of subpopulations of activated B cells. In an attempt to relate the non-Hodgkin's lymphomas (NHLs) to this sequence of activation, 69 tumor samples from patients with B cell NHLs were then examined for expression of these activation antigens. Histologically defined subgroups of B cell NHLs demonstrated differential expression of activation antigens with B5, BB1, and T9 exhibiting the widest distribution, whereas IL-2R, Blast-1, and Blast-2 demonstrated more limited expression. The finding that no B cell malignancy phenotypically resembles the small resting B lymphocyte coupled with the observation that virtually all B cell NHLs examined expressed activation antigens suggests that these tumors may be the neoplastic counterparts of subpopulations of activated B lymphocytes.     

HBV转基因小鼠的解毒活力变化的研究

ＡＦＢ１和ＨＢＶ是致肝癌的两个主要因素。研究表明ＡＦＢ１与ＨＢＶ有协同致肝癌作用，但其机理不明。方法利用ＨＢＶ转基因小鼠模型，分析小鼠肝组织的细胞色素Ｐ４５０酶的含量和活性，ＧＳＨ和ＧＳＴ的含量和活性，并测定ＨＢＶ转基因小鼠暴露于ＧＳＨ和ＧＳＴ的含量的含量和活性，并测定了ＨＢＶ转基因小鼠暴露于ＡＦＢ１后血清ＡＦＢ１后血清ＡＦＢ１－白蛋白加成物的含量，结果加成物的含量在ＨＢＶ转基因小鼠都较对照小鼠高     

胃癌MAGE-1基因启动子 B′B区去甲基化状态的研究

目的: 探讨胃癌组织中 MAGE-1基因启动子 B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系.方法: 取胃癌组织标本40例,另外取同患者相应的癌旁组织40例作为对照.采用分子生物学技术-甲基化敏感性内切酶酶切及 PCR扩增技术,研究了胃癌组织中MAGE-1启动子 B′B区的去甲基化状态.结果: 在所检测的胃癌组织标本中 MAGE-1基因启动子 B′B区去甲基化的发生率为25%(10/40).而在癌旁组织中发生率为0,两者发生率的差别具有显著的统计学意义(P＜0.01).在低分化腺癌中 MAGE-1基因的 B′B区去甲化发生率为50%(6/12),中分化腺癌中发生率为18.7%(3/16),高分化腺癌中发生率为8.3( 1/11).其发生率的差异有统计学意义(P<0.05).在早期胃癌组织中 B′B区的去甲基化的发生率为16.7%,在晚期胃癌组织中发生率为28.6%(P<0.05),差别有统计学意义.结论: 胃癌组织中 MAGE-1基因启动子的 B′B区存在去甲基化.该区的去甲基化发生率与胃癌组织的病理分级以及与临床分期有关.