抑制ERK增强白血病和卵巢癌耐药细胞系化疗敏感性

为了研究细胞外调节蛋白激酶(extracelluar regulated protein kinases，ERK)和端粒酶在白血病和卵巢癌细胞耐药中的作用，应用流式细胞术检测细胞凋亡率，应用端粒重复序列扩增法(TRAP)和生物发光分析法去除检测端粒酶活性，应用Weestern blot法检测磷酸化ERK1/2蛋白(ERK1和ERK2)表达水平。结果表明：ERK激酶1(MEK1)特异性抑制剂PD98059能增强HL-60／E6细胞对三尖杉酯碱(HRT)的敏感性，PD98059也能增强COCl／DDP细胞对顺铂(DDP)的敏感性。PD98059与化疗药物HRT和DDP均可以降低细胞内磷酸化ERK表达，抑制端粒酶活性，但PD98059与化疗药物的联合作用明显强于其各自的单独作用。结论：通过阻抑ERK通路，降低磷酸化ERK1/2蛋白表达水平，进而下调端粒酶活性，可以达到增强白血病和卵巢癌耐药细胞对HRT或DDP敏感性的目的。     

p53基因与卵巢癌耐药的关系

卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,迄今由于其缺乏完善的早期诊断方法,其死亡率居妇科恶性肿瘤的首位,成为妇科恶性肿瘤威胁最大的疾病。化疗是治疗卵巢癌的主要辅助手段,其机制主要是抑制肿瘤细胞生长和促进肿瘤细胞凋亡。但肿瘤细胞对化疗药物产生耐药严重制约了抗肿瘤药物效能的发挥,晚期病人的5年生存率为25%～30%,是卵巢癌治疗失败的主要原因之一。近年随着分子生物学及其研究方法的飞速发展,p53基因在卵巢癌研究中日趋深入,其结构改变及功能异常可能与卵巢癌耐药有关。本文就p53基因与卵巢癌耐药关系的研究现状作一扼要综述。     

鼻咽低分化鳞癌细胞X射线照射后多药耐药基因的表达及功能

目的：检测鼻咽癌CNE2细胞射线照射前后多药耐药基因（mdr1基因）及其编码产物P糖蛋白（P-glycoprotein，P-gP）的表达及其功能的变化。方法：利用RT-PCR、Westernblot和流式细胞仪检测CNE2细胞射线照射前后的mdr1基因和P-gp的表达及对柔红霉素的外排功能。结果：鼻咽癌CNE2细胞射线照射前mdr1基因、P-gp不表达；射线照射后较长时间内mdr1基因、P-gp均明显表达，对柔红霉素的摄取较射线照射前高。结论：鼻咽癌低分化鳞癌细胞CNE2射线照射后化疗敏感性增高，除了多药耐药机制外可能尚存在其他耐药机制。     

外泌体与卵巢癌耐药关系的研究进展

卵巢癌是女性生殖系统中恶性程度最高的肿瘤,目前化疗是其主要治疗方法之一,然而化疗药物的长期使用通常会引起卵巢癌的耐药性,从而导致治疗的失败。卵巢癌耐药机制及逆转耐药策略抑制是卵巢癌治疗研究的热点。外泌体是由细胞分泌的直径为40～100 nm的球形囊泡,其携带多种生物活性分子(如DNA、非编码RNA、蛋白质等)调控多种生理和病理活动。本文就外泌体与卵巢癌耐药的关系及其机制进行综述,以期为卵巢癌耐药的预防和治疗提供新思路。     

紫杉醇加洛铂联合化疗治疗卵巢癌的护理

目的探讨卵巢癌患者应用紫杉醇加洛铂联合化疗的最佳护理方法。方法对12例卵巢癌患者采用紫杉醇加洛铂进行治疗,化疗期间实施相应的护理措施包括加强心理护理、化疗用药护理、骨髓抑制护理及饮食护理等,观察其护理效果并总结其要点。结果12例卵巢癌患者除1例发生过敏性休克经抢救脱险停止化疗外,其余均顺利完成化疗计划,心理表现也正常。结论紫杉醇加洛铂联合化疗治疗卵巢癌患者,通过严格执行化疗计划,严密的病情观察,强化化疗护理,可以有效地预防和减轻毒性反应,保证化疗的顺利完成,取得了满意的治疗效果。     

上皮性卵巢癌组织中P73基因的表达及临床意义

目的：探讨上皮性卵巢癌中P73基因的表达和临床病理特征的关系,为卵巢癌的临床诊断及开展基因治疗提供实验依据.方法：采用EliVision plus免疫组化研究40例上皮性卵巢癌组织、15例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤组织中P73基因的表达.结果：P73基因在正常卵巢组织中阳性率为20%（3/15）,在良性上皮性卵巢肿瘤中阳性率为24%（6/25）,与上皮性卵巢癌中P73基因表达阳性率[80%（32/40）]比较差异有显著性（P＜0.05）;随着上皮性卵巢癌病理学分级及临床分期增高,P73基因表达率增高（P＜0.05）;但不同病理类型之间P73基因表达差异无显著性.结论：P73基因表达与上皮性卵巢癌的发生、发展及组织分化程度有关.P73基因在上皮性卵巢癌组织中表达增强,并随恶性程度增高而增强.     

紫杉醇加洛铂联合化疗治疗卵巢癌的护理

目的 探讨卵巢癌患者应用紫杉醇加洛铂联合化疗的最佳护理方法.方法 对12例卵巢癌患者采用紫杉醇加洛铂进行治疗,化疗期间实施相应的护理措施包括加强心理护理、化疗用药护理、骨髓抑制护理及饮食护理等,观察其护理效果并总结其要点.结果 12例卵巢癌患者除1例发生过敏性休克经抢救脱险停止化疗外,其余均顺利完成化疗计划,心理表现也正常.结论 紫杉醇加洛铂联合化疗治疗卵巢癌患者,通过严格执行化疗计划,严密的病情观察,强化化疗护理,可以有效地预防和减轻毒性反应,保证化疗的顺利完成,取得了满意的治疗效果.     

MDR1基因在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨多药耐药基因(MDR1)在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定了37例上皮性卵巢癌,32例卵巢上皮性良性肿瘤和30例正常卵巢组织中MDR1的表达,并分析其临床意义。结果:正常卵巢组织不表达MDR1基因,卵巢良性肿瘤组织MDR1基因表达率为15.6%,上皮性卵巢癌组织表达率为75.7%。上皮性卵巢癌组织中MDR1基因表达与卵巢良性肿瘤相比较,差异有统计学意义(P<0.01)。化疗无效者MDR1的阳性表达率是94.1%,明显高于化疗有效者的57.1%(P<0.05)。结论:MDR1在上皮性卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤,并与化疗疗效有关。     

miR-199在对顺铂敏感性不同的卵巢癌细胞株中的表达及其意义

目的探讨 miR-199在卵巢癌细胞株中的表达,寻找卵巢癌化疗敏感性的指标。方法组学分析找出在顺铂敏感性不同的卵巢癌细胞株,miR-199的表达量差异较为显著,qRT-PCR 和 western blot 方法检测瞬时转染 miR199 mimic ／antagomir 后的卵巢癌细胞株,P63表达水平发生显著变化。结果miR-199在对顺铂耐药的 ES-2细胞中表达水平高于在对顺铂耐药的 SKOV3细胞中的表达,miR-199的下游蛋白 P63的表达也有差异。结论miR-199与 P63在一定程度上可以预测卵巢癌顺铂化疗敏感性,miR-199可能是通过其下游靶基因 P63发挥其在卵巢癌顺铂化疗敏感性中的作用。     

Drug transporter expression profiling in chemoresistant variants of the A2780 ovarian cancer cell line

Ovarian cancer is characterized by the higher mortality among gynecological cancers. In results of MDR development during chemotherapy cancer cells become resistant to further treatment. Microarray techniques can provide information about MDR development at gene expression level. ABC and SLC transporters are most important proteins responsible for this phenomenon. In this study changes of ABC and SLC genes expression pattern in drugs resistant sublines of the A2780 ovarian cancer cell line were demonstrated. The cytostatic resistant sublines were generated by culture of A2780 cell line with an increasing concentration of the indicated drugs. As screening methods, we used Affymetrix U219 Human Genome microarrays. Independent t-tests were used to determinate statistical significances of results. Genes that expression levels were higher than assumed threshold (upregulated above threefold and downregulated under −3 fold) were visualized using scatter plot method, selected and listed in table. Between the ABC genes increased expression of seven genes and decreased expression of three genes were observed. Expression of two genes was increased or decreased depending on the cell line. We observed significant (more than tenfold) increase in expression of four ABC genes: ABCA8, ABCB1, ABCB4 and ABCG2 and decreased expression of ABCA3 gene. We also observed changes in expression of 32 SLC genes. Between them we observe increased expression of 17 genes and decreased expression of 15 genes. Expression of four genes was increased or decreased dependent on cell line. The expression of nine SLC genes increased or decreased very significantly (more than tenfold). Five genes were significantly upregulated: SLC2A9, SLC16A3, SLC16A14, SLC38A4 and SLC39A8. Four additional genes were significantly downregulated: SLC2A14, SLC6A15, SLC8A1 and SLC27A2. Expression profiles of these genes give strong arguments for assumption of correlation between expression of ABC and SLC genes and drug resistance phenomenon. Identifying correlations between specific drug transporters and cytostatic drug resistance will require further investigation.     

Microarray-based detection and expression analysis of ABC and SLC transporters in drug-resistant ovarian cancer cell lines

Multiple drug resistance of cancer cells is multifactorial. A microarray technique may provide information about new candidate genes playing a role in drug resistance. Drug membrane transporters from ABC and SLC families play a main role in this phenomenon. This study demonstrates alterations in ABC and SLC gene expression levels in methotrexate, cisplatin, doxorubicin, vincristine, topotecan and paclitaxel-resistant variant of W1 ovarian cancer cell line. Resistant W1 cell lines were derived by stepwise selection of cells in increasing concentration of drugs. Affymetrix GeneChip^® Human Genome U219 Array Strip was used for hybridizations. Statistical significance was determined by independent sample t-test. The genes having altered expression levels in drug-resistant sublines were selected and filtered by scater plot. Genes up/downregulated more than threefolds were selected and listed. Among ABC genes, seven were upregulated and three were downregulated. Three genes: ABCB1, ABCB4 and ABCG2 were upregulated very significantly (over tenfold). One ABCA8 was significantly downregulated. Among 38 SLC genes, 18 were upregulated, 16 were downregulated and four were up- or downregulated dependent on the cell line. Expression of 10 SLC genes was changed very significantly (over tenfold). Four genes were significantly increased: SLC6A1, SLC9A2, SLC12A1, SLC16A6 and six genes were significantly decreased: SLC2A14, SLC7A3, SLC7A8, SLC7A11, SLC16A14, SLC38A9. Based on the expression profiles, our results provide a preliminary insight into the relationship between drug resistance and expression of membrane transporters involved in drug resistance. Correlation of specific drug transporter with drug resistance requires further analysis.     

卵巢癌基因表达的cDNA微阵列研究

目的应用基因表达谱芯片研究人卵巢癌组织和正常卵巢组织中差异表达的基因,筛选出与卵巢癌发生发展相关的基因,并对这些基因的功能进行初步分析.方法采用cDNA芯片技术从有关癌基因和抑癌基因、细胞周期和细胞凋亡相关、DNA合成、转录和修复以及细胞信号传递等肿瘤相关的2304个基因中,分析研究卵巢癌基因表达谱,即寻找出不同于正常卵巢组织而只在卵巢癌实体瘤中上调或下调的特殊基因.结果与正常卵巢组织比较,卵巢浆液性囊腺癌组织表达有明显差异的基因92个,卵巢粘液性囊腺癌差异表达基因110个,卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌均呈差异表达的基因65个,卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌中不同的差异表达基因共有173个.结论与卵巢癌有关的基因涉及多种细胞生物学过程,说明卵巢癌的发生是一个多步骤、多基因调控的过程.基因芯片技术实现了基因分析的快速、高通量、微型化和自动化,它为同时分析几百个基因状况提供了一个有效的方法,所获得的差异基因表达谱为深入研究特异相关基因提供了参考.     

深部热疗联合化疗治疗晚期卵巢癌近期疗效临床观察

目的探讨深部热疗联合全身化疗治疗晚期卵巢癌的临床近期疗效与相关毒副反应。方法将73例晚期卵巢癌患者随机分为深部热疗联合全身化疗组(治疗组)36例和单纯全身化疗组(对照组)37例,均给予紫杉醇+顺铂/卡铂方案化疗,热疗为腹盆腔深部热疗。治疗结束时,评价两组近期疗效,并观察毒副反应。结果治疗组和对照组的有效率及临床受益率分别是63.4%vs.51.4%(P=0.279),80.6%vs.70.3%(P=0.308);总有效率比较为77.8%vs.56.8%(P=0.056);CA125下降率分别为72.2%vs.54.1%(P=0.108),均无显著性差异。腹水控制率分别为70.6%vs.38.9%(P=0.044),差异有统计学意义。两组毒副反应主要是骨髓抑制、胃肠道反应、脱发、神经毒性等,大多为Ⅱ^Ⅲ度。治疗组及对照组发生Ⅲ+Ⅳ度骨髓抑制、胃肠道反应分别为38.9%vs.45.9%、19.4%vs.27.0%,差异无统计学意义(P=0.922,P=0.425)。热疗副反应轻,表现为轻度烫伤,不增加化疗的副作用。结论深部热疗联合全身化疗能一定程度提高晚期卵巢癌近期疗效,可缓解患者腹水引起的腹胀等临床症状,治疗相关毒副反应可耐受。     

基因芯片研究卵巢癌细胞系HO-8910差异基因表达

目的用基因芯片技术研究人卵巢癌细胞系HO-8910和正常卵巢上皮的基因表达谱,分析其基因表达变化,探讨卵巢癌发生、发展过程中与肿瘤相关的基因群及其功能,有助于从分子水平全面了解细胞癌变机理,为卵巢癌的临床诊断和治疗提供分子标记和靶基因.方法用一步法抽提人卵巢癌细胞和对照正常卵巢组织的总RNA并纯化mRNA;将等量的人卵巢癌细胞及对照组织的mRNA逆转录合成以Cy5和Cy3标记的cDNA链做探针,混合后在含有4096条双点人类全长基因的芯片上进行杂交.经洗片后用ScanArray 3000扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用ImaGene 3.0软件对扫描图像进行数字化处理,分析高低转移人卵巢癌细胞系之间及与正常卵巢上皮基因表达谱差异.结果人卵巢癌细胞系HO-8910细胞与正常卵巢上皮比较,差异3倍以上共有355个基因,其中表达上调＞3倍有88个,表达下调＜0.33有267个.差异6倍以上共有75个基因,其中表达上调＞6倍有13个,表达下调＜0.17有62个.结论通过基因谱平行比较表明:人卵巢癌细胞系与正常卵巢上皮细胞基因表达谱存在差异:人卵巢癌细胞系HO-8910细胞与正常卵巢上皮比较差异3倍以上共有355个基因.提示这些基因与卵巢癌的发生和发展有关.本实验说明利用基因芯片对基因表达谱的检测可以为人体卵巢癌的基因诊断、治疗和预防提供新的方向.     

紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌的疗效观察

目的观察紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌的临床疗效。方法 78例晚期卵巢癌患者随机分为两组,观察组(n=40例)采用紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗,对照组(n=38例)采用紫杉醇联合顺铂静脉注射化疗治疗。比较两组临床疗效、无进展生存期、中位生存期、1年生存率、2年生存率、3年生存率及不良反应等。结果观察组腹腔热灌注化疗有效率(80.0%)明显高于对照组静脉滴注化疗有效率(63.2%)(P0.05);观察组无进展生存期、中位生存期、1年生存率、2年生存率和3年生存率均明显高于对照组(P0.05);观察组毒副反应发生率(42.5%)明显低于对照组(60.5%)。结论紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌疗效显著,可明显提高患者生存期及生存率,不良反应较少,值得临床推广应用。     

CXCL10基因对乳腺癌细胞株MCF-7肿瘤相关基因表达的影响

EGF在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.183±0.003、0.787±0.019及0.789±0.011,3组间比较差异有统计学意义(F=2 232,P<0.01);STAT3在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0.573±0.016、0.707±0.008及0.711±0.013,3组间比较差异有统计学意义(F=115,P<0.01).结论 CXCL10能在MCF-7细胞株稳定表达,且CXCL10能抑制MCF-7细胞VEGF及STAT3表达,从而发挥抗肿瘤作用.     

卵巢恶性生殖细胞肿瘤年轻患者保留生育功能手术后化疗对卵巢功能的影响

目的 探讨卵巢恶性生殖细胞肿瘤年轻患者行保留生育功能手术后化疗对卵巢功能的影响.方法 观察15例11～29岁施行保留生育功能手术并进行化疗的恶性卵巢生殖细胞肿瘤患者化疗阶段至化疗结束后1年期间月经改变、血清性激素水平及卵巢窦卵泡(F0)数量.并比较化疗相关性停经(CRA)患者与同期相同年龄段切除一侧附件的良性肿瘤患者(对照组10例)的血清性激素水平及卵巢窦卵泡数量.结果 15例保留生育功能手术后化疗的患者13例(13/15,86.67%)出现以月经量减少为表现的月经异常,其中10例(10/15,66.67%)于化疗第4～6疗程出现化疗相关性停经:高促性腺激素,雌二醇(E2)、窦卵泡数量显著减低.并且随着化疗的进程,停经患者增加(r=1.000,P=0.01).患者一般在化疗结束后2～3个月可恢复月经.CRA患者化疗结束后6个月Fo为(3.8±1.04)个,血清促卵泡生成素(FSH)为(8.30±1.46)mU/ml,E2为(80.50±7.86)ng/L,Fo低于对照组,FSH、E2高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为:7.660、5.277、7.225、P<0.001、P<0.001、P<0.001).化疗结束后1年,CRA患者激素水平及卵巢储备[FSH=(5.59±0.52)mU/ml、LH=(5.25±0.84)mU/ml、E2=(56.50±5.13)ng/L、F0=(6.50±1.08)个1与对照组[FSH=(5.43±0.35)mU/ml、LH:(5.17±0.48)mU/ml、E2=(58.10±3.73)ng/L、F0=(6.60±0.97)个]相当(t值分别为:1.177、0.694、0.740、0.318;P>0.05、P>O.05、P>0.05;P>0.05).结论 化疗可致保留生育功能手术后的青春期及生育年龄患者卵巢功能损害.化疗所致的停经是可逆的,但恢复月经并不等于卵巢功能恢复正常,化疗对卵巢功能损害的影响可延续到化疗结束6个月后.时该患者在化疗期间应当考虑应用保护卵巢功能的药物.