石蜡包埋组织中结核菌抗酸染色与PCR检测意义的探讨

对６１例拟诊为结核病和１０例正常胎儿肺组织的石蜡包埋组织分别进行组织化学方法（抗酸染色）和ＰＣＲ检测结果，结核组６１例中，抗酸染色阳性２８例，阳性率为４５．９％，ＰＣＲ检测阳性４０例，阳性率为６５．６％。两种方法阳性检出率差异显著（Ｐ〈０．００５）。对照组１０例，两种方法检测均为阴性。结果表明：ＰＣＲ检测石蜡组织中的结核菌，具有较高的灵敏度和特异性。     

抗酸染色联合金胺O荧光染色诊断肺结核的临床价值探究

目的探究抗酸染色联合金胺O荧光染色诊断肺结核的临床价值。方法选取2015年1月—2017年12月深圳市盐田区人民医院收治并确诊的肺结核患者200例作为肺结核组,选取同期于深圳市盐田区人民医院进行病理组织学诊断的非肺结核患者50例作为对照组;两组患者均行组织抗酸染色、痰液抗酸染色法及金胺O荧光染色;比较三种检测方法分别及联合诊断肺结核的诊断效能。结果两组抗酸染色及金胺O荧光染色对肺结核诊断的阳性率均不高,但对非结核类疾病诊断的阴性率均较高,分别为100.00%、100.00%及94.00%;与金胺O荧光染色相比,两组抗酸染色的灵敏度、特异性、准确性及阳性预测率均有显著增加(P<0.05);三种方法联合检测对肺结核患者诊断的阳性率为88.00%(176/200),阴性率为12.00%(24/200);对非结核患者诊断的阳性率为6.00%(3/50),阴性率为94.00%(47/50);灵敏度、特异性、准确性、阳性预测率及阴性预测率分别为88.00%、94.00%、98.32%、66.20%及80.00%。与单独检测相比,灵敏度、准确度及阳性预测率得到显著提升。结论抗酸染色联合金胺O荧光染色能够显著提升肺结核患者诊断的灵敏度、准确度及阳性预测率,具有显著的临床意义。     

金胺“O”荧光染色法在痰涂片抗酸杆菌染色中的应用

为寻找用于痰涂片抗酸杆菌染色的简便、易观察、阳性检出率高的方法,我们参考文献报道,将金胺“Ｏ”荧光染色法用于痰涂片抗酸杆菌的检测中,通过对５０例样本的观察,结果满意,现报道如下。１　方法与结果１．１　方法　常规痰标本处理,用金胺“Ｏ”荧光染色法染色后,抗酸杆菌在暗背景中呈金黄色荧光,高倍镜连续观察至少５０个视野,根据其中所出现细菌数量多少用“＋”表示。同时取处理后的痰标本,用临床上常用的萋－奈氏抗酸染色法染色以作对比。１．２　结果　５０例样本中,利用金胺“Ｏ”荧光染色法共检出抗酸杆菌阳性者３２例…     

快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中应用

目的 探究快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色方法在细胞蜡块结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法 分析2019年1月至2021年10月湖北省中西医结合医院病理检查确诊或临床怀疑结核性炎症病例的细胞蜡块标本103例,细胞蜡块均是通过超声快速组织处理系统制作,结合传统抗酸染色方法,通过改进制片及染色的过程,分析快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中的应用价值。结果103例细胞蜡块标本中,结核分枝杆菌检测阳性41例,阳性率为39.8%(41/103),其中20例为结核杆菌簇状阳性。胸腔积液、腹腔积液标本88例,结核杆菌检测阳性34例。肺泡灌洗液标本10例,阳性3例。髋关节和体表包块细针穿刺抽吸脓液标本5例,阳性4例。多数病例通过重复送检或者同时送检活体组织,检测结果均保持一致。结论 快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色在细胞蜡块中检测结核分枝杆菌具有阳性率高,耗时短,操作简便,成本低廉等优势,非常具有临床诊断价值。     

石蜡包埋组织中结核杆菌DNA的检测

石蜡包埋组织中结核杆菌ＤＮＡ的检测邹菊贤１刘茂贤１郭天程２齐为民１郭力１（１第四军医大学唐都医院检验科西安７１００３８２西安空军医院呼吸科）关键词石蜡包埋结核杆菌ＤＮＡ检测中图号Ｒ３６５０引言分子生物学技术把结核病的诊断提高到了分子和基因水平，从而提...     

金胺O荧光染色法辅助诊断结核抗酸杆菌感染的价值分析

目的探讨分析金胺O荧光染色法辅助诊断结核抗酸杆菌感染的价值。方法选择该院2017年6月-2018年6月收治的接受金胺O荧光染色、抗酸染色、痰涂片抗酸染色及血清学结核抗体金标法联合检测的病理组织切片患者195例,统计计算各诊断方法的阳性情况、敏感性及特异性,并进行比较分析。结果临床诊断与病理诊断均符合结核抗酸杆菌感染87例,均不符合结核抗酸杆菌感染80例,病理未确诊而临床诊断为结核抗酸杆菌感染28例。金胺O荧光染色法各方面诊断阳性率比组织抗酸法、痰涂抗酸法、血清学结核抗体金标法阳性率均明显更高(P?<0.05);金胺O荧光染色法的特异性与组织抗酸法、痰涂抗酸法、血清学结核抗体金标法比较差异无统计学意义(P?>0.05),金胺O荧光染色法的敏感性则比其他方法显著更高(P?<0.05)。结论临床诊断结核抗酸杆菌感染采用金胺O荧光染色法辅助诊断可促进阳性率提高,具有较高的敏感性和特异性,值得推广。     

荧光定量PCR技术检测石蜡包埋组织结核杆菌DNA的应用评价

[摘要] 目的 探讨荧光定量PCR技术（FQ-PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法233例的石蜡包埋组织标本采用实时荧光定量PCR技术检测TB-DNA,同时进行抗酸染色和组织病理学检查,以临床诊断结果为金标准,分别计算TB-DNA、抗酸染色和病理学检查的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值。结果129例临床诊断为结核病的组织标本中,TB-DNA阳性107例, TB-DNA阴性22例;104例非结核病的标本中, TB-DNA阳性2例,TB-DNA阴性102例。TB-DNA检测的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为82.95%、98.08%、89.70%、98.17%、82.25%,均高于抗酸染色的63.57%、95.19%、77.68%、94.25%、67.80%和病理学检查的77.52%、96.15%、85.84%、96.15%、77.52%。结论 FQ-PCR技术检测石蜡包埋组织的TB-DNA用于各种结核病的诊断具有灵敏度高、特异性强的优点,与病理学检查相结合可以大大提高结核病的诊断率,适合于临床推广应用。     

荧光定量PCR检测石蜡组织中结核杆菌的临床应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB—DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法33例石蜡包埋组织标本采用FQ—PCR技术检测TB—DNA,同时进行组织病理学检查,分别计算FQ—PCR和病理学检查的灵敏度和准确度。结果29例临床诊断为结核病的组织标本中,FQ—PCR检测阳性26例,病理学拟诊为结核阳性20例,4例临床诊断非结核病的标本中,FQ—PCR检测和病理学检查都为阴性,两者的灵敏度和准确度分别为89．66％、90．91％和68．97％、72．73％。结论FQ—PCR技术检测石蜡包埋组织的TB—DNA用于结核病的诊断具有较高的灵敏度和准确度,与病理学检查相结合可以大大提高结核病的检出率。     

石蜡包埋组织中结核菌抗酸染色与PCR检测意义的探讨

对６１ 例拟诊为结核病和１０ 例正常胎儿肺组织的石蜡包埋组织分别进行组织化学方法（ 抗酸染色）和ＰＣＲ检测结果,结核组６１ 例中,抗酸染色阳性２８ 例,阳性率为４５．９ ％ ;ＰＣＲ检测阳性４０ 例,阳性率为６５．６ ％ 。两种方法阳性检出率差异显著（Ｐ＜０ ．００５） 。对照组１０ 例,两种方法检测均为阴性。结果表明,ＰＣＲ 检测石蜡组织中的结核菌,具有较高的灵敏度和特异性。     

活检小组织石蜡包埋的快速制片及染色方法

1　材料1.1　组织块大小 :直径小于 1cm组织。1.2　组织块脱水剂及医用固体石蜡。1.3　苏木素一伊红染色液及染色架 (半年内配制 )。1.4　医用纱布、固体石蜡、10 %甲醛液。2　方法与步骤2 .1　固体　将小标本用 2 5 cm× 2 5 cm医用纱布包裹 ,浸入10 %甲醛溶液中 2 0 m in。2 .2　脱水方法和时限　将组织块浸入 85 %乙醇 3 min,室温。然后分别放入 95 %乙醇 ,95 %乙醇 ;无水乙醇 ,无水乙醇 ;各 2 0 min,再分别放入二甲苯 ,二甲苯 ,各 5 min。温度控制在 80℃。注意 :更换每步骤前 ,必须控干液体 ;脱水时间及温度要严格控制 ;液体浓度…     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的 探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段.方法 采用石蜡切片进行脱蜡,修复抗原直接免疫荧光染色,将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较.结果 石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100%,而石蜡切片具有组织结构保存好,免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点.结论 石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段.     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段。方法采用石蜡切片进行脱蜡，修复抗原直接免疫荧光染色，将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较。结果石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100％，而石蜡切片具有组织结构保存好，免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点。结论石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段。     

碎小组织石蜡包埋的改进

在制作组织切片中,技术人员对于碎小组织的包埋普遍感到棘手,原因之一是多个碎小组织往往不能包埋在同一平面;其二是在包埋过程中组织容易丢失,且在染色过程中碎小组织容易脱落,从而导致病理诊断的不全面或误诊,继而延长诊断时间,延误病人的治疗。笔经过半年的临床实践,取得     

实时荧光定量PCR方法检测石蜡包埋组织microRNA表达的方法探讨

目的:探讨从石蜡包埋组织中运用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)方法检测microRNA表达的可靠性和敏感性。方法:选取2005年至2010年从石河子大学医学院第一附属医院、新疆伊犁哈萨克族自治州友谊医院收集的97例福尔马林固定、石蜡包埋食管癌组织样本,提取组织总RNA,RT-PCR逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR法检测microRNA表达。结果:97例食管癌组织样本中,RNA提取成功90例,7例失败,运用实时荧光定量PCR成功检测了83例microRNA表达,7例检测不准确。RNA提取成功率明显高于失败率,实时荧光定量PCR检出的定量准确例数高于定量不准确例数,P<0.05,差异具有统计学意义。结论:实时荧光定量PCR(RQ-PCR)方法是检测石蜡包埋组织中microRNA表达的一种有效方法。     

痰标本高压灭菌对结核杆菌抗酸染色及核酸检测的影响研究

目的探讨痰标本高压灭菌对结核杆菌抗酸染色及结核杆菌核酸检测的影响。方法将皮内注射用卡介苗作浓度梯度稀释,比较高压灭菌前后结核杆菌的核酸含量变化,120例临床痰标本高压灭菌前后结核杆菌抗酸染色结果,以及100例临床痰标本高压灭菌前后检测结核杆菌核酸结果。结果高压灭菌前后卡介苗结核杆菌DNA含量检测差异无统计学意义(>0.05),120例临床痰标本高压灭菌前后结核杆菌抗酸染色阳性率差异无统计学意义(>0.05);100例临床痰标本高压灭菌前后结核杆菌核酸检测阳性率差异无统计学意义(>0.05)。结论痰标本高压灭菌可有效防止实验室感染,无需添加NaOH,能使痰液液化完全,对结核杆菌抗酸染色及核酸检测结果无显著影响,值得推广。     

307例抗酸染色阳性病例的临床分析

目的通过对307例抗酸染色阳性病例的临床分析．探讨结核病的发病率及流行趋势．为结核病的防治提供流行病学依据。方法统计2003年1月～2005年12月我院所做抗酸染色的全部病例，结合病例的临床资料．获得近年来结核痛的发病率及其流行趋势变化。结果3年共做抗酸染色14060例．阳性307例．阳性率为2、18％．2003、2004和200j年的阳性检出率分别为1．12％（55／3876）、2．14％（98／4580）、2．75％（154／5604）．经统计学分析差异有统计学意义．P〈0．05。其中．经临床及实验室确诊为免疫功能受损或低下患者1151例．抗酸染色阳性55例，阳性率为4．78％．2003、2004和2005年的阳性率分别为2．83／（9／318）、4．76％（17／357）、6．09％（29／476），统计学分析差异有统计学意义．P〈0．01。结论结核杆菌的感染率呈逐年上升趋势．尤其是免疫功能受损或低下患者的感染率明显上升．结核病的防治将面临严重的挑战。     

用RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的肠道病毒RNA

目的:应用逆转录PCR技术(RT-PCR)在石蜡包埋的心肌组织切片中检测肠道病毒(柯萨奇病毒B3,CVB3)RNA.方法:用Trizol法从石蜡包埋的心肌组织切片中提取CVB3RNA,用适当的引物合成cDNA第一链,从中取出适量进行聚合酶链反应(PCR).PCR结果用琼脂糖凝胶电泳检测并将PCR产物做核苷酸序列分析.阳性对照采用CVB3感染的人羊膜细胞.结果:用RT-PCR技术可扩增出一条约500 bp(540 bp)的核苷酸片段,测序结果表明是CVB3的一个片段.结论:RT-PCR技术应用于长期保存的石蜡包埋的组织切片进行肠道病毒的检测可获得较满意结果,可将RT-PCR技术用于回顾性研究.     

不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法. 方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析. 结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01).改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得 DNA产量和质量均高于试剂盒法. 结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

结核杆菌痰检方法的临床应用比较

目的：比较结核杆菌抗酸染色、金胺O荧光染色（以下简称荧光染色）及结核杆菌分离培养（以下简称结核培养）3种检测方法的阳性检出率,探讨最适合基层医疗机构结核杆菌筛查的检测模式。方法选取确诊为肺结核的患者536例,期间共计痰检人次为1531次,按医学影像学和临床症状分为3个组,每位肺结核患者每痰检1次则记为1例,其中处于进展期895例,好转期357例,稳定期279例。对处于进展期、好转期和稳定期的患者的痰检标本分别采用抗酸染色、金胺O荧光染色及结核杆菌分离培养3种方法同时检测即时、夜间和晨痰3份标本。对检测结果进行统计学分析。结果（1）肺结核进展期895例,其中抗酸染色阳性病例为266例（29.72%）,金胺O荧光染色阳性病例377例（42.12%）,结核杆菌分离培养阳性病例401例（44.80%）。结核杆菌分离培养阳性检出率最高,荧光染色次之,抗酸染色最低;抗酸染色与另2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;另2种检测方法之间比较差异无统计学意义。（2）肺结核好转期357例,其中抗酸染色阳性病例为7例（1.96%）,金胺O荧光染色阳性病例23例（6.44%）,结核杆菌分离培养阳性病例19例（5.32%）。后2种检测方法之间比较差异无统计学意义;抗酸染色与后2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）稳定期279例,其中抗酸染色阳性病例为5例（1.79%）,金胺O荧光染色阳性病例8例（2.86%）,结核杆菌分离培养阳性病例7例（2.51%）。3种方法之间比较差异均无统计学意义。结论抗酸染色检测迅速,实验操作及设备要求简单,适合基层医疗机构大规模结核病初次筛查及稳定期患者的痰检;金胺O荧光染色检测迅速,操作简单,实验设备要求相对较高,配合抗酸染色有助于提高结核杆菌检出率,适用于肺结核治疗过程中痰菌检测;结核杆菌分离培养在3种方法中阳性检出率最高,但是检测时间相对较长,不利于结核杆菌的快速检出,可用于检测抗酸染色和金胺O荧光染色不能确定的可疑标本。