糖尿病肾病患者尿液糜蛋白酶检测及其病理意义分析

目的：了解肥大细胞糜蛋白酶在糖尿病肾病患者尿液中的表达及其与糖尿病肾病临床指标的相关性,探讨糜蛋白酶和肥大细胞在糖尿病肾病肾组织损伤中的作用。方法收集糖尿病肾病103例（包括糖尿病肾病早期10例、中期31例和晚期62例）和20例正常对照者的尿液;利用ELISA法检测尿中糜蛋白酶水平;比较分析尿液糜蛋白酶在正常对照组、糖尿病肾病早期组、中期组和晚期组中的变化情况及其与患者各临床指标的相关性。结果与正常对照组相比,糖尿病肾病患者尿液中糜蛋白酶的水平显著升高,表现为随糖尿病肾病的发展而逐渐增加的趋势。糖尿病肾病患者尿液糜蛋白酶水平与血肌酐[相关系数（r）＝0．446,P＜0．01]、血胱蛋白酶抑制剂C（r＝0．398,P＜0．01）、血尿素氮（r＝0．365,P＜0．01）、24 h尿蛋白（r＝0．512,P＜0．01）、尿C3（r＝0．321,P＜0．01）、尿视黄醇结合蛋白（r＝0．432,P＜0．01）、尿溶菌酶（r＝0．482,P＜0.01）、尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶（r＝0．582,P＜0．01）水平具有显著相关性。结论上述结果支持关于肥大细胞参与糖尿病肾病肾组织损伤的观点,提示肾组织肥大细胞及其分泌的糜蛋白酶很可能在糖尿病肾病肾组织损伤中具有重要作用并可能是糖尿病肾病防治的新靶标。     

肥大细胞与IgA肾病患者肾间质病变关系的研究

目的研究肥大细胞与IgA肾病患者肾间质病变之间的关系。方法收集49例IgA肾病患者的临床资料和肾活检标本,采用免疫组织化学技术检测肥大细胞在IgA肾病患者肾组织中的表达,并分析其意义。结果正常肾组织中偶见或无肥大细胞的存在,而在IgA肾病患者肾组织中肥大细胞表达明显增强（肥大细胞检出阳性率为42.86%）,并且随着肥大细胞的表达增多IgA肾病肾间质纤维化程度逐渐加重（χ2=9.1189,P〈0.05）;肥大细胞与临床指标的相关性：肥大细胞数量与血肌酐呈显著正相关（r=0.65,P〈0.05）,与尿蛋白定量无明显相关性（r=0.18,P〉0.05）。结论肥大细胞可能是IgA肾病肾间质纤维化的重要参与者,与IgA肾病肾间质病变的发生发展可能具有一定的关系。     

肥大细胞 巨噬细胞及转化生长因子在IgA肾病患者肾组织中的表达研究

目的探讨肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1在IgA肾病患者肾组织中的表达与肾组织病变严重程度的关系。方法收集49例IgA肾病患者的临床资料和肾活检标本,采用免疫组织化学技术检测肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1在IgA肾病患者肾组织中的表达,并分析其意义。结果正常肾组织中偶见或无肥大细胞、巨噬细胞及转化生长因子β1的存在,而在IgA肾病患者肾组织中肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1表达明显增强(肥大细胞检出阳性率为43%,巨噬细胞检出阳性率为41%,转化生长因子β1检出阳性率为51%);并且肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1的表达与IgA肾病肾组织病变程度呈正相关关系(r=0.9901,0.9897,0.9926,P均<0.05)。结论肥大细胞可能是IgA肾病肾间质纤维化的重要参与者;巨噬细胞可能是IgA肾病发生发展过程的重要参与者;转化生长因子β1可能是肥大细胞、巨噬细胞的重要趋化因子。     

肥大细胞特异酶在IgA肾病中的表达及其意义

为了探讨IgA肾病患者肾间质中是否存在肥大细胞（MC）及其与间质纤维化的关系,采用甲苯胺蓝特殊染色及类胰蛋白酶（tryptase)免疫组织化学染色,对13例IgA肾病患者肾活检标本进行了观察。结果：①肾脏皮质和髓质均可见到MC,多见于纤维化区域、血管周围、萎缩小管或扩张小管周围,肾小球内未发现类胰蛋白酶阳性细胞。②系膜细胞增殖程度与MC数无关,而随着MC数增加,间质纤维化加重（x^2=6.2853,P&;lt;0.025),有显著差异。结论：IgA肾病患者的肾间质存在肥大细胞,并与肾间质纤维化有关。     

肥大细胞在马兜铃酸肾病肾间质中的表达

为研究肥大细胞(MC)在马兜铃致马兜铃酸肾病(AAN)的实验模型肾组织中的分布，采用甲苯胺蓝特殊染色法及MC特异酶——类胰蛋白酶免疫组化染色法，对马兜铃所致大鼠AAN的肾组织标本内MC分布进行研究。结果表明，AAN大鼠肾间质中可见炎性细胞及血管内膜炎改变；免疫组化法可见类胰蛋白酶阳性的MC，从第10周开始明显增多。结论：AAN大鼠肾间质中存在MC，是肾间质中炎性细胞之一。     

IgA肾病肾组织乙型肝炎病毒DNA的检测及意义探讨

目的对血清乙型肝炎病毒(HBV)标志物阴性IgA肾病患者肾组织进行HBV-DNA的检测,为临床诊疗提供理论依据。方法应用原位杂交(ISH)技术检测56例血清HBV抗原阴性和8例血清HBV抗原阳性的肾炎患者肾活检石蜡包埋组织切片中的HBV-DNA。用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对14例血清HBV抗原阴性和8例血清HBV抗原阳性的肾炎患者肾新鲜活检组织中的HBV-DNA。结果ISH在血清HBV抗原阳性的8例标本中HBV-DNA的检出率为88%(7/8),血清HBV抗原阴性56例中检测出HBV-DNA11例(20%)。原位杂交显示两组检出的HBV-DNA均以肾小管上皮细胞胞质分布为主,与组织中HBV抗原阳性颗粒的分布基本一致。荧光PCR在血清HBV抗原阳性的8例标本中HBV-DNA的检出率为100%(8/8),血清HBV抗原阴性14例中检测出HBV-DNA0例(0%)。结论HBV-DNA在IgA肾病肾组织中的检出,表明HBV在IgA肾病的发病机制中可能有着重要作用。     

屋尘螨变应原对人肥大细胞脱颗粒的影响

目的：阐明屋尘螨变应原Derp1对人肥大细胞HMC-1释放类胰蛋白酶水平的影响。方法：流式细胞法测定HMC-1细胞表面蛋白酶激活受体2（PAR2）表达水平;将Derp1、SLIGRL-NH2（PAR2激活剂）、LRGILS-NH2（PAR2对照肽）及Derp1+ FSLLY（ PAR2拮抗剂）分别处理HMC-1细胞,用ELISA检测药物刺激后类胰蛋白酶水平;采用钙绿实验检测PAR2生物学功能。结果：肥大细胞表面表达PAR2受体;Derp1单独作用于HMC-1可明显引起HMC-1细胞内钙流释放及类胰蛋白酶的释放,类胰蛋白酶释放水平明显高于SLIGRL-NH2及正常对照;将Derp1与FSLLY共同作用于HMC-1时,可部分抑制HMC-1细胞内的钙流释放及类胰蛋白酶的释放。结论：屋尘螨变应原Derp1可以通过激活人肥大细胞HMC-1表面PAR2受体引起肥大细胞脱颗粒释放类胰蛋白酶。     

血清乙型肝炎病毒阴性肾小球肾炎与乙型肝炎病毒感染关系的探讨

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)感染与肾小球肾炎的相关性,探讨肾组织中HBV抗原的来源及其与病理变化的关系,以有助于进一步研究HBV相关性肾炎的发病机制。方法应用免疫组织化学(SP)法检测96例血清HBV感染标志阴性,5例血清HBV感染标志阳性肾炎肾组织中的HBV抗原[HBV表面抗原(HBsAg)、HBV核心抗原(HBcAg)],用原位杂交方法检测32例肾炎组织HBV抗原阳性的(包括5例血清HBV感染标志阳性者)中的HBV-DNA。5例肾组织中检出HBV抗原的膜性肾病(其中1例血清HBV感染标志阳性)作透射电镜观察。结果发现血清HBV感染标志阴性肾炎肾组织中HBV标志物沉积与在血清HBV标志阳性肾炎中一致:HBV抗原除在肾小球沉积外,肾小管常有阳性表达,并且肾小管HBcAg阳性率高于其在肾小球中的表达(43.6%vs23.8%)。肾小管HBcAg阳性组的肾组织病变程度明显严重于肾小管HBcAg阴性组,且差异有显著性(P<0.05)。27例血清学阴性肾炎中8例肾组织中HBV-DNA阳性,主要沉积于肾小管上皮细胞质。电镜观察显示,血清HBV标志阴性膜性肾病表现为基底膜弥漫增厚,电子致密物在上皮下沉积及上皮足状突细胞融合;血清HBV标志阳性膜性肾病表现为基底膜不均匀增厚,基膜内小而散在的高密度电子致密物沉积。结论血清HBV感染与肾炎[膜性肾小球肾炎(MGN)、膜增生性肾小球肾?     

循环肿瘤细胞对结直肠癌预后的相关性研究

目的 研究分析肥大细胞三种亚型对结直肠癌预后可能产生的影响,从而发现肥大细胞对结直肠癌预后的影响因素,为临床指导治疗提供理论依据.方法 选择2011年资料完整的结直肠癌根治术后石蜡标本40例作为试验组,术前未放疗或化疗;另取20例正常大肠组织,作为对照组,采用双重免疫组化技术对试验组做连续切片进行染色,观察2组中各亚型构成比是否有差异.计算出40例结直肠癌患者切片中各亚型的总平均计数值,与试验组每张切片相对应的平均计数值进行比较,观察肥大细胞各亚型的数量与性别、癌的分化程度、癌的浸润深度、淋巴结转移及生存时间的关系,并总结肥大细胞三种亚型与结直肠癌之间的关系.结果 TIM在结直肠癌根治术后石蜡标本有不同程度的浸润,2组的在结直肠癌的N分期和TNM分期及肿瘤分化程度方面差异有统计学意义(P<0.05).高计数组和低计数组5年总生存率和无瘤生存率分别为63.1%、59.3%和82.9%、79.0%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05).COX比例风险模型单因素分析结果显示,在肿瘤组织中,肥大细的浸润是对结直肠癌患者总生存时间和无瘤生存时间造成影响的不良因素,后续多因素分析得出,对结直肠癌患者总生存时间、无瘤生存时间而言,浸润肥大细胞为其独立影响因素(P<0.05).结论 TIM与结直肠癌的N分期和TNM分期相关,循环肿瘤细胞可影响结直肠癌患者预后,所以可借助对循环肿瘤细胞的检测,去对结直肠癌患者的生存预后进行预测,提高患者的预后及生存率.     

间质性膀胱炎肥大细胞雌激素受体的表达及意义

目的:检测雌激素受体在间质性膀胱炎(IC)患者膀胱黏膜肥大细胞上的表达情况,探讨雌激素通过调控肥大细胞的激活在IC发病机制中的作用及其临床意义。方法:IC患者膀胱黏膜活检组织标本18例,12例正常膀胱黏膜活检组织标本作为对照组。分别采用0.5%甲苯胺蓝及抗人肥大细胞类胰酶抗体标识组织标本肥大细胞;多克隆抗人雌激素受体抗体标识标本膀胱黏膜上雌激素受体;分析2组标本在肥大细胞数目、脱颗粒肥大细胞比例及雌激素受体表达方面的差异。结果:IC组织标本中肥大细胞密度4.38(3.96,5.29)个/HP,明显高于对照组的2.30(2.26,2.40)个/HP,差异有统计学意义(Z=2.561,P<0.05);IC组织中75.3%的肥大细胞呈不同程度脱颗粒状态,对照组未见明显脱颗粒肥大细胞存在;IC组织标本中雌激素受体阳性肥大细胞(ER+)3.48(3.16,3.69)个/HP,对照组ER+0.82(0.79,0.86)个/HP,2组比较差异有统计学意义(Z=2.988,P<0.05);IC组织中肥大细胞数与ER+数呈正相关(r=0.884,t=3.870,P<0.01)。结论:雌激素可能通过其在肥大细胞上的受体表达来调控肥大细胞脱颗粒,产生IC特有的临床症状。     

Long-term cultures of mast cells: a new model for studying the allergic response

Mast cells are the key cells of allergic reactions and probably play also a role in chronic inflammatory reactions resulting in fibrosis. Although their biochemical and functional properties have been extensively investigated, several studies have been hampered by the absence of a tissue culture system to keep these cells alive and functionally active for long periods of time. Recently we have developed an in vitro system in which rat peritoneal mast cells are cocultured with 3T3 mouse skin derived fibroblasts (MC/3T3). Under these tissue culture conditions, mast cells do not proliferate and maintain their viability and functional activity for more than a month. This system allowed us to carry out long-term studies on the functional properties of mast cells. We have found that mast cells activated both by IgE-dependent and IgE-independent stimuli survive, and slowly replenish their histamine content. After a non-immunological challenge mast cells retain their full potential to release histamine upon a repeated similar challenge. In contrast, immunologically challenged mast cells become partially unresponsive to a similar activation event for up to 3 weeks. By exploiting this long-term culture system we described a novel type of mast cell activation induced by cytokines. The onset of this activation is slow and its course appears to be chronic-continuous, very different from the classical anaphylactic type activation that is completed within few minutes. Since MC/3T3 release higher amounts of histamine, this system is a sensitive tool to investigate the antiallergic properties of various drugs. By employing MC/3T3 cultures we were able to show that the gold salt auranofin inhibits histamine release from mast cells stimulated by different secretagogues. In addition, salbutamol inhibited histamine release from repeatedly challenged mast cells; and nedocromil sodium was effective in preventing mast cell activation when incubated for a week with MC/3T3.     

Anti-asthmatic property and possible mode of activity of an ethanol leaf extract of Polyscias fruticosa

Context: Polyscias fruticosa (L.) Harms (Araliaceae) is used as a traditional remedy for asthma in Ghana.

Objective: The objective of this study is to establish the anti-asthmatic property and a possible mode of activity of an ethanol leaf extract of P. fruticosa (PFE).

Materials and methods: The time (min) for pre-convulsive dyspnea, and time for recovery, after sensitization with 150?μg OVA and induction of bronchospasm with 1% acetylcholine or histamine in normal, and 100, 250, and 500?mg/kg PFE-treated Dunkin Hartley guinea pigs, were recorded. Atropine (0.1?mg), mepyramine (0.1?mg), and PFE (1?mg) effect on a contractile response of 2.0?×?10^?2?μg/ml acetylcholine and 5.8 × 10^?2?μg/ml histamine on the isolated guinea pig ileum was investigated. Cytological and histological studies were conducted using guinea pig peritoneal mast cells and mesenteric cells, respectively, to establish PFE effect on compound 48/80-induced mast cell degranulation.

Results: PFE (100–500?mg/kg) prolonged the onset of pre-convulsive dyspnea by 76.1–180.2% (p?≤?0.01–0.001), and decreased recovery time by 71.9–78.5% (p?≤?0.01–0.001). It also enhanced percentage protection against histamine-induced bronchospasm by 15.8–80.1-fold (p?≤?0.05–0.01), and decreased percentage recovery time 2.5–3.3-fold (p?≤?0.05–0.01). PFE significantly inhibited (60.4?±?8.3%) contractile responses of histamine and produced significant inhibition (56–79%: p?≤?0.001) of mast cell degranulation.

Conclusion: PFE has anti-asthmatic, antihistaminic, and mast cell stabilization effect making it useful in traditional asthma management.     

支气管扩张症中神经内分泌免疫网络及肥大细胞的变化

目的：探讨支气管扩张症中神经内分泌免疫网络的异常和肥大细胞（MC）在该病发病中的作用及关系。方法：应用组织化学、免疫组化、组织化学与免疫组化结合的方法和形态计量学方法进行观测。结果：支气管扩张症中，支气管上皮蛙皮素（Bombesin）阳性细胞、固有膜S-100蛋白和神经特异性烯醇化酶（NSE）阳性神经纤维、IgE阳性细胞、MC和IgE阳性MC均显著增多，且在支气管相关淋巴组织（BALT）增生的区域上述肺内分泌细胞、神经纤维和IgE阳性细胞增多尤为显著，S-100蛋白和NSE阳性神经纤维分布于弥散淋巴组织和BALT中，MC与S-100蛋白阳性神经纤维紧密接触．MC表面有IgE阳性环状带，MC和IgE阳性细胞出现在支气管上皮间和肺泡壁。结论：支气管扩张症的发病与局部神经内分泌免疫网络异常有关；MC可能作为感受器、分泌细胞或靶细胞参与神经内分泌免疫网络，在支气管扩张症的发病中起重要作用。     

Olopatadine: a drug for allergic conjunctivitis targeting the mast cell

Importance of the field: Ocular allergic diseases are characterized by specific activation of conjunctival mast cells with subsequent release of preformed and newly formed mediators. Mast cells are thus the first therapeutic target of ocular anti-allergic treatments.

Areas covered in this review: In this review, a Medline literature search was conducted on conjunctival mast cells, their role in ocular allergy and mast cell stabilization by ocular anti-allergic compounds.

What the reader will gain: Olopatadine hydrochloride, a mast cell stabilizer and histamine receptor antagonist, has been shown to inhibit mast cell activation in an in vitro model of human mast cell culture, reducing histamine and TNF-α release and upregulating proinflammatory mediators in conjunctival epithelial cells. In the in vivo conjunctival allergen challenge (CAC) model in allergic subjects, combined with objective evaluations of tear mediators and cytology, olopatadine reduced histamine tear levels and all aspects of allergic inflammation, confirming the positive clinical effects observed in active allergic patients.

Take home message: Mast cells play a central role in the pathogenesis of ocular allergy. The CAC model is ideal for assessing the mast cell stabilizing effects of anti-allergic compounds. This review of clinical studies demonstrates the superiority of olopatadine compared with other topical allergic drugs.     

类糜蛋白酶抑制剂对人结肠肥大细胞组胺释放的影响

目的　研究类糜蛋白酶抑制剂对人结肠肥大细胞释放组胺的影响。方法　用酶消化人结肠组织并分离细胞成份。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果　类糜蛋白酶抑制剂ZIGPFM、TPCK和α1 抗胰蛋白酶无明显刺激人类结肠肥大细胞释放组胺的作用。 3种类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性方式抑制抗IgE抗体诱导的组胺释放 ,最大浓度的ZIGPFM(1mmol·L-1)、TPCK(80mmol·L-1)和α1 抗胰蛋白酶(30mmol·L-1)可分别抑制 37%、2 6 %和 36 8%的组胺释放。在 37℃条件下同结肠细胞预培养 2 0min与无预培养相比 ,ZIGPFM和TPCK抑制抗IgE抗体诱导的组胺释放的作用略有增强。 3种类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性方式抑制CI诱导的组胺释放 ,最大抑制范围在 2 3 6 %～ 35 %之间。在 37℃条件下同结肠细胞预培养 2 0min与无预培养相比 ,TPCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用略有增强 ,但ZIGPFM则无此特点。结论　我们发现了类糜蛋白酶抑制剂可抑制人结肠肥大细胞IgE依赖性和非依赖性组胺释放 ,提示类糜蛋白酶抑制剂可能有抗炎症性肠病的作用 ,可研究开发     

促组胺释放的肽类物质*

组胺是各种炎症反应中重要的介质,许多物质都具有导致人体和大鼠肥大细胞释放组胺的不良反应。虽然肽类药物相对于其他药物而言,具有活性高,不良反应小等优点,但一些活性肽类化合物也能引起组胺释放,使得这些肽类药物临床使用受到限制。对肽类物质的组胺释放作用研究,有助于进一步改善肽类药物的某些不良反应,降低其毒性。现列举了部分内源性和外源性的肽类物质,并对其组胺释放作用机制进行了综述。     

口腔扁平苔癣病损中免疫活性细胞的研究

探讨肥大细胞和淋巴细胞在口腔扁平苔癣发病听作用。方法采用甲苯胺蓝发言奶法和免疫组织化学ＡＢＣ法染色，分别显示病变组织中的肥大细胞和Ｔ、Ｂ淋巴细胞结果：（１）扁平苔癣病损固有淋巴细胞浸润带及其下方的肥大细胞数量明显多于对照组，且病变深层明显于于浅层。（２）扁平苔癣病损中浸润的Ｔ、Ｂ淋巴细胞数量与对照组有显著性差异，且以Ｔ淋巴细胞浸润为主，与对照组相比差异有性（Ｐ〈０．０１）。（３）在糜烂和非糜烂型扁     

Mast cells as a target in the treatment of rheumatoid arthritis

— Mast cells represent a unique cell population, which is involved in a number of immune responses in our body. Mast cells (MCs) release an array of potent pro-inflammatory mediators and cytokines upon activation that are either pre-stored in the granules or synthesised de novo. These mediators can make a substantial contribution to the initiation and perpetuation of the inflammatory processes. This review provides an insight for the potential role of MCs in rheumatoid arthritis (RA). The data on mast cell distribution in the rheumatoid joint along with the information obtained from in vitro experiments and observations in animal models suggest that these cells may be involved in RA. The encouraging results of MC inactivating therapy in animal models of arthritis indicate that MC stabilizers may prove beneficial as a supplementary therapy in RA.     

囊尾蚴病患者的肥大细胞脱颗粒试验

本文对35例囊尾蚴病患者进行了间接非特异性和特异性肥大细胞脱颗粒试验。结果表明,此病患者的肥大细胞脱颗粒阳性率明显高于正常人,而且在囊尾蚴抗原作用下肥大细胞也可出现明显的脱颗粒反应。从而进一步证明,囊尾蚴病患者的血清中存在特异性IgE,致敏的肥大细胞在囊尾蚴抗原作用下发生脱颗粒反应,释放出组织胺等生物活性物质。     

老年口腔扁平苔藓免疫电镜细胞观察

目的：探讨老年患者口腔扁平苔藓的免疫发病机理。方法：采用透射电子显微镜观察老年口腔扁平苔藓患者的免疫细胞学变化。结果：上皮层病变,郎格罕细胞呈轻度水肿变性,粘膜上皮基底板呈阶段性溶解,脱落的上皮细胞内有凋亡小体,活化的T淋巴细胞攻击粘膜上皮细胞。固有层病变,固有层活化的肥大细胞数目增多,活化的淋巴细胞与活化的脱颗粒的肥大细胞膜相接触、相吻合,可见淋巴细胞间合作现象及微血管内皮细胞及周细胞损害。结论：老年人口腔扁平苔藓的发病机理是以细胞介导的免疫反应为主,继发或伴发有体液免疫反应。