自制HYD液低温保存大鼠肝脏方法的改进

为探讨改进大鼠肝脏低渐保存方法对鼠肝的影响,即将切取后的鼠肝灌入一定量的自制保存液（ＨＹＤ）后结扎进出肝脏的各血管,应用大鼠离体肝灌注模型,地传统保存法（对照组）和改进保存法（２０％组,３０％组及４０％组）肝脏微循环指标（门静脉灌注压,流出液内内皮素－１,台盼蓝分布时间及组织学改变）,流出液有关酶指标水平及分泌胆汁量进行了系统,结果：２０％组,３０％组及４０％组肝脏微循环指标及分泌胆汁量明显优于对     

自制HYD液对大鼠肝脏低温保存后生化功能影响的研究

目的 研制自制ＨＹＤ液对大鼠肝脏低温保存后生化功能的影响。方法 采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型,比较ＨＹＤ液,ＵＷ液和乳酸林格液（ＬＲ液）对大鼠肝脏６,１２,２４,３０,３６ｈ保存后生化功能的影响。结果 保存１２ｈ的肝脏,其各项生化功能ＨＹＤ组明显优于ＬＲ组。三磷酸腺苷,磷酸腺苷含量及Ａｔｋｉｎｓｏｎ能荷（ＡＥＣ）,ＨＹＤ组略高于ＵＷ组,且保存３６ｈ差异有显著性。     

自制KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡影响的研究

目的 研究自制的KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡的影响。方法 采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型（noncirculated isolated perfusion of ratliver，IPRL），随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24、48h，测定灌注流出液氧自由基代谢产物（丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD）的含量，检测肝细胞内钙离子浓度，检测肝细胞凋亡率和凋亡相关基因表达，观察肝脏组织形态学变化。同时设生理盐水保存阴性对照组，了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用。结果 KYL液保存的大鼠肝脏肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低，灌注流出液MDA和SOD含量与UW液保存者相近，两者肝细胞凋亡率及凋亡基因表达情况相近，光、电镜观察两者形态学变化基本一致。两组所有指标均较生理盐水保存组好，说明两种液体对大鼠肝脏均有保护作用。结论 自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果在钙拮抗方面略优于UW液，在抑制细胞凋亡方面与UW液相当，而在防止细胞水肿方面较UW液稍差。     

大鼠肝脏低温保存方法的改进

我们改进了传统低温保存肝脏的方法,旨在探讨此改良方法对鼠肝低温保存的影响。一、材料与方法1动物模型Wistar大鼠40只,体重250±20g。以大鼠离体肝脏灌注（IPRL）为肝脏保存再灌注模型：分别分离胆管、门静脉后,插入导管并迅速固定,立即开始灌注0℃自制灌洗保存液（HYD液：组氨酸90mmol／L,蔗糖120mmol／L,甘露醇30mmol／L,KH2PO435mmo／L,H600mg／L,Y400mg／L,D40mp／L）20ml,切取肝脏后置于0℃HYD液中保存。24小时后,将肝脏经门静脉恒温对℃行再灌注30分钟。再灌注液为Kreb．Henseleit液。2实验分组切取肝脏后,…     

自制KYL液和UW液保存大鼠肝脏效果的比较

目的比较自制的KYL液和UW液对大鼠肝脏的保存效果。方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型(noncirculatedisolatedperfusionofratliver),随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24和48h,记录胆汁流出量,测定灌注流出液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和氧自由基代谢产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,检测肝细胞内钙离子浓度,观察肝脏组织形态学变化。同时设生理盐水保存阴性对照组,了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用。结果KYL液保存的大鼠肝脏在保存16h以内各时相胆汁流出量均较UW液保存者高(P<0.01),灌注流出液AST、ALT和LDH含量与UW液保存者相近,肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低(P<0.01);KYL组保存24及48h时,MDA含量低于UW组,SOD含量高于UW组(P<0.01);光、电镜观察两者形态学变化基本一致。两组所有指标均较生理盐水保存组好,提示KYL保存与UW液一样对大鼠肝脏具有保护作用。结论自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果总体上与UW液相当,在再灌注后肝细胞胆汁分泌方面和钙拮抗方面略优于UW液,而在防止细胞水肿方面较UW液稍差。     

自制CMU-1液保存大鼠肝脏的实验研究

目的　探讨CMU 1液保存大鼠肝脏的效果。方法　根据灌注液和保存液的种类将Wistar大鼠分为两组 :UW组和CMU 1组 ,每组分 6h、12h、2 4h 3个保存时限 ,每亚组 6只大鼠。采用离体循环灌注模型 ,研究CMU 1保存液对保存肝脏能量代谢、生化功能、胆汁分泌及形态学方面的影响。结果　随着保存时间延长 ,肝组织TAN含量及AEC逐渐降低 ,CMU 1组较UW组下降略缓慢 ,保存 2 4h后高于UW组 (P <0 0 5 )。再灌注 12 0min后CMU 1组的肝脏分泌胆汁量较UW组多 (P <0 0 5 )。相同时限相比 ,灌出液中ALT、LDH值两组之间无显著差异 (P >0 0 5 )。肝脏组织学变化两组间无明显差异。保存 6h后 ,保存液pH值无明显变化 ;保存 12h后pH值下降 ,两组无明显差异 ;保存2 4h后 ,UW组pH值下降较CMU 1组明显。结论　CMU 1保存液保存大鼠肝脏效果与UW液相似 ,在改善保存肝脏能量代谢、预防细胞内酸中毒、胆汁分泌方面略优于UW液。     

自制SDMC-2液对离体大鼠心脏低温保存的实验研究

目的：开发一种应用简便、保存效果好的新心脏保存液。方法：实验动物采用SD雄性大鼠。分为对照组（A组），Stanford液保存组（B组），SDMC－1液保存组（C组），SDMC－2液保存组（D组）。实验组中，每组心脏均经某一种液体停搏、灌洗并保存8h，然后通过Langendorff灌流装置再灌注，分别测定保存未及再灌注后心肌的ATP、肌酸激酶（CK）、含水量及组织学检查，以及左心室功能的恢复、冠脉流量（CF）。结果：B、C、D三组各项检测指标与A组比较均有不同和程度降低（P＜0．05或0．01）。左心室功能指标；D组优于B、C组；CF：D组高于B、C组；ATP、CK含量：保存末及再灌注后D组优于B、C组，再灌注前后比较，B、C组降低；B组水含量高且再灌注后加重；电镜：D组细胞结构损伤轻，B组损伤最重。结论：SDMC－2液配方更为合理，长时间低温保存离体心脏，效果优良。可直接用于心脏停搏、原位灌洗、保存及移植过程中的灌注，简化了心脏保存过程。     

两种不同肝脏灌注方法对大鼠肝脏保护作用的比较

目的探讨两种不同的肝脏灌注方法对冷保存的离体大鼠肝脏保护作用的差异,为后期离体大鼠肝脏保存实验提供简单而有效的方法。方法制备两种不同的单纯冷保存的离体大鼠肝脏灌注模型,分为实验组（经门静脉和腹主动脉灌注法,10只）;对照组（经门静脉、腹主动脉及肝动脉灌注法,10只）,灌注后取出肝脏置于4℃威斯康星大学保存液保存,12h后切取肝组织。行苏木素-伊红（HE）染色,观察肝组织病理损伤情况,并且用免疫组织化学染色法检测核因子（NF）-κB（SABC法）的表达情况。结果经12h冷保存后,两组大鼠肝脏组织病理示：肝脏小叶结构紊乱,肝细胞变性、肿胀及空泡形成,肝血窦和中央静脉有不同程度的淤血,部分肝窦内皮细胞坏死并脱落,但两组之间无明显差别。两组之间NF-κB阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论经门静脉和腹主动脉灌注法与经门静脉、腹主动脉及肝动脉灌注法,对离体大鼠肝脏的保护作用无差异,但前者操作相对简单,更容易在今后研究大鼠离体肝脏的实验中应用。     

乌司他丁对大鼠肝脏低温保存作用的实验研究

乌司他丁 (Ｕｌｉｎａｓｔａｔｉｎ) ,即尿胰蛋白酶抑制剂 (ＵＴＩ) ,可抑制多种蛋白酶类如胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶Ｇ、磷脂酶Ａ2等 ,对糖及脂水解酶亦有抑制作用 ,还可稳定细胞膜及细胞亚膜、清除氧自由基、抑制炎性介质释放[1 ] 。我们利用鼠肝低温保存模型 ,在保存液中应用乌司他丁 ,观察其对鼠肝的保护作用、适合浓度及作用机制。一、材料与方法1.动物及分组 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠体重 ( 2 5 0± 2 0 ) ｇ ,中国医科大学实验动物中心提供 )。实验分为 4组 ,对照组 :保存液中不加入乌司他丁 ;实验组 1、2、3:保存液…     

阿霉素预处理对大鼠肝脏低温保存损伤的保护作用

我们采用大鼠肝脏非循环灌注模型。探讨应用抗癌药阿霉素预处理(DPc)是否可以模拟缺血预处理的延迟保护作用，旨在减轻肝脏缺血一再灌注(I／R)损伤，为临床提供一种安全有效的预处理方法。     

SWH液对大鼠肝脏保存有效时间的探讨

目的通过与UW液进行比较,探讨SWH液对SD大鼠肝脏保存的有效时间.方法应用大鼠原位肝移植模型,通过高效液相色谱法（HPLC）,检测肝组织ATP、ADP、AMP,计算总腺苷酸含量（TAN）及Atkinson＇s能量转换（EC）,判断肝脏能量代谢状态;通过检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,判定肝脏功能;观察移植术后7d动物存活率,判定SWH液对大鼠肝脏有效保存的时间.结果保存18 h组的ATP、TAN、EC恢复水平明显低于保存8 h组,相差显著,保存12 h组与保存8 h组比较相差不显著;保存18 h组的ALT、AST、LDH明显高于保存8h组,差异显著,保存12 h组与保存8 h组比较相差不显著;SWH液组移植术后7 d动物存活率有高于UW液组的趋势.结论无论使用SWH液还是UW液,SD大鼠肝脏有效保存的时间都不超过12 h.     

缺血预处理对大鼠肝脏低温保存损伤的保护作用

目的　探讨缺血预处理 (IPC)对大鼠肝脏低温保存损伤的保护作用。方法　制备大鼠肝脏离体非循环灌注模型 ,对供肝分别作不同时间的IPC (IPC1组缺血 5min、IPC2 组缺血 10min、IPC3 组缺血 15min) ,而后比较各组供肝的损伤程度。结果　流出液中AST和ALT的水平 ,IPC1组分别为 (4 0 .1± 6.3 )U/L和 (17.1± 0 .5 )U /L ,IPC2 组分别为 (5 3 .6± 3 .7)U/L和 (19.7± 0 .5 )U /L ,均显著低于未预处理 (NPC)组的 (64 .5± 8.2 )U/L和 (2 3 .8± 3 .9)U /L (P<0 .0 5 ) ;IPC1组又显著低于IPC2 组和IPC3 组的 (63 .8± 7.2 )U/L和 (2 2 .8± 2 .5 )U /L (P<0 .0 5 )。LDH水平 ,NPC组、IPC1组、IPC2 组和IPC3 组分别为 (10 4.3± 2 0 .6)U/L、(84.1± 19.7)U /L、(90 .5± 2 1.1)U/L和 (10 3 .1± 18.5 )U /L ,4组间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ,但均高于正常组〔(71.5± 18.9)U /L〕 (P<0 .0 5 )。胆汁分泌量及肝组织ATP含量 ,IPC1组分别为 (5 3 .5± 10 .2 ) μl和 (6.15± 0 .65 ) μmol/g ,IPC2 组分别为 (4 1.5± 8.1) μl和 (4 .77± 0 .2 1) μmol/g ,均显著高于NPC组的 (2 2 .8± 9.7) μl和 (2 .62± 0 .3 4) μmol/g (P<0 .0 5 ) ;IPC1组又显著高于IPC2 组和IPC3 组的 (2 7.5± 2 .8) μl和 (2 .61     

SWH液对大鼠肝脏保存中肝细胞凋亡的影响

目的　通过与UW液进行比较 ,观察SWH保存液对大鼠肝细胞凋亡及其对肝移植受者存活率的影响。方法　应用大鼠原位肝移植模型 ,通过HE染色、电镜和TUNEL法检测肝细胞凋亡以及观察移植术后 7d动物存活率。结果　随着保存时间的延长 ,两组的凋亡指数 (AI)均无明显升高 ,保存 18h后 ,两组的AI亦无明显改变 ,仅在行肝移植恢复血流循环后AI才明显上升 ,移植前后存在显著性差异 ,P <0 .0 1,SWH液组略低于UW液组 ;SWH液组移植术后 7d动物存活率有高于UW液组的趋势。结论　有效地防止肝细胞凋亡可以提高肝脏的保存效果 ,在防止肝细胞凋亡方面 ,SWH液优于UW液。     

山莨菪碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 探索山莨菪碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 选雄性Wistar大鼠160只,分为正常对照组、缺血再灌注组、生理盐水组和山莨菪碱组,观察了肝脏缺血60分钟及再灌注1、3、6、12及24小时后血浆内皮素－1（ET－1）、透明质酸（HA）和谷丙转氨酶（ALT）含量变化及肝组织病理学变化。结果 肝脏缺血再灌注后,血浆ET－1、HA和ALT含量均明显增高,同时肝脏瘀血很明显,肝脏缺血再灌注前用山莨菪碱后,血浆HA和ALT含量明显降低,同时肝组织瘀血减轻。结论 山莨菪碱可改善再灌注后的肝脏微循环障碍,对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

HX—3液和UW液保存大鼠肝脏效果的比较

采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型比较自制的ＨＸ－３液和ＵＷ液对大鼠肝脏的保存效果。实验结果显示，经ＨＸ－３液原位灌洗并保存４８小时的肝脏肝组织含水量正常，而同等条件下换用ＵＷ液，肝组织的含水量虽无明显变化，但都低于正常值；随着保存时间的延长，两组肝窦内皮细胞死亡率逐渐上升，但在２４小时以内两组肝窥内皮细胞死亡率的差异不显著．     

丙泊酚对大鼠肝脏缺血-再灌注内皮素-1和肝功能的影响

目的 探讨丙泊酚对肝脏缺血-再灌注损伤中内皮素-1(ET-1及肝功能的影响.方法 SD大鼠72只,体重280～300 g,随机均分为三组:缺血-再灌注组(Ⅰ组)、丙泊酚保护组(Ⅱ组)、对照组(Ⅲ组).在肝脏缺血-再灌注前(T1)、再灌注后2 h(T2)、4 h(T3)时检测血浆和肝组织中ET-1、谷丙转氨酶(ALT)及肝脏组织病理学变化.结果 T2、T3时Ⅰ、Ⅱ组血浆、肝组织中ET-1水平明显高于Ⅲ组(P＜0.05),而Ⅱ组明显低于Ⅰ组(P＜0.05).T2、T3时Ⅰ、Ⅱ组血浆、肝组织中ET-1水平、血浆ALT明显高于T1时,而Ⅰ组T3时高于T2时(P＜0.05).结论 ET-1参与了肝脏缺血再灌注损伤,丙泊酚具有抑制ET-1分泌及保护肝功能的作用.     

HX液延长大鼠肝脏有效保存时间的研究

ＨＸ液延长大鼠肝脏有效保存时间的研究张锐敏，沈文律，吴言涛，吴和光目前供肝紧缺及其有效保存时间过短已成为妨碍肝移植发展的主要因素。国内常用的灌注液如Ｃｏｌｌｉｎｓ液等保存肝脏的有效时间仅６～９小时，我们在以前研究基础上设计了一种新型灌注液－ＨＸ液。本...