秋水仙碱对人瘢痕疙瘩成纤维细胞MMP-1、MMP-2及MMP-9表达的影响

目的研究探讨秋水仙碱对体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast,KFB)内基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响方法取7例患者的瘢痕疙瘩组织进行体外成纤维细胞培养,待细胞培养至第3代时,加入浓度为0.125%的胰蛋白酶消化液浸泡至细胞质回缩、细胞间隙增大后,转种于75.0cm~2的培养瓶中继续培养;待细胞基本融合成片(密度达85%时)后,分别将每例患者瘢痕组织的传代培养细胞分为A组、B组、C组、D组及E组,A组加入含胎牛血清的DMEM培养基继续培养备用,B组、C组、D组、E组加入含胎牛血清的DMEM培养基及浓度分别为2、4、8、16μg/mL的秋水仙碱继续培养24 h(37℃,5.0%CO_2)后备用。采用逆转录聚合酶链反应(real-time PCK,RT-PCR)法检测基质金属蛋白酶mRNA的表达情况,Western Blot法检测基质金属蛋白酶蛋白的表达情况。结果 A组、B组、C组、D组、E组KFB中MMP-1 mRNA的表达水平分别为(0.174±(0.016)、(0.282±0.015)、(0.369±0.022)、(0.541±0.027)及(0.672±0.020),MMP-2 mRNA的表达水平分别为(0.201±0.033)、(0.371±0.026)、(0.548±0.031)、(0.653±0.019)及(0.796±0.024),MMP-1蛋白的表达水平分别为(0.127±0.031)、(0.205±0.013)、(0.293±0.027)、(0.349±0.034)及(0.512±.0.035),MMP-2蛋白的表达水平分别为(0.278±0.023)、(0.395±0.036)、(0.526±0.025)、(0.673±0.014)及(0.792±0.037),而MMP-9m,RNA及MMP-9蛋白均未见表达。与A组对比,B组、C组、D组及E组KFB中MMP-1 mRiA、MMP-2 mRNA、MMP-1蛋白及MMP-2蛋白的表达水平均较高,P均0.01,差异具有统计学意义,且随着秋水仙碱浓度的增高,B组、C组、D组及E组KFB中MMP-1 mRNA、MMP-2 mRNA、MMP-1蛋白及MMP-2蛋白的表达水平均呈逐渐增高的趋势,P均0.01,差异具有统计学意义。结论秋水仙碱可提高KFB中MMP-1与MMP-2的表达水平,从而达到抗纤维化、抑制瘢痕疙瘩形成的目的,且在一定浓度范围内,其作用随着秋水仙碱浓度的增加而逐渐增强,有望成为临床治疗瘢痕疙瘩的一线药物。     

秋水仙碱对人瘢痕疙瘩成纤维细胞MMP-1､MMP-2表达的影响

【摘要】 目的 研究探讨秋水仙碱对体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast, KFB) 内基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)基质金属蛋白酶-2 (MMP-2) 和基质金属蛋白酶-9 (MMP-9) 表达的影响?方法 取7 例患者的瘢痕疙瘩组织进行体外成纤维细胞培养, 待细胞培养至第3 代时, 加入浓度为0.125%的胰蛋白酶消化液浸泡至细胞质回缩?细胞间隙增大后, 转种于75.0 cm2 的培养瓶中继续培养; 待细胞基本融合成片(密度达85%时) 后, 分别将每例患者瘢痕组织的传代培养细胞分为A 组?B 组?C 组?D 组及E组, A 组加入含胎牛血清的DMEM 培养基继续培养备用, B 组?C 组?D 组?E 组加入含胎牛血清的DMEM 培养基及浓度分别为2?4?8?16 μg/ mL 的秋水仙碱继续培养24 h (37℃, 5.0% CO2 ) 后备用?采用逆转录聚合酶链反应(real-time PCR, RT-PPCR) 法检测基质金属蛋白酶mRNA 的表达情况, Western Blot 法检测基质金属蛋白酶蛋白的表达情况?结果 A 组?B 组?C 组?D 组?E 组KFB 中MMP-1 mRNA 的表达水平分别为(0.174±0.016)?(0.282±0.015)?(0.369±0.022)?(0.541±0.027) 及(0.672±0.020), MMP-2 mRNA 的表达水平分别为(0.201±0.033)?(0.371±0.026)?(0.548±0.031)?(0.653 ±0.019) 及(0.796±0.024), MMP-1 蛋白的表达水平分别为(0.127±0.031)?(0.205±0.013)?(0.293±0.027)?(0.349±0.034) 及(0.512±0.035), MMP-2 蛋白的表达水平分别为(0.278±0.023)?(0.395±0.036)?(0.526±0.025)?(0.673±0.014)及(0.792±0.037), 而MMP-9 mRNA 及MMP-9 蛋白均未见表达?与A 组对比, B 组?C 组?D 组及E 组KFB中MMP-1 mRNA?MMP-2mRNA?MMP-1 蛋白及MMP-2 蛋白的表达水平均较高, P均< 0.01, 差异具有统计学意义, 且随着秋水仙碱浓度的增高, B 组?C 组?D 组及E 组KFB 中MMP-1 mRNA?MMP-2 mRNA?MMP-1蛋白及MMP-2 蛋白的表达水平均呈逐渐增高的趋势, P均< 0.01, 差异具有统计学意义?结论 秋水仙碱可提高KFB 中MMP-1 与MMP-2 的表达水平, 从而达到抗纤维化?抑制瘢痕疙瘩形成的目的, 且在一定浓度范围内, 其作用随着秋水仙碱浓度的增加而逐渐增强, 有望成为临床治疗瘢痕疙瘩的一线药物?     

脊髓损伤后MMP-9表达的时空分布及其意义

目的通过研究大鼠急性脊髓损伤后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的时空变化,探讨基质金属蛋白酶-9在急性脊髓损伤后的作用。方法使用改良Allen法制作大鼠急性脊髓损伤模型,检测脊髓损伤后基质金属蛋白酶-9在损伤脊髓中表达的时空分布特点。结果损伤组急性脊髓损伤后1小时,可见基质金属蛋白酶-9的表达,损伤后1～2天达到高峰,7天仍有表达。阳性细胞主要表达在缺血神经元、血管内皮细胞和嗜中性粒细胞。对照组未见基质金属蛋白酶-9表达。结论基质金属蛋白酶-9在脊髓损伤后的早期表达,提示基质金属蛋白酶-9可能参与脊髓损伤后水肿形成和炎性细胞的浸润,加重了继发性脊髓损伤。     

TACE对肝癌MMP-2和MMP-9表达及患者预后的影响研究

目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)对肝癌(HCC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的表达以及对HCC患者预后的影响。资料与方法72例可切除HCC患者分为两组,一组行术前TACE然后行手术切除(A组,n=36),另一组直接行手术切除(B组,n=36)。对手术切除的标本行常规病理、免疫组织化学检查,比较两组切除标本中癌组织、癌旁组织中MMP-2和MMP-9基因的表达和分布。比较两组生存期,同时行Cox回归模型分析影响预后的因素。结果A组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为6例、12例和18例,而B组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为18例、3例和15例,两组比较有显著差异(χ2=11.67,P=0.03)。A组MMP-9表达呈强、弱和无表达分别为10例、15例和11例,而B组表达呈强、弱和无表达分别为18例、15例和3例,两组比较有显著差异(χ2=6.857,P=0.03)。A、B两组中位生存期分别为37.0个月和26.0个月,A组12、24、36个月生存率分别为94.4%、69.4%、50.9%,B组分别为88.6%%、60.0%、25.7%。两组差异有统计学意义(...     

缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的鼠动脉平滑肌细胞MMP-2活性的影响

 目的 探讨缬沙坦对血管紧张素Ⅱ刺激下离体大鼠胸主动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的基质金属蛋白酶-2活性的影响.方法 体外培养大鼠主动脉VSMCs,使用血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、缬沙坦(Val)干预血管平滑肌细胞,应用酶谱法(zymogrophy)测基质金属蛋白酶-2活性水平的变化.结果 Ang Ⅱ明显提高基质金属蛋白酶-2活性,选择4个时间观察点:6、12、24、48 h,在12 h时基质金属蛋白酶-2活性最强,随后逐渐下降.选择12 h作为药物作用时间观察终点,Ang Ⅱ能明显提高基质金属蛋白酶-2活性,这一作用可被缬沙坦明显抑制,差异有统计学意义.结论 血管紧张素Ⅱ可诱导血管平滑肌细胞MMP-2活性的增加;缬沙坦可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞MMP-2活性的增加.     

MMP-2、MMP-9与脑出血的研究进展

基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）是-组同源的酶活性依赖钙离子和锌离子的中性蛋白酶基因家族,是广泛参与降解全身各种组织细胞外基质（ECM）的蛋白酶类,现发现20多种,其中MMP-2和MMP-9是MMPs家族的两个最主要的成员。由于MMP-2和MMP-9的作用使细胞外基质降解的正常平衡被破坏,从而导致多种病理过程的发生,如髓鞘脱失、血脑屏障损伤等。近年来的研究认为MMP-2和MMP-9与脑血管病的关系密切,其参与了脑出血后脑水肿及炎症反应以及继发性脑损伤的病理过程,并发挥重要作用。本文着重对其与脑出血的关系及研究进展作简要综述。     

盐酸米诺环素对慢性牙周炎基质金属蛋白酶-8水平的影响

 目的 研究盐酸米诺环素对慢性牙周炎患者龈沟液中基质金属蛋白酶-8(matrix metalloproteinase-8,MMP-8)水平的影响.方法 选26例中重度慢性成人牙周炎患者,每例口腔左右两个象限随机分为实验组和对照组.基础治疗后实验组使用盐酸米诺环素缓释软膏,每周1次,共2次.对照组不使用盐酸米诺环素软膏,仅使用生理盐水和10%过氧化氢冲洗.使用酶联免疫法(ELISA)测定两组治疗前后龈沟液中基质金属蛋白酶-8的水平.结果 实验组、对照组在基础治疗后龈沟液中基质金属蛋白酶-8总量和浓度均明显降低(P<0.01).实验组与对照组龈沟液中基质金属蛋白酶-8总量和浓度的变化差异有统计学意义,实验组基质金属蛋白酶-8总量和浓度减少的量要多于对照组(P<0.01).结论 基础治疗和盐酸米诺环素缓释软膏联合应用能有效降低慢性牙周炎患者龈沟液中基质金属蛋白酶-8水平,改善牙周状况.     

螺内酯对急性心肌梗死患者基质金属蛋白酶水平的影响

目的观察螺内酯对急性心肌梗死（AMI）患者血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响。方法将68例未经溶栓或者溶栓未成功的AMI患者随机分为常规治疗组（32例）和螺内酯治疗组（36例）,持续观察12周。比较24小时内、1周后、4周后、12周后血清基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的水平。结果较常规治疗组而言,螺内酯治疗能降低1周及此后的基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的水平（P〈0.05）。结论螺内酯治疗能够降低心肌梗死后1周以后的基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9水平。     

MMP-9和TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

 目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及其临床意义。方法 采用SP免疫组化法检测62例NSCLC中MMP-9和TIMP-1蛋白的表达水平。结果 MMP-9和TIMP-1的阳性表达率分别为74.2％和69.4％。腺癌中二者表达率均显著高于鳞癌(P＜0.05)。随肿瘤TNM分期增加而二者表达率增高,Ⅲ+Ⅳ期二者阳性表达率均显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P＜0.05)。淋巴结转移组的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05)。结论 MMP-9可作为判断肺癌恶性程度、转移及预后的指标。TIMP-1不是简单对MMP-9的局部升高起反应。     

复元胶囊对膝骨关节炎患者血清MMP-3和TIMP-1表达变化的影响

目的观察复元胶囊治疗膝骨关节炎（KOA）患者血清基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3,MMP-3）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase - 1, TIMP - 1）的表达变化。方法将60例辨证为肝。肾不足、筋脉瘀滞证的KOA患者随机分为两组,治疗组口服复元胶囊,对照组口服仙灵骨葆胶囊,4W为1疗程,共服用3疗程。另将30例健康查体者纳入健康组。治疗前后收集血清,采用酶联免疫吸附试验检测MMP-3和TIMP-1的表达,观察药物不良反应。结果治疗前治疗组、对照组血清MMP-3、TIMP-1水平较健康组明显增高（P〈0．05）;治疗后治疗组和对照组血清MMP-3、TIMP-1水平较治疗前明显降低（P〈0．05）,未见明显的毒副作用。结论复元胶囊通过调节MMP-3和TIMP—1表达变化发挥治疗KOA的作用。     

Tumour-targeting properties of antibodies specific to MMP-1A, MMP-2 and MMP-3

Purpose  

Matrix metalloproteinases (MMPs), a group of more than 20 zinc-containing endopeptidases, are upregulated in many diseases, but several attempts to use radiolabelled MMP inhibitors for imaging tumours have proved unsuccessful in mouse models, possibly due to the limited specificity of these agents or their unfavourable pharmacokinetic profiles. In principle, radiolabelled monoclonal antibodies could be considered for the selective targeting and imaging of individual MMPs.     

MMP-1、MMP-13在大鼠骨关节炎软骨中的表达

目的观察MMP-1和MMP-13在大鼠前交叉韧带切断加内侧半月板切除的骨关节炎模型中的表达,探讨MMP-1和MMP-13表达与骨关节炎（OA）进程的关系。方法将25只SD大鼠右膝行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术（ACLT＋MMx）,对侧作为空白对照,分别于术后1周、2周、4周、6周、10周处死,每次随机处死5只,另取5只SD大鼠仅行右膝关节切开术作为假手术组,于术后10周处死,对膝关节软骨标本进行大体和组织学切片观察及评分,用ELISA法检测MMP-1、MMP-13在关节软骨中的表达。结果 ACLT＋MMx组Mankin评分由1周的1.0分到4周的6.2分发展到10周的13.6分,与假手术组及空白对照组相比有显著差异（P〈0.01）。ACLT＋MMx组MMP-13的表达在OA早期增高,中重度期后出现明显下降趋势（P〈0.01）;MMP-1的表达则随着病程持续升高,与病变严重程度呈正相关性（P〈0.01）。假手术组及空白对照组软骨细胞几乎不表达MMP-1及MMP-13。结论 MMPs在OA的发病机制中有重要作用,MMPs各亚型在OA进程中的表达各不相同。     

MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达及其意义

 目的 研究MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达,探讨子宫腺肌病的发病机制.方法 采用二步法免疫组化的方法检测子宫肌腺病45例在位内膜(A组)、36例异位内膜(B组)和28例对照组内膜中的MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量.结果 MMP- 9在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-3在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TIMP-1在对照组中的阳性表达弱于研究组A,差异有统计学意义(P<0.05),研究组A强于研究组B的阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 子宫腺肌病的发病可能与MMP-3、MMP-9、TIMP-1的异常表达有关.     

冬凌草甲素抑制BGC823细胞的生长及MMP-2 MMP-9的表达

目的探讨冬凌草甲素（oridonin,Ori）在体内、外对胃癌BGC823细胞生长的影响,及对BGC823移植瘤MMP-2、MMP-9表达的影响。方法MTT法检测Ori对BGC823细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测其对BGC823细胞周期的影响,体内抑瘤实验观察其对BGC823移植瘤生长的影响,免疫组织化学染色法观察Ori对移植瘤组织中MMP-2、MMP-9表达的影响。结果Ori在体外显著抑制细胞的增殖,引起细胞G2/M期阻滞;体内实验表明,Ori显著抑制肿瘤组织的生长,抑制率达70.7%;免疫组化染色结果显示,Ori显著抑制移植瘤MMP-2及MMP-9的表达。结论Ori在体内、外显著抑制胃癌BGC823细胞的生长,减少移植瘤MMP-2、MMP-9的表达,提示Ori可能具有抑制肿瘤侵袭转移及血管生成的作用。     

MMPs/TIMPs系统在小鼠急性放射性肺损伤中的表达

目的 通过检测基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶组织抑制物（TIMPs）在单次大剂量胸部照射小鼠肺组织中的表达,探讨全肺照射诱导的MMPs/TIMPs系统表达紊乱在放射性肺损伤发生与发展中的作用。方法 实验组小鼠在出生后8周时给予单次胸部照射12 Gy,对照组小鼠给予假照射。在照射后4和8周时处死小鼠,收集肺组织标本,测定肺组织中MMP-2、MMP-9、MMP-3、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2和TIMP-3蛋白的表达。结果 照射后4和8周时,实验组小鼠肺组织中MMP-2表达水平分别为对照组的1.7和1.9倍,MMP-9表达水平分别为对照组的2.7和2.6倍,而MMP-3、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、和TIMP-3的表达水平与对照组比较无显著改变。结论 辐射诱导小鼠肺组织中MMP-2和MMP-9的表达增加,可能加剧了急性放射性肺损伤。     

uPA和MMP-9在胃癌组织中的表达及意义

目的研究胃癌组织中尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活剂（uPA）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达及与临床病理特征的关系,以及二者的关系。方法运用免疫组化SP法检测56例胃癌组织和56例正常胃黏膜组织中uPA和MMP-9的表达。结果胃癌组织中uPA和MMP-9的表达率分别为76．79％和80136％,高于正常黏膜中uPA和MMP-9的表达率（分别为46．43％和48．21％）,差异有统计学意义（P〈0．05）;uPA表达与MMP-9表达呈正相关（P〈0．05）。低分化癌中uPA及MMP-9的表达强于高分化癌,差异有统计学意义（P〈O．05）;有淋巴结转移组中uPA和MMP-9的表达强于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论uPA和MMP-9的表达与胃癌的浸润及转移密切相关,uPA和MMP-9的表达具有协同性。二者的联合检测可作为判断胃癌发展及预后的分子指标。     

湿润烧伤膏对糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平的影响

【摘要】目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病足创面组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平的影响。方法选取2020年5月至2022年5月郑州大学附属郑州中心医院收治的55例糖尿病足患者作为研究对象,按照不同治疗方法将其分为MEBO组(35例)和VSD组(20例),MEBO组患者局部创面采用MEBO治疗,VSD组患者局部创面采用负压封闭引流(VSD)治疗,对比观察两组患者创面面积,创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平及临床疗效。结果治疗第7、21天,MEBO组患者创面面积均明显小于VSD组(t=2.719、5.268,P=0.009、P<0.001),创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平均明显低于VSD组(MMP-2:t=2.138、2.202,P=0.037、0.032;MMP-9:t=2.129、2.476,P=0.038、0.017;Bax:t=3.623、3.038,P=0.001、0.004),Bcl-2水平均明显高于VSD组(t=2.040、3.054,P=0.046、0.004);治疗21d后,MEBO组患者中显效23例、有效10例、无效2例,明显优于VSD组患者的显效8例、有效7例、无效5例(Z=-2.126,P=0.033)。结论MEBO可通过降低糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平以及提高Bcl-2水平促进创面愈合。     

基质金属蛋白酶2,9与类风湿性关节炎病情活动及关节破坏相关

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者血清基质金属蛋白酶MMP - 2 ,MMP - 9与病情活动及早期关节破坏的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法测定98例病史少于12个月未经治疗的早期RA患者及2 0例健康人血清中MMP - 2、MMP - 9,并分析其与RA患者X线表现积分(△Larsen)及健康评分(△HAQ)、CRP的关系。结果:血清MMP - 2、MMP - 9水平与C反应蛋白(CRP)、△Larsen、△HAQ显著相关,相关系数及P值分别为r=0 .4 2 ,0 .4 9,P <0 .0 1;r=0 .2 3,0 .32 ,P <0 .0 5 ;r =0 .32 ,0 .30 ,P<0 .0 1。MMP - 2、MMP - 9与关节侵蚀改变的出现相关(r=0 .6 5和0 .5 2 ,P <0 .0 5 )。Larsen积分显示骨侵蚀进展与MMP - 2水平关系更密切(r=0 .30 ,P <0 .0 1)。结论:血清MMP - 2、MMP - 9水平与RA患者病情活动及早期关节骨侵蚀显著相关,可以作为早期患者出现骨侵蚀的有益预测指标。