青龙衣多糖对S180小鼠红细胞膜唾液酸水平、ATP酶活性及膜电位的影响

目的考察青龙衣多糖对S180荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸(SA)的量、Na ,K -ATP酶和Ca ,Mg -ATP酶活性,以及红细胞膜电位的影响。方法应用试剂盒测定S180荷瘤小鼠红细胞膜SA的量、红细胞膜Na ,K -ATP酶及Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,利用流式细胞仪测定S180荷瘤小鼠红细胞膜电位。结果青龙衣多糖能增加S180荷瘤小鼠红细胞膜表面SA的量,3个剂量组作用显著(P<0.05);增强S180荷瘤小鼠红细胞膜Na ,K -ATP酶和Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,3个剂量组作用显著(P<0.05);升高S180荷瘤小鼠红细胞膜电位,其中低剂量组作用显著(P<0.05),中、高剂量组作用非常显著(P<0.01)。结论青龙衣多糖能增强红细胞的免疫功能,这可能是青龙衣多糖抗肿瘤作用机制之一。     

甜菜碱对HepG2人肝癌细胞[Ca2+]i和细胞膜电位的影响

目的研究甜菜碱对肝癌HepG2细胞内游离Ca2 浓度([Ca2 ]i)和细胞膜电位的影响。方法Fluo-3/AM标记,激光扫描共聚焦显微镜观察HepG2细胞[Ca2 ]i,TMRE标记,激光扫描共聚焦显微镜测定细胞膜电位的影响。结果甜菜碱能够升高HepG2细胞[Ca2 ]i,降低细胞膜电位。升高[Ca2 ]i的强度具一定的剂量依赖性,随甜菜碱剂量的增大而升高。甜菜碱50、25mg/mL组与对照组比较差异非常显著(P<0.01),甜菜碱12.5mg/mL组与对照组比较差异显著(P<0.05)。给药48h时间段内细胞内的[Ca2 ]i升高的幅度较大,72h升高幅度相对较小。而降低膜电位上,在48h时间段内,甜菜碱50、25、12.5mg/mL各组膜电位均显著高于对照组(P<0.05),但在72h时间段内甜菜碱12.5mg/mL组与对照组比较没有显著性差异(P>0.05)。结论甜菜碱通过开放细胞膜上的通透性转换孔道(MPTP),从而升高HepG2细胞[Ca2 ]i,启动细胞凋亡机制,诱导HepG2细胞凋亡。     

芦荟大黄素对大鼠巨噬细胞[Ca2+]i和释放TNF-α的影响

目的研究芦荟大黄素对正常的和细菌脂多糖(LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞内自由Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响。方法应用MTT法检测TNF-α量和细胞钙离子成像系统检测单细胞内[Ca2 ]i的动态变化。结果芦荟大黄素可剂量依赖性活化正常PMφ释放TNF-α,同时诱发正常PMφ[Ca2 ]i呈波动式变化,[Ca2 ]i升高来源于胞外钙内流和胞内钙池释放钙。芦荟大黄素对LPS刺激PMφ升高[Ca2 ]i和释放TNF-α的影响有较复杂的剂量依赖性特征,即芦荟大黄素低浓度时对[Ca2 ]i升高有明确的抑制作用;其对TNF-α释放的抑制呈随浓度增高而减弱的趋势。大黄酸可增强芦荟大黄素对LPS升高[Ca2 ]i的抑制作用。结论芦荟大黄素对PMφ[Ca2 ]i和释放TNF-α表现出双向调节作用,其对[Ca2 ]i动力学的调制与其调节PMφ释放TNF-α间有明确的对应性。     

针刺对局灶性脑缺血大鼠海马神经元细胞[Ca2+]i的影响

[目的]研究脑缺血不同时点大鼠海马神经元内游离Ca2+浓度[Ca2+]i及醒脑开窍针刺对其影响,探讨醒脑开窍针刺法早期干预对脑缺血的治疗作用。[方法]建立大脑中动脉所致局灶性脑缺血(MCAO)模型,采用醒脑开窍针刺法治疗,采用激光扫描共聚焦显微技术动态观察脑组织海马CA1区锥体细胞[Ca2+]i在不同时间点的变化。[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞内游离[Ca2+]i(以细胞内Ca2+相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血1 h时升高,持续升高至缺血24 h时(P<0.05)。假手术组与正常组相比[,Ca2+]i变化差异无统计学意义(P>0.05)。相应时间点非穴位针刺组与模型组[Ca2+]i比较,无统计学意义(P>0.05)。在相应时间点,醒脑开窍针刺组[Ca2+]i低于模型组(P<0.01)。[结论]急性局灶性脑缺血后大鼠海马神经细胞[Ca2+]i随缺血时间的延长而持续升高,提示细胞内钙超载;醒脑开窍针刺组能有效调节缺血区的[Ca2+]i,提示在缺血后针刺治疗效果越早越好,为临床及早应用针刺治疗缺血性脑血管病提供了理论依据。     

羊栖菜多糖对SGC-7901人胃癌细胞内[Ca2+]i的影响

[目的]观察羊栖菜多糖对人胃癌细胞内Ca^2 含量的变化，揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]采用Fluo-3／AM探针标记，激光共聚焦技术观测细胞内[Ca^2 ]i。[结果]SFPS可使SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i先升高然后下降，给CaCl2后，[Ca^2 ]i又升高。[结论]SFPS诱导肿瘤细胞凋亡是通过升高SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i而达到的，[Ca^2 ]i升高时Ca^2 来源于细胞内钙库释放。     

芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的影响

目的研究芦荟大黄素对植物血凝素(PHA)引起的大鼠T淋巴细胞增殖和细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)变化的影响,探讨芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖的作用和机制。方法采用MTT法检测细胞增殖,用单细胞钙成像系统记录细胞胞浆[Ca2 ]i。结果芦荟大黄素对PHA引起的细胞增殖有显著抑制作用,且其抑制作用与剂量有关;加入PHA引起细胞[Ca2 ]i迅速升高,并持续维持高[Ca2 ]i水平,芦荟大黄素对PHA引起的[Ca2 ]i升高有显著抑制作用,其作用途径包括阻断胞内Ca2 释放和抑制胞外Ca2 内流。结论芦荟大黄素可抑制T淋巴细胞增殖,其作用机制可能与抑制淋巴细胞内[Ca2 ]i升高相关。     

龙葵多糖对S180荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 考察龙葵多糖对 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸 (SA)、过氧化氢酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD) 量的影响。方法 应用试剂盒测定 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞膜 SA、CAT、SOD 的量。结果 龙葵多糖能增加 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞膜表面 SA、CAT、SOD 的量,其中 SA、CAT 低剂量组作用显著 (P＜0.05),中、高剂量组作用非常显著 (P＜0.01)。而 SOD 高、中、低剂量组的作用都非常显著 (P＜0.01)。结论 龙葵多糖能增强 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞的 SA、CAT、SOD 的量,这可能是龙葵多糖抗肿瘤作用机制之一。     

青龙衣中胡桃醌对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用研究

 目的研究胡桃醌的体内抗肿瘤作用,探讨其可能的作用机制。方法建立S₁₈₀荷瘤小鼠肉瘤模型,考察胡桃醌的体内抑瘤活性及其对胸腺和脾脏指数的影响;HE染色,光镜观察各组小鼠肿瘤组织生长及病理变化;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肿瘤组织细胞的凋亡率及细胞周期的改变。结果在2,4和8μmol·kg^-1·d^-1剂量下,胡桃醌对S₁₈₀实体瘤的抑瘤率分别为29.04%,37.33%,52.66%,瘤重与空白对照组比较均显著降低(P<0.01);胡桃醌4,8μmol·kg^-1·d^-1剂量组脾脏指数降低(P<0.01),各剂量组胸腺指数无明显变化(P>0.05);光镜下胡桃醌各组肿瘤组织坏死程度明显增加;电镜下观察发现,胡桃醌各组均出现核染色质凝集、边聚,凋亡小体形成等典型的细胞凋亡形态学改变;胡桃醌2,4和8μmol·kg^-1·d^-1剂量下,流式细胞仪检测发现凋亡峰,凋亡率分别为(5.58±0.63)%、(6.66±0.85)%和(10.27±1.05)%。细胞周期观察发现,G₁期细胞百分率有所降低,而G₂/M期有所增加,推测胡桃醌可将细胞阻滞于G₂/M期,但还需进一步研究证实。结论胡桃醌能有效抑制小鼠S₁₈₀实体肿瘤的生长,诱导肿瘤细胞凋亡及引起G₂/M期阻滞可能是其主要作用途径。     

活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATP酶G-6-P酶活性影响的实验研究

目的:观察活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATP酶、G-6-P酶活性的影响。方法:采用酶细胞化学染色方法检测SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性。结果:药物血清组Mg2+-ATP酶和G-6-P酶的酶反应颗粒变小,数量减少,密度减低,活性下降,明显低于对照组(P<0.05)。结论:活血行气方药物血清具有降低SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性的作用。     

青龙衣多糖对荷瘤小鼠红细胞膜流动性及封闭度的影响

目的:探讨青龙衣多糖对红细胞膜流动性及封闭度的影响。方法:首先建立肿瘤模型,并对小鼠进行分组和给药,再给药第8天处死小鼠,眼球取血,代用。在封闭度的测定中,取血离心,3000转／分,生理盐水洗涤3次,蒸馏水破膜,12000转／分离心,制成半封闭红细胞影泡,2000转／分离心40分钟,37℃温浴1小时,制成封闭影泡,按Zamudio法进行NADH-细胞色素C氧化还原酶活性的测定,并按公式计算出核瘤小鼠红细胞的封闭度。以1,6-Dipheyl-1,3,5-hexatriene(DPH)为探针剂,用荧光分光光度计以发射光波长432nm,激发光波长362nm,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P)值和微粘度(η)研究细胞膜脂的流动性。两者的膜蛋白定量均采用考马斯亮兰法。结果:针对S180核瘤小鼠生理盐水组的红细胞膜封闭度为,流动性为4.3645±0．1173,黄芪多糖两数值分别为54．81±3．73和8．8806±0．5586,青龙衣多糖1低剂量组为48．90±1．45和6．6177±0. 2905,中剂量组为54．59±1．21和8．0146±0．1339,高剂量组为61.59±1．34和9．1415±0．2893,多糖2低剂量组为46. 71±0．84,6．8156±0．1781,中剂量组为52．61±0．74和7．9889±0．0479,高剂量组为62．69±6．78和9．1890±0．1336针对H22核瘤小鼠,生理盐水组为38．43±4．63和4．6022±0．0398,黄芪多糖组为54．81±3．73和9．6234±0．9633,多糖1低剂量组为44．89±2．13和6．7871±0．3303,中剂量组为56．39±1．46和8．0988±0．2352,高剂量组为62．32±2．29和9．1415±0．2893,多糖2低剂量组为45．69±2．18和6．6796±0．0367,中剂量组分别为57．89±1．33、0．4854±0．0059,高剂量组分别为63．44±2．48、9．4473±0．1226,各组数据与空白对照生理盐水组相比较,均有显著差异,且P<0．05。结论:青龙多糖的抑瘤作用可能通过提高红细胞膜流动性及封闭度,增强维持红细胞膜的稳定性的能力并升高红细胞膜的重新封闭的能力起积极作用。     

芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响

[目的]考察芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响.[方法]芦笋多糖对S180小鼠腹腔注射给药7d,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量,采用试剂盒测定红细胞膜磷脂、胆固醇和唾液酸含量,荧光偏振法结合探针1,6一二苯-1、3、5己三烯测定红细胞膜流动性.[结果]芦笋多糖能增加S180小鼠红细胞膜表面带3蛋白、血型糖蛋白A的含量;升高S180小鼠红细胞膜磷脂含量,降低胆固醇含量;增加S180小鼠红细胞膜表面唾液酸含量;提高S180小鼠红细胞膜流动性.[结论]芦笋多糖可以改善S180小鼠红细胞膜组分的异常变化,从而保持细胞膜的流动性,恢复红细胞的结构和功能.     

海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca2+]i的影响

目的：揭示海嘧啶诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的影响及[Ca^2 ]i变化时Ca^2 的来源,采用定磷法测定海嘧啶对肿瘤细胞膜钙泵活性的影响。结果：海嘧啶可显著升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,[Ca^2 ]i升高时,Ca^2 同时来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。海嘧啶可显著降低肿瘤细胞膜钙泵活性。结论：海嘧啶通过升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,从而启动肿瘤细胞凋亡机制,诱导肿瘤细胞凋亡;海嘧啶升高肿瘤细胞内的作用是通过开放肿瘤细胞膜钙通道,引起肿瘤细胞内钙库释放,降低肿瘤细胞钙泵活性3条途径达到的。     

芦荟多糖对S180小鼠红细胞膜功能的影响

目的　研究芦荟多糖对S180 荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响。方法　采用荧光分光光度法、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳以及唾液酸试剂盒分别测定S180 小鼠红细胞膜脂流动性、膜交联蛋白、带 3蛋白以及膜唾液酸 (SA)含量。结果　两种芦荟多糖各剂量组均能不同程度地提高S180 荷瘤小鼠降低的红细胞膜脂流动性、带 3蛋白和SA的含量 ,降低红细胞膜交联蛋白的含量 ,且中剂量均非常显著 (P <0 0 1)。结论　芦荟多糖对S180 荷瘤小鼠红细胞膜功能具有促进作用 ,这可能是芦荟多糖抗肿瘤作用的主要机制之一。     

清胰汤对急性胰腺炎大鼠胰腺及肝细胞钙-镁ATP酶的影响

目的：研究急性胰腺炎（AP）大鼠胰腺及肝细胞钙－镁ATP酶的变化及清胰汤等药物对其影响,进一步探讨这些药物治疗AP的作用机制。方法：将81只SD大鼠分为正常对照组、AP组、AP后清胰汤（AP＋清胰汤）治疗组及粉防己碱（Tet,AP+Tet)治疗组共4组,在制备AP动物模型后1h、5h、10h活体取胰、肝组织,通过钙－镁ATP酶的酶组织化学染色检测其活性;同时通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）,测定其组织钙－镁ATP酶的表达。结果：钙－镁ATP酶酶组织化学染色阳性率ATP组低于正常对照组（P＜0.05),且AP组5h的阳性率低于1h;清胰汤、AP+Tet组的高于AP组（P＜0.05),且5h的阳性率高于1h。RT－PCR结果显示：胰腺组织钙－镁ATP酶的表达AP组最低,且AP组5h的表达低于1h;AP+清胰汤、AP+Tet组的表达高于AP组,且5h的表达高于1h;肝组织钙－镁ATP酶的表达各组均为阳性,各组间差异无显著性。结论：AP时大鼠胰腺及细胞钙－镁ATP酶活性降低,清胰汤、Tet可提高细胞钙－镁ATP酶活性,减轻细胞钙超载。     

黄芪总皂甙对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤及肌浆网钙泵的影响

目的：观察黄芪总皂甙（ＡＳ）及黄芪注射液（ＡＩ）对病毒性心肌炎（ＶＭＣ）小鼠心肌损伤的保护作用及其对心肌肌浆网钙泵的影响。方法：腹腔接种柯萨奇Ｂ３亲心肌病毒株建立小鼠ＶＭＣ模型，分成模型组，ＡＳ组，ＡＩ组及正常对照组，分别观察各组小鼠死亡率，心肌病理变化，血清心肌肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎＩ）含量及心肌肌浆网钙泵（ＳＥＲＣＡ）活力等指标，结果：模型组死亡率高于对照组（Ｐ＝０．００４２）ＡＳ组及ＡＩ组（Ｐ〉     

针刺人体足三里上巨虚穴对胃经其他腧穴处Ca2+浓度影响的试验观察

[目的]观察针刺足三里、上巨虚对胃经其他腧穴处Ca^2 浓度的影响。[方法]以Ca^2 选择性塑料针型电极，刺入足三里、解溪、阴市及其旁开点，测试Ca^2 浓度，然后将针刺入上巨虚、足三里，动态观察测试点Ca^2 浓度。[结果]针刺上巨虚、足三里，可提高胃经其他腧穴处Ca^2 浓度。[结论]针刺调气与调节经脉线上的Ca^2 浓度可能存在相关性。