白血病细胞体外培养~3H-TdR掺入法药敏试验临床观察

目前，化疗是治疗白血病的主要方法。化疗方案的选择应遵循个体化的原则，白血病细胞对化疗药物的敏感性是影响疗效的关键因素之一，应用体外药敏试验能合理选用化疗药物。笔者选择阿糖胞着（Ara－C）、三尖杉酯碱（Har）、长春新碱（VCR）和阿克拉霉素（ACR）4种常用化疗药物，用核酸前体物质’H－TdR（氖一胸腺呼唤核昔）掺入法做体外微量短期细胞培养，用掺入抑制率表示对某药物的敏感程度，以指导临床医生选择化疗方案。1材料和方法1．l病例选择25例白血病中男性13例，女性12例。初治12例，复治13例，平均年龄45．5岁。急淋L。型3…     

急性白血病患者骨髓体外~3H-TdR掺入试验

细胞动力学的研究对于探索肿瘤的发展和指导肿瘤的化疗具有特殊重要的意义。初期的研究工作多在实验动物或体外培养的肿瘤细胞中进行,这对逐步阐明细胞动力学的普遍规律作出了很大的贡献,但还不能测知个别病人的特定细胞动力学变化。近十年来,开始在急性白血病病人中应用了简易的体外标记方法,这类工作至今在国际上开展还不多,在国内尚未见报导,但所得结果证明它对于预测预后和制订切合于病人特定的细胞动力学变化的化疗方案,可以作出最直接的指导。为此,我们在这方面作了探索,现将结果报导如下。     

~3H—TdR掺入法研究细胞内DNA代谢的动态过程

胸腺嘧啶核苷(Thymidine以下简称TdR)是DNA合成所需要的特异前身物,细胞的增殖速率与TdR掺入DNA的速率基本一致。~3H标记的化合物~3H—TdR可以取代正常底物TdR被细胞无选择地吸收,并掺入细胞的代谢产物DNA中。利用这一原理,本文取20±2g雄性昆明     

应用~3H-TdR掺入试验观察不同肠段粘膜DNA生物合成

本文报道了应用~3H—TdR掺入方法,观察小鼠不同肠段粘膜DNA含量及DNA生物合成。静脉注射~3H—TdR空肠和回肠段粘膜DNA掺入量低,但数据稳定,分布均匀、波动较小(C.V.=9.3);腹腔注射~3H—TdR后各肠段DNA掺入量大大增加,二者差异非常显著。在小肠、大肠及胃等不同组织的掺入水平也有显著差异(P<0.01),小肠DNA掺入量最高,但数据不稳定,波动大;大肠次之;胃DNA掺入量最低。因此,选择不同肠段粘膜观察DNA生物合成应是值得特别注意的问题。     

用CTLL细胞~3H-TdR掺入法检测鼠麻风杆菌感染小鼠IL-2活性的初探

作者采用白细胞介素2(Interleukin 2,IL-2)依赖细胞株(Cytotoxic T-lymphocyte line,CTLL)~3H-TdR 掺入法,分别检测了正常的和鼠麻风杆菌(Mycobacterium lepraemurium,MLM)感染的BALB/c 小鼠脾细胞产生IL-2的能力及IL-2活性,以探讨麻风病的免疫抑制机理。结果表明:对 IL-2绝对依赖的 CTLL 细胞的增殖反应与加入 IL-2的含量呈正相关(r=0.9862);经MLM感染的小鼠的IL-2 活性明显降低,与正常小鼠比较,二者有显著性差异(P<0.001)。提示 IL-2活性降低可能与MLM 感染小鼠的免疫抑制现象有关。     

影响~3H-TdR掺入法测定正常小鼠淋巴细胞转化的因素的探讨

淋巴细胞是参与机体免疫的一大类免疫活性细胞。很多幼物有一部分淋巴细胞在致有丝分裂剂(Mitogen)作用下可被激活。致有丝分裂剂广泛用于估计个体免疫系统的功能,通常用PHA或ConA来测定T细胞功能。被激活的淋巴细胞转化为成淋巴细胞,可以从形态改变或对~3H-TdR掺入量的改变来量度。 ~3H-TdR掺入法测定人周血淋巴细胞转化,已在临床检验和基础研究中得到广泛应用。小鼠是免疫学研究中常用的实验动物,对小鼠淋巴细胞转化条件的研究,将有助于建立检测细胞免疫功能及观察免疫活性细胞之间相互作用的实验模型。本文对~3H-TdR掺入法测定正常小鼠淋巴细胞转化(以下简称淋转)的影响因素进行了探讨。     

骨髓细胞体外参入~3H-TdR研究中高速放射自显影术的应用

本文介绍了一种用于体外培养骨髓细胞~3H-TdR参入研究新的放射自显影方法。该种方法无需特殊设备、操作简便,并可大大缩短曝光时间,使原需7～21天方能完成的检测缩短为1～2天,因而尤其适合于临床血液学工作的应用。本文还报告了用该种方法测定的正常小鼠骨髓细胞~3H-TdR标记率,可供研究工作参考。     

~3H-TdR掺入法测定NHG-1脾淋巴细胞转化功能

本文报告用~3H-TdR掺入法测定本室的NC系正常裸小鼠和荷人脑胶质瘤裸小鼠(NHG-1)的脾淋巴细胞转化功能。结果提示:正常的纯合子(nu/nu)T细胞缺乏,B细胞功能均正常;杂合子(nu/ )的T和B细胞功能均正常;荷瘤鼠(NHG-1,30代)除了T细胞缺乏,B细胞功能亦受到抑制。     

MNNG及丝裂霉素诱发人淋巴细胞DNA损伤的检测——~3H-TdR掺入试验

所谓化学致癌作用,主要就是指化学致癌物(一般为电子不足型,因而具强烈的亲电子特性)与细胞靶分子特别是 DNA 的富含电子中心(即亲核性基团)的结合,并造成了 DNA 的损伤,结果因此而导致癌变。受损的 DNA 可发生种种变化,例如由于存在精巧的损伤修复机制,在 DNA 复制过程中会有更多硷基的掺入;但如损伤过于强烈,则又会引起 DNA 合成抑制,此时硷基的掺入量就会减少。因此用~3H-TdR 掺入法来检测DNA 损伤,对同一种化学污染物来说,随着毒物浓度的增加,~3H-TdR 的掺入量会有     

流式细胞术法与3H-TdR掺入法观察细胞增殖的相关性研究

目的:研究3H-TdR掺入法和流式细胞术法研究指标的相关性,探讨用流式细胞术法来替代3H-TdR掺入法的数据依据.方法:用3H-TdR掺入法和流式细胞术法对细胞DNA合成和有丝分裂进行检测.结果:流式细胞仪指标与3H-TdR掺入实验指标呈高度的正相关关系,相关系数分别为:PI与cpm相关系数为r=0.964;SPF与3H-TdR,掺入的相关悉数r=0.876,且经检验有统计学意义(P＜0.01).结论:主动脉平滑肌细胞增殖指数、S期细胞分数与3H-TdR掺入值密切相关.     

培养温度、时间及db-cAMP对骨髓细胞~3H-TdR参入的影响

本文以~3H-TdR参入技术探讨了几种因素对短期离体培养的小鼠骨髓造血细胞增殖活性的影响。结果表明:温度和时间的影响是十分明显的。为减少骨髓细胞原有的~3H_TdR参入活性的变化,骨髓样品应放在4℃下。db-cAMP的作用决定于浓度。10M~(-8)时,db-cAMP具有刺激效应。大于或小于该浓度,它显示抑制作用。     

用原子示踪法研究Raji癌细胞在氩离子激光照射下对~3H-TdR掺入量的影响

原子示踪技术是核医学的一个组成部分。近年来,由于示踪技术的不断发展,使生物化学由细胞水平进入分子水平。如细胞膜受体,遗传密码,RNA-DNA逆转录等,使人类对基本生命现象的认识开辟了新的途径。在医学上,示踪技术对肿瘤、针麻原理、中药药理等的深入研究,已从多方面显示广阔的前景。激光治疗各种疾病和激光光动力     

青蒿素对白血病人外周血白细胞~3H-TdR自动掺入的影响

本文着重报导青蒿素对白血病人外周血白细胞3H-TdR自动渗入的影响。实验结果证明: 1.青蒿素对分裂旺盛的白血病人外周血白细胞3H-TdR自动掺入有不同程度抑制作用,抑制作用大小与青蒿素浓度呈正比。当青蒿素浓度达500μg/ml时,对未缓解白血病人掺入抑制率可达67%,但对缓解白血病人掺人抑制率可降低。2.青蒿素对各种类型白血病人外周血白细胞3H-TdR自动掺入抑制作用都很明显,说明青蒿素的作用无严格的细胞特异性。3.青蒿素对白血病人外周血白细胞的渗入抑制影响不是由于细胞毒作用。     

分次大剂量~(60)Co-γ外照射对小鼠骨髓细胞~3H-TdR参入的影响

为了观察分次大剂量照射对骨髓细胞的损伤,我们曾对小鼠骨髓细胞微核率、小鼠骨髓抑制等进行了研究。本文系利用高速放射自显影技术,观察小鼠骨髓细胞~3H-TdR参入的变化。 材料和方法 1.北京医学院繁殖的瑞士种雌性小鼠,体重18-24克。设照射组和对照组。前组用~(60)Co-γ源(剂量率92.52伦/分),每周照射一次,每次200伦,总剂量600伦。     

~3H-TdR掺入法测定妇科恶性肿瘤患者免疫抑制因子的诊断价值

在Graham(1964)发现子宫颈癌等恶性肿瘤患者体液中具有一类非特异性的免疫抑制成分的启示下,Ueda系统观察了卵巢癌患者血清免疫抑制因子(ISF),认为测定ISF可能发现早期卵巢癌患者。我们曾报道形态学方法检测ISF对判断卵巢癌复发和估计预后的临床价值。本文进一步应     

LSPB_Ⅱ在~3H-TdR掺入淋巴细胞转化闪烁测量中的应用

~aH-TdR掺入法反映淋巴细胞受PHA刺激后的DNA合成和代谢,掺入~3H-TdR在细胞内的量,客观反映了淋巴细胞的转化程度。测量~3H的低能β射线需要液闪,液态闪烁体LSPBⅡ就是本工作研制应用的新型号闪烁液,初用它作为~3H-TdR掺入淋转的闪烁测定剂,在实验中交叉设计,与目前国内外常用的闪烁液相比较,对仪器工作条件作适应调整后,LSPBⅡ可以代替LS二甲苯。两种闪烁液能相关地测试临床标本。     

高温与紫草A_(-I)联合应用对体外培养的Eta-109细胞增殖和3H-TdR 掺入DNA的影响

<正> 大量地实践研究和临床实践表明,加温可选择性地破坏癌细胞,而且当与放射或化学药物合并应用,可以大大加强其治疗效果,从而降低放射和药物的剂量,减少其副作用,并提高癌症的治愈率。因而被认为是治疗癌症极有希望的一项突破,受到了国内外普遍重视。为了探索高温能否与中草药联合应用和高温能否增强中草药的细胞毒性,同时降低中草药的剂量而使疗效增强,我们进行了实验研究,选用了中草药紫草 A-I 制剂,高温43℃对长期体外增养的 Eca—109细胞株进行了适当的处理,应用了体外细胞培养方法及有关的细胞学技术,同时利用了 H~3—TdR 掺入实验,标记各实验组细胞     

用~3H-TdR参入法检测大鼠胸腺细胞增殖活性

作者建立了大鼠胸腺细胞自发增殖功能测定的~3H-TdR参入法,并对其影响因素进行了探讨。实验发现,放射性计数值(min~(-1))随胸腺细胞数量增加(0→2×10~6/孔)呈高度正相关(r=0.9959);随~3H-TdR浓度增大(0→92.5kBq/孔)或标记时间延长(4→6→12h)而增高;但加PHA或Con-A对胸腺细胞DNA合成有抑制作用。胸腺细胞体外培养以pH7.6～8.0、37.5℃为宜。此法简便快速、细胞用量少,重复性好。     

~3H-TdR在幼年和成年小鼠睾丸中的代谢差异及对睾丸的损伤效应

本文研究了氚标记胸腺嘧啶核苷(8H-TdR)静脉注射后在BALB/C 纯种幼年和成年小白鼠睾丸中的代谢差异及其对成年雄性生殖细胞的损伤效应。注入0.037MBq/g 体重~3H-TdR 后,氚在成年鼠睾丸中的初始负荷量大于幼年鼠,但幼年鼠氚滞留量随时间延长渐渐超过成年鼠。~3H-TdR 可引起成年雄性生殖细胞损伤,表现为显性致死和显性骨骼突变的发生率增高。显性致死的致突变指数Y 与注射~3H-TdR 放射性活度I 的关系为Y=74.13+80.20I;显性骨骼突变发生率B 与注入~3H-TdR 放射性活度I 的关系为B=0.16+7.95×10_(-2)I。     

钡对小鼠骨髓细胞DNA损伤的研究

探讨可溶性钡盐对小鼠骨髓细胞 DNA的损伤作用。方法　采用活体小鼠骨髓细胞 ,混于低溶点琼脂糖液中 ,铺展在磨砂载玻片上的中间层 ,而上、下两层均为正常溶点琼脂糖 ,在载玻片上制成“三夹层”式琼脂糖凝胶层。浸入不同浓度含钡溶液中 37℃染毒 2 h,然后进行单细胞凝胶电泳 ( SCGE) ,在荧光显微镜下计算出彗尾细胞百分比数并测得细胞彗尾的长度。数据之间进行 t检验。结果　实验组与对照组比较 ,差异显著 ( P<0 .0 1)。实验组之间 ,随钡浓度上升 ,彗尾细胞百分比数和彗尾长度均增高 ,呈现出剂量效应关系。结论　可溶性钡盐可引起细胞 DNA的损伤 ,是一种具有潜在危险的金属毒物