m~6A甲基化修饰在消化道肿瘤中的研究进展及临床价值探讨

N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化修饰是真核信使RNA(mRNA)中最常见的内部转录修饰, 为一种动态可逆的调控修饰, 调控因子包括甲基转移酶、去甲基化转移酶和m6A识别蛋白。近年来相关研究发现, m6A甲基化修饰在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。本文就m6A甲基化修饰及其调控因子的相关概念、在消化道肿瘤中的研究进展、对预后的评估价值及治疗耐药等方面进行综述。     

N6-甲基腺苷甲基化修饰在胃癌转移中的作用及机制研究进展

N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰是一种动态可逆的转录后修饰，主要由甲基转移酶催化mRNA上腺苷酸发生甲基化，去甲基转移酶将甲基去除，然后m6A甲基结合蛋白特异性结合mRNA从而完成m6A甲基化修饰。m6A甲基化修饰通过调控RNA的代谢影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移以及对化学治疗药物的耐药性，进而调控肿瘤的发生发展进程。胃癌位居全球常见癌症的第5位，其相关病死率位居世界第4位，严重危害人类健康。最新研究报道，m6A甲基化修饰在调控胃癌转移中发挥重要作用。本文就近年来m6A甲基化修饰在胃癌转移中的作用相关研究进展进行综述，以期为今后胃癌转移机制的阐明、新的候选治疗靶点的发现及抗癌药物的研发提供理论基础。     

消化系统肿瘤m6A甲基化修饰对非编码RNA调控的研究进展

m6A甲基化修饰是哺乳动物中最丰富的RNA修饰方式,是表观遗传学重要的调控方法之一,通过添加、移除或者识别结合m6A位点,参与RNA合成与代谢过程,进而调控基因的表达。非编码RNA(ncRNA)是一类缺乏编码多肽或蛋白质能力的RNA,在肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用,是癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药等生物学特性的调节因子。越来越多的研究表明,m6A甲基化修饰可通过调控ncRNA参与肿瘤的发生和发展。本研究就消化系统肿瘤中m6A甲基化修饰对ncRNA表达调控的研究进展作一综述。     

N~6-甲基腺苷及其调控蛋白在肿瘤中的研究进展

N~6-甲基腺苷(m~6A)是最常见的真核生物RNA甲基化修饰,由甲基转移酶、去甲基化酶和甲基结合蛋白等共同催化调控。m~6A及其甲基转移酶、去甲基化酶和甲基结合蛋白在肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌等多种实体肿瘤及血液肿瘤的发生发展中均有重要的调控作用,且m~6A及其调控蛋白水平的异常还与部分肿瘤患者的预后和药物治疗效果密切相关。深入研究m~6A及其甲基转移酶、去甲基化酶和甲基结合蛋白在不同肿瘤中的作用和机制,可为肿瘤的预防、诊断和治疗提供参考。     

N6-甲基腺苷甲基化在心血管相关疾病中的研究进展

N6-甲基腺苷(m6A)是指在腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰,对非编码RNA来说普遍存在,在真核生物中是最常见的。m6A的作用是通过参与mRNA与读取蛋白结合,进一步调控mRNA的可变剪切、翻译效率和稳定性等,是一种动态的、可逆的修饰方式。目前的研究表明,m6A甲基化可能在多种心血管疾病的发生、发展中发挥重要作用。本文结合近期的研究进展,对m6A修饰、检测方法以及在心血管系统中的研究进展作一综述。     

RNA m6A修饰及在肿瘤中的作用

6?甲基腺嘌呤（N6?methyladenosine,m6A）是真核生物RNA内部序列中最常见的一种修饰方式,该过程依赖于书写器、擦除器、阅读器等三类分子的精准调控。m6A修饰参与调控基因表达,与肿瘤、神经系统疾病、胚胎发育迟缓等多种疾病相关,近年来该领域成为表观转录组学中新的研究热点。文章详细阐述了m6A修饰在肿瘤发生发展中的作用,包括m6A修饰参与肿瘤干细胞自我更新与分化,调控肿瘤细胞增殖以及参与放化疗抵抗,讨论靶向m6A治疗可能带来的临床干预措施,以期为肿瘤精准治疗提供新手段。     

m6A修饰在神经系统疾病中的作用

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈癌、乳腺癌等中的调控作用,近年来发现m6A富集于与神经发生、细胞周期、神经元分化等相关的mRNA中,其在神经系统中的调控作用逐渐被重视。m6A修饰水平及相关酶蛋白表达水平发生改变会引起神经系统功能紊乱,参与神经系统疾病的发生与转归。m6A修饰及其相关酶在重度抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默症、脆性X综合征、肌萎缩侧索硬化、创伤性脑损伤及神经系统肿瘤等众多神经系统疾病的发展进程中扮演关键角色。     

m6A RNA甲基化修饰与肿瘤关系的研究进展

N6-甲基腺苷(m6 A)是动态可逆的转录后修饰,是真核信使RNA(mRNA)上最普遍的内部修饰.越来越多的证据表明,m6 A可改变基因表达,从而调节细胞的自我更新、分化、侵袭和凋亡等过程,并且m6 A甲基化失调与异常的RNA代谢直接相关,可导致肿瘤的发生和药物反应的改变.m6 A修饰主要由m6 A甲基转移酶催化,m6...     

N6-甲基腺苷甲基化修饰在多种肿瘤中的调控作用及机制

N6-甲基腺苷（N6-methyladenine, m6A）甲基化修饰是最常见的表观遗传修饰之一，近年来越来越多的研究表明失调的m6A甲基化修饰参与肿瘤的发生、发展并和肿瘤的预后密切相关。m6A甲基化修饰由甲基化转移酶、去甲基化酶和甲基化识别蛋白动态调节。本文主要对近年来m6A甲基化修饰在肿瘤中的相关研究进行综述，以期为m6A甲基化领域的基础研究提供思路，同时也为肿瘤的预防和治疗提供参考。     

RNA甲基化与神经血管单元重塑

RNA甲基化在基因表达的调控中具有重要意义,其较为重要的甲基化修饰物为N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)与5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,m5C),甲基化过程主要由甲基转移酶、去甲基化酶与阅读器3种蛋白质调节.m6A与m5C及其相关的蛋白质在大脑中有较高的丰度,在神经系统...     

m6A甲基化在鼻咽癌中的研究进展

N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化是哺乳动物最常见的mRNA修饰方式,受m6A甲基化酶、m6A去甲基化酶、m6A甲基识别蛋白等三类分子的动态调控。m6A甲基化修饰相关蛋白在鼻咽癌组织标本中表达异常,有望成为鼻咽癌诊断和治疗的潜在分子靶点。本文就m6A甲基化及其对鼻咽癌增殖、转移、多重耐药性和放疗增敏方面的影响进行综述。     

m6A甲基转移酶METTL3在结直肠癌中的研究进展

越来越多的证据表明RNA 甲基化作为mRNA 最常见的修饰方式在肿瘤发生、发展中发挥重要的作用。结直肠癌是消化系统常见恶性肿瘤,严重危害中老年人健康。尽管关于结直肠癌的发生和发展的生物学机制已有许多研究,但对结直肠癌的诊断和预后作用仍存在较大的不足。随着对RNA 甲基化研究的深入,发现m6A 甲基转移酶METTL3 与结直肠癌的发生、发展及预后显著相关;但是,其在结直肠癌中的作用尚存在争议。本文将对m6A 甲基转移酶METTL3 在结直肠癌发生、发展及预后中的作用进行综述。     

脊髓损伤后m6A甲基化修饰在神经干细胞自发分化中的调控作用

目的探讨脊髓损伤后mRNA m6A甲基化修饰对神经干细胞自发分化的调控作用。方法8周龄C57小鼠构建脊髓钳夹损伤模型,采用后肢运动功能评分（basso mouse scale, BMS）评价小鼠脊髓钳夹损伤模型构建情况;脊髓组织冰冻切片免疫荧光染色检测脊髓损伤1、3d后,损伤位点周围神经干细胞的数量及m6A甲基化水平;microRNA干扰技术敲低神经干细胞内的METTL14蛋白表达,并利用细胞免疫荧光检测神经干细胞自发分化后,神经元细胞、少突胶质细胞及星形胶质细胞数量;Western印迹法及Northern印迹法检测髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein, MBP）与神经干细胞共培养后神经干细胞内METTL3、METTL14、FTO及ALKBH5蛋白表达情况及细胞内m6A甲基化水平。结果BMS评分结果表明小鼠脊髓钳夹损伤模型构建成功。免疫蛋白印迹结果显示,脊髓损伤后组织内脊髓损伤后星形胶质细胞的细胞标志蛋白GFAP显著增加,神经元标志蛋白NeuN和少突胶质细胞标志蛋白MBP表达显著降低。组织免疫荧光结果表明,损伤早期受损位点周围神经干细胞标志蛋白NESTIN达量增加,但m6A水平减少。细胞免疫荧光结果表明,m6A甲基化水平降低可促进神经干细胞神经向星形胶质细胞的自发分化。免疫蛋白印迹结果显示,MBP处理神经干细胞可使细胞内METTL3/METTL14表达量及细胞整体m6A甲基化水平降低。结论脊髓损伤后mRNA m6A甲基化降低可促进神经干细胞向星形胶质细胞分化。     

CD155依赖m6A修饰调控宫颈癌细胞的恶性行为

目的:探究CD155在宫颈癌中的作用和依赖m6A修饰的调控机制。方法:应用数据库预测宫颈癌细胞中CD155（PVR）的表达情况，CD155对患者预后的影响，运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定宫颈癌细胞HeLa和宫颈永生细胞S12中CD155的表达水平。分别运用MTT、平板克隆、迁移侵袭等实验评估CD155对宫颈癌细胞HeLa生长、增殖、迁移和侵袭的影响。应用Western印迹法测定E-钙黏蛋白（E-cad）和波形蛋白（Vimentin）的表达水平并评价CD155对EMT的影响。MeRIP-RT-qPCR检测CD155是否受m6A 调控，Western印迹法和qRT-PCR测定METTL3是否影响CD155蛋白和RNA的表达水平。放线菌素D处理细胞后检测METTL3对CD155RNA半衰期的作用，利用预测网站m6ATaget预测CD155RNA甲基化位点的识别者（Reader），运用Western印迹法和qRT-PCR分析YTHDF1是否影响CD155蛋白和RNA的表达水平，放线菌素D处理细胞后检测YTHDF1对CD155RNA半衰期的作用，RIP-RT-qPCR实验进一步确定YTHDF1和YTHDF1-mut对CD155RNA下拉能力。结果: CD155在宫颈癌组织和细胞中表达较高，体内高表达CD155的患者生存率较低。相比S12细胞，HeLa细胞中CD155的表达增加（t=3.749，P<0.05）。CD155的高表达促进了体外宫颈癌细胞的生长（t=3.152，P<0.05）、增殖（t=3.706，P<0.05）、迁移（t=5.422，P<0.01）和侵袭（t=3.599，P<0.05），抑制E-cad的表达促进了Vimentin的表达。MeRIP-RT-qPCR结果显示CD155RNA受m6A调控，METTL3促进了CD155蛋白和RNA（t=6.725，P<0.05）的表达，敲降METTL3之后CD155RNA半衰期降低（t=5.622、6.063、5.857，均P<0.05）。敲降YTHDF1之后CD155的蛋白水平降低，CD155RNA半衰期降低（t=10.93、5.602、4.359，均P<0.05）。在YTHDF1高表达的细胞中，CD155RNA被有效免疫沉淀（t=4.686，P<0.01），但在YTHDF1-mut转染的细胞中，免疫沉淀结果显示下拉的CD155RNA水平明显降低（t=4.462，P<0.05）。结论:CD155RNA在m6A修饰的情况下，被YTHDF1特异性识别，进而稳定性增强和翻译增加，CD155表达增加促进了宫颈癌细胞的恶性行为。     

RNA甲基化修饰在肺动脉高压中的研究进展

肺动脉高压（pulmonary hypertension, PH）是以肺血管显著重构及血管负荷进行性增大为特征的一类综合征,疾病进展常伴随右心室重构及肥厚,最终导致右心衰而致死亡。近年来,表观遗传机制特别是RNA甲基化的研究进展,揭示了表观遗传修饰与PH之间的密切关系,并为诊断和治疗PH提供了新的潜在靶点。N6-甲基腺苷(m6A)、N7-甲基鸟苷(m7G)是真核细胞中最普遍和最丰富的内部转录后RNA修饰类型。本文主要对m6A甲基化修饰,m7G甲基化修饰在PH发生发展过程中的作用及其机制进行综述。     

RNA m6A修饰与免疫功能调控

目前，在编码和非编码RNA中已经发现超过100种化学修饰。N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine, m6A）是真核细胞中最常见和最丰富的转录后水平RNA修饰，m6A甲基转移酶及去甲基化酶参与m6A修饰水平的动态可逆调节，m6A修饰识别蛋白特异性识别m6A修饰并调控RNA的剪接、转运、稳定性和翻译。 m6A修饰几乎参与了从正常发育到疾病的所有主要生物过程，包括对免疫系统的调控。免疫系统的正常发育和功能行使依赖于相关基因表达的精准调控，而m6A修饰在该调控中起到关键作用。本文围绕m6A修饰的概念、功能和作用机制，特别是其在免疫系统功能调控中的作用进行综述，讨论了目前该研究领域的挑战并展望未来的研究方向，以期为m6A修饰参与免疫调控的研究提供理论依据和参考。     

m6A甲基化修饰在食管癌中的研究进展

6-甲基腺嘌呤（m6A）作为真核细胞中最丰富的表观转录组学修饰，其在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。目前国内外对于m6A甲基化修饰如何参与到食管癌发生、发展的研究主要集中于细胞恶性增殖、迁移和侵袭等生物功能方面。关于m6A甲基化修饰调节因子在食管癌中差异表达情况的研究认为，m6A甲基化修饰调节因子有望成为食管癌潜在的预后分子标志物。本文围绕着m6A甲基化修饰的生物功能，以及m6A甲基化修饰在食管癌中的预后价值、术后治疗等方面研究进展进行综述，旨在为食管癌的预后和靶向治疗提供新思路。     

赖氨酸特异性去甲基化酶6A及其在白血病中的研究进展

白血病是发生于血液系统造血干/祖细胞的恶性增殖性疾病,临床以化学药物治疗为主,但其复发及耐药仍是难题和瓶颈。最新研究显示组蛋白甲基化是通过调控基因转录参与了细胞增殖、分化、凋亡等过程的表观遗传调节机制之一。另有研究显示赖氨酸特异性去甲基化酶6A(KDM6A),又称X染色体上普遍转录的四肽重复序列(UTX),与多种肿瘤尤其白血病的发生密切相关。 KDM6A通过将H3K27me3去甲基化为H3K27me2或H3K27me1激活基因的表达;还可通过非去甲基化酶功能调控靶基因转录的激活,参与形成与Set1结构域相关的蛋白质复合体的亚基继而调节H3K4me1表达;与酵母交配型转换/蔗糖不发酵复合物的结合,从而促使染色质构象开放;促进H3K27ac生成。本文全面阐述KDM6A(UTX)结构和生物活性的最新进展,重点讨论其在白血病中的作用,为白血病的靶向治疗提供新的研究方向。     

mir-34a的表达调控及其与肿瘤发生的关系

MicroRNA(miRNA)是一种进化中高度保守的不编码蛋白质的小RNA,广泛参与细胞的生长、发育等许多复杂生命过程的调控。miR-34a为新近发现并备受关注的miRNA之一。目前的研究发现,细胞中的miR-34a受染色体、p53及其启动子甲基化等因素的调节,并通过调控多种靶分子参与调节细胞的增殖与凋亡。现就近年来miR-34a及其与肿瘤关系的研究进展进行综述。     

t(8;21)急性髓系白血病中RNA N6-甲基腺嘌呤（m6A）的修饰特征

目的 研究（t8;21）急性髓系白血病（AML）中AML1-ETO（AE）融合基因与细胞内N6-甲基腺嘌呤（m6A）修饰的关系。方 法 利用RNA-蛋白免疫共沉淀和高通量测序技术（MeRIP-Seq）在AE（+）和敲除AE的AML细胞系中进行RNA m6A测序,分析整个转录组m6A修饰的变化。利用高通量测序技术进行转录组测序（RNA-seq）。进一步通过GO分析、KEGG通路富集分析对差异修饰的 mRNA 进行功能注释。实时荧光定量PCR检测m6A相关酶表达量变化。结果 RNA m6A甲基化测序在敲除AE和表达AE的AML细胞系中共检测到26 441个基因,包含了72 036个m6A peak。AE敲除后细胞内m6A peak的数目由37 042个变成34 994个,其中有1278个m6A peak升高,1225个下降。AE敲除后新出现了1316个m6A修饰的基因,1830个基因失去了m6A修饰。差异的peak主要在癌症、人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ等通路中富集。RNA-seq结果显示,AE敲除后有2483个基因表达上调,3913个基因表达下调。MeRIP-Seq和RNA-Seq联合分析结果显示,与非m6A修饰的基因相比,m6A所修饰的基因表达水平均相对较高（SKNO-1:0.6116±1.263 vs 2.010±1.655,P<0.0001;SKNO-1 siAE:0.5528 ±1.257 vs 2.067± 1.686,P<0.0001）。m6A修饰位于3'UTR或5'UTR的基因较位于外显子区的基因表达量更高（SKNO-1:2.177±1.633 vs 1.333± 1.470 vs 2.449±1.651,P<0.0001;SKNO-1 siAE:2.304±1.671 vs 1.336±1.522 vs 2.394±1.649,P<0.05）。RNA-seq结果显示,有3 种m6A相关酶METTL14、WTAP、ALKBH5的mRNA表达升高（WTAP:5.36±0.5657 vs 13.19±0.3253,METTL14:2.850±0.1556vs 8.815±1.761,ALKBH5:13.70±0.4596 vs 39.84±6.067,P<0.05）。实时荧光定量PCR检测METTL14、WTAP、ALKBH5的表达量变化发现敲除AE后WTAP、ALKBH5的表达量升高,而METTL14的表达量降低（P<0.05）。结论 AE敲除造成m6A相关酶差异,推测AE融合基因或许可以调控一种或多种m6A相关酶的表达控制细胞内的甲基化水平,影响m6A修饰模式。