前列腺素E1联合缺血预处理对肾部分切除术肾缺血再灌注损伤的机制研究

目的：研究前列腺素E1（PGE1）联合缺血预处理对肾部分切除术肾缺血再灌注损伤的防治效应及其分子机制,为临床防治肾部分切除术肾缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：构建肾部分切除术肾缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组、PGE1组及PGE1联合缺血预处理组。病理检测肾小管损伤程度;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）、肾损伤分子1 (kidney injury molecule-1,Kim-1)和血栓调节蛋白（thrombomodulin,TM) 水平;实时荧光定量PCR检测肾组织Kim-1和TM mRNA表达水平。结果：与缺血再灌注模型组比较,前列腺素E1联合预处理对肾部分切除术肾缺血再灌注肾小管损伤最低;与PGE1组或缺血预处理组比较,前列腺素E1联合缺血预处理Cr水平和Kim-1水平最低,然而差异无统计学意义（P>0.05）。与ELISA结果一致,与PGE1组或缺血预处理组比较,前列腺素E1联合缺血预处理组Kim-1的表达水平最低,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：PGE1联合缺血预处理在改善肾缺血再灌注损伤中具有一定协同增效作用,其机制可能部分与下调Kim-1表达相关。     

还原型谷胱甘肽对大鼠肺缺血-再灌注后黏附分子-1,肿瘤坏死因子α蛋白表达影响

目的 观察还原型谷胱甘肽对大鼠肺缺血再灌注（IR）后细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）蛋白表达的影响。方法 72只雄性清洁级SD大鼠随机分为3组：假手术组（S）、缺血再灌注组（IR）、药物治疗（RG）组。每组分别于夹闭缺血的第45min、缺血再灌注后1、2及4h四个时间点，处死大鼠，取肺组织测定肿瘤坏死因子（TNF—α）、髓过氧化物酶（MPO）含量，免疫组化染色检测肺组织细胞间黏附分子（ICAM-1）蛋白表达。结果 TNF-α、MPO含量在IR组缺血再灌注后含量明显增加，较S、RG组显著增高（P〈0．01）；IR组ICAM-1蛋白表达明显高于S组和RG组。结论 还原型谷胱甘肽能减少肺组织TNF—α、Ⅰ—CAM-1表达，在一定程长上减少肺损伤。     

高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织髓质过氧化酶活性的影响

目的探讨高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织髓质过氧化酶活性的影响。方法56只SD大鼠随机分为假手术对照组（S组）、缺血再灌注组（IR组）和高渗盐水处理组（H组）。肾缺血再灌注模型的建立：左侧肾蒂夹闭45min后松开，于再灌注4、6、12h测量血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肾组织髓质过氧化酶（MPO）活性和丙二醛（MDA）含量。结果H组血清BUN、Cr履肾组织MPO活性、MDA含量显著低于IR组，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论高渗盐水预处理对肾缺血再灌注损伤有保护作用。     

缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响

目的 研究缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响.方法 采用缺血6 min,再通血4 min,循环4次的缺血预适应方案,对Wistar大鼠肾脏进行缺血预处理,再缺血60 min后进行再灌注,与缺血再灌注大鼠肾脏进行比较,观察大鼠肾功能及肾内黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin的表达变化.结果 缺血预适应大鼠肾脏内的黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin表达明显低于缺血再灌注组,在第48 h 其血清肌酐也明显低于缺血再灌注组大鼠.结论 缺血预适应对肾功能有保护作用,其机制与减少缺血再灌注肾脏内黏附分子的表达有关.     

右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注肝脏TNF-α及ICAM-1表达的影响

目的：通过右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注肝脏TNF-α及ICAM-1表达的影响,探讨其对肝脏缺血再灌注的保护作用。方法：SD成年雄性大鼠30只,体重150~220 g。随机平均分为3组,每组10只,分别为假手术组（S组）,缺血再灌注组（IR组）,右美托咪定组（Dex组）。S组和IR组用1 mL/（kg·h）速度静脉滴注0.9%生理盐水30 min;Dex组用右美托咪定5μg/（kg·h）预处理30 min。间隔2 h后IR组和Dex组建立肝脏缺血再灌注模型,S组开腹后不作缺血再灌注。缺血1 h后行再灌注4 h,然后处死大鼠取材。测定大鼠血清ALT和AST,检测肝组织TNF-α活性和ICAM-1水平,观察大鼠组织学病理改变。结果：与S组比较,IR组和Dex组血清ALT、AST和肝组织TNF-α和ICAM-1表达明显升高。Dex组血清ALT、AST酶升高幅度明显较IR组小,肝组织TNF-α和ICAM-1表达低于IR组,肝细胞损伤程度小于缺血再灌注组。结论：右美托咪定预处理能抑制肝缺血再灌注细胞的TNF-α和ICAM-1表达;TNF-α可能通过调控ICAM-1的表达在缺血再灌注损伤中发挥作用。     

高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与ICAM-1的关系

目的：研究高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用与细胞间黏附分子（ICAM-1）的关系。方法：56只家兔随机分为3组：假手术对照组（P组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、高氧液灌注组（HBO组）。分别取缺血危险区心肌,免疫组化法检测ICAM-1的表达;检测匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;计算心肌梗死面积。结果：HBO组、IR组SOD活性均较P组降低（均P〈0.05）;MDA含量则较P组增加（均P〈0.05）。HBO组心肌梗死面积较IR组明显减小（P〈0.05）。ICAM-1的表达,IR组比HBO、P组都明显增高（均P〈0.05）。结论：高氧液处理可下调心肌缺血再灌注损伤时ICAM-1的表达,使SOD活性升高,从而降低心肌梗死面积。     

胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏黏附分子表达的影响

目的研究胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏细胞黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、手术对照组、胡黄连提取物不同剂量给药组,采用切除右肾无创动脉夹夹闭左肾动脉60 min再灌注72 h的方法制备急性缺血再灌注(I/R)肾损伤大鼠模型,生化法测定血清肌酐、尿肌酐,并结合尿量计算内生肌酐清除率(Ccr),光镜电镜观察肾组织病理变化并肾小管计分,免疫组化观察肾脏ICAM-1,MCP-1的表达,实时定量荧光RT-PCR测定肾组织ICAM-1,MCP-1 mRNA表达。结果肾脏I/R损伤时大鼠Ccr明显降低,肾脏病理变化明显,肾脏ICAM-1,MCP-1表达明显,肾组织ICAM-1,MCP-1 mR-NA表达增加;与手术对照组相比,各胡黄连提取物组肾脏ICAM-1,MCP-1表达减弱,肾组织ICAM-1,MCP-1mRNA表达降低,肾小管计分降低,Ccr升高。结论胡黄连提取物可以抑制缺血再灌注损伤后肾脏ICAM-1,MCP-1表达,改善肾功能。     

乌司他丁对缺血再灌注肺组织细胞间黏附分子-1和P-选择素基因mRNA表达的影响

目的探讨乌司他丁（UTI）对在体缺血再灌注后肺组织细胞间黏附分子（ICAM）-1和P-选择素基因mRNA表达的影响。方法新西兰兔18只随机分为3组：低钾右旋糖酐液（LPD）组、UTI组和对照组。建立兔在体肺缺血冷存再灌注模型,阻断左肺门后将左肺下叶在体冷存于10℃肺保存器内2 h,再灌注2 h。LPD组灌注LPD液,UTI组灌注含UTI的LPD液,对照组不灌注肺保护液。分别于左肺门阻断前、缺血2 h、再灌注2 h取左肺组织,以RT-PCR技术检测ICAM-1和P-选择素基因mRNA表达。结果缺血2 h及再灌注2 h,UTI组ICAM-1基因mRNA表达量显著低于LPD组和对照组;再灌注2 h,LPD组和对照组P-选择素基因mRNA的表达量明显高于缺血前和缺血2 h,UTI组则无明显变化。结论乌司他丁可抑制缺血冷存再灌注后肺组织ICAM-1和P-选择素基因mRNA表达上调,有利于肺保护。     

参附注射液预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后HSP70基因表达的影响

目的：探讨参附注射液预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：30只Wistar大鼠随机分为3组：假手术组、缺血再灌注损伤（IR）组、参附注射液预处理组（SFI）。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，应用原位杂交技术和免疫组化S-P法检测HSP70 mRNA及其蛋白的表达。结果：与缺血再灌注损伤（IR）组比较，参附注射液预处理组（SFI）HSP70 mRNA（P〈0．01）及其蛋白（P〈0．05）的表达显著增加。结论：HSP70是心肌中重要的内源性保护物质，参附注射液可诱导HSP70 mRNA及其蛋白的表达而发挥心肌保护作用。     

猪胆酸对体外缺血再灌注大鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1的影响

目的观察大鼠脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨清开灵有效组分猪胆酸阻抑脑缺血炎症反应的作用途径。方法体外培养大鼠脑微血管内皮细胞,氧糖剥夺法模拟缺血再灌注损伤,采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法半定量检测ICAM-1蛋白和mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组ICAM-1蛋白和mRNA的表达明显增高(P<0.01);与模型组比,猪胆酸显著降低ICAM-1的表达(P<0.05)。结论猪胆酸可能通过干预ICAM-1表达而阻抑脑缺血损伤炎症反应。     

缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注损伤心肌ICAM—1mRNA表达的影响

目的：利用大鼠在体心肌缺血再灌注模型,应用原位杂交来观测ICAM－1mRNA在各组大鼠心肌中的表达,以了解缺血预处理对ICAM－1表达的影响,并探讨其机制。方法：雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为心脏缺血／再灌注组（IR,n=20),预处理组（IPC,n=20)及假缺血组（Sham,n=20),术毕抽血5ml,查血清SOD,MDA,应用原位杂交方法检测ICAM－1mRNA在各组大鼠心肌中的表达,结果：再灌注2hIR组血清MDA较Sham组及IPC组有明显升高（P＜0．01）,IR组血清SOD较Sham组及IPC组有明显降低（P＜0．01）,再灌注2h后,IR组心肌ICAM－1mRNA表达较IPC组明显增加（P＜0．01）,结论：缺血预处理可有效的保护缺血再灌注心肌,同时对于心肌ICAM－1mRNA表达具有下调作用,且后者有可能是前者的原因。     

Effects of isoflurane on ICAM-1 expression and neutrophils infiltration in rats with liver ischemia and reperfusion injury

Objective： To establish a rat model of warm partial hepatic ischemia-reperfusion （IR）, and investigate the protective and anti-inflammatory effects of isoflurane on warm hepatic ischemia-reperfusion injury （IRI） in rats. Methods： Thirty-two female Sprague-Dawley rats were divided equally into 4 groups （n-8）： PB-Sham group in which the rats were anesthetized by intraperitoneal injection of pentobarbital sodium （1.0%, 40 mg/kg, PB） and received a sham operation without occlusion of liver blood flow; PB-IR group whose rats underwent partial hepatic IR after anesthesia; Iso-Sham group in which inhalation of 1.0 MAC isoflurane and sham operation was performed; Iso-IR group in which 1.0 MAC isoflurane was inhaled for 4 h and IR was performed. Rat model of warm partial hepatic IR was established by clamping the hepatic arteries and hilar vessels distributing to the left and median lobes to induce partial hepatic ischemia （70%） for 60 rain followed by reperfusion for 3 h. The rats were killed 3 h after declamping, and specimens of liver tissue and blood were obtained. The serum ALT and AST were detected as liver damage markers. Viability of myeloperoxidase （MPO） in liver was measured. The protein level of ICAM-1 in the liver was detected by immunohistochemistry and Western blotting. Results： Rats treated with 1.0 MAC isoflurane during warm partial （70%） hepatic ischemia 60 rain and 3 h reperfusion had significantly lower serum ALT and AST compared with rats anesthetized with pentobarbital sodium subjected to hepatic IRI. The expression of ICAM-1 in hepatic tissue was significantly increased by hepatic IRI after pentobarbital sodium anesthesia. Isoflurane significantly inhibited protein expression of ICAM-1 in hepatic IR injury compared with pentobarbital sodium anesthesia. Viability of liver MPO was significantly increased by hepatic IRI after pentobarbital sodium anesthesia; Isoflurane can significantly inhibit MPO alteration in rat liver ischemia-reperfusion injury compared with rats anesthetized with pentobarbital sodium. Conclusion： Isoflurane anesthesia can attenuate liver IR injury in rats that maybe by inhibiting ICAM-I expression and reducing the infiltration of neutrophils.     

七氟烷预处理对大鼠缺血再灌注肝脏TNF-α及ICAM-1表达的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在七氟烷保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤机制中的作用。方法:将40只SD成年雌性大鼠,随机平均分为4组(n=10):假手术组,缺血再灌注组,七氟烷组,七氟烷-缺血再灌注组。假手术组、七氟烷组作为对照;缺血再灌注组和七氟烷-缺血再灌注组阻断支配大鼠肝脏左叶和中叶的门静脉造成约70%肝脏缺血再灌注模型,缺血1h、再灌注2h后取材。测定大鼠血清ALT和A ST作为肝损害的标志被检测,光镜观察组织学病理改变,电镜下观察肝细胞的超微结构,采用免疫组织化学法检测肝组织TNF-α活性和ICAM-1水平。结果:七氟烷-缺血再灌注组,肝ALT、A ST酶升高受到显著抑制,电镜显示七氟烷-缺血再灌注组细胞损伤程度小于缺血再灌注组,七氟烷-缺血再灌注组TNF-α和ICAM-1表达低于缺血再灌注组。结论:七氟烷预处理能抑制肝缺血再灌注细胞的TNF-α和ICAM-1表达;TNF-α可能通过调控ICAM-1的表达在缺血再灌注损伤中发挥作用。     

Bag-1在大鼠缺血预处理肝胆管中的表达及意义

目的 研究缺血预处理对大鼠缺血再灌注损伤肝内胆管上皮细胞凋亡及Bag-1表达及影响,探讨IP对IR损伤后胆管上皮细胞凋亡的保护作用及其可能机制. 方法 健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(S0组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组),每组10只.制备IR及IP模型,取肝门周围组织行免疫组化、原位杂交染色检测Bag-1基因和蛋白的表达及行TUNEL染色检测胆管上皮细胞凋亡并计算凋亡指数(AI). 结果 TUNEL染色显示胆管上皮细胞凋亡水平SO组最低、IR组最高、IP组居中,三组两两比较均有统计学意义.免疫组化染色及原位杂交染色Bag-1 mRNA和蛋白在各组中的表达程度与TUNEL染色提示的凋亡程度相同,且两两比较有统计学意义. 结论 缺血预处理对胆管上皮细胞具有保护作用,可能与上调Bag-1 mRNA和蛋白的表达有关.     

异氟烷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究异氟烷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的影响,探讨异氟烷肝脏缺血再灌注保护作用的机制。方法将32只SD成年雌性大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、异氟烷组、异氟烷．缺血再灌注组。假手术组、异氟烷组作为对照;缺血再灌注组和异氟烷-缺血再灌注组阻断支配大鼠肝脏左叶和中叶的门静脉分支,建立肝脏70％缺血再灌注模型,缺血60min再灌注3h后取材,测定大鼠血清ALT、AST;免疫组织化学方法检测ICAM-1蛋白的表达,HE染色进行病理学检查。结果肝脏缺血60min再灌注3h后肝组织ICAM-1蛋白表达水平增高;血清酶ALT和AST升高;肝组织损害严重。异氟烷抑制ICAM-1表达,降低ALT、AST水平,减轻肝细胞损伤。结论肝脏缺血再灌注损伤程度与肝组织内ICAM-1水平有密切的关系,异氟烷可抑制肝脏缺血再灌注期间肝组织ICAM-1的表达,同时减轻伤肝脏损伤。     

高渗盐液复苏创伤失血性休克大鼠对细胞间黏附因子-1和肾脏的影响

目的建立创伤失血性休克动物模型,观察高渗盐液及乳酸林格液复苏后对细胞间黏附因子-1(ICAM-1)及肾脏的影响。方法66只雄性SD大鼠,随机分为3组,假休克组(sham组,n=6),乳酸林格液复苏组(LRS组,n=30),高渗盐液复苏组(HSH组,n=30)。复制创伤失血性休克动物模型后,经静脉输入高渗盐液或乳酸林格液,然后腹主动脉取血,酶联免疫吸附法测ICAM-1。取一侧肾脏HE染色,光镜观察组织形态改变。结果HSH组与LRS组中ICAM-1浓度于复苏后2h开始增加,分别为(371±16)ng/ml、(382±22)ng/ml,至12h最高分别为(486±20)ng/ml、(620±31)ng/ml,与sham组(349±10)ng/ml比较,各时间点差异均有显著意义(P<0.05);HSH组各时间点ICAM-1浓度明显低于LRS组(P<0.01)。肾脏HE染色光镜见LRS组肾小管腔内可见丝网状絮状物,肾间质少量瘀血,肾小管上皮细胞空泡变性,随时间的延长,病理改变加重,HSH组病变轻于LRS组。结论高渗盐液可降低复苏后血中ICAM-1的浓度,使复苏后肾脏的缺血—再灌注损伤减轻。     

吡格列酮对实验性缺血再灌注大鼠脑组织细胞间黏附分子-1mRNA表达的影响

目的 观察PPARγ激活剂吡咯列酮对实验性缺血再灌注脑组织区细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠,随机分4组,每组6只,分别为假手术组、生理盐水组、小剂量吡格列酮组、大剂量吡格列酮组.线栓法制备大脑中动脉闭塞动物模型.术前3d分别给予盐酸吡咯列酮,每日1次灌胃给药,小剂量组为10mg·kg-1·d-1,大剂量组为15mg·kg-1·d-1.以缺血后24 h作为观察时间点,RT-PCR测定缺血脑组织mRNA表达.结果 小剂量吡格列酮组ICAM-1 mRNA表达(0.571±0.032)和大剂量吡格列酮组ICAM-1mRNA表达(0.396±0.024)均较生理盐水干预组(0.847±0.028)低(P<0.05).结论 PPARγ激活剂吡咯列酮可下调缺血脑组织ICAM-1mRNA的表达.     

雷帕霉素对缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨雷帕霉素(RPM)对肾缺血再灌注不同时间Fas、Bcl-2蛋白表达的影响.方法 将54只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组、手术组和药物组.采用HE染色分析肾组织病理损伤程度,电镜观察再灌注24 h的肾组织超微结构,免疫组化SABC法检测Bcl-2、Fas蛋白表达的变化.结果 Fas蛋白在假手术组呈阴性表...