不同海拔高度大鼠严重烫伤延迟复苏心肌组织ET-1和HSP70的变化

目的：探讨高原地区不同海拔高度（3840m，1517m）大鼠严重烫伤后延迟复苏心肌组织内皮素-1（ET-1）与热休克蛋白70（HSP70）的变化规律。方法：雄性Wistar大鼠240只随机分为延迟复苏组（DFR，n=100）、即时复苏组（IFR，n=120）和对照组（CG，n=20），建立总体表面积30％的Ⅲ度烫伤模型，分别于伤后1、6、12、24、72和168h取材。应用免疫组化方法检测心肌组织ET-1和HSP70的含量。结果：ET-1在心肌细胞浆及血管内皮组织表达高于对照组，随海拔梯度上升ET-1表达增高，海拔高组高于海拔低组，DFR组高于IFR组（P〈0．01）；HSP70表达在海拔低者差异早于海拔高者（P〈0．01）。结论：高原地区大鼠严重烫伤后随海拔升高，心肌保护物质消耗增多，ET-1／HSP70调节变化更加显著。     

高海拔地区大鼠严重烧伤延迟复苏后肝脏HSP70的表达及其意义

目的：探讨高海拔地区大鼠严重烧伤延迟复苏后肝脏HSP70表达的意义及与肝损伤的关系。方法：雄性Wistar大鼠240只,分别在海拔1 517 m和3 848 m分为即时复苏组（IFR,n=60）、延迟复苏组（DFR,n=50）和假伤组（SG,n=10）,建立30%体表面积Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后1、6、12、24、72和168 h取材。采用组织病理学、组织芯片技术、原位末端标记（TUNEL）法、免疫组织化学染色与图像分析技术,观察肝组织病理学改变与细胞凋亡及HSP70蛋白的表达。结果：两个海拔高度HSP70表达强度,实验组均高于假伤组,高海拔组表达强度均高于低海拔组的强度,各海拔高度DFR组高于IFR组（P〈0.05）;肝细胞凋亡率DFR组高于IFR组,且高海拔组高于低海拔组（P〈0.05）。结论：HSP70可能参与肝缺血缺氧等应激损伤过程,HSP70在一定程度上反映机体应激水平和损伤程度,其表达可能与肝细胞自我保护机制启动有关。     

不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织损伤的特点

目的：探讨不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织损伤的特点。方法：将240只雄性Wistax大鼠建立高原（海拔3800m）与兰州地区（海拔1517m）严重烧伤动物模型（TBSA30％，Ⅲ度），并随机分为延迟、即时复苏组和正常对照组。采用干湿比重法测定脑组织含水量并应用HE染色与透射电镜技术观察大鼠脑组织结构的变化。结果：高原严重烧伤后早期脑水含量呈显著升高趋势，伤后24h达峰值。大鼠脑组织超微结构变化显示：延迟复苏组脑损伤后24h达高峰，7d尚未恢复。结论：高原严重烧伤延迟复苏脑组织损伤改变明显加重。     

不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织中神经肽-Y的变化

目的:探讨不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织神经肽-Y(Neuropeptide-Y,NPY)变化及意义。方法:将240只雄性Wistar大鼠建立高原与兰州地区严重烧伤模型(TBSA30%,Ⅲ度),随机分为延迟复苏组和即时复苏组及正常对照组,应用免疫组织化学SABC法检测大鼠脑组织中NPY的表达。结果:NPY阳性表达主要分布在神经元细胞的胞浆中。高原地区各组间在伤后1~72 h差异显著(P<0.01)。高原地区各组与兰州地区相比较,NPY表达均减少。结论:NPY表达减少与高原严重烧伤延迟复苏脑损伤的发生有关。     

严重烧伤延迟复苏患者血清心肌酶谱的变化

目的 :初步检测严重烧伤延迟复苏患者心肌酶谱的变化 ,评价其临床价值 ,探索防治心肌损伤的方法。方法 :5 7例严重烧伤患者 ,其中延迟复苏者 33例 ,即时复苏 2 4例 ,检测伤后不同时间点的心肌酶谱。结果 :本组患者血清心肌酶谱均有异常改变。同等面积与深度延迟复苏组患者血清心肌酶谱的酶值明显高于即时复苏的患者 ,且持续时间长 (P <0 .0 5 )。结论 :测定血清心肌酶及其同工酶的活性 ,对诊断严重烧伤延迟复苏患者的心肌损伤有较高的敏感性 ,尽早消灭创面 ,有益于心肌保护。     

高原地区大鼠严重烫伤延迟复苏血浆降钙素基因相关肽的变化

目的:探讨高原地区不同海拔高度大鼠严重烧伤后延迟复苏血浆降钙素基因相关肽(CGRP)的变化特点。方法:240只雄性Wistar大鼠建立严重烧伤模型(TBSA30%,Ⅲ度),随机分为延迟复苏组(DFR)、即时复苏组(IFR)和正常对照组(C),分别于伤后1、6、12、24、72h、7d取材。应用放射免疫法检测血浆中CGRP的含量。结果:在3800m海拔高度,IFR组血浆CGRP于伤后12h达最低点,DFR组于伤后6h达最低点;1500m海拔高度,IFR组与DFR组均于伤后12h达最低点,CGRP血浆含量明显高于3800m海拔高度者。两个海拔高度间,DFR组在伤后6h即出现显著差异(P<0.01),并一直延续至伤后24h,IFR组无显著性差异(P>0.05)。结论:高原地区大鼠严重烫伤后同一海拔高度,延迟复苏组血浆CGRP的含量低于即时复苏组;海拔越高,血浆CGRP的含量越低,延迟复苏后CGRP下降的越早。提示消耗的心肌保护物质越多,缺血缺氧越严重。     

不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织中能量负荷的变化及其意义

目的：探讨不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织能量负荷变化及其意义。方法：以120只雄性Wistar大鼠建立高原（海拔3800m）实验模型（TBSA30％，Ⅲ度），随机分为延迟、即时复苏组和正常对照组，分别于伤后1、6、12、24、72h及7d取材。兰州地区取相等数量动物重复实验。应用高效液相色谱法检测脑组织中AMP、ADP、ATP的含量，并计算能量负荷。结果：能量负荷在高原正常对照组与兰州地区正常对照组差异显著（P〈0．01）。高原烧伤后脑组织能量负荷与对照组相比均降低，即时复苏组伤后早期即出现显著变化（P〈0．01），伤后72h开始恢复，伤后7d差异无显著，延迟复苏组伤后7d仍星显著差异（P〈0．01）。与即时复苏组比较伤后6～24h无显著差异，伤后72h～7d呈显著性差异（P〈0．01）。高原地区各时相点与兰州地区比较，EC值均降低，除即时复苏组6h外，具有统计学意义。结论：不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织能量负荷的改变一定程度上反映了脑损伤的严重程度。     

小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素-21变化的临床意义

目的探讨C57BL/6小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素21(IL-21)的变化及其意义。方法雄性C57BL/6小鼠100只,随机分为延迟复苏组(DFR组,n=40)、即时复苏组(IFR组,n=50)和正常对照组(CG组,n=10),建立体表面积25%的Ⅲ度烫伤模型,分别于致伤后1、6、24、72 h和168 h取材。采用组织病理学、免疫组织化学染色、图像分析技术,观察不同实验组小鼠肺脏组织的病理学变化与IL-21的表达。结果 IL-21的阳性表达位于肺泡上皮细胞的胞核与胞质,延迟复苏组与即时复苏组IL-21的表达分别明显高于正常对照组,且延迟复苏组小鼠肺组织IL-21的表达高于即时复苏组小鼠肺组织IL-21的表达(P<0.05)。结论 IL-21表达强度的变化与严重烫伤延迟复苏小鼠肺组织损伤有关。     

NF-κB在高原地区严重烫伤延迟复苏大鼠肺组织中的表达及其意义

目的：探讨高原地区严重烫伤延迟复苏大鼠肺组织中NF-κB的变化规律及其意义。方法：雄性Wistar大鼠240只,分别在1517m和3848m两个海拔高度随机分为延迟复苏组（DFR,n=50）、即时复苏组（IFR,n=60）和对照组（CG,n=10）,建立30%Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后1、6、12、24、72和168h取材,观察肺组织病理学改变及NF-κB的表达。结果：随着海拔高度增加,肺组织病理变化越明显,且DFR组较IFR组差异显著。NF-κB阳性表达位于肺泡上皮细胞核或胞浆,高海拔组表达强度高于低海拔组,实验组高于对照组,各海拔高度DFR高于IFR组（P〈0.05）。结论：NF-κB表达强度变化与高原地区严重烫伤延迟复苏大鼠肺组织损伤有关。     

延迟复苏对烫伤大鼠小肠上皮细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨延迟复苏对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡百分率（ap%）及凋亡相关基因表达的影响。方法：Wistar大鼠30只，随机分为立即复苏组（ER）和延迟复苏组（DR）；30％体表面积Ⅲ度烫伤，采用DNA片段百分率测定、电泳和RT-PCR 观察伤后小肠粘膜上皮细胞ap%和ICE、bcl-2基因表达。结果：大鼠烫伤后小肠上皮ap%显著高于伤前（P＜0.01）；DR组肠上皮ap%显著高于ER组（P＜0.05-0.01）。DNA电泳可见明确梯形条带。烫伤后肠上此ICE基因表达明显增强，DR组ICE基因表达显著高于ER组（P＜0.01）。Bcl-2基因伤前在肠粘膜不表达，伤后极弱表达，两组比较无显著性差异。结论：烫伤延迟得苏后小肠上皮凋亡显著增加；促凋亡基因ICE和抑凋亡基因bcl-2的表达失衡可能是其凋亡剧增的重要原因之一。     

独参汤对大鼠烧伤延迟复苏并发心肌损害的保护作用

探讨中药人参对烧伤延迟复苏大鼠心肌损害的保护作用。结果烧伤后大鼠血浆中心肌肌钙蛋白T(TnT)浓度即显著升高 ,独参汤治疗组大鼠的血浆TnT浓度显著低于对照组。     

不同+Gz暴露后大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平的变化

目的 观察不同大小的 Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平的影响，探讨 Gz暴露致脑损伤的机理。方法 80只SD大鼠随机分为对照组， 2Gz暴露组， 6Gz暴露组， 10Gz暴露组，各组在 Gz暴露后的5h、10h、1d、2d、4d处死，采用原位分子杂交方法观察大鼠脑皮层HSP70mRNA表达情况、并对实验结果进行统计分析。结果 三个 Gz暴露组，HSP70mRNA表达水平表现出相同的变化趋势：在 Gz暴露后5h，HSP70mRNA表达水平开始增加，10h达峰值，4d时基本恢复正常。而对照组没有这一变化趋势．不同 Gz值之间的比较表明， 6Gz组HSP70mRNA表达水平最高，且分布较广泛， 10Gz组最低，且分布较局限，主要位于靠近颅底部的皮层中。结论 Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平有着显著的影响。     

严重烫伤大鼠肝组织核蛋白中糖皮质激素受体表达的变化及地塞米松对其的影响

目的 观察大鼠严重烫伤后早期肝组织核蛋白中糖皮质激素受体（glucocorticoid re-ceptor,GR)的表达变化。并探讨大剂量地塞米松对GR核转位的影响，为严重创伤时外源性糖皮质激素的合理应用提供可靠实验依据。方法 结合Western blot和免疫组织化学染色技术，检测大鼠严重烫伤后早期48h内肝组织核蛋白中GR的表达变化情况；于烫伤后不同时间腹腔注射地塞米松（5mg/kg)，通过Western blot分析地塞米松使用前后肝脏GR由胞浆向胞核的转位改变。结果 大鼠严重烫伤后15min，肝组织核蛋白中GR的表达就已开始降低，1h达最低值，显著低于正常对照，之后逐渐回升，12h恢复正常，24h后又明显高于正常对照；严重烫伤后4-12h，腹腔注射大剂量地塞米松可使肝脏组织核蛋白中GR的表达显著增多，而烫伤后1h内和24h后应用地塞米松对核内GR的表达无显著影响。结论 严重烫伤可引起大鼠肝组织细胞核内GR的表达显著下降，在烫伤后4-12h应用大剂量地塞米松可通过促进核转位来提高GR在胞核内的表达。     

Ad-GFP修饰MSCs静脉移植在严重烫伤延迟复苏大鼠体内的定向迁移

目的:观察携带目的基因的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 静脉移植在严重烫伤延迟复苏损伤体内的分布.方法:分离培养MSCs,用Ad-GFP转染MSCs,25只Wistar大鼠随机分为延迟复苏组(A组,10只)、即时复苏组(B组,10只)、假伤组(C组,5只).A、B两组大鼠背部造成Ⅲ度30%烫伤,制备A组为延迟复苏模型,B组为即时复苏模型,同时制备C组为假伤模型,经股静脉移植转染Ad-GFP 48 h后的MSCs.24 h,7 d后取小肠、肝脏、肾脏、烫伤皮肤创缘等组织,快速冰冻切片,荧光显微镜下观察在体内的分布.结果:MSCs 体外分离培养扩增5代,细胞数可达(1～2)×1011个,具有多态性和贴壁生长特性,MOI=100时,Ad-GFP转染MSCs效率可达86.4%.经股静脉移植24 h,在延迟复苏组烫伤皮肤组织创缘,小肠黏膜广泛可见绿色荧光,而在肝、肺等器官少见,即时复苏组荧光以烫伤皮肤创缘分布为主,小肠黏膜较少,假伤组中绿色荧光分布以肝脏为主.延迟复苏组小肠荧光强度明显强于即时复苏组和假伤组(P《0.05),而延迟和即时复苏组皮肤创缘荧光强度又强于假伤组(P《0.05).结论:导入目的基因可能不会改变MSCs归巢特性,并将为后续启动基因治疗烧伤延迟复苏后的损伤研究提供参考.     

高原不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肾组织细胞凋亡及Bcl-2蛋白的表达

目的 探讨高原不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肾脏组织Bcl-2蛋白的表达及其与肾组织细胞凋亡的关系.方法 雄性Wistar大鼠240只,分别在1 517m和3 848m两个海拔高度建立30%TBSAⅢ度高原烫伤模型,随机分为即时复苏组(IFR组,伤后即刻腹腔注射等渗盐水4ml/kg,n=60)、延迟复苏组(DFR组,伤后6h开始按4ml/kg补液,n=50)和假烫对照组(NC组,n=10),分别于伤后1、6、12、24、72和168h取材.采用组织芯片技术和原位末端标记法(TUNEL)检测肾组织细胞的凋亡,免疫组织化学染色与图像分析技术检测肾组织Bcl-2蛋白的表达.结果 随着海拔梯度上升,肾小管上皮细胞发生水肿、颗粒变性、坏死及崩解;肾小球毛细血管出现不同程度扩张、充血,内皮细胞变性及坏死,肾间质充血、水肿及炎性细胞浸润.病变程度DFR组较IFR组加重,高海拔地区较低海拔地区加重.肾组织细胞凋亡率和Bcl-2蛋白表达水平DFR组高于IFR组,高海拔地区高于低海拔地区(P＜0.001),且二者呈明显正相关(r=0.516,P＜0.001).结论 高原严重烧伤导致的肾损伤与肾小管细胞凋亡有关,而凋亡抑制因子Bcl-2的高表达反映了损伤过程中细胞自我保护机制的增强.     

延迟复苏对烫伤大鼠心肝肾氧自由基生成的影响及维生素E和维生素C治疗效果评价

采用３６只肠内含５种细菌悉生的大鼠，分成伤前对照组（Ⅰ组）、早期复苏组（Ⅱ组）、延迟复苏组（Ⅲ组）和治疗组（Ⅳ组），观察了伤后８ｈ和１ｄ心、肝、肾氧自由基（ＯＦＲ）相对量（ＥＳＲ技术）及丙二醛（ＭＤＡ）含量变化。结果发现，Ⅱ、Ⅲ组大鼠心、肝、肾ＯＦＲ相对含量均增高，Ⅲ组升高更明显，各时间点较Ⅱ组均有显著差异（Ｐ＜０．０１），尤以肾脏升高最明显。Ⅳ组各脏器ＯＦＲ相对含量低于Ⅲ组（Ｐ＜０．０１）。各脏器ＭＤＡ含量与ＯＦＲ相对含量变化规律基本一致。该结果表明，延迟复苏增加烧伤后早期脏器ＯＦＲ生成，导致脂质过氧化反应加重，ＯＦＲ对肾脏的影响可能重于其它脏器。维生素Ｅ、维生素Ｃ联合治疗可有效清除脏器中ＯＦＲ，可用于延迟复苏后脏器功能保护。     

模拟不同海拔高住低练对大鼠心肌VEGF和HSP70的影响

目的:探讨模拟不同海拔高住低练对大鼠心肌保护性蛋白热休克蛋白70(HSP70)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:适应性喂养1周后,将48只SD大鼠按体重随机分为6组:常氧对照组(C)、14.5%O2低氧暴露组(14.5%O2LH)、12.7%O2低氧暴露组(12.7O2LH)、常氧训练组(TL)、14.5%O2高住低练组(14.5%O2LiLo)、12.7%O2高住低练组(12.7%O2HiLo),每组8只。采用20.9%、14.5%和12.7%三种氧浓度暴露和运动强度逐渐递增的高住低练模型,两LH组每天在低压氧舱中放置22 h后2 h舱外常氧生活,两HiLo组每天在低压氧舱中放置22 h后常氧生活1 h,再常氧训练1 h,所有进行低氧暴露的动物每周实验6天;TL组和两HiLo组进行一次5～10 min跑台适应性训练(速度为16 m/min,坡度为0)后,每天训练速度为35m/min,运动时间从30 min至60 min递增,每3天增加5 min,每天训练1次,每周6天,共4周。实验方案结束后24 h,麻醉大鼠取大鼠心尖肌组织,采用免疫组织化学技术检测VEGF和HSP70表达。结果:(1)与C组比较,14.5%O2LH组、TL组和12.7%O2的HiLo组VEGF阳性物质表达量显著增加(Ρ<0.05),12.7%O2LH组增加不显著(Ρ>0.05),而14.5%O2HiLo组表达量增加非常显著(Ρ<0.01);14.5%O2LH组VEGF阳性物质表达量较12.7%O2LH组显著增加(Ρ<0.05),12.7%O2HiLo组比14.5%O2HiLo组显著降低(Ρ<0.05),14.5%O2HiLo组VEGF阳性物质表达量较14.5%O2LH组显著增加(Ρ<0.05)。(2)与C组相比较,14.5%O2LH组、14.5%O2和12.7%O2两HiLo组HSP70阳性物质表达量增加(Ρ<0.05),12.7%O2LH组表达最明显,而TL组增加不显著(Ρ>0.05);14.5%O2LH和HiLo两组HSP70阳性物质表达量分别比12.7%O2LH和HiLo两组显著降低(Ρ<0.05),而两LH组HSP70阳性物质表达量分别与两HiLo组相比无显著性差异(Ρ>0.05)。结论:单纯低氧暴露、常氧运动及高住低练三种应激因素均诱导细胞保护性蛋白VEGF和HSP70表达;14.5%O2HiLo组的VEGF表达最显著,而12.7%O2LH组的HSP70表达最显著。     

力竭运动后不同时相大鼠心肌低氧诱导因子1α表达的变化

目的:探讨力竭运动对心肌低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法:90只健康成年雄性SD大鼠,分为安静对照组(n=10)和一次力竭游泳运动组(包括一次力竭后即刻组、6小时组、12小时组和24小时组,每组10只大鼠)、2周反复力竭游泳运动组(包括反复力竭后即刻组、6小时组、12小时组和24小时组,每组10只大鼠),建立一次力竭游泳和反复力竭游泳运动后心肌微损伤运动实验模型。两力竭运动组分别于最后一次力竭运动后即刻、6小时、12小时及24小时取材,安静对照组同期安静状态下取材。应用免疫荧光技术和图像分析方法测定各组大鼠心肌HIF-1α表达。结果:一次力竭游泳运动后即刻、6小时、12小时组大鼠左室、右室及室间隔HIF-1α蛋白表达均显著高于相同部位对照组蛋白表达(P<0.05);反复力竭运动后即刻组大鼠左心室HIF-1α蛋白表达显著高于对照组、6小时组及24小时组(P<0.05),即刻组、12小时及24小时组右心室HIF-1α蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,力竭运动后心肌低氧诱导因子-1α表达与心肌受损有关。