MACC1、HGF/c-Met和EMT在促进恶性肿瘤侵袭转移机制中的相关性研究

结肠癌转移相关基因1（metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1）是一个在多种恶性肿瘤中调控肿瘤生长和转移的重要基因.MACC1通过调控肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）/间质向上皮转化因子（mesenchymal-epithelial transition factor,c-Met）信号通路诱导上皮向间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,促进肿瘤细胞的迁移、浸润和转移.因此,本文将MACC1、HGF/c-Met和EMT三者结合在一起,探索三者与肿瘤侵袭转移的相关性.     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与恶性肿瘤上皮间质转化研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)是细胞内许多重要信号转导通路的枢纽,参与多种生理与病理过程(如细胞增殖、细胞周期调控、细胞迁移等),其功能失调与肿瘤的发生、发展紧密相关。以m TOR为靶点的抗肿瘤基础研究已是当前热点。上皮间质转化(EMT)与肿瘤的侵袭与转移密切相关,受多种转录因子以及Wnt、转化生长因子β、Notch等信号通路的调控。m TOR结合蛋白、信号通路及相关基因均参与恶性肿瘤EMT进程,m TOR可正性调控EMT,改变肿瘤的侵袭与转移能力。     

缺氧诱导因子对肿瘤细胞上皮-间质转化的诱导机制

实体瘤组织内普遍存在低氧现象,缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)是缺氧条件下传递缺氧信号、介导缺氧效应的关键转录因子;上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transitions,EMT)是一个多步骤有序可高度调节的过程,EMT的发生与多种蛋白分子、微环境及Micro RNA等有关,涉及多个信号转导通路和复杂的分子机制,在肿瘤细胞的侵袭和转移过程中扮演重要的角色。研究证实,低氧可通过转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路、刺猬信号通路(hedgehog signaling pathway,Hedgehog)、肝细胞生长因子/肝细胞生长因子(HGF/Met)信号通路及多种转录因子等途径参与肿瘤EMT调控,目前通过抑制HIF来达到阻断EMT过程的研究日益增多且初见成效,揭示低氧诱导的EMT途径可能成为日后肿瘤治疗的新靶点,对于预防和治疗癌症具有重要意义。     

TGF-β引发的上皮间质转化与肿瘤侵袭转移的关系

近年来研究发现,上皮-间质转化（epithelial—mesenchymal transition、EMT）是肿瘤浸润、转移的重要机制。转化生长因子-β（TGF-β）是一种具有多功能生物学活性的细胞因子,已有研究发现TGF—β在诱发EMT中起关键作用。恶性肿瘤主要死亡原因是肿瘤发生浸润转移。研究TGF—β引发的上皮间质转化在恶性肿瘤侵袭、转移中的作用,可为肿瘤侵袭转移机制和肿瘤治疗提供新的思路。     

上皮间质转化在肝细胞癌侵袭转移中的研究进展

上皮间质转化(EMT)现象是指上皮细胞通过特定程序转化获得具有间质细胞表型的过程。EMT在胚胎发生、器官纤维化和肿瘤转移过程中发挥重要作用,在原发性肝细胞癌的转移中存在这一现象。该文重点介绍Notch通路、Wnt(wingless-type)/β联蛋白通路、转化生长因子β/Smad通路和Hedgehog通路,以及转录因子Snail、Twist、ZEB-1和同源盒基因B7的组成及其在原发性肝细胞癌的EMT过程中起到的重要调控作用。EMT分子机制的研究是一个有前景的课题,可为原发性肝细胞癌的治疗提供新的靶点。     

上皮间质转化在乳腺癌中的研究进展

上皮间质转化（epithelial - mesenchymal transition,EMT）是上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,是一种重要的病理生理现象。EMT 的发生涉及多种信号转导通路,与诱导因子、转录因子等有关。而乳腺癌的发生、发展受多个因素影响和多个信号传导途径调控,近年研究发现 EMT 在乳腺癌的原位浸润和远处转移中发挥重要作用。本文就 EMT 与乳腺癌涉及的信号通路、浸袭转移及耐药的最新研究进展作一综述。     

上皮间质转化在肿瘤中的研究进展

肿瘤细胞的上皮间质转化(EMT)可以使上皮细胞来源的肿瘤细胞获取更强的侵袭和转移能力,从而导致肿瘤的浸润、侵袭和转移。EMT是一个连续的动态变化的生物过程,其发生和发展受到不同转录因子(Snail家族、E盒结构锌指蛋白家族、碱性螺旋-环-螺旋蛋白同型和异质二聚体)及信号通路(转化生长因子β信号通路、Wnt/β联蛋白信号通路)的调控,理解并运用这一机制可以增强对肿瘤侵袭和转移的认识,利于寻找控制肿瘤侵袭和转移的有效途径,并且开发出针对性的靶向治疗药物,改善患者的预后,为临床治疗提供理论支持。     

上皮剪接调节蛋白与肿瘤细胞上皮-间质转化

上皮-间质转化（EMT）是具有极性的上皮细胞向间质细胞转化的过程,在机体正常发育和肿瘤细胞的侵袭及转移过程中具有重要作用。近年来,大量的实验数据表明上皮剪接调节蛋白（epithelial splicing regulatory proteins,ESRPs）具有抑制肿瘤EMT的作用,是肿瘤恶性转化的一种负向调控因子,受TGF-β-Smad信号通路的调节。ESRPs通过选择性剪接作用在转录后水平直接或者间接地调控FGFR2、Rac1b、E-钙黏蛋白及ZEBs等EMT相关因子的表达,抑制上皮细胞向间质细胞转换。本文综述了ESRPs的分子结构特征及其抑制肿瘤细胞EMT机制的研究进展,并对其在临床上作为恶性肿瘤诊断标志物的可能性进行了讨论。     

上皮-间质转化在肿瘤侵袭转移中的作用研究进展

上皮-间质转化（EMT）是指上皮细胞获得间质细胞的生物学特性的过程,表现为细胞极性丧失、上皮细胞标志物（如细胞黏附分子）表达减少及间质细胞标志物（如波形蛋白）表达的增高.EMT在胚胎发育等生理过程及创伤修复等病理生理过程中起重要作用.近年来研究发现,EMT可促进肿瘤细胞侵袭转移,并与肿瘤干细胞生物学功能关系密切.EMT的发生与肿瘤微环境中多种信号通路、诱导因子、转录因子以及microRNA相关.     

上皮-间质转化发生机制的研究进展

上皮-间质转化（EMT）参与多种恶性肿瘤的发生、侵袭和转移,其发生机制是一个非常复杂的过程,由多种转录因子、信号通路等参与,同时与miRNA、肿瘤微环境、外泌体有关。本文就EMT发生机制的研究进展作一综述。     

卵巢癌SOX4介导TGF-β1诱导的上皮间质转化对侵袭转移能力的影响

目的 探讨SOX4(SRY-related HMG-box4)在卵巢癌中的表达、调控及其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导卵巢癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)能力的影响。方法 通过对TCGA、GEO等数据库中卵巢癌样本表达谱数据进行分析,探讨SOX4在卵巢癌中的表达情况,及其与EMT相关标志物的相关性。利用shRNA技术敲降卵巢癌SKOV3细胞系中SOX4的表达;利用Western blotting和qRT-PCR技术检测SOX4敲降对上皮标志物ZO1及间质标志物Vimentin和Slug表达的影响;利用Transwell技术检测SOX4敲降对卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的影响;使用TGF-β1(10 ng/mL)处理SKOV3细胞72 h,然后通过 Western blotting 和qRT-PCR技术,检测TGF-β1对SOX4表达的调控情况,以及SOX4敲除对TGF-β1诱导EMT能力的影响。结果 SOX4在卵巢癌中的表达显著上调,并与EMT间质标志物呈显著正相关;敲除SOX4可显著下调卵巢癌SKOV3细胞的EMT水平及其侵袭转移能力;TGF-β1可显著上调卵巢癌SKOV3细胞中SOX4的表达水平,而SOX4敲除可显著抑制TGF-β1诱导卵巢癌EMT的能力。结论 SOX4在卵巢癌中表达上调,通过激活EMT促进其侵袭转移能力;并且,作为TGF-β1下游靶蛋白,SOX4介导了TGF-β1对卵巢癌EMT的诱导过程。因此,SOX4是一个干预卵巢癌转移的重要靶点。     

上皮间质转化在特发性肺纤维化及其信号通路中的研究进展

 特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种慢性致死性疾病，其发病机制尚未完全阐明。上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是分化的肺泡上皮细胞失去上皮特征同时获得间充质细胞形态以及迁移性的生物学过程。阻断TGF-β-Smad、Wnt/β-catenin、Hippo等介导的信号转导，有利于抑制EMT，进而有助于抑制IPF进展。本文总结了EMT相关信号转导通路在IPF中的研究进展，为临床使用靶向EMT的药物诊疗肺纤维化患者提供一定的参考和依据。     

Type 2 epithelial mesenchymal transition in vivo: truth or pitfalls?

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a process by which fully differentiated epithelial cells undergo a phenotypic conversion and assume a mesenchymal cell phenotype, including elongated morphology, enhanced migratory and invasiveness capacity, and greatly increased production of extracellular matrix (ECM) components. The EMTs associated with wound healing, tissue regeneration, and organ fibrosis are termed as type 2 EMT. Over the past two decades, emerging evidence suggested that injured epithelial cells, via type 2 EMT, may serve as important sources of fibroblasts and contribute to organ fibrosis, such as kidney, liver, lung and eyes. There is perhaps no doubt that adult epithelial cells can undergo EMT in vitro in response to transforming growth factor (TGF)-β1 and other inflammatory or pro-fibrotic stimuli. However, whether type 2 EMT really occurs in vivo, whethers it is actually a source of functional and activated interstitial fibroblasts and whether it contributes to tissue fibrosis have already been the subjects of heated debate. In this review, we will describe the main features of EMT, the major findings of type 2 EMT in vitro, the evidences for and against type 2 EMT in vivo and discuss the heterogeneity and pitfalls of the techniques used to detect EMT during fibrotic diseases. We suggest that in order to ascertain the existence of type 2 EMT in vivo, different proper phenotype markers of epithelial and mesenchymal cells should be jointly used and cell lineage tracking techniques should be standardized and avoid false positives. Finally, we believe that if EMT really occurs and contributes to tissue fibrosis, efforts should be made to block or reverse EMT to attenuate fibrotic process.

     

上皮-间质转化胶质瘤细胞的干细胞样特性及白藜芦醇对其干细胞样特性的抑制作用

目的：探讨发生上皮-间质转化（EMT）的胶质瘤细胞的干细胞样特性,阐明白藜芦醇（Res）对其干细胞样特性的抑制作用。方法：采用TGF-β1诱导胶质瘤U87细胞发生EMT,倒置显微镜观察细胞的形态表现,Western blotting法检测细胞间质标志物N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和诱导EMT的转录因子（Snail、Slug、Zeb1和Twist1）表达水平。确定胶质瘤细胞发生EMT后,实验分为对照组（U87细胞不做处理）、EMT组（TGF-β1诱导胶质瘤细胞发生EMT）和Res处理组（Res处理发生EMT的U87细胞）,检测各组胶质瘤U87细胞二代胶质球形成数和细胞中干细胞标志物（Bmi1和Sox2）表达水平。结果：经TGF-β1处理48 h的胶质瘤U87细胞表现出分散、拉长和类似成纤维细胞的外观。与对照组比较,不同浓度TGF-β1组胶质瘤细胞中N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、Zeb1和Twist1表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,表明胶质瘤U87细胞发生EMT改变。与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞二代胶质球形成数明显增多（P<0.01）,胶质瘤细胞中干细胞标志物Bmi1和Sox2表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与EMT组比较,Res处理组胶质瘤U87细胞二代胶质球形成数明显减少（P<0.01）,胶质瘤细胞中干细胞标志物Bmi1和Sox2表达水平明显降低（P<0.01）。结论：发生EMT的胶质瘤U87细胞呈现干细胞样特性,Res能抑制其干细胞样特性。     

外泌体对上皮-间质转化调控作用的研究进展

外泌体是一种具有生物活性的膜性囊泡,既可在细胞间传递活性物质,还可通过调控细胞间的信息传递参与细胞活动。 上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞获得间充质细胞特性的过程,在众多疾病中发挥了重要作用。研究表明,外泌体在EMT的发 生发展过程中具有双向作用。一方面,外泌体可促进细胞发生EMT,赋予肿瘤细胞侵袭和转移能力,促进血管新生和加快肿瘤 生长;另一方面,外泌体亦可抑制EMT,发挥减弱肿瘤细胞侵袭能力,抑制心、肝、肾纤维化,改善心肌梗死等作用。外泌体可能 是通过携带EMT相关蛋白或miRNA,调控EMT相关信号通路发挥双向调节作用。     

高尿酸通过TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质转化的作用研究

目的 探讨尿酸诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制.方法 采用不同质量浓度的尿酸预孵育肾小管上皮细胞(HK-2)48 h,通过倒置显微镜观察尿酸对HK-2细胞形态的影响,Western blot检测Fibronectin、α-SMA和E-cadherin蛋白表达变化.Real-time PCR检测炎症因子IL-1 β、IL-6以及TNF-α mRNA的表达变化,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化.结果 与正常组相比,15 mg/dL的尿酸处理HK-2细胞48 h后,HK-2细胞间隙增大,呈长梭形改变.间充质细胞标志物Fibronectin、α-SMA表达明显升高,而上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降(P＜0.05).同时,高浓度尿酸诱导了HK-2细胞炎症因子IL-1β、TNF-α的表达升高(P＜0.05),TLR4/NF-κB信号通路活化,而靶向抑制NF-κB信号通路活化可以显著抑制尿酸诱导的EMT.结论 高尿酸可以通过活化TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞EMT的发生,靶向干预NF-κB信号通路可以显著抑制尿酸诱导的肾间质纤维化.     

HIF诱导EMT在肿瘤侵袭转移中的作用

缺氧是肿瘤微环境的主要特点,通过缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)激活众多靶基因,从而影响肿瘤的代谢、增殖、凋亡、侵袭转移、耐药等多个方面。上皮细胞间质化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)是肿瘤发生侵袭转移的重要起始过程,缺氧亦是EMT的诱发因素之一并可通过多条信号转导通路包括TGF-β,Notch,Wnt/β-catenin等调节EMT。研究缺氧诱导EMT的机制并阻断其进程,可成为治疗肿瘤的新靶点。     

沉默ZEB1基因对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的影响

目的：探讨沉默锌指E盒结合同源框1（ZEB1）基因对胶质瘤U87细胞间质标志物表达和细胞迁移的作用,阐明ZEB1对胶质瘤细胞上皮-间质转化（EMT）的影响。方法：将构建的ZEB1短发夹RNA（shRNA）干扰质粒（shZEB1#1和shZEB1#2）和对照质粒（shCtrl）转染至胶质瘤U87细胞,Western blotting法检测干扰效果。将胶质瘤U87细胞分为对照组（转染shCtrl的胶质瘤U87细胞）、EMT组[转染shCtrl的胶质瘤U87细胞用转化生长因子β1（TGF-β1）诱导EMT]和ZEB1基因沉默组（转染shZEB1的胶质瘤U87细胞用TGF-β1诱导EMT）。Western blotting法检测各组细胞中间质标志物（N-钙黏蛋白和波形蛋白）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白表达水平,划痕愈合实验检测各组细胞的迁移率。结果： Western blotting法检测,转染shZEB1#1和shZEB1#2的胶质瘤U87细胞中ZEB1蛋白表达水平较转染shCtrl的细胞明显降低（P<0.05或P<0.01）,shZEB1#2对ZEB1表达的抑制效果更明显,表明ZEB1已稳定转染到U87细胞。与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞中N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）;与EMT组比较,ZEB1基因沉默组N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。EMT组细胞迁移率明显高于对照组（P<0.01）,而ZEB1基因沉默组细胞迁移率明显低于EMT组（P<0.01）。结论：沉默ZEB1基因表达可抑制胶质瘤U87细胞EMT,并降低细胞迁移能力,提示ZEB1可作为侵袭性胶质瘤治疗的重要靶标。     

白藜芦醇对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的抑制作用

目的：探讨白藜芦醇（Res）对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化（EMT）、迁移和侵袭能力的调控作用,阐明Res对胶质瘤细胞EMT的抑制作用。方法：将胶质瘤U87细胞分为对照组（不做处理）、EMT组（TGF-β1诱导EMT）和Res处理组（Res处理EMT）。应用Western blotting法检测各组细胞中间质标志物（N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白）、诱导EMT的转录因子（Snail、Slug和Twist1）以及基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的蛋白表达水平。划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果：与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞的间质标志物（N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白）、诱导EMT的转录因子（Snail、Slug和Twist1）和MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;与EMT组比较,Res处理组上述蛋白表达水平明显下调（P<0.05和P<0.01）;40 μmol·L^-1 Res处理组效果较20 μmol·L^-1 Res处理组更明显（P<0.05）。EMT组细胞迁移率和侵袭率明显高于对照组（P<0.01）,而Res处理组胶质瘤细胞迁移率和侵袭率明显低于EMT组（P<0.01）。结论：Res能抑制胶质瘤U87细胞EMT,降低细胞的迁移和侵袭能力。