压力超负荷性心肌肥厚发病机制的研究

目的:探讨α1、β受体阻断剂派唑嗪(Prazosin,Pra)、心得安(Propra-nolol,Pro)及钙离子拮抗剂尼群地平(Nitrendipine,Nit)在压力超负荷性心肌肥厚发病学中的意义。方法:采用Pra、Pro和Nit治疗大鼠腹主动脉缩窄所致左室肥厚(LVH)。结果:Pra和Nit能抑制早期肥厚心肌c-fosmRNA表达,6周后Pra组和Nit组较LVH组之BP,LVW/BW均显著下降,同时心脏舒张功能改善,Na+-K+ATPase活性增强;而Pro不能有效改善LVH。结论:Pra和Nit治疗成功预防了心肌肥厚的发生,而Pro不能。提示儿茶酚胺参与压力超负荷性心肌肥厚的形成,其效应不仅涉及后负荷的高低,也可通过α1肾上腺素能受体而不是β肾上腺素能受体对心肌产生直接性致肥大作用,同时钙离子可作为第二信使参与引起心肌细胞肥大的信息传递。     

一氧化氮在压力超负荷心肌肥大作用中的定量分析

目的：探讨一气化氮（NO）在压力超负荷心肌肥大反应过程中的作用。方法：建立腹主动脉缩窄性高血压大鼠模型,测定平均动脉压（MAP）和左心室／体重比值（LVW／BW）;测量大鼠心肌的体积密度（Vv）、表面积密度（Sv）、比表面（S／V）及平均自由程（λ）等。结果：高血压大鼠的MAP、LVW／Bw、心肌横断面积、平均直径、Vv、Sv明显增大、入显著减小;加L-Arg组的MAP、LVW／BW值大致恢复至正常水平,心肌横断面积及平均直径、Vv、Sv等明显小于高血压组,S／V及入则增大;加L-NAME组的MAP、LVW／BW、心肌横断面积及平均直径、Vv、Sv等持续加大,而S／V及入则变小。结论：NO可明显改变体视学各项参数,对压力超负荷引起的高血压和心肌肥大具有明显的抑制作用。     

压力超负荷所致心肌肥厚中程序性坏死的初步研究

本研究旨在观察压力超负荷所致心肌肥厚的病理生理过程中是否发生细胞程序性坏死及洛沙坦对这一病理生理过程的影响。实验采用腹主动脉缩窄术(TAC)建立压力超负荷导致的心肌肥厚大鼠模型,通过动脉血压、超声心动图、左心室质量指数、心肌肥厚分子标志物等观察左心室的结构功能变化。用real-time PCR和Western blot法分别检测程序性坏死标志物——受体相互作用蛋白激酶1和3(RIPK1和RIPK3)的基因和蛋白表达变化。结果表明,SD大鼠TAC术后4周可发生心肌肥厚。心肌组织中RIPK1/RIPK3的表达升高,HE染色发现坏死样心肌组织,电镜结果显示线粒体结构受损,提示心肌细胞可能发生程序性坏死。给予TAC大鼠血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂洛沙坦治疗,大鼠心脏结构及功能明显改善,心肌肥厚程度减轻,而且对心肌肥厚过程中的程序性坏死有明显的抑制作用。     

血管紧张素Ⅱ在压力超负荷性心肌肥厚发病学中的意义

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）在心肌肥厚发病学的意义。方法：采用大剂量血管紧张素转化酶抑制剂（ＡＣＥＩ）ｃａｐｔｒｏｐｒｉｌ（Ｃａｐ）治疗大鼠腹主动脉缩窄所致左室肥厚（ＬＶＨ）。结果：Ｃａｐ早期能抑制肥厚心肌ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达,６周后ＬＶＨ＋Ｃａｐ组较ＬＶＨ组Ｂｐ,ＬＶＷ／ＢＷ各下降２５．９％（Ｐ〈０．０１）,２９．０（Ｐ〈０．０１）,同时心脏舒张功能改善（Ｐ〈０．０５）,肌球蛋白ＡＴＰ     

钙调蛋白与肥厚心肌的心律失常

钙调蛋白(calmodulin,CaM)是广泛存在于真核生物体内的一种多功能蛋白质,是Ca2+在体内的一个重要受体。CaM通过Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶及CaMKⅡ,调节心肌细胞肥大相关基因的表达;通过心肌细胞膜上钙通道的磷酸化,造成钙超载,进而诱导心肌肥厚及肥厚心肌心律失常的发生。钙调蛋白在肥厚心肌心律失常机制的阐述,对指导临床治疗和开发新的、更有效的药物具有重要的意义。     

Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化

目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型.分别于术后24h, 2、 4、 6周,测定血液动力学变化;称量心体质量;光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化; 提取左心室RNA, RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化.结果:术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化.术后2、 4、 6周时,模型组大鼠的SBP、 DBP、 LVSP、 LVED及左心室体质量指数逐渐增加,心肌纤维逐渐增粗,线粒体逐渐增多, 肌节增长.术后24h PrxⅢ的表达稍有降低,但无统计学意义,2周时则明显降低,4周有所上升但仍低于对照,6周时明显上升且高于对照组.结论:PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势,即在心肌肥厚中早期表达降低,而在心肌肥厚形成后表达明显升高,表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生.     

二甲双胍对压力超负荷大鼠心肌肥厚的影响

目的:探讨二甲双胍(MET)对高血压大鼠心肌肥厚的影响及其机制。方法:制作腹主动脉缩窄(TAC)大鼠高血压心肌肥厚模型,术后1周随机分为5组(每组8只),灌胃给药8周:sham组:假手术,予蒸馏水2mL;TAC组:TAC大鼠,予蒸馏水2mL;MET组:TAC大鼠,予MET300mg·kg-1.d-1;MN组:TAC大鼠,同时给予MET300mg·kg-1.d-1和NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,NOS抑制剂)50mg·kg-1.d-1;NAME组:TAC大鼠,予L-NAME50mg·kg-1.d-1。处理8周后测定超声心动图、血流动力学、心肌组织学、心肌AMP激活的蛋白激酶(AMPK)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的水平及活性。结果:处理8周后,TAC组大鼠左心室室壁厚度、心脏重量/体重(HW/BW)以及左心室心肌血管周围纤维化及心肌间质纤维化程度较sham组显著升高,给予MET300mg·kg-1.d-18周后,左心室肥厚及心肌纤维化显著减轻,心肌收缩及舒张功能改善(P0.05)。同时给予NOS抑制剂L-NAME则显著抑制MET上述效应。MET组大鼠左心室心肌p-AMPKαThr172和p-eNOSSer1177水平以及心肌及血清一氧化氮水平较TAC组显著升高。结论:长期给予MET治疗,显著抑制压力负荷高血压大鼠心肌肥厚及心肌纤维化程度,同时心功能改善。其机制可能与MET激活AMPK-eNOS信号通路有关。     

钙联蛋白在心肌成纤维细胞活化过程中的作用研究

钙联蛋白(Calnexin)是内质网上的凝集素样分子伴侣蛋白,也是线粒体结合内质网膜上的重要蛋白,在心脏疾病中发挥着重要作用,但其在心肌成纤维细胞活化中的作用和机制并未阐明。本研究通过小鼠胸主动脉缩窄(TAC)模型来观察体内心肌纤维化情况,并利用心脏超声,苏木精-伊红、Masson和天狼星红染色,以及心脏纤维化标志物表达水平,鉴定模型是否成功。体外实验利用转化生长因子TGFβ1刺激建立心肌成纤维细胞活化模型,通过定量PCR、Western blot、EdU渗入法及划痕实验等方法检测其活化、细胞增殖、迁移的变化。利用腺病毒过表达和沉默Calnexin,来观察Calnexin在体外心肌成纤维细胞活化中的作用。结果显示,Calnexin在TAC模型和体外心肌成纤维细胞活化过程中均表达降低。过表达Calnexin能缓解心肌成纤维细胞活化;相反,沉默Calnexin导致其活化加重。进一步探究发现,内质网应激在心肌成纤维细胞活化过程中被激活,过表达Calnexin后内质网应激缓解,相反,敲低Calnexin后内质网应激加重,与活化表型变化一致。结果表明,过表达Calnexin可能通过缓解内质网应激从而减轻心肌成纤维细胞的活化程度。     

急性压力超负荷诱导心肌内分泌活化

目的：探讨压力超负荷致心肌肥大的跨膜信号传递机制。方法：利用放射免疫法及分光光度法动态观察压力超负荷后大鼠心肌组织血管紧张素转换角活性，血管紧张素Ⅱ、内皮索和一氧化氢含量的变化，并观察它们与压力超负荷心肌肥大的关系。结果：随大鼠动脉血压逐步升高，心肌组织中血管紧张素转换酶活性，血管紧张素Ⅱ、内皮素含量均迅速升高（P＜0．05），并持续保持高水平，血管紧张素Ⅱ升高早于内皮系，而一氧化氛含量迅速降低并持续受抑（P＜0．05）。结论：心肌内分泌活化可能是介导压力超负荷致心肌肥大的重要机制。     

钙稳态和自噬在心肌肥厚中作用的研究进展

心肌肥厚指心脏在各种因素作用下出现的心肌质量和体积的增加。生理性心肌肥厚可以转变为病理性心肌肥厚,最终导致心力衰竭和心源性猝死。心肌肥厚病理因素较为复杂,钙稳态和自噬在心肌肥厚的发生发展中起着重要作用。钙信号主要包括钙离子/钙调蛋白/钙调素依赖蛋白激酶II/肌细胞增强因子-2(Ca²⁺/CaM/CaMKⅡ/MEF-2)和钙离子/钙调蛋白/钙调素依赖蛋白激酶II/钙调神经磷酸酶/活化T细胞核因子(Ca²⁺/CaM/CaMKⅡ/CaN/NFAT)两条通路,同时钙稳态与自噬两种途径也互相调节。本文对钙稳态和自噬在心肌肥厚中的作用作一综述。     

压力超负荷大鼠心肌胶原代谢的动态变化

目的:探讨压力超负荷大鼠心肌胶原代谢的动态变化。方法:采用腹主动脉缩窄法制备压力超负荷大鼠模型,并以假手术组为对照,分别于术后第3周、4周、8周和12周取材,称量大鼠体质量、心脏质量和左心室质量,计算心脏质量指数(heart mass index,HMI)和左心室质量指数(left ventricle mass index,LVMI);心肌组织Masson染色观察心肌胶原纤维沉积情况;样本碱水解法检测心肌组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;ELISA法检测血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(procollagen typeⅠcarboxy-terminal peptide,PⅠCP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(procollagen typeⅢamino-terminal peptide,PⅢNT)和Ⅰ型胶原C端肽(collagen C telopeptide typeⅠ,CTX-Ⅰ)水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠心肌血管周围及间质可见胶原纤维沉积,心肌胶原容积分数明显增高(P0.01),且随时间延长胶原沉积明显增多;模型组大鼠HMI、LVMI和HYP均明显增加(P0.05),且随时间延长大鼠HYP有升高的趋势;模型组大鼠血清PⅠCP浓度显著升高,在第4、8和12周时差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠血清PⅢNP浓度显著升高,CTX-Ⅰ浓度显著降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:压力超负荷状态下,心肌胶原代谢紊乱,且随时间的延长心肌呈不同程度的纤维化表现。     

压力超负荷致心肌肥大过程中心肌内分泌因子活化

目的探讨急性压力超负荷心肌肥大的跨膜信号传递机制.方法分别利用放射免疫法、分光光度法、免疫组化及原位杂交法动态观察压力超负荷后大鼠心肌组织血管紧张素转换酶(ACE)活性、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、一氧化氮含量和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的变化,并观察它们与压力超负荷心肌肥大的关系.结果随大鼠血压升高,心肌组织中ACE活性及AngⅡ含量均迅速升高(P＜0.05),并持续保持高水平,bFGF表达先升高(P＜0.05)后又恢复到正常水平;AngⅡ含量升高早于bFGF表达升高;而一氧化氮含量迅速降低并持续受抑(P＜0.05).结论心肌内分泌活化可能是介导压力超负荷致心肌肥大的重要机制.     

钙网蛋白在心肌组织细胞氧化应激与缺血损伤构建中的表达与应用

背景：生物体内钙网蛋白具有调节细胞凋亡、应激、心血管炎症反应等多种生理和病理生理过程的功能。 目的：分析钙网蛋白在缺血再灌注损伤中的表达与应用。 方法：由作者检索1996/2010 PubMed数据库与中国知网数据库有关钙网蛋白结构、功能及在自身免疫、心脏发育中的作用、在缺血缺氧过程中表达的变化等方面的文献后,对钙网蛋白在氧化应激与缺血损伤中的表达变化进行了实验观察。 结果与结论：钙网蛋白通过协助蛋白质正确折叠和维持细胞内Ca2+稳态而参与调节细胞凋亡、黏附、类固醇敏感基因表达等,在心脏发生、发育和病理变化中发挥着重要作用。作者应用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过酶联免疫吸附试验、免疫组织化学及RT-PCR 3种不同的检测方法,观察了钙网蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的表达,结果显示缺血再灌注损伤诱导钙网蛋白高表达,进而激活内质网凋亡信号途径,诱导细胞损伤,加重心肌损伤。     

miR-20a调控压力超负荷型心肌肥大

背景：心肌肥大是心脏对压力超负荷等生理和病理刺激所做出的适应性反应,早期具有代偿意义,若刺激持续进行可引起心肌病变导致心力衰竭。micro RNAs参与调控了心肌肥大的发生发展,然而mi R-20a在压力超负荷所致心肌肥大中的作用尚未见报道。目的：探究mi R-20a在压力超负荷所致心肌肥大中的作用及其机制。方法：横向主动脉缩窄术诱导心肌肥大小鼠模型,使用血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大H9c2细胞模型。体内实验在小鼠心脏原位注射mi R-20a过表达腺病毒,体外实验将mi R-20a mimic转染至H9c2细胞。通过检测心质量/体质量比值、细胞表面积、心肌纤维化等指标评估心肌肥大,实时荧光定量PCR法检测心房利钠肽、脑利钠肽、β-肌球蛋白重链和mi R-20a的表达水平,Mito Tracker法检测线粒体分裂情况,RNAhybrid软件预测miR-20a的下游靶基因。结果与结论：(1)在心肌肥大细胞模型和动物模型中,mi R-20a的表达水平均显著降低(P<0.05);(2)在动物水平,过表达miR-20a显著抑制了横向主动脉缩窄手术诱导的心肌肥大,包括抑制了肥大标志基因表达水平的...     

压力超负荷对大鼠左室心肌肌型LIM蛋白mRNA和蛋白表达的影响

目的:了解压力超负荷大鼠左室肥厚心肌肌型LIM蛋白(MLP)mRNA和蛋白水平的变化, 探讨病理性左室肥厚心肌是否存在细胞骨架蛋白的缺失。方法:观察大鼠腹主动脉缩窄术后1、4、8、16周各组血流动力学参数、心室肥厚指数、MLPmRNA表达和蛋白水平的变化。结果:腹主动脉缩窄术后4周左室肥厚指数较术后1周组明显增加(P＜0.05), 术后8周组左室心肌MLPmRNA的表达较术后1、4周组明显下降(P＜0.05), 但各组左室心肌MLP蛋白水平差异无显著(P＞0.05)。结论:在病理性左室肥厚心肌出现明显心力衰竭前, MLP转录水平下调, 而MLP蛋白水平无明显改变。提示MLP作为心肌细胞骨架的基础, 对维持肥厚左室心肌的收缩功能起重要作用。     

钙网蛋白介导线粒体损伤在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用

目的:观察高糖培养对心肌细胞钙网蛋白(calreticulin,CRT)表达的变化、线粒体功能和细胞凋亡的影响。方法:将培养的AC-16人心肌细胞随机分为正常糖浓度组、高糖组、高糖+CRT siRNA(small interfering RNA)组及等渗组,分别测定各组心肌细胞凋亡率、细胞内活性氧水平、线粒体功能和CRT表达水平的变化。结果:与正常糖浓度培养的心肌细胞相比,高糖组心肌细胞凋亡率增加,活性氧生成增多,线粒体膜电位及呼吸链酶活性降低,同时CRT表达升高;CRT siRNA可以减轻高糖组心肌细胞线粒体损伤,但细胞内活性氧的生成与高糖组相比未见显著差异。结论:CRT介导的线粒体损伤可能参与高糖时心肌细胞凋亡的增加。     

丝裂原活化蛋白激酶信号途径在心肌肥厚中的作用进展

Myocardial hypertrophy is an independent risk factor for cardiac events. Mitogen-activated protein kinases(MAPK), including extracellular signal-regulated kinases, C-jun N-terminal kinases and P38-MAPK, are the common intracellular pathway of transducing hypertrophic signs. All three MAPK subfamilies play an important role in development of myocardial hypertrophy.     

Neuregulin-1β对压力超负荷心肌肥大大鼠治疗作用及机制的研究

 目的：研究神经调节蛋白 1β（NRG-1β）对压力超负荷所致大鼠心肌肥大的治疗作用并探讨其机制。方法：Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥大模型。术后8周,将模型动物随机分成模型（model）组、NRG-1β治疗组（尾静脉注射NRG-1β,10 μg·kg-1·d-1）和NRG-1β+赫赛汀(Herceptin, HERCE)治疗组（尾静脉注射NRG-1β的同时给予注射HERCE 10 μg·kg-1·d-1）。假手术（sham）组除不以银夹缩窄腹主动脉外,其余操作同腹主动脉缩窄组。7　d后分别采用心动超声、血流动力学评价心功能;Masson染色观察心肌组织的超微结构;放射免疫法检测心肌组织中血管紧张素II（Ang II）,酶联免疫吸附法测定心肌组织中肿瘤坏死因子 α（TNF-α）的变化;RT-PCR法检测心肌中bcl-2和bax mRMA表达的改变。结果：（1）心动超声显示,和模型组比较,NRG-1β组左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(LVFS)升高,左室收缩末内径(LVESD)及舒张末内径(LVEDD)减小（P<0.01）。（2）血流动力学检测显示,NRG-1β治疗组左室收缩末压(LVESP)和左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)均明显高于模型组（P<0.01）;左室舒张末压(LVEDP)低于模型组（P<0.01）。（3）与模型组比较,NRG-1β组心肌胶原容积分数（CVF）下降,心肌中Ang II和TNF-α明显减少,bcl-2 mRNA表达显著升高,而bax mRNA表达下降（P<0.01）。（4）NRG-1β+ HERCE治疗组与模型组相比各项指标无明显改变（P>0.05）。结论：NRG-1可以减少压力超负荷大鼠心肌Ang II和TNF-α的生成,从而减轻Ang II和TNF-α介导的心肌间质重构; NRG-1可通过上调bcl-2 mRNA表达、下调bax mRNA表达,抑制心肌细胞的凋亡,改善压力超负荷大鼠的心功能,进而在心肌肥大的过程中发挥作用。     

促红细胞生成素对压力超负荷小鼠心肌保护作用的相关分子机制

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对压力超负荷小鼠心肌保护作用的分子机制。方法采用主动脉弓缩窄术(TAC)的方法建立小鼠模型,小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TAC-PBS)和EPO2000U/Kg治疗组(TAC-EPO2000)。术后8周,测定各组小鼠心肌毛细血管密度及生存率,Western blot方法检测各组小鼠心肌组织p Akt/Akt、p-STAT3/STAT3、p-e NOS/e NOS、p-p38/p38、p-ERK/ERK-1、p-JNK/JNK的表达。结果 EPO治疗能显著提高TAC小鼠生存率(P0.05)。与TAC-PBS组比较,TAC-EPO2000心肌组织p-STAT3、p Akt和p-e NOS的表达水平显著增多(P0.05),p-p38的表达水平显著减少(P0.05),p-ERK/ERK-1,p-JNK/JNK则无明显差异(P0.05)。各组小鼠心肌毛细血管密度没有明显差异。结论 EPO对压力超负荷小鼠心肌保护作用可能与调控p-STAT3、p Akt、p-e NOS和p-p38的表达相关。