诺斯卡品逆转人卵巢癌裸鼠移植瘤对顺铂耐药的作用及机制

目的：探讨微管抑制剂诺斯卡品（ NOS ）逆转人卵巢癌细胞株 SKOV3/DDP 裸鼠皮下移植瘤对顺铂（ DDP）耐药的作用及其机制。方法建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、DDP组、NOS组、NOS与DDP联合组,每组6只。观察各组裸鼠饮食和精神状态,测量裸鼠的体重及移植瘤的体积,并绘制肿瘤生长曲线。用网搓法制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率的变化,细胞中X链锁凋亡抑制蛋白（ XIAP ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）和生存素（Survivin）蛋白表达。结果联合组裸鼠移植瘤体积明显小于对照组和其他用药组（ P ＜0ⅱ．05）。与对照组和DDP组比较,联合组皮下移植瘤细胞凋亡率显著增加（ P ＜0．05）,G2/M期细胞比例增多（ P ＜0．05）,细胞中XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达降低（ P ＜0．05）, Caspase-3蛋白表达升高（ P ＜0．05）。结论 NOS增加了移植瘤细胞对DDP的敏感性,逆转其对DDP的多药耐药,其机制可能与XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达的下调,Caspase-3蛋白表达的上调有关。     

三氧化二砷对小鼠肝癌生物学行为的影响

目的研究三氧化二砷对HepA小鼠肝癌生长、血管生成及侵袭与转移特性的影响。方法建立皮下种植肝癌小鼠模型,用药后观察小鼠肿瘤体积变化及抑瘤率;利用免疫组织化学观察移植瘤中血管内皮生长因子（VEGF）,对移植瘤的微血管密度（MVD）进行计数。结果三氧化二砷对小鼠肝癌瘤体体积和抑瘤率均具有抑制作用;三氧化二砷能抑制肿瘤新生血管生成,降低VEGF的表达,并能降低肿瘤MVD,与未用药对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷能缩小肿瘤体积、增加抑瘤率,并能降低VEGF的表达,减少微血管密度。     

多西他赛抑制小鼠肺癌血管生成分析

目的探讨常用化疗药物多西他赛化疗抑制肿瘤血管生成的作用。方法选择Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠50只,随机分成多西他赛不同剂量治疗3组、生理盐水组和对照组,观察4周后5组最终肿瘤体积、质量以及移植瘤血管生成抑制情况。结果多西他赛组小鼠皮下移植瘤质量与体积明显小于其他组,其微血管数（MVD）亦明显低于其他组。结论多西他赛能明显抑制小鼠肺癌血管生成。     

芦荟多糖增强顺铂对肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 观察芦荟多糖（Aloe polysaccharide,AP）和顺铂（DDP）合用对人肺腺癌A549细胞裸小鼠移植瘤生长的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法 采用A549细胞株建立人肺腺癌裸鼠模型,将35只,♀,成瘤裸小鼠随机分为7组：对照组（生理盐水0.2 mL）;DDP低剂量组（1.0 mg·kg^-1）;DDP高剂量组（5 mg·kg^-1）;AP低剂量组（10 mg·kg^-1）;AP高剂量组（30 mg·kg^-1）;DDP低剂量组＋AP低剂量组;DDP低剂量组＋AP高剂量组,隔天腹腔注射给药,共8次。于最后1次给药后48 h处死各组小鼠,收集瘤标本行光镜观察,免疫组化检测p53和bcl-2蛋白表达情况。结果 各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤质量明显低于对照组（P〈0.01）。低、高剂量AP联合用药组较低剂量DDP组抑瘤作用明显增强（P〈0.05）,其瘤重抑制率分别为49.34%和82.61%。高剂量AP组与对照组比较,p53和bcl-2的表达均下调,差异具有统计学意义（P〈0.05）,联合用药组该调节作用进一步增强。高剂量DDP组出现不良反应,其余各组无明显不良反应。结论 AP能够增强DDP对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,其作用机制可能与AP抑制p53和bcl-2的表达有关。     

新加沙参麦冬煎剂抑制肿瘤转移及其作用机制的实验研究

目的 探讨新加沙参麦冬煎剂防治肿瘤转移的机制。方法结合动物模型、免疫组化、细胞分子生物学技术，观察新加沙参麦冬煎剂对荷瘤小鼠抑瘤率、转移抑制率、生命延长率的影响，检测实验小鼠皮下移植瘤血管内等细胞生长因子（VEGF）、血管内皮细胞第Ⅷ因子（CD34）、黏附因子（CD44V6）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶抑制酶（TIMP2）的表达情况。结果新加沙参麦冬煎剂治疗组的瘤重抑制率、肺转移抑制率、生命延长率分别为37.3%，58.3% 和20.8%；皮下移植瘤CD44V6 、VEGF表达、微血管密度（MVD）明显低于空白组（P＜0.01），TIMP2表达记分明显高出其他组（P＜0.01）。小鼠肺转移灶数与VEGF 、CD44V6、MVD呈线性相关，相关系数分别为0.490，0.398，0.455。结论①新加沙参麦冬煎剂对小鼠LA795高转移肺腺癌模型有较好抑制转移、抑制肿瘤生长和延长荷瘤小鼠生存时间的作用。②新加沙参麦冬煎剂可通过调控肿瘤转移过程中黏附、基质降解、血管生成相关分子的表达，多途径、多靶点防治肿瘤的转移。     

慢病毒介导NK4过表达对人肺腺癌移植瘤生长的影响

目的：研究瘤内注射慢病毒介导的NK4过表达对肺腺癌移植瘤生长、转移以及微血管生成的影响。方法：构建人肺腺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型并随机分为3组。通过瘤内注射的方式分别向三组注射过表达慢病毒LV-NK4 (50 μl, 6×108 TU/ml)、空载慢病毒LV-con (50 μl, 6×108 TU/ml)和PBS(50 μl)。观察28天后将裸鼠处死,测量瘤体积及瘤重。HE染色观察瘤组织、肺组织情况。采用TUNEL法检测各组瘤体细胞凋亡情况。免疫组化染色检测c-Met蛋白的表达,微血管密度(MDV)检测评估血管生成。结果：小鼠荷瘤实验显示,LV-NK4组瘤体积(316.166±89.290 mm3)小于LV-con组(812.714±348.967mm3)和PBS组(838.598±390.780mm3),差异具有统计学意义,P＜0.05。LV-NK4组瘤重(0.4344±0.1234g)小于LV-con组(0.7018±0.2227g)和PBS组(0.7829±0.1510g),差异具有统计学意义,P＜0.05。肿瘤组织病理结果显示LV-NK4组凋亡、坏死明显增多;LV-NK4组微血管密度(MDV)为(11.2±2.78),较LV-con组(18.90±3.479)和PBS组(22.00±5.40)明显减少,P＜0.01。LV-con组和PBS组肺部可见明显肿瘤转移灶,LV-NK4组未见明显转移灶,RT-PCR/WB检测证明移植瘤组织中NK4的表达增加。免疫组化染色显示LV-NK4组裸鼠瘤组织c-Met蛋白表达明显减少。结论：慢病毒介导的NK4过表达抑制肺腺癌移植瘤的生长及肺转移。     

2-甲氧基雌二醇联合环磷酰胺对小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用

目的：研究2-甲氧基雌二醇（2-ME2）和环磷酰胺（CTX）对小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用及两者结合的疗效.方法：将BALB/c 4T1乳腺癌模型小鼠,随机分为生理盐水对照组、2-ME2组、CTX组、2-ME2＋CTX联合组,观察肿瘤生长情况;给药21d后,处死小鼠并分离瘤组织和双肺,计算抑瘤率和肺转移率;免疫组化SP法检测瘤组织中缺氧诱导因子（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达以及微血管密度（MVD）.结果：2-ME2＋CTX联合组的抑瘤率高于2-ME2组、CTX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;2-ME2＋CTX联合组小鼠肺脏转移灶数目明显低于2-ME2组及CTX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;2-ME2＋CTX联合组移植瘤MVD及HIF-1α、VEGF蛋白表达明显低于2-ME2组和CTX组（P＜0.05）.结论：2-ME2联合CTX应用对小鼠乳腺癌的疗效优于单用CTX或2-ME2;在抑制小鼠乳腺癌移植瘤血管新生方面,2-ME2、CTX具有协同作用.     

麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用及机制研究

目的:研究麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用,并探究其可能的作用机制。方法:通过腋下接种Lewis肺癌细胞复制Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将60只小鼠随机分为模型组(生理盐水,每天灌胃1次)、顺铂组(6mg/kg,每周腹腔注射1次)、麦门冬汤加减方组(20 g/kg,每天灌胃1次)和联合组(每周腹腔注射6 mg/kg顺铂1次+每天灌胃20g/kg麦门冬汤加减方1次),每组15只。所有小鼠均连续给药2周。给药结束后,检测各组小鼠瘤质量和胸腺指数,苏木精-伊红(HE)染色后观察其瘤体组织病理变化,TUNEL法检测其瘤体细胞凋亡指数,Western blot法检测其瘤体组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和促凋亡基因Bax蛋白表达。结果:与模型组比较,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量均显著降低(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量均显著升高(P<0.05);并且联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量明显低于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量明显高于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05)。HE染色结果显示,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠肿瘤细胞密度有所降低,肿瘤组织坏死区域增多,并且联合组小鼠的坏死区面积明显大于麦门冬汤加减方组和顺铂组。结论:麦门冬汤加减方可通过下调瘤组织中Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达,从而抑制Lewis肺癌移植瘤模型小鼠肿瘤的生长。     

新城疫病毒对荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的 观察新城疫病毒（NDV）对裸鼠人肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法 建立人肺腺癌细胞系spc-a-1在裸小鼠皮下移植瘤动物模型,瘤体内1次注射NDV病毒作抗肿瘤研究,同时设PBS对照,观察6周,绘制肿瘤生长曲线,比较两组肿瘤体积变化。结果 NDV组肿瘤生长迟缓,PBS组肿瘤生长迅速,6周后PBS组瘤重明显大于NDV组（P〈0．01）。结论 NDV对裸小鼠人肺腺癌移植瘤有明显的抑制作用。     

蛋白标志物在不同化疗模式下荷人卵巢癌裸鼠移植瘤中的表达差异

目的：通过检测肿瘤干细胞标记物CD133、增殖细胞核抗原Ki－67、肺耐药蛋白（ lung resistance protein , LRP）水平的表达,在蛋白表达水平上探讨顺铂低剂量节拍（low－dose metronomic,LDM）化疗及最大可耐受剂量（maxi－mum tolerated dose ,MTD）化疗两种不同化疗模式,对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤的影响。方法建立荷人裸鼠皮下移植瘤模型36例。随机分为3组对照组（注射0．9％氯化钠溶液）、LDM－DDP组（低剂量节拍化疗）和MTD－DDP组（最大耐受剂量化疗）,治疗期间观察肿瘤细胞在裸鼠体内的生长、转移情况及化疗的副作用。疗程结束后,通过抑瘤率比较两种化疗模式的优劣。使用Western Blot方法检测各组移植瘤组织中LRP、Ki－67及CD133的表达。结果 LDM较MTD化疗能更明显的抑制肿瘤生长（ P ＜0．05）。 LRP蛋白表达的两两比较：MTD－DDP组、LDM－DDP组LRP蛋白表达均高于对照组,LDM－DDP组LRP蛋白表达较MTD－DDP组低（ P ＜0．05）。增殖细胞核抗原Ki－67的蛋白表达的两两比较：Ki－67蛋白在LDM－DDP中的瘤组织中,表达最低,明显低于MTD－DDP组及对照组,而MTD－DDP组与对照组及LDM－DDP组比较无差异（ P ＞0．05）。肿瘤干细胞标记物CD133的蛋白表达：化疗结束,MTD－DDP组、LDM－DDP组化疗结束后,CD133蛋白表达显著增高,与对照组比较具有统计学意义,而且MTD－DDP组表达量最高,明显高于LDM－DDP组（（ P ＜0．05）。结论顺铂LDM化疗较MTD化疗能更明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长,并能降低移植瘤中耐药相关蛋白及肿瘤标记物CD133的表达。     

Bcl-2抑制剂用于急性髓系白血病靶向治疗的研究进展

摘要： 急性髓系白血病 （AML） 是成人最常见的急性白血病, 诱导化疗仍是AML的一线治疗手段。但是, 由于 AML诱导化疗毒性较高, 且有高失败率及高复发率的特点, 在AML患者中应用受限。近年来, 去甲基化药物地西他滨和阿扎胞苷在AML表观遗传学治疗中得到深入研究, 已经动摇了诱导化疗在AML治疗中的地位。随着对AML生物学研究的深入, 发现越来越多的靶点可影响AML的生物学进程。针对这些靶点的靶向药物分为3类： 第一类是突变位点抑制剂, 如FLT3和IDH抑制剂; 第二类是调节代谢或信号通路的抑制剂, 如Bcl-2拮抗剂及表观遗传学药物;第三类是靶向细胞毒性药物。2017年美国血液学年会报道, AML靶向治疗最有前景的药物为调节代谢或信号通路的抑制剂, 其中BCL-2抑制剂Venetoclax在AML的临床试验报告被评为本届会议最佳。本文就BCL-2抑制剂在 AML的治疗进展做一综述。     

Roles of proteolysis in regulation of GPCR function

The enzymatic activity of peptidases must be tightly regulated to prevent uncontrolled hydrolysis of peptide bonds, which could have devastating effects on biological systems. Peptidases are often generated as inactive propeptidases, secreted with endogenous inhibitors, or they are compartmentalized. Propeptidases become active after proteolytic removal of N-terminal activation peptides by other peptidases. Some peptidases only become active towards substrates only at certain pHs, thus confining activity to specific compartments or conditions. This review discusses the different roles proteolysis plays in regulating GPCRs. At the cell-surface, certain GPCRs are regulated by the hydrolytic inactivation of bioactive peptides by membrane-anchored peptidases, which prevent signalling. Conversely, cell-surface peptidases can also generate bioactive peptides, which directly activate GPCRs. Alternatively, cell-surface peptidases activated by GPCRs, can generate bioactive peptides to cause transactivation of receptor tyrosine kinases, thereby promoting signalling. Certain peptidases can signal directly to cells, by cleaving GPCR to initiate intracellular signalling cascades. Intracellular peptidases also regulate GPCRs; lysosomal peptidases destroy GPCRs in lysosomes to permanently terminate signalling and mediate down-regulation; endosomal peptidases cleave internalized peptide agonists to regulate GPCR recycling, resensitization and signalling; and soluble intracellular peptidases also participate in GPCR function by regulating the ubiquitination state of GPCRs, thereby altering GPCR signalling and fate. Although the use of peptidase inhibitors has already brought success in the treatment of diseases such as hypertension, the discovery of new regulatory mechanisms involving proteolysis that control GPCRs may provide additional targets to modulate dysregulated GPCR signalling in disease.     

黄酮类化合物抗卵巢癌化疗耐药的作用进展

摘要：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一类多酚类物质,亦是诸多传统中草药中的有效成分之一,因其高效、低毒,且具有多种生物学活性而得到了广泛的关注。卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤,化疗耐药是导致其预后不良的主要原因之一。研究发现,黄酮类化合物对改善卵巢癌耐药有独特的效果,或将有助于克服卵巢癌耐药。本文就近年来黄酮类化合物改善卵巢癌化疗耐药作用的相关研究进展进行综述。     

Differential effect of L-NAME and S-methyl-isothiourea on leukocyte emigration in carrageenin-soaked sponge implants in rat

1. The role of nitric oxide (NO) in leukocyte (polymorphonuclear cells, monocytes and lymphocytes) emigration was studied in a model of carrageenin-sponge implants in rats.
2. The subcutaneous implantation of 1% (w/v) of λ-carrageenin-soaked sponges elicited an inflammatory response that was characterized by a time-related increase in leukocyte infiltration in the sponges and increased levels of nitrite in the exudate. Total leukocyte infiltration and nitrite production were maximal at 24 h and decreased after 48 and 96 h. The mononuclear cell influx was maximal at 48 h (21% of the total leukocytes). Therefore, this time point was used in the successive experiments.
3. Polymorphonuclear cell (PMN) and lymphocyte infiltration in the sponges significantly increased when rats were treated with the non-specific NO-synthase (NOS) inhibitor, N^G-nitro-L-arginine methylester (L-NAME) (1 mg ml⁻¹ in drinking water ad libitum). Monocyte emigration was not affected by L-NAME treatment. The nitrite levels in the exudate of L-NAME-treated rats were significantly reduced. The concomitant ingestion of L-arginine (30 mg ml⁻¹) resulted in a reversion of the L-NAME effect, while D-arginine (30 mg ml⁻¹) had no effect, indicating the involvement of the L-arginine: NO pathway.
4. Administration of L-NAME resulted also in an increased release of tumour necrosis factor-α (TNF-α) and prostacyclin (measured as the stable metabolite, 6-keto-PGF_1α). L-NAME had no effect on monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) release in the exudate.
5. Since L-NAME may have effects on the local blood flow, phenylephrine (0.034 mg ml⁻² in drinking water) was used as it has an effect on the local blood flow similar to L-NAME. Phenylephrine had no effect on either leukocyte emigration, or on nitrite, TNF-α, prostacyclin or MCP-1 accumulation in the exudate.
6. In contrast, the more selective iNOS inhibitor S-methyl-isothiourea (SMT) (10 μg ml⁻¹ in drinking water) significantly reduced PMNs and lymphocyte influx in the sponge, having no effect on monocyte influx. Moreover, SMT decreased nitrite production in the exudate to a comparable extent as L-NAME.
7. Administration of SMT significantly reduced MCP-1 release in the exudate, without an effect on TNF-α or prostacyclin production. Moreover SMT did not produce any changes in local blood flow.
8. Our results show that a different outcome of the inflammatory process can be obtained depending on the types of NOS inhibitor used.

     

激素治疗对阿霉素肾病大鼠上颌骨骨密度的影响

摘要： 目的 研究甲泼尼龙激素治疗对阿霉素肾病大鼠上颌骨骨密度 （BMD） 的影响。方法 将 40 只大鼠随机分为 4 组, 空白对照组、 激素组、 阿霉素肾病组、 阿霉素+激素组。阿霉素肾病组及阿霉素＋激素组采用间隔 1 周 2 次尾静脉注射盐酸阿霉素 4 mg/kg 建立大鼠阿霉素肾病模型, 空白对照组和激素组尾静脉注射生理盐水 4 mg/kg。建模后激素组及阿霉素＋激素组给予甲泼尼龙 30 mg/ （kg·d） 灌胃, 空白对照组及阿霉素肾病组给予等体积生理盐水灌胃。每日 1 次, 连续 10 周。采用酶联免疫吸附试验 （ELISA） 测定骨钙素 （BGP）、 Ⅰ型原胶原 N-端前肽 （PINP）、 β- Ⅰ型胶原交联 C 末端肽 （CTX） 水平; 并行上颌骨 micro-CT 三维扫描检测骨小梁厚度 （Tb.Th）、 骨小梁间隙 （Tb.Sp）、骨小梁数目 （Tb.N）、 骨体积分数 （BVF）、 BMD。结果 与其余 3 组相比, 阿霉素＋激素组 BGP、 PINP 降低, CTX 升高（P＜0.05）。经 micro-CT 三维扫描分析, 阿霉素＋激素组上颌骨发生明显骨质疏松现象, 包括骨显微结构的改变, BMD 降低、 BVF 降低、 Tb.Th 减少以及 Tb.Sp 增宽 （P＜0.05）。但各组 Tb.N 差异无统计学意义。结论 阿霉素肾病大鼠本身存在骨代谢异常, 大剂量激素治疗可加速骨质疏松的发生, 使其骨代谢水平下降, 影响骨小梁结构。     

银杏叶提取物对大鼠美托洛尔药动学的影响

目的：探讨银杏叶提取物对大鼠美托洛尔药动学的影响。方法：将大鼠随机分为美托洛尔组和美托洛尔联合银杏叶提取物组,美托洛尔组口服给予美托洛尔40 mg·kg^-1,美托洛尔联合银杏叶提取物组口服给予银杏叶片28.8 mg·kg^-1（按黄酮醇苷量）和美托洛尔40 mg·kg^-1。给药后2,5,10,20,40,60,90,120,240,360,480,720 min股动脉采血,液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）测定美托洛尔及代谢物血药浓度。结果：美托洛尔组联合灌胃给予银杏叶提取物与美托洛尔后,美托洛尔K_a和AUC_0-t显著降低（P<0.05）,t_max显著增加（P<0.05）,美托洛尔代谢产物O-去甲基美托洛尔和α-羟基化美托洛尔AUC_0-t显著增加（P<0.05）,而CL显著减小（P<0.05）。结论：银杏叶提取物能够显著降低美托洛尔的血药浓度,抑制其代谢物O-去甲基美托洛尔和α-羟基化美托洛尔的清除。     

主动脉夹层诊疗进展

摘要： 主动脉夹层病情凶险， 且病死率和病残率均很高。近年来随着多种检查技术的应用， 特别是CT造影技术的发展， 使得夹层诊断率显著提高； 对该病的认识和预后的判断也随着生化检测的完善而进一步加深。根据夹层累及范围的不同， 已发展出多种成熟的手术术式， 特别是对于主动脉弓部的处理， 已由传统的象鼻支架技术演变出孙氏手术和新型三分支覆膜支架植入等， 手术的病死率和并发症发生率显著下降。主动脉覆膜支架植入术的应用将主动脉夹层的治疗由有创转向微创化发展， 但是其在影像学上有严格的限制条件。去分支手术则进一步扩大了腔内介入技术的适应证， 也使得具有手术禁忌证的患者重新获得手术机会。根据近年来主动脉夹层诊疗技术的发展，就目前主动脉夹层的早期诊断、 实验室检查、 预后评估以及治疗方法的现状进行评述， 以供基础与临床研究参考借鉴。     

彩色多普勒超声检查对小儿急性阑尾炎的诊断价值

目的探讨彩色多普勒显像诊断小儿急性阑尾炎的临床应用价值。方法对53例临床诊断为小儿急性阑尾炎的住院病例行彩色多普勒超声检查，其中41例诊断为小儿急性阑尾炎。全部病例均实施手术治疗。术后标本常规送病理检查。结果彩色多普勒显像对小儿急性阑尾炎的诊断正确率为92．7％、临床诊断正确率为67．9％．两者间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论彩色多普勒超声检查对小儿急性阑尾炎的诊断准确率高，费用低，值得推广。     

五味子提取物对百草枯中毒模型小鼠肺纤维化的保护作用

摘要： 目的 探讨五味子提取物对百草枯（PQ）中毒模型小鼠肺纤维化的保护作用, 并探讨其机制。方法 108 只小鼠按随机数字表法分为正常对照组, 模型组, 五味子提取物低剂量组 （200 mg/kg）、 中剂量组 （400 mg/kg）、 高剂量组 （800 mg/kg） 及维生素 C 组 （100 mg/kg）, 每组 18 只。除正常对照组以外的小鼠行一次性 PQ 溶液 （100 mg/kg） 灌胃造模, 造模成功后每 24 h 给予相应剂量药物 1 次, 分别在建模后第 7、 14、 21 天处死小鼠, 每个时间点 6 只。解剖肺脏, HE 染色观察小鼠肺组织炎症程度并进行炎症评分; Masson 染色观察肺组织纤维化程度;RT-PCR 和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测各组肺组织中转化生长因子（TGF） -β1、 白细胞介素（IL） -6、 IL-17 mRNA 及蛋白表达水平。结果 （1）造模后第 7 天和第 14 天, 模型组小鼠肺组织出现大量炎性细胞浸润、 肺泡间隔充血, 炎症评分较正常对照组升高（P < 0.05）, 而五味子提取物中、 高剂量组小鼠肺组织炎症评分较模型组和维生素 C 组降低（P < 0.05）。（2）造模后第 14 天和第 21 天, 五味子中、 高剂量组小鼠肺组织纤维化程度较模型组降低（P < 0.05）。（3）随着造模时间的延长, 模型组 TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平升高, IL-6 表达降低, IL-17 则先升高后降低。五味子提取物中、 高剂量组与模型组比较, 造模后第 7 天和第 14 天, IL-6 表达降低, 造模后第 14 天和第 21 天, TGF-β1 表达降低, 而 3 个时间点 IL-17 表达均降低 （P < 0.05）。结论 五味子提取物可通过抑制 TGF-β1、 IL-6 和 IL-17 的表达来减轻 PQ 中毒造成的炎症反应和肺纤维化。     

Influence of the metabolic profile on the in vivo antioxidant activity of quercetin under a low dosage oral regimen in rats

BACKGROUND AND PURPOSE: Flavonoids are known to possess a broad set of pharmacological effects, some of which have been attributed to their antioxidant properties and, more recently, to cell signalling modulation. Nevertheless, flavonoids are extensively metabolized and their metabolites are the potential bioactive forms in vivo. Therefore, a first and crucial step to understand the mechanisms underlying potential health benefits of flavonoids is knowledge of their metabolites and their biological activities.EXPERIMENTAL APPROACH: To approximate a human dietary pattern of intake of flavonoids, regular rat chow was supplemented with 0.02% quercetin and fed to Sprague-Dawley rats over 3 weeks. Plasma samples were analysed by HPLC and electrospray tandem mass spectrometry, and plasma antioxidant capacity was measured by the 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline sulphonate) assay. KEY RESULTS: Major metabolites were 3'-methylquercetin (isorhamnetin) glucuronide sulphate conjugates, the most plausible conjugation positions being at the 3-, 5- and 7-hydroxyl positions. Isorhamnetin conjugates are methylated at the 3'-OH position, which decreases the high antioxidant activity of quercetin and its metabolites and their contribution to plasma antioxidant potential.CONCLUSIONS AND IMPLICATIONS: This metabolic pattern differs from that observed after a single high-dose administration, where the major metabolites were quercetin conjugates at 5- and 7-hydroxyl positions and a significantly increased plasma antioxidant activity was observed. These data show altogether that the different metabolic patterns obtained under a prolonged low-dosage regimen or after a single high dose, crucially affected the antioxidant potential of plasma in treated animals. Our data also allow for the establishment of structure-antioxidant activity relationships for quercetin metabolites.