姜黄素对急性髓性白血病细胞HL—60增殖和凋亡的影响

为了探讨姜黄素对白血病细胞的杀灭能力,运用细胞培养,流式细胞仪和末端ＴｄＴ酶标记技术系统研究其药理作用和方式。结果表明,姜黄素能选择性抑制急性髓性白血病细胞ＨＬ－６０的增殖,呈时间与剂量依赖曲线,姜黄素体外抑制ＨＬ－６０细胞２４ｈ达到最大峰值。亚Ｇ１凋亡峰出现在１２ｈ后,并随时间延长而逐步增加,２４ｈ可达３４．４％。用末端ＴｄＴ酶标记法进一步证实凋亡的同一时相可达到４１％。结果提示：姜黄素有明确的     

冬凌草甲素对人白血病HL-60细胞抑制作用的研究

为研究冬凌草甲素对人白血病细胞系ＨＬ－６０细胞的生长抑制作用,以不同浓度的冬凌草甲素处理体外培养ＨＬ－６０细胞２４ｈ,以噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定细胞生长曲线,以光学显微镜和流式细胞仪分析细胞凋亡,结果冬凌草甲素６～２４μｍｏｌ／Ｌ明显显著抑制ＨＬ－６０细胞生长,４～１２μｍｏｌ／Ｌ可诱导细胞凋亡,为冬凌草甲素治疗白血病提供了依据。     

灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用，而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制；细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ，可使ＨＬ－６０细     

Wilms肿瘤基因反义寡苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 了解Ｗｉｌｍｓ肿瘤基因（ＷＴ１）反义寡核苷酸（ＡＳＯ）对白血病细胞凋亡的作用。方法 应用ＷＴ１ＡＳＯ以及足叶乙甙（ＶＰ－１６）作用Ｋ５６２、ＨＬ－６０细胞系,然后应用流式细胞仪测定ＤＮＡ含量以确定白血病细胞的凋亡数。结果 Ｋ５６２细胞系经ＷＴ１ ＡＳＯ作用２４ｈ和６０ｈ后细胞凋亡数分别为１４．６％和２６．８％;而ＷＴ１有义寡核苷酸（ＳＯ）组分别为３．１％（２４ｈ）和３．９％（６０ｈ）;加入少     

维甲酸诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察维甲酸（ＲＡ）在体外诱导ＨＬ６０细胞（人早幼粒细胞白血病细胞株）凋亡的作用,探讨维甲酸治疗早幼粒细胞白血病的作用机制。方法：用ＤＮＡ电泳、ＤＮＡ片段定量测定技术、流式细胞术分析及光镜和电镜观察凋亡细胞。结果：在体外培养中加维甲酸５０ｍｇ／Ｌ孵育４ｈ,ＤＮＡ片段率达５５７％±１２１％,而对照为１２５％±４９％（Ｐ＜０００１,ｎ＝９）;流式细胞术检测发现,在５０ｍｇ／Ｌ维甲酸作用下,细胞凋亡达５０％,对照为９％。电镜观察维甲酸组ＨＬ６０细胞出现典型的凋亡细胞形态改变。维甲酸诱导ＨＬ６０细胞凋亡具有剂量及时间依赖性,维甲酸作用６ｈ,出现凋亡高峰;随维甲酸浓度升高,诱导凋亡作用明显增强。在环孢素Ａ（ＣｓＡ）存在时,低浓度的维甲酸也有明显诱导ＨＬ６０细胞凋亡作用。结论：维甲酸在体外能诱导ＨＬ６０细胞凋亡,ＣｓＡ能增强维甲酸诱导ＨＬ６０细胞凋亡活性。研究提示诱导白血病细胞凋亡是维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的重要机制之一。     

沙棘汁对白血病细胞的杀伤作用

不同浓度的沙棘汁分别于Ｋ５６２、ＨＬ－６０和ＹＡ－１肿瘤细胞体外培养２４ｈ，可使ＹＡＣ－１、ＨＬ－６０细胞的ＤＮＡ合成有抑制作用，并似有剂量效应关系；对Ｋ５６２细胞ＤＮＡ中的ＵｄＲ有释放作用，亦即沙棘汁对瘤细胞的毒性作用。沙棘汁对白血病细胞生长抑制作用的机理可能与沙棘汁对其ＤＮＡ合成的解聚作用和抑制合成作用有关。     

沙棘汁对白血病细胞的杀伤作用

不同浓度的沙刺分别于Ｋ５６２、ＨＬ－６０和ＹＡＣ－１肿瘤细胞体外培养２４ｈ，可使ＹＡＣ－１、ＨＬ－６０细胞的ＤＮＡ合成抑制作用，并似有剂量效应关系；对Ｋ５６２细胞ＤＮＡ中的ＵｄＲ有释放作用，亦即沙棘汁对瘤细胞的毒性作用。沙棘汁对白血病细胞生长抑制作用的机理可能与沙刺汁对ＤＮＡ合成的解聚作用和抑制合成作用有关。     

中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响

为探讨中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响。采用形态学及ＤＮＡ凝胶电泳方法观察其对白血病细胞株ＨＬ－６０及Ｋ５６２细胞凋亡的影响,结果示：①电镜观察可见凋亡细胞和凋亡小体,ＤＮＡ凝胶电泳可见典型的梯形带改变;②一定浓度范围内的拮新康经适当作用时间后可诱导白血病ＨＬ－６０,Ｋ５６２细胞凋亡,但诱导Ｋ５６２细胞凋亡所需时间较ＨＬ－６０长且剂量较大。提示拮新康可诱导白血病细胞凋亡,与剂量和时间有一定的关     

放射诱导HL-60细胞凋亡及其与克隆存活率的关系

目的研究放射诱导的ＨＬ－６０细胞凋亡及其与放射后细胞克隆存活率的关系。方法应用电子显微镜、琼脂糖电泳、流式细胞术和ＴｄＴ介导的缺口和末端标记法（ＴＵＮＥＬ）等方法分析放射诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，应用有限稀释法测定放射后细胞克隆形成率。结果放射后ＨＬ－６０细胞表现出细胞体积缩小、染色质固缩致密化、边缘化、染色体断裂、出现凋亡小体、细胞膜保持完整和电泳时ＤＮＡ“梯谱”等典型的细胞凋亡特征。放射诱导ＨＬ－６０细胞凋亡有明显的时间、剂量效应，照射后４ｈ细胞凋亡已比较明显，放射诱导ＨＬ－６０细胞凋亡随着照射剂量增加而增加。但是，放射引起ＨＬ－６０细胞克隆存活率的减少比放射诱导ＨＬ－６０细胞凋亡更敏感，如８Ｇｙ照射后克隆存活率减少到０．００１６，而此剂量时的细胞凋亡水平几乎与对照组水平相同。结论放射能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，并有明显的时间、剂量效应关系。但是，放射诱导ＨＬ－６０细胞凋亡并不能解释ＨＬ－６０细胞克隆存活率的减少。     

脂质体介导c—myc反义核酸对HL—60细胞作用的研究

原癌基因ｃ－ｍｙｃ参与调控细胞的增殖、分化和凋亡过程,在白血病细胞株ＨＬ－６０ 中有很高的表达。ｃ－ｍｙｃ通过扩增活化或基因重排而异常激活,在白血病的发生和发展中可能起着重要的作用。　目的　通过脂质体介导ｃ－ｍｙｃ反义核酸转染ＨＬ－６０ 细胞,观察其抑制细胞生长增殖、促进分化、诱导凋亡,降低ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 和蛋白表达水平,探讨反义核酸的抗肿瘤作用机制。　方法　ＨＬ－６０ 细胞在３７℃、５％ＣＯ２ 条件下,培养于１０％ 小牛血清１６４０ 培养液中,细胞接种密度为４×１０７／Ｌ,反义核酸终浓度为１μｍ ｏｌ／Ｌ,反义核酸与脂质体比例为１ μｍ ｏｌ（６．５ μｇ）∶１０ μｇ,无血清转染６ ｈ。实验同时设置空白组、无义组、反义组、脂质体组、脂质体无义组等对照组。连续培养４ 天。通过锥虫蓝拒染实验测定细胞的生长能力;ＮＢＴ还原实验和瑞特－姬姆萨染色测定细胞的分化能力;免疫细胞化学染色检测ｃ－ｍｙｃ蛋白表达;ＲＴ－ＰＣＲ法检测ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 水平;吖啶橙／溴化乙锭染色观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测凋亡率;ＤＮＡ抽提及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成。　结果　脂质体转染ｃ－ｍｙｃ反义核酸的作用：（１）抑制ＨＬ－６０     

重组FN多肽CH50及IFN-γ对化疗小鼠免疫功能影响的比较

腹腔连续注射ＣＨ５０或腹腔内转染ＩＦＮ－γ基因能减弱或防止化疗药物对免疫功能的抑制作用,减轻或防止化疗药物使外周血单核细胞数量和腹腔细胞的数量降低（Ｐ＜０．０５）,促进巨噬细胞代谢活性、杀瘤活性以及分泌细胞因子的能力（Ｐ＜０．０５,＜０．０１）;促进脾淋巴细胞的增殖反应能力（Ｐ＜０．０５,＜０．０１）。注射ＣＨ５０的作用早于ＩＦＮ－γ基因转染的作用。结果提示ＣＨ５０可改善肿瘤化疗药物疗效。     

机体免疫状态与白念珠菌感染的关系

目的 研究不同免疫状态下，白念珠菌在小鼠肠增殖及播散的情况。方法 给经口饲白念珠菌液的小鼠口服庆大霉素，甲硝唑，腹腔注射环磷酸胺，氨甲蝶呤等处理。持续３～４周，此间每隔１周处死数只小鼠，检查其盲肠及内脏器官的白念珠菌落数。结果 某些抗生素的免疫抑制剂处理能增加小鼠肠道内白念珠菌定居数量（Ｐ〈０．０１）；两类药物联合应用时，作用更为显著，并可使白念珠菌向内脏播散，甚或致死。结论 宿主肠道白念珠菌数量     

镁对脑缺血早期脑组织中谷氨酸及一氧化氮含量的影响

为研究镁在脑缺血早期对神经元保护作用的机制,用电凝法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,在造模前给大鼠注射２０ｇ／Ｌ硫酸镁,观察镁对脑组织中谷氨酸（Ｇｌｕ）及一氧化氮（ＮＯ）含量的影响。结果显示,高浓度镁可明显降低脑缺血皮质中Ｇｌｕ、ＮＯ含量,在缺血组Ｇｌｕ、ＮＯ的峰值浓度分别为９．８７、４４．９７ｎｍｏｌ／ｇ,而在加镁组两者浓度分别为７．６８、３３．９２ｎｍｏｌ／ｇ。提示：镁对脑缺血早期神经元的保护作用与其降低脑组织中Ｇｌｕ及ＮＯ含量有关。     

迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠行为及脑电图的影响

为探讨迷走神经刺激（ＶＮＳ）的抗癫痫作用,观察了ＶＮＳ对正常大鼠和戊四氮（ＰＴＺ）致痫大鼠行为和脑电图的影响,结果发现,ＶＮＳ可明显延长致痫大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期（Ｐ＜０．０５）,减轻癫痫发作的严重程度（Ｐ＜０．０１）,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放（Ｐ＜０．０１）,而对正常大鼠脑电图无影响。结果提示ＶＮＳ可明显抑制ＰＴＺ诱导的大鼠癫痫。     

DNR荧光直方图诊断白血病细胞耐药的意义

为研究用细胞内柔红霉素（ＤＮＲ）的荧光直方图诊断白血病耐药的方法,用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测了２０例急性髓性白血病（ＡＭＬ）的荧光直方图,结合患者的临床耐药表现,耐药细胞的荧光强度诊断界点,耐药指数和荧光指数进行分析。结果,初治４例诊断为药敏,１例诊断为原发耐药;１５例有耐药临床表现的病例,１２例诊断为经典耐药,３例诊断为再生耐药。该方法可快速、简便、直观地在临床上及时发现和评价白血病耐药的类型和程度,为指导临床制定个体化的化疗方案提供依据     

粉防己碱对大鼠膀胱平滑肌的药理作用

研究植物源性钙通道阻滞剂粉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠膀胱平滑肌的作用。结果发现,在整体实验中,Ｔｅｔ８ｍｇ／ｋｇ灌胃能在较少影响血压、心率的情况下,降低膀胱平滑肌的收缩力（Ｐ＜０．０１）。在离体实验中,Ｔｅｔ（１０、３０μｍｏｌ／Ｌ）能浓度依赖性地非竞争性抑制由ＫＣｌ引起的大鼠正常和肥厚膀胱平滑肌的收缩反应,ＰＤ２′值分别为４．３５和３．７９。在连续每ｄ灌胃Ｔｅｔ８ｍｇ／ｋｇ６周后,能减轻膀胱重量并改善形态学变化,且明显降低膀胱对外源性激动剂如ＫＣｌ的反应性（Ｐ＜０．０１）。提示Ｔｅｔ在治疗某些泌尿系统疾病如膀胱激惹综合征等有一定的应用前景     

先天性高度近视合并固定性内斜视的手术治疗

报道了手术治疗６例先天性高度近视合并固定性内斜视患者,其病因目前尚不清楚。术中可见内直肌及其周围组织挛缩、外直肌菲薄,病检提示内直肌纤维化。手术采用内直肌后徙、外直肌－眶外侧缘骨膜连接术或外直肌与上、下直肌外１／２连接术可取得较为满意的效果     

脑缺血时乙酰胆碱加强谷氨酸的神经兴奋毒性及受体机制研究

分别用ＴＴＣ染色和ＨＥ染色观察大鼠大脑中动脉闭塞后乙酰胆碱（ＡＣｈ） 和谷氨酸（Ｇｌｕ） 对梗塞面积及细胞形态的影响; 采用皮质脑电图记录方法, 观察大鼠双侧颈总动脉夹闭后, Ｇｌｕ、ＡＣｈ 及ＡＣｈ 受体激动剂、拮抗剂对脑电图恢复时间的影响。结果发现： Ｇｌｕ 可使梗塞面积扩大, ＡＣｈ 可使Ｇｌｕ 的这种效应放大３０％ （Ｐ＜ ０．０１）; 脑缺血后Ｇｌｕ 使缺血区细胞破坏加重,ＡＣｈ 可加剧细胞的崩解,Ｇｌｕ 致缺血性皮质神经元兴奋性存在量效关系,其阈值为１０－ ２ｍ ｏｌ／Ｌ, ＡＣｈ 可使之降为１０－ ３ ｍ ｏｌ／Ｌ, ＡＣｈ 的这种作用可被阿托品所阻断而不被六羟季胺拮抗, 可被氨甲酰胆碱呈浓度－ 效应模拟, 而不被烟碱模拟。可见, 脑缺血时, 乙酰胆碱通过Ｍ 型受体降低谷氨酸兴奋毒性的阈值而表现出加强谷氨酸的神经兴奋毒性作用。     

四氯化碳、血吸虫病和肝炎病毒所致的肝细胞死亡的模式

为研究四氯化碳（ＣＣＩ４）、血吸虫病和肝炎病毒所致的肝细胞死亡的模型, 以大鼠ＣＣＩ４ 肝损伤、兔血吸虫病和人肝炎后肝硬变为研究对象, 分别以形态学、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ法） 和流式细胞术检测肝细胞凋亡, 并以免疫组化法分析凋亡的调控因素。结果表明：血吸虫病肝、ＣＣＩ４ 大鼠肝、人肝炎后肝硬变肝细胞有凋亡和坏死两种死亡模式, 二者形态不同, 但往往同时存在, 凋亡指数或比率分别为（８．７４±２．４０）％ , （５．７４±２．４１）％ 和（３．０６±０．７９）％ 。免疫组化： 正常肝Ｂｃｌ－２、ｃ－ｍ ｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－β、ＴＮＦα、ｉＮＯＳ均为阴性或弱阳性, 肝损伤模型中均呈阳性或强阳性。结果提示： 凋亡和坏死是肝细胞死亡的两种死亡模式, 并同时存在, 肝细胞凋亡受一系列基因和因子的调控。     

大鼠脑缺血早期阶段不同脑区NO和cGMP的变化

目的 研究大鼠脑缺血后大脑皮质，海马，纹状体和小脑一氧化氮（ＮＯ）和ｃＧＭＰ的变化。方法 采用荧光法和放射免疫分别测定了ＳＤ雄性大鼠（ｎ＝１０）脑缺血不同时点４个脑区ＮＯ代谢产物ＮＯ２和ｃＧＭＰ的含量，结果 各脑区ＮＯ２的含量在脑缺血５ｍｉｎ开始升高，持续到缺血１５ｍｉｎ缺血３０～６０ｍｉｎ开始下降，ｃＧＭＰ的含量在大脑皮质于缺血５～１５ｍｉｎ明显升高，在海马，纹状体和小脑于缺血１０～３０ｍｉｎ升