吸毒人员外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3调节性T细胞表达

目的:探讨外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞与吸毒人员机体免疫的关系。方法:采集114名吸毒人员外周血,根据不同吸毒方式和吸毒年限进行分组,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达。结果:不同吸毒方式的吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达,以口吸、静脉注射、混合吸顺序递减(49.07%±14.88%、34.96%±13.41%、26.72%±8.49%),各组间两两比较,差别有统计学意义(P<0.01);同一吸毒方式不同吸毒年限的吸毒人员CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达相比较,≤10年的口吸组(51.79%±10.44%)较>10年口吸组(37.14%±12.29%)明显降低(P<0.01),而混合吸毒组明显升高(27.06%±8.99%到35.47%±11.02%,P<0.05),静脉注射组变化不明显(P>0.05)。结论:通过检测吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞的表达,反映了不同吸毒方式和吸毒年限的吸毒人员机体免疫功能损伤程度,不仅可作为一项准确、可靠监测指标,也将为吸毒人员的免疫功能的检测提供新的思路。     

新生儿脐带血CD4＋CD25high调节性T细胞Foxp3的表达探析

目的：对新生儿脐带血CD4＋CD25high细胞中调节性Treg细胞的Foxp3表达进行研究。方法：采用密度梯度离心法提取新生儿（A组）脐带与成年人（B组）外周血液中的单个细胞核后,使用流式细胞仪测定CD4＋CD25high细胞中的Treg细胞数量,并对细胞内的转录因子（Foxp3）进行检测,并记录检测结果。结果：A组CD3＋CD4＋细胞中Treg细胞所占比例为（3．86±1．63）％,明显高于B组的（0．87±0．74）％：A组Treg细胞中表达Foxp3的比例为（23．21±8．9）％,明显低于B组的（71．3±11．6）％,差异均有统计学意义（P〈O．01）。结论：虽然新生儿脐带血中CD4＋CD25high的细胞数量较高,但新生儿Foxp3细胞相对于成年人却相对较低,这也进一步说明新生儿Treg细胞的Foxp3表达能力尚未完全发育并未成熟。     

胃病患者CD4＋CD25＋FoxP3＋调节性T细胞检测及意义

近年来,随着人们生活节奏的加快,生活方式和环境因素的改变,胃病的发生率呈上升趋势,胃癌也成为我国常见的恶性肿瘤之一,胃癌的发生多是以慢性胃病为基础。为此,笔者研究了慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和胃癌患者外周血中T淋巴细胞亚群和CD4＋CD25＋FoxP3＋调节性T细胞（Treg）表达水平,旨在探讨胃病患者细胞免疫功能状况及其与胃病发生之间的关系。     

支气管哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平及Foxp3 mRNA表达的分析

目的 观察支气管哮喘（哮喘）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）水平及叉状头／翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达的变化，探讨CD4^＋CD25^＋ Treg在哮喘发病巾的作用。方法 采用流式细胞仪检测78例哮喘患者（急性发作期组30例，慢性持续期组25例，缓解期组23例）和29例健康志愿者（正常对照组）PBMCs中CD4^＋、CD25^＋Treg的比例；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PBMCs中Foxp3 mRNA的表达。结果 急性发作期组和慢性持续期组PBMCs中CD4^＋CD25^＋ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达明显低于缓解期组和正常对照组（P〈0．05）；缓解期组CD4^＋CD25^＋ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达虽亦低于正常对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05）；急性发作期组CD4^＋CD25^＋ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达低于慢性持续期组（P〈0．05）。结论 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4^＋CD25^＋ Treg数量减少，功能下降，可能参与哮喘的发生和发展。     

CD4+CD25+T细胞在溃疡性结肠炎患者中的表达及意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞和其特异性标志物Foxp3的表达及其在UC不同病期的变化,探讨其在UC发病机制中的意义。方法研究纳入2007年2月至2008年12月在我院就诊的UC患者40例,其中活动期23例,缓解期17例;同时选择33例肠易激综合征（IBS）患者及32名健康者作为对照。用流式细胞仪检测UC患者、IBS患者和正常对照者的外周血CD4＋CD25＋T细胞阳性率,用RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3mRNA的表达,用酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF—β）的浓度。结果活动期和缓解期UC患者、IBS患者、正常对照者外周血CD4＋T细胞总数相比差异无统计学意义（P=0．126）。CD4＋CD25＋T细胞在CD4＋T细胞中所占比例在活动期和缓解期UC患者中均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．01）,活动期患者较缓解期患者更低（P〈0．001）,并且与疾病活动指数（r=-0．660,P〈0．001）及红细胞沉降率（r=-0．572,P=0．001）均呈显著负相关,而IBS患者和正常对照者间差异没有统计学意义（P=0．343）。PBMC中Foxp3mRNA的表达在活动期和缓解期UC患者均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．001）。而血清IL-10和TGF—β的浓度在活动期和缓解期UC患者、IBS患者和正常对照者4组间无明显差异（P均〉0．05）。结论活动期UC患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞明显降低,缓解期UC患者的表达有所升高,并且与临床疾病活动相关,提示这类细胞可能参与了UC疾病的发生发展,Foxp3表达降低可能是导致CD4＋CD25＋T细胞发育障碍的重要因素。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究上皮性卵巢癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法:采用流式细胞术检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA表达水平。结果:卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P<0.05);Foxp3 mRNA在卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中表达明显增高(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+调节性T细胞可能在卵巢癌免疫耐受中发挥重要作用。     

肺结核患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测及意义

[目的]通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义。[方法]采用流式细胞技术多色荧光分析法,测定84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性者之间的差别。[结果]肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P0.05);各型结核之间、抗酸杆菌阳性与阴性之间的差异有统计学意义(P0.05);初治肺结核与复治肺结核也有一定的差异,但无统计学意义(P0.05)。[结论]CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免疫功能的指标,它对肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义。     

脓毒症患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及其与预后的关系

目的评价脓毒症患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化趋势及其与预后的相关性。方法采用流式细胞仪检测36例脓毒症患者自诊断成立第1、3、5天的CD4^＋CD25^＋细胞／CD4^＋细胞比值,并与15例健康体检者（对照组）比较。按照预后分为生存组和死亡组,分析两组CD4^＋CD25^＋调节性T细胞随时间的变化。结果脓毒症患者19例生存,17例死亡。生存组和死亡组第1天CD4^＋CD25^＋细胞／CD4^＋细胞比值均低于对照组[分别为（12．42±3．26）％、（12．96±3．00）％比（16．97±3．66）％,P〈0．05].生存组和死亡组第3天CD4^＋CD25^＋细胞／CD4^＋细胞比值分别为（24．47±4．62）％和（26．61±3．85）％,均高于第1天,差异有统计学意义（P〈0．05）。生存组第5天CD4^＋CD25^＋细胞／CD4^＋细胞比值为（18．28±4．28）％,较第3天显著下降,差异有统计学意义（P〈0．05）;死亡组第5天CD4^＋CD25^＋细胞／CD4^＋细胞比值为（36．19±5．33）％,较第3天显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。第1、3天生存组和死亡组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;第5天生存组CD4^＋CD25^＋细胞/CD4^＋细胞比值显著低于死亡组（P〈0．05）。结论脓毒症患者血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞呈现先下降后上升的变化,而持续上升提示出现免疫功能麻痹,伴随病死率的升高。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可作为临床评价脓毒症患者炎性反应中免疫功能状态和预后的方便可靠的指标。     

肺癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞检测及其临床意义

目的了解肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的比例和其临床意义,探讨CD4+CD25+调节性T细胞与临床分期的相关性。方法流式细胞分析仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例。结果肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比为(15.7±1.6)%,明显高于健康对照者(7.1±1.5)(p<0.05),且外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平与患者病情分期呈显著正相关。结论肺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞比例较高,对肺癌患者具有免疫抑制功能。     

吸毒人群外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞和免疫功能变化及意义

目的通过测定不同吸毒方式的吸毒人群外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)的变化,从免疫调节方面探讨吸毒对人体免疫功能的影响以及机体的调节功能改变。方法清晨空腹抽取静脉血,采用流式细胞仪同期测定吸毒组和正常对照组人群CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25+Foxp3Treg细胞及CD8+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞的表达。结果口吸组和静脉注射组调节性T细胞与正常对照组比较,差异有统计学意义(LSD-t=2.34,4.35,P﹤0.05),静脉注射组和口吸组CD4+CD25+、CD4+CD25+Foxp3Treg细胞相比差异有统计学意义(LSD-t=3.37,4.07,P﹤0.05);不同吸毒途径淋巴细胞CD4+、CD8+表达不同,与对照组比较口吸组、静脉注射组CD4+和CD8+T淋巴细胞差异有统计学意义(LSD-t=5.18,4.94,2.17,2.23,P﹤0.05)。结论吸毒人群CD4+CD25+调节性T细胞功能代偿升高和不同吸毒方式导致机体免疫功能受损程度也不同。     

前列腺癌患者手术前后外周血调节性T细胞和FOXP3mRNA的表达及临床意义

目的探讨前列腺癌（PCa）患者手术前后外周血CD4^＋ CD25＋调节性T细胞（Tregs）及其特异标志物FOXP3mRNA的表达比例的变化及临床意义。方法应用流式细胞术检测50例前列腺癌及50例正常对照组外周血单个核细胞（PBMC）中Trigs占CD4CF细胞的比例,应用RT～PCR技术检测人外周血PBMCFOXP3mRNA的表达。结果随着Gleason分级升高,CD4^＋CD25^＋Tregs／CD4^＋T比值和FOXP3 mRNA表达量均有升高趋势;PCa患者术前CD4^＋CD25^＋Treg细胞占CD4^＋细胞的比例和FOXP3mRNA表达水平高于正常对照组（均P〈0．05）,术后水平与正常对照组差异无统计学意义;PCa组Tregs表达率与FOXP3mRNA呈正相关（r=0．623,P〈0．01）。结论Tregs及其特异标志物FOXP3具有维持自身免疫稳定和抑制肿瘤免疫作用,可能参与前列腺癌的发生。     

1,25二羟基维生素D3对大鼠脾调节性T细胞及其特异性转录因子表达的影响

目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响. 方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组.分别给予对照组和LPS组赋形剂,VitD3组用1,25(OH)2VitD3(0.25 μg/只·d-1),连续灌胃14 d.第15天LPS组和VitD3组腹腔注射致死剂量LPS(10 mg/kg).6 h后处死,用流式细胞仪检测脾CD4 CD25 调节性T细胞比例,用Realtime RT-PCR检测脾中Foxp3 mRNA的表达. 结果:1,25(OH)2VitD3明显上调大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞的比例及其特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达. 结论:1,25(OH)2VitD3预干预对大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3的基因表达有显著影响.1,25(OH)2VitD3有可能通过促进CD4 CD25 调节性T细胞的发育,发挥其免疫调节作用.     

CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞抑制耐药肺结核患者机体细胞免疫研究

目的了解耐药肺结核患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞及其分泌的细胞因子转化生长因子β1（TGF β1）、白细胞介素-10（IL 10）的表达水平与非耐药肺结核患者和健康对照者的差异,并探讨其在抑制特异细胞免疫反应中的作用。方法应用流式细胞技术分别对30例健康成人（健康对照组）、39例非耐药肺结核患者（普通肺结核组）及35例耐药肺结核患者（耐药肺结核组）的外周血CD4+CD25+T淋巴细胞和CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞表达水平进行检测;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同组别人群外周血血清中TGF β1、IL 10水平。结果健康对照组成人外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞和CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞分别占CD4+细胞总数的(17.09±5.43)%和(0.78±0.88)%;普通肺结核组外周血中上述两种细胞分别占CD4+细胞总数的(22.12±3.43)%和(2.79±1.65)%;耐药肺结核组外周血上述两种细胞分别占CD4+细胞总数的(24.01±5.65)%和(4.51±1.47)%。耐药肺结核组外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞所占CD4+T淋巴细胞的比例较普通肺结核组高,但差异无统计学意义(P＞0.05);耐药肺结核组CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞的比例明显高于健康对照组及普通肺结核组 (P＜0.05),并且耐药肺结核组TGF β1［（4.15±1.39）ρ/ng·L-1］、IL 10［（872.17±269.75）μg/L］明显高于普通肺结核组［分别为（3.03±1.42）ρ/ng·L-1、（266.83±57.09）μg/L］和健康对照组［分别为（2.12±0.77）ρ/ng·L-1、（105.21±23.56）μg/L］ (P＜0.05)。结论CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞可能削弱结核病患者机体免疫系统对感染结核分枝杆菌的清除作用,是导致结核病感染慢性化且出现耐药的原因之一; TGF β1、IL 10可能参与抑制机体细胞免疫,与耐药结核病的形成和严重程度有一定相关性。     

实验性抗磷脂综合征小鼠CD4~+CD25~+调节性细胞及foxp3表达的变化

目的:观察实验性抗磷脂综合征(experimental anti-phospholipid antibody syndrome,EAPS)进展过程中小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量和功能变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立实验性APS模型,免疫12周后检测抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)、抗心磷脂抗体(ACA)、流产率(%)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、血小板计数(PLT PBC)。以流式细胞术检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果:模型小鼠anti-β2-GP1、aCL水平明显升高,aPTT延长,PLT PBC降低,流产率提高,差异有统计学意义(P0.05)。模型小鼠PBMC中foxp3基因表达在4周短暂高于对照组(P0.05),8周后随着APS进展开始逐渐降低,12周后明显低于对照组(P0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P0.05)。结论:CD4+CD25+Treg数量和功能下降参与抗磷脂综合征的发病机制。     

实验性矽肺大鼠外周血NK及NKT细胞动态变化及意义

[目的]研究实验性矽肺模型大鼠在染尘后的不同时间点外周血中自然杀伤细胞（NK）及自然杀伤T细胞（NKT）数量的变化,并探讨NK及NKT细胞与矽肺的相关性及临床意义。[方法]将48只健康雄性SD大鼠随机分成模型组和对照组,每组24只。模型组采用非暴露方式气管内一次性染尘（注入40mg／mL二氧化硅悬液1mL）建立大鼠矽肺模型,对照组采用相同方式气管内注入等量灭菌生理盐水。分别于染尘后第1、8、15、23、30、37天时处死模型组和对照组大鼠各4只,采集外周血,用流式细胞术检测大鼠外周血中NK（CD3-／CD161＋）及NKT（CD3＋／CD161＋）细胞的百分率。[结果]模型组外周血NK细胞的水平在试验早期（第1天）开始上升,高于对照组（P〈0．05）,第23天达到高峰（P〈0．01）;之后有所下降,但依然高于对照组（P〈0．05）。NKT细胞百分率在早期明显下降,后期慢慢回升,但仍低干对照组（P〈0．05）。[结论]石英诱发了机体的固有性免疫应答．NK及NKT细胞参与了矽肺变化发展过程。     

实验性矽肺大鼠外周血和脾T淋巴细胞亚群的动态变化

[目的]研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时间点外周血和脾组织T淋巴细胞亚群数量的变化，并探讨其意义。[方法]将60只健康雄性SD大鼠随机分为染矽尘组和对照组，每组30只。对染矽尘组以非暴露方式气管内分2次（间隔1周）分别注入1ml二氧化硅悬液（20mg／ml）建立大鼠矽肺模型，对照组气管内注入等量的灭菌生理盐水。染尘后第7、14、21、28、35、42、49、56、63和70天各处死实验组和对照组大鼠3只，采集外周血和脾脏，用流式细胞术检测大鼠外周血、脾组织的T淋巴细胞（CD3、CD4、CD8细胞）百分率。[结果]矽肺大鼠外周血CD4水平在实验早期（第1～3周）高于对照组。在实验后期，CD3、CD4、CD4／CD8明显低于对照组（P〈0，05），CD8明显高于对照组（P〈0．05）。脾组织CD3水平在第1～3周明显高于对照组（P〈0．05），CD8水平在第1～3周轻度增高（差异无显著性）。在实验后期，CD3、CD4、CD4／CD8明显低于对照组（P〈0.05），CD8明显高于对照组（P〈0．05）。[结论]在实验早期，石英增强获得性免疫反应；在实验后期，矽肺大鼠外周血及脾T淋巴细胞亚群存在明显异常，细胞免疫功能严重紊乱，石英降低了获得性免疫反应。     

Frequencies of CD4+ T Regulatory Cells and their CD25high and FoxP3high Subsets Augment in Peripheral Blood of Patients with Acute and Chronic Brucellosis

Objectives

Brucellosis remains one of the most common zoonotic diseases worldwide. In humans, brucellosis can be a serious, debilitating, and sometimes chronic disease. Different mechanisms can be postulated as to the basis for the induction of the chronic status of infectious diseases that T regulatory cells are one of the most important related mechanisms. The current study was designed to determine whether percentage of CD4+Treg cells and their CD25^high and FoxP3^high subpopulations in peripheral blood are changed in human brucellosis samples in comparison to a control group.

Methods

In total, 68 brucellosis patients (acute form: n = 43, chronic form: n = 25) and 36 healthy volunteers entered our study. After isolating of peripheral blood mononuclear cells, heparinized venous blood samples were obtained from both patients and healthy donors, CD4, CD25, and FoxP3 molecules were evaluated by two- and three-color flow cytometric methods.

Results

The results revealed a new finding in relation to Treg cells and human brucellosis. The numbers of CD4⁺Treg cells and their CD25^high and FoxP3^high subsets increase significantly in the peripheral blood of acute and chronic forms of brucellosis samples compared with healthy groups, with this increase being greater in the chronic group.

Conclusion

There seems to be a correlation between increase of CD4+Treg cells and their subsets and the disease progress from healthy state to acute and chronic brucellosis.