慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

miR-203在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-203的表达水平与疾病活动度?肾脏受累情况等临床表现之间的关系,初步探讨miR-203在SLE中的临床意义?方法:收集31例SLE患者?16例健康志愿者外周血标本,根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例?采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quota polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-203表达,比较各组间miR-203表达水平的差异,并分析其与SLE临床指标之间的关系?结果:SLE患者miR-203表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.05);狼疮肾炎组患者miR-203表达低于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.01);SLE患者miR-203表达水平与24 h尿蛋白?肾脏急性指数呈明显负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者PBMCs中miR-203的表达水平降低,表明miR-203在SLE发病机制中可能发挥一定作用;狼疮肾炎患者miR-203的表达降低,提示miR-203可能参与了狼疮肾炎的发病?     

Expression of miR-155 and miR-146a in patients with systemic lupus erythematosus

目的 通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用.方法 SLE患者20例,健康对照组15例.取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNA U6作为内对照,计算标准化后的2-ΔCt值表示miRNA的相对表达含量.结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P＜0.01)和1.91倍(P=0.056); SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义.结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势.     

系统性红斑狼疮患者血清中miR-155的表达及意义?

目的：探讨系统性红斑狼疮( systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清中miR-155的表达及其在SLE发病中的作用及临床检验诊断的意义。方法收集SLE患者90例[ SLE疾病活动指数( SLEDAI)评分≤9为轻度活动组,>9为重度活动组],类风湿关节炎( RA)患者60例,干燥综合征( SS)患者60例和健康体检者30例,采用实时荧光定量聚合酶反应( qRT-PCR)检测血清中miR-155的表达水平,分析其与临床及实验指标的相关性。结果 SLE患者血清中miR-155的表达水平显著低于健康体检者(P<0．01);与SLE患者相比,RA患者和SS患者血清中miR-155表达均下降,差异有统计学意义(P<0．05,P<0．01)。 SLE患者血清中miR-155的表达水平重度活动组显著低于轻度活动组,差异有统计学意义( P<0．01)。 SLE患者血清中miR-155表达量与SLEDAI呈负相关(r=-0．673,P<0．01),与C3呈正相关(r=0．594,P<0．01)。血清miR-155作为临床检验标志物敏感度为73．3%,特异度为86．7%。结论 miR-155在SLE患者血清中显著低表达,其敏感度和特异度都很高,有望成为新的临床检验诊断标志物。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微小RNA-146a的表达

目的 采用生物信息学和分子生物学技术相结合,寻找在系统性红斑狼疮(SLE)中特异性表达的微小RNA,为进一步研究微小RNA在SLE发病机制中的作用打下基础.方法 查找与SLE发病相关的基因,采用微小RNA靶基因预测数据库预测SLE相关基因上的可能微小RNA靶位点,选择其相对应的微小RNA-146a,即hsa-miR-146a,采用实时荧光定量PER方法检测SLE患者与正常人外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA的表达差异.结果 SLE患者外周血PBMCs中hsa-miR-146a的循环阈值的差值高于正常对照组(4.52±1.18比2.76±1.38,P=0.02),hsa-miR-146a的表达量显著低于正常对照组.结论 SLE患者PBMCs中hsa-miR-146a的表达水平降低,表明hsa-miR-146a在SLE发病机制中可能发挥一定的作用.     

miR-29a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及意义

目的 分析microRNA-29a（miR-29a）在系统性红斑狼疮（SLE）患者血浆中的表达水平及与SLE临床特征的相关性。方法建立检测miR-29a的实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法,分析48例SLE患者和20例健康体检者血浆中miR-29a的表达水平,ROC曲线评估其作为SLE诊断标记物的意义,统计分析其表达与SLE患者临床特征的相关性。结果与健康体检者比较,SLE患者血浆miR-29a表达水平明显上调（Z=3.476,P=0.0009）;血清miR-29a诊断SLE的ROCAUC为0.794（95%CI:0.689~0.898）,具较好诊断SLE的效能;抗β2GP1抗体＞20RU/ml患者的血浆miR-29a水平明显升高（P=0.033）,Pearson相关分析显示,SLE患者血浆miR-29a表达水平与抗β2GP1抗体水平呈正相关（r=0.584,P=0.001）,而与不同SLEDAI评分及其他SLE活动相关指标等差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论miR-29a在SLE患者血浆中的表达水平明显上调,且血浆miR-29a上调与SLE患者自身抗体水平相关,其调节机制尚待进一步的研究。     

系统性红斑狼疮患者血清miR-155表达变化及诊断价值

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清中miR-155表达变化及其在SLE诊断及判断病情活动中的意义。方法收集22例系统性红斑狼疮患者(SLE组)和健康对照组20例健康体检者的血清,应用实时定量PCR(Q-RT-PCR)检测两组对象血清中miR-155的表达变化,并分析其与实验指标的相关性。结果 SLE患者血清中miR-155的相对表达低于对照组(P=0.012);血清中miR-155表达与患者血沉(r=-0.647,P=0.001)和C反应蛋白(r=-0.647,P=0.001)均呈负相关,与补体C3(r=0.458,P=0.032)和C4(r=0.535,P=0.010)水平均呈正相关;miR-155作为SLE标志物敏感性为50%,特异性为90%(P=0.013)。结论以上结果表明,miR-155可作为标志物用于SLE的诊断及判断病情的活动。     

IL-18在系统性红斑狼疮肾损害患者外周血中过度表达

【目的】探讨IL-18在系统性红斑狼（SLE）肾损害发生发展中的作用。【方法】采用RT-PCR及ELISA法测定了20例SLE患者（其中10例伴有肾损、10例无肾损）及10例健康人的外周血单个核细胞（PBMC）表达IL-18 mRNA和血清IL-18蛋白水平。【结果】SLE肾损组和非肾损组、健康对照组PBMC的IL-18 mRNA表达分别为1．35±0．30、0．91±0．27、0．69±0．17。SLE肾损组和非肾损组、健康对照组血清IL-18蛋白水平分别为：（799±237）pg／mL、（163±53）pg／mL、（114±39）pg／mL。SLE肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA平均表达水平较健康人、非肾损SLE患者显著增高；SLE非肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA表达水平也高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】IL-18的过度表达可能在SLE特别是狼疮性肾损害过程中起着一定作用。     

女性系统性红斑狼疮患者雌激素受体的表达

目的:检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中雌激素受体在基因和蛋白水平的表达,分析其表达类型与女性系统性红斑狼疮的相关性。方法:收集46例女性SLE患者和33例健康体检者空腹静脉血,分离PBMCs,采用RT-PCR法检测PBMCs中雌激素受体(estrogen receptor,ER)αmRNA、ERβmRNA的表达,荧光免疫技术检测ERα和ERβ在蛋白水平的表达。分析两组ER表达的差异。结果:SLE患者组PBMCs中ER亚型在基因和蛋白水平上的表达率与正常对照组无显著差异(P>0.05)。结论:ER的表达类型与女性SLE没有相关性。     

IL-18在系统性红斑狼疮肾损害患者外周血中过度表达

 【目的】探讨IL-18在系统性红斑狼(SLE)肾损害发生发展中的作用。【方法】采用RT-PCR及ELISA法测定了20例SLE患者(其中10例伴有肾损、10例无肾损)及10例健康人的外周血单个核细胞(PBMC)表达IL-18 mRNA和血清IL-18蛋白水平。【结果】SLE肾损组和非肾损组、健康对照组PBMC的IL-18 mRNA表达分别为1.35±0.30、0.91±0.27、0.69±0.17。SLE肾损组和非肾损组、健康对照组血清IL-18蛋白水平分别为:(799±237)pg/mL、(163±53)pg/mL、(114±39)pg/mL。SLE肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA平均表达水平较健康人、非肾损SLE患者显著增高;SLE非肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA表达水平也高于健康对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。【结论】IL-18的过度表达可能在SLE特别是狼疮性肾损害过程中起着一定作用。     

系统性红斑狼疮患者B细胞中microRNA-155的表达及干预后效应

目的分析microRNA-155（miR-155）在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血B细胞中的表达及干预后B细胞表达IgG水平。方法收集66例SLE患者及10例健康人群外周血,分离出B细胞,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-155在B细胞中的表达水平,利用电转染技术使miRNA抑制剂干预SLE患者外周血B细胞miR-155的表达,然后以ELISA检测B细胞干预后培养液上清液IgG的水平。结果qRT-PCR结果显示,与健康人比较,SLE患者外周血B细胞中miR-155表达上调（P＜0.05）,通过miRNA抑制剂下调SLE患者B细胞中的miR-155的表达后,B细胞分泌的IgG水平明显降低。结论SLE患者的B细胞中表达上调的miR-155可能参与了SLE患者B细胞功能调控。     

miR-200a和miR-155在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达及其作用机制探讨

目的：探讨miR-200a及miR-155在狼疮性肾炎(LN)患者肾组织中的表达及其在LN发病机制中的作用。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应测定30例LN患者和15例健康对照组肾组织中miR-200a及miR-155的表达水平。结果 LN患者肾组织中miR-155的表达水平高于健康对照组,miR-200a的表达水平低于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。LN患者肾组织中miR-200a的表达水平与狼疮评分呈负相关(r=-0.391,P=0.032),miR-200a的表达水平与尿蛋白呈负相关(r=-0.395,P=0.034)。miR-155与狼疮评分呈正相关(r=0.593,P=0.001),miR-155表达水平与尿蛋白呈正相关(r=0.375,P=0.045),miR-155的表达水平与eGFR呈负相关（r=-0.59,P=0.001）。miR-200a的表达水平与eGFR之间无明显相关性(r=0.22,P=0.242)。结论肾组织中miR-155和miR-200a在狼疮性肾炎患者与健康对照组之间的表达水平有差异,且它们的表达水平与蛋白尿、肾功能及狼疮评分均相关。提示LN患者组织中miR-200a与miR-155的表达与LN患者肾功能恶化和狼疮疾病活动程度密切相关,可作为预测LN进展的重要标志物。     

COX-2在系统性红斑狼疮病人PBMC中的表达及意义

目的：检测环氧全酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)蛋白在系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus．SLE)患外周血单核细胞(Peripheral blood monoeytes，PBMC)中的表达情况。探讨COX-2蛋白表达水平与SLE病情活动程度之间的关系。方法：从外周血中分离PBMC后涂片，用免疫组化染色的方法测定COX-2蛋白的表达情况。结果：COX-2蛋白在SLE实验组呈高表达状态，与SLE疾病的活动性之间呈正相关。结论：COX-2的表达与SLE的发病有关，可作为今后辅助治疗措施的目标和病情变化和疗效评价的参考指标之-。