T细胞酶联免疫斑点试验在结核性胸膜炎鉴别诊断中的应用价值

目的:探讨T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT·TB)在结核性胸膜炎鉴别诊断中的应用价值.方法:对2013.9-2015.1住院治疗的61例疑似结核性胸膜炎致胸腔积液患者(A组)和64例其他疾病致胸腔积液(B组)的患者进行外周血T-SPOT·TB检测,所有患者同时进行结核菌素试验(PPD)、血清结核抗体检测(Mtb-AB)并对比,结果与最终诊断比较.结果:A组T-SPOT·TB的阳性率90.16％,明显高于B组20.5％(X2 =52.19,P＜0.001).A组T-SPOT·TB的阳性率明显高于PPD试验36％(X2 =5.20,P＜0.05)、Mtb-AB 41％(X2 =0.52,P＞0.05).T-SPOT· TB在B组中阴性率为79.55％.结论:T-SPOT·TB检测特异性和敏感度要明显优于PPD试验和Mtb-AB检测,可用于结核性胸膜炎的鉴别诊断,值得临床推广应用.     

结核T细胞酶联免疫斑点试验诊断结核感染的临床应用

 目的 探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)诊断结核感染的临床应用价值。方法 选择结核分枝杆菌感染者103例及非结核病对照者30例,用酶联免疫斑点试验检测外周血单个核细胞经结核特异性蛋白6KD早期分泌靶向抗原,以及培养滤液蛋白10刺激产生γ-干扰素的T淋巴细胞数,并与血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验结果比较。结果 T-SPOT.TB诊断结核感染的敏感性和特异性为95.15% 、93.33%;阳性预则值和阴性预测值为98.00%、84.85% ;阳性似然比和阴性似然比为14.27%、0.05%,均优于血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验(P<0.01),但方法间一致性较弱(Kappa＜0.40,P<0.001),差异有统计学意义。结论 T-SPOT.TB检测在结核分枝杆菌(MTB)感染的筛查,快速早期辅助结核病诊断和排除感染方面意义重大。     

酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附试验技术是继免疫荧光技术与放射免疫技术的基础上发展起来的一种新的免疫学技术,它不仅可以检测抗体,还可以检测抗原。具有敏感性高、特异性强、方法简便容易观察结果,便于大规模检测的特点,应用范围和程度可与放射免疫分析法相比拟。目前已开始应用于生物学和医学的许多领域中。它是免疫学中令人注目的有发展前途的一种新的技术,有可能代替补体结合试验、血凝试验、免疫荧光技术及放射免疫分析法。     

APAAP桥联酶标技术检测支原体和虫媒病毒

APAAP免疫酶标技术(即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)是最近几年随着单克隆抗体(McAb)技术进展而发展起来的一新兴组化染色技术.此项技术在国内首先由杨志刚等同志建立并推广应用.我们将这一方法应用于支原体和虫媒病毒抗原检测,获得了满意结果.材料与方法支原体:口腔支原体引自生物制品检定所,猪鼻支原体(BTS-7CF8)引自中监所.病毒:辛德比斯病毒引自生物制品检定所,森林脑炎病毒(森张株)引自长春生物制品所.上述支原体和病毒感染敏感细胞一定时间后按常规法进行细胞滴片,经丙酮固定后,作为感染抗原片.抗体:我们用口腔支原体和猪鼻支原体免     

固相酶联免疫斑点技术检测递增负荷过度训练大鼠细胞免疫机能变化研究

目的:建立大鼠脾脏淋巴细胞中Th1/Th2型淋巴细胞亚群表达的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术检测方案,进一步比较Th1/Th2淋巴细胞和CD4+/CD8+在大鼠递增负荷过度训练过程中的改变,为筛选最佳免疫学评价指标提供参考。方法:雌性SD大鼠进行9周递增负荷跑台训练,分别在训练的第1周、第3周、第9周训练结束后的36小时,以及恢复1周后处死大鼠。采用不同种类刺激剂、不同刺激剂浓度刺激不同数量大鼠脾脏淋巴细胞,建立最佳ELISPOT检测方案。检测大鼠血红蛋白、睾酮、皮质酮,评估疲劳模型的建立,并对Th1/Th2型淋巴细胞亚群以及传统免疫学指标CD4+/CD8+进行动态观察。结果:建立最佳ELISPOT技术检测方案:PMA和Ionomycin联合刺激。刺激物浓度:检测γ干扰素(IFN-γ)时PMA浓度为2.5ng/ml,检测白细胞介素4(IL-4)时PMA浓度为10ng/ml;检测IFN-γ时Ionomycin浓度为0.05μg/ml,检测IL-4时Ionomycin浓度为0.2μg/ml。细胞浓度:3×104cells/孔(IFN-γ),60×104cells/孔(IL-4)。运动后36小时,运动组血红蛋白、睾酮、皮质酮均较对照组显著下降;经1周恢复后,和对照组相比无显著性差异。递增负荷运动第1周跑台训练后,运动组Th1型细胞因子IFN-γ与对照组相比显著升高;第3周跑台训练后,运动组和对照组相比显著下降;恢复1周后,运动组IFN-γ与对照组相比显著下降。递增负荷训练结束后的恢复期,运动组Th2型细胞因子IL-4较对照组升高了1.44倍(P<0.01)。CD4+/CD8+在整个训练期及恢复期均无显著性变化。结论:递增负荷过度训练过程中,与CD4+/CD8+相比,采用ELISPOT技术检测SD大鼠Th1/Th2淋巴细胞亚群的改变具有较高的灵敏性。     

荧光酶联免疫分析技术测定人甲状腺过氧化物酶抗体

目的以重组人甲状腺过氧化物酶（hTPO）为抗原建立定量检测hTPO抗体（hTPOAb）的板式荧光酶联免疫技术（FEIA）,用于甲状腺疾病的临床检测。方法用该法测定326名健康人和各类甲状腺疾病患者279例,包括慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）119例,初诊Graves病（GD）116例,结节性甲状腺肿28例,亚急性甲状腺炎10例,单纯性甲状腺肿6例的血清hTPOAb水平。组间比较采用秩和检验,组间阳性率的比较用,检验。结果（1）确立该法阳性切限值为第95百分位数（％）4000U／L（即hTPOAb浓度值大于4000U／L定为阳性）。（2）批内、批间变异系数（CV）分别为4．59％～6．52％、17．37％～17．45％。（3）该法与商品试剂盒雅培微粒荧光法检测同批血清hTPOAb结果显著相关（r=0．80,P〈0．01）。（4）用该法测定各类甲状腺疾病患者hTPOAb浓度值结果以中位数表示,HT为7000U／L,阳性率85．70％;初诊GD为4000U／L,阳性率39．65％;结节性甲状腺肿为4000U／L,阳性率28．57％;亚急性甲状腺炎为4000U／L,阳性率30．00％;单纯性甲状腺肿为3500U／L,阳性率0。HT患者血清hTPOAb阳性率与其他各甲状腺疾病组之间的差异有统计学意义（,=53．45,39．30,15．41和21．74,P均〈0．01）。结论该定量检测hTPOAb的FEIA应用于临床甲状腺疾病患者的血清学检查,在HT中有很高的阳性率,故可作为HT的诊断手段。     

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标技术的建立及应用

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)桥联酶标技术是近10年来发展起来的一种免疫酶标记新技术,它属于不标记抗体桥法,即以APAAP复合物及桥联二抗替代了一般间接免疫酶技术中的酶标抗体。该技术因具有较多的优点,近年来应用逐渐广泛并日益受到重视。然而,建立桥联酶标技术对其中的抗酶抗体纯度要求较高,抗酶抗体与酶结合形成的复合物必须     

血清酶测定在诊断急性心肌梗塞中的应用

<正>用于诊断急性心肌梗塞(AMI)的手段近十余年来进展很快.但主要是临床表现、心电图和酶学三个方面.在AMI临床症状不明显,不典型或心电图未出现典型改变时,血清酶测定则是一种有效的辅助诊断方法.从理论上讲当心肌细胞遭受不可逆损伤后,细胞内所含的一些酶即可释放入血循环,通过特殊方法测出这些酶并分析其含量及动态变化即可判断梗塞的程度.目前国内外应用于诊断AMI的血清酶主要有AST.LDH、CK.其中尤以CK及其同工酶CK—MB具有较高的阳性率和特异性.     

核酸扩增检测技术和酶联免疫吸附在人类免疫缺陷病毒检测中的应用价值

血站是无偿献血的主要场所,也是临床急救和疾病预防血液的主要来源,因此加强血站血液筛选对预防血液途径传染性疾病的发生具有重要的意义[1]。近年来,艾滋病的发病率呈现明显的上升趋势,人免疫缺陷性病毒(HIV)携带者的比例也显著增加,导致无偿献血志愿者中HIV感染比例有所上     

酶联免疫试验测定血清中结核抗体的应用

采用酶联免疫试验(ELISA)技术检测38例肺结核病人血清中结核抗体，同时应用痰集菌法找抗酸杆菌．结果表明血清中结核抗体的检测可以作为结核病的辅助诊断。具体做法如下。     

大孔树脂吸附技术在中药制剂中的应用

大孔树脂是20世纪70年代末发展起来的一类有较好吸附性能的有机高聚物吸附剂。近年来，大孔树脂吸附技术已广泛用于中草药有效成分的提取、分离、纯化工艺，且越来越多的用于中成药制备工艺。本介绍大孔吸附树脂的性能、分离原理、吸附和解吸作用的影响因素及树脂的预处理和再生。并总结近年来大孔吸附树脂在中药制剂工艺改革中和中药制剂质量控制预处理中的应用。在中药制剂工艺中，使用该技术可以简化工艺，降低成本，使产品的收率和质量明显提高；在中药制剂质量控制预处理中，该技术可有效地除去某些干扰成分，对中药质量控制有良好效果。为大孔吸附树脂在药用植物有效成分分离和复方制剂的纯化中的应用提供参考。     

新型酶联ELISA—固相小珠法在包虫病检测中的应用

我们应用了一种新型的ELISA固相小珠法检测包虫病患者血清抗体水平,获得了满意的效果。共检测了120例可疑包虫病人,其中69例阳性,包括假阳性2例,假阴性1例,经手术证实阳性符合率为90％。该法作为包虫病的诊断,灵敏,简单,快速,不需特殊仪器,有实用价值。     

冠状动脉CT血管成像技术在心肌桥诊断中的应用

冠状动脉心肌桥是覆盖在心外膜下冠状动脉表面的一段心肌纤维,可以出现在任何心外膜动脉上,但多累及左前降支动脉.心肌桥起初被定性为良性解剖变异,近年来随着冠脉成像技术的发展和临床研究的深入,与之相关的心律失常、心绞痛、心肌梗死甚至心源性猝死的报道越来越多.因此,如何高效、精准地甄别及评估心肌桥具有重要的临床意义.冠状动脉C...     

血球吸附免疫荧光技术在食品沙门氏菌快速检出中的应用

荧光抗体技术于1957年开始用于沙门氏菌纯培养的观察,1962年开始对乳制品中沙门氏菌进行检验试验,以后逐步扩大到其他多种食品的检出试验。早期的工作多采用间接荧光抗体染色法,自1970年以后,则多使用直接法。1975年以前,一般是处于实验研究阶段,方法程序往往各人不同。1975年美国分析化学协会(AOAC)提出了一个用免疫荧光检出食品沙门氏菌的标准化筛选程序,推荐作为初步法定的分析方     

人血清TRAb酶联免疫吸附试验检测在甲状腺疾病患者中的临床应用

目的 探讨促甲状腺激素受体抗体（TRAb）水平对健康人和不同甲状腺疾病患者的临床意义.方法 分别以重组人促甲状腺激素受体（TSHR）膜外区氨基（N）端蛋白和羧基（C）端蛋白作为抗原建立N法和C法,分别检测89名健康者（正常对照组）和254例各种甲状腺疾病患者的血清TRAb水平,组间血清TRAb水平比较采用方差分析,组间阳性率比较采用x2检验.结果 应用N法检测发现：89名健康者405 nm处的光吸收值（（x）±s）为0.511±0.135,阳性切限值（（x）±2s）为0.789,阳性率为4.5％（4/89）;初发Graves病（毒性弥漫性甲状腺肿）患者及Hashimoto甲状腺炎伴甲状腺功能减退症（简称甲减）患者405 nm处的光吸收值（（x）±s）分别为：0.95±0.30、0.61±0.22,高于健康者（F=2.4851和2.0763,P均＜0.05）;N法对初发Graves病患者、治疗中的Graves 病患者、Graves病治疗恢复期患者、Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者检测的阳性率分别为73.2％、55.9％、32.1％、45.0％,与正常对照组阳性率之间的差异均有统计学意义（x2=68.55、56.45、20.71和25.51,P均＜0.05）;初发Graves病患者阳性检出率高于Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者（x2=4.63,P＜0.05）,初发Graves病患者与Graves病治疗恢复期患者阳性率之间的差异有统计学意义（x2=15.94,P＜0.05）.应用C法检测发现：89名健康者405 nm处的光吸收值（（x）±s）为0.507±0.142,阳性切限值（（x）＋2s）为0.791,阳性率为3.4％（3/89）;Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者及初发Graves病患者405 nm处的光吸收值（（x）±s）为1.18±0.25、0.78±0.25,明显高于健康者（F=3.8164和2.4539,P＜0.05）;C法对Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者、初发Graves病患者、治疗中的Graves病患者、Graves病治疗恢复期患者检测的阳性率分别为：75.0％、46.3％、23.6％、16.1％,与正常对照组阳性率之间的差异均有统计学意义（x2=66.34、36.87、15.79和7.30,P均＜0.05）;Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者阳性检出率明显高于其他患者（x2=4.48、19.70和23.68,P均＜0.05）.结论 应用N法和C法检测Graves病和Hashimoto患者血清TRAb水平均有重要意义,可用于临床Graves病和Hashimoto甲状腺炎伴甲减患者的诊断、治疗及疗效的评估.     

放射性元素在矾土上的吸附及其在测定尿总α放射性中的应用

矾士(Alumina,Al_2O_33)是一种特别有意思的无机吸附剂。Dobyohill曾把它的吸附特性与其它吸附剂进行比较。吸附效率高是由于它表面的极性和均匀的微孔所致。本文研究了低水平曰礴肺(里)、'。钻(I)、'37绝(I)、"绝(且)、2"2社(W)、23"铀(矶)、2"杯(W)和2'媚(l)在矾土的吸附行为。用pH计测量溶液pH,用钟罩型G一M计数器测量p一放射性,用硫化锌     

壳聚糖在酶固定化中的应用

壳聚糖又名氨基葡萄糖，是由氨基-D-葡萄糖和N-乙酰基-D-氨基葡萄糖通过B-（1，4）糖糖苷键连接起来的直链多糖，它是目前发现的唯一的一种天然的碱性多糖。其在材料工业、化妆品、纺织、印染、造纸、生物医药、环保、农业等多方面都具有广泛的用途。壳聚糖及其衍生物对人体无毒，具有良好的生物相容性和生物可降解性，其本身不仅具有广谱抗菌、抗感染和较强的凝血作用，还具有促进伤口愈合、调节血脂和降低胆固醇、增强免疫和抗肿瘤等多种生理活性。     

酶联免疫吸附测定检测人血清胰岛素抗体的研究

报告用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定人血清胰岛素抗体(IAb),批内及批间平均变异系数分别为8.3％、14.6％;阻断试验及交叉反应试验证明有较高的免疫学特异性。用本法调查了177名正常人血清中IAb,P/N值为0.9±0.27((?)±S),以>1.6((?)+2.5S)为阳性,阳性率为1.1％(2/177);接受胰岛素治疗的糖尿病(DM)组血清IAb阳性率为60％(27/45),与非胰岛素治疗的DM组、非DM组及正常对照组差异非常显著(P<0.01);非胰岛素治疗的DM组、肾病组及结缔组织疾病组阳性率分别为11.30％(9/80)、59％(3/51)、25％(5/20),与正常对照组比差异显著(P<0.01、0.05>P>0.01、P<0.01);结果提示ELISA法测IAb具临床特异性。本法简便,可为研究DM患者对胰岛素的免疫应答提供一个实用的工具。