单克隆抗体的多重反应性(文摘)

单克隆抗体存在抗原特异性的同时,还发现相当多的McAbs能与复合的无关抗原反应。由于其反应程度尚未完全弄清,因此作者用ELISA系统地检测了31株纯化McAbs与10种普通的无关蛋白抗原非特异性反应的程度。本试验所用McAbs的特异性和数量是:抗DNP7,抗人IgE9,抗riscosus放线菌T14v9,抗苄青霉素2,抗卵清蛋白1,抗鼠嗜碱性白血病细胞Fc受体3。     

淋巴瘤对单克隆抗体出现意外的反应性(文摘)

CD_3(T_3)是确定成熟T细胞标记的一种单克隆抗体(McAb),而正常B细胞为阴性。成熟B细胞的典型标记是有表面免疫球蛋白(SIg)表达,而T细胞则SIg阴性.作者最近发现2例无细胞白血病,1例为分化良好的淋巴细胞性淋巴瘤,另1例为慢性淋巴细胞性白血病(CLL),这2例患者SIg和CD_3同时阳性。通过各种方法检查,认为SIg和CD_3似乎是内源性的。     

单克隆抗体ELISA捕捉法检测传染性法氏囊病病毒抗体(文摘)

作者用抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)McAb 2 G10,建立了检测幼鸡血清中IBDV抗体的单克隆抗体ELISA捕捉法(McAb-ELISA),并与常规ELISA进行了比较。McAb-ELISlA的操作程序为:用0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)400倍稀释的McAb 2 G10包被ELISA板,每孔50ul,37℃孵育2h,PBST液(含0.05％吐温-20的PBS液)冲洗3次后,每孔加入50ul PBS液80倍     

抗日本脑炎病毒上山株单克隆抗体的免疫学性状的分析(文摘)

日本脑炎病毒(JEV)与黄病毒属中约60种病毒有广泛的交叉反应。历来均采取免疫血清进行血球凝集抑制试验(HIT)帮助诊断,但分析鉴定病毒则显得困难。本文以B淋巴细胞杂交瘤技术,建立15种分泌抗日本流行的JEV上山株种特异性单克隆抗体(McAb)细胞系(KAMIMA),结果发现只与JEV发生HI反应,而与墨累山谷(Muray Valley)脑炎病毒、西尼罗(West—nile)病毒、圣路易(St.Louis)脑炎病毒、苏联春夏(Russian Spring-Summer)脑炎病毒及登革1型(Dengue-1)病毒5种黄病     

单克隆抗体与原位杂交检测早期培养细胞中巨细胞病毒的比较(文摘)

巨细胞病毒(CMV)感染人群(如AIDS病人,化疗患者和新生儿等)日益增多,迫切需要一种快速敏感检测诊断CMV的方法。目前,检验诊断CMV的方法有:用免疫荧光法检测CMV早期抗原和分离培养病毒,观察CPE的出现等。本文详细地比较了4种检测早期培养细胞CMV诊断方法。这4种方法是 (1)直接McAb荧光染色法(DFA);(2)间接McAb荧光染色法(IFA);(3)生物素标记DNA探针的原位杂交及 (4)辣根     

用单克隆抗体对西尼罗病毒的抗原分析(文摘)

西尼罗(West Nile)病毒是黄病毒属中经蚊传播的成员,广泛分布于非洲、亚洲及欧洲的部分地区,主要引起地方性和流行性人类感染。亚尼罗病毒体为单链RNA基因组,含有表面囊膜(E)、衣壳(C)及膜样(M)三种结构蛋白。E蛋白含有大多数涉及免疫反应的抗原决定族。     

检测单克隆抗体不同ELISA方法的敏感性比较(文摘)

本文比较7种不同的EL1SA方法在检测9株单克隆抗体中的敏感性。7种ELSA按试剂加入程序不间分别为①抗原、鼠抗体、酶标兔抗鼠②抗原、鼠抗体、兔抗鼠、酶标羊抗兔③羊抗体、抗原、鼠抗体、酶标兔抗鼠④鸡抗体、抗原,、鼠抗体、免机鼠、酶标羊抗兔⑤鼠抗体、抗原、兔抗体、酶标羊抗兔⑥兔抗鼠、鼠抗体、抗原、酶标兔抗体⑦羊抗鼠、鼠抗体、抗原、鸡抗体、酶标兔抗鸡。抗原为烟草花叶病毒(TMV)及其衣壳蛋白(TMVP)。用碱     

抗入巨细胞病毒极早期抗原单克隆抗体的制备(文摘)

作者用杂交瘤技术制备出抗人巨细胞病毒(HCMV)极早期抗原的单克隆抗体(McAb),探讨HCMV感染的早期临床诊断。 作者将HCMV用moiI法感染人胚肺纤维母细胞(HEL)后分离细胞核,与Freund氏佐剂一起免疫BALB/c小鼠,每隔2周追加免疫一次,共4个月。腹腔内追加注入后,将脾细胞和鼠骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附法筛选,经过克隆化获得杂交瘤细胞纯株后,     

淋巴瘤对单克隆抗体出现意外的反应性（文摘）

CD3(T3)是确定成熟T细胞标记的一神单克隆抗体(McAb)，而正常B细胞为阴性。成熟B细胞的典型标记是有表面免疫球蛋白(SIg)表达，而T细胞则SIg阴性，作者最近发现2例无细胞白血病，1例为分化良好的淋巴细胞性淋巴瘤，另1例为慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，这2侧患者SIg和CDs同时阳性。通过各种方法检查，认为SIg和CD3似乎是内源性的。     

有助于诊断的单克隆抗体新技术(文摘)

一种新的制备单克隆抗体的方法若被证明和stratacyte公司作为商品化的技术一样有效,那么制备一种主要诊断工具-单克隆抗体的费用将会下降。 这项工作的研究者们克隆了识别相应抗原的抗体分子片段的基因,并在E.coli中表达成功。具体讲,他们将免疫球蛋白可变区的重链和轻链基因克隆进入表达载体,这些基因来自经抗原免疫后,小鼠的全部脾细胞mRNA。用PCR技术扩增这些基因,其探针可以识别可     

五株EV71病毒毒力、免疫原性与基因组比较分析

目的对5株EV71分离株(LCH01、LCH02、BJ01、BJ02、AH01)进行毒力、免疫原性和基因组的比较分析。方法分别用5株EV71分离株攻击Balb/c乳鼠,比较毒力差异;免疫6～8周龄Balb/c小鼠后收集血清,ELISA检测抗体效价,微量中和实验检测中和抗体效价;反转录获得5株EV71的全长cDNA进行全基因组测序;最后,用CLC Main Workbench 5.5软件对序列进行比较分析。结果通过对VP1基因的比较分析发现,这5株EV71分离株均为C4a亚型。1周龄Balb/c小鼠经脑部注射LCH01株,表现出后肢瘫痪和后继死亡;而注射其它4株EV71的小鼠在观察了14 d之后仍然存活。5株EV71血清抗体效价为210～211,中和抗体效价为27～28,无显著差异。LCH01毒株与其它几株序列相比,在5′-NTR、3′-NTR、3D等处均有明显差异。结论这5株EV71分离株为近几年流行的C4a亚型,具有较高的免疫原性;LCH01毒株的毒力高于其它几株,从基因组水平上找到了差异序列,这为EV71疫苗评价和致病机制研究提供了实验数据和实验材料。     

呼吸道合胞病毒逃逸株对单克隆抗体预防的抗性比较

目的 Palivizumab（PZ）是目前临床使用的惟一一个预防人类感染性疾病的单克隆抗体，本研究评估不同逃逸株在棉鼠体内对PZ预防的抗件。方法在细胞培养系统中筛选获得PZ逃逸株，测定其全长F基因序列，用微量中和法评估逃逸株对PZ的抗性，在棉鼠模型体内观察逃逸株对PZ预防的抗性差异。结果筛选获得的PZ逃逸株于F蛋白内第268位氨基酸（F212）和272位氨基酸（MP4、MS312、MS412和MS512）发生替换。用Western blot检测发现所有逃逸株PZ识别位点抗原性改变。F212复制能力受损，而其他逃逸株复制能力与A2母株接近。与A2原型株比较，MP4和MS412在体内外对PZ的中和活性具完全抗性。F212体外对PZ中和活性显示不完全抗性，但大剂量PZ在棉鼠体内仍能有效预防F212感染。结论不同PZ逃逸株体内对PZ的预防效应可能具有不同程度的抗性，某些逃逸株即使在PZ筛选压力下产生，亦不一定导致临床后果。     

DNA探针,单克隆抗体酶免疫检测和细胞培养检测沙眼衣原体的比较(文摘)

诊断生殖器沙眼衣原体感染的方法除细胞培养外,现有采用直接检测抗原的酶免疫测定法、直接荧光抗体法、细胞免疫化学及DNA探针法。尽管各种细胞培养方法的敏感性一般认为是低于100％,但直接检测抗原法和其他非培养的免疫法仍缺乏客观标准。当抗原检出阳性和阴性与培养结果不符时解决的方法可重新培养和再进行抗原检测试验,结合临床症状和流行病学调查以及采用另外独立检测原体的试验,例如常用的直接荧光显微镜检测。 本研究目的是比较IDEIA(Ⅳ)(EIA)放大的单克隆抗体免疫检测和同位素DNA探针检测,以及细胞培养方法检测沙眼衣原体     

抗K物质单克隆抗体的制备(文摘)

本文报道速激族肽,包括K物质、P物质、神经素B等都具有神经递质的功能,它们越来越引起人们的关注。免疫方法诸如:放射免疫测定法、免疫组化法等对神经肽的分布、定位和生物学功能等方面的研究提供了极大的方便。作者以K物质-甲状腺球蛋白偶联物免疫动物,Wistar大鼠对K物质-甲状     

MAPREC与MNVT评价Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒神经毒力的比较

目的用PCR扩增及限制性酶切分析突变技术(MAPREC)和猴体神经毒力试验(MNVT)评价同一批Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力的结果差异。方法采用MAPREC技术,检测Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力关键位点472位点突变率;采用MNVT病理切片分析,评价Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力。结果 MAPREC检测待测样品核酸472位点突变率均值为0.324%,低于高突变参考品的0.621%。MNVT切片结果分析表明,xtest–xref=0.169,小于C_1。对同一批样品,MAPREC与MNVT分析结果一致。结论在Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力检测方面,操作简单,试验周期短的MAPREC技术可作为金标准MNVT的有益补充。     

被动给予单克隆抗体对小鼠抗日本脑炎病毒的保护作用(文摘)

日本脑炎病毒(JEV)是60种黄病毒属中较重要的成员之一,对人类具有高度的致病性。在东南亚JEV和登革热(DEN)病毒交叉流行已对公众的健康造成严重的危害。这两种病毒均属于黄病毒属中一个不同亚组,这使预防接种和宿主的免疫应答变得更为复杂。黄病毒主要囊膜糖蛋白-E的抗原决定簇不仅为研制新的疫苗,而且为阐明感染机制提供了重要的依据。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备和鉴定

<正>传染性法氏囊病(IBD)是鸡的高度接触性急性传染病,自1957年在美国首先发现后已逐渐成为全球性感染.为诊断治疗此病打基础,我们研制了相应的单克隆抗体(用抗),现简述如下.1 材料和方法1.1 IBDV的提纯 将购自北京中监所的IBDV标准每株接种8～9日龄鸡胚尿囊,孵化24h后取尿囊液经预离心,再作20%～50%蔗糖梯度离心,收集梯度液中间乳白色带经透析浓缩后,进行1.36～1.285g/ml氯化铯密度梯度离心,4℃ 3800r/min 18h.分部收集并测定,将含病毒组分以PBS透析、PEG20000浓缩后分装冻存.用于小鼠免疫、间接ELISA的固相抗原,乳胶凝集试验和琼脂扩散试验.     

贵州不同新城疫分离株的毒力测定与单克隆抗体分群鉴定

目的 对15株贵州新城疫病毒进行毒力测定与单克隆抗体分群鉴定.方法测定鸡胚平均死亡时间(MDT)和3日龄脑内接种指数(ICPI),同时对这些毒株的三项表型特征进行了试验观察.并通过间接酶联免疫吸附实验,利用针对NDV的HN基因的单克隆抗体对贵州NDV不同分离株进行分群.结果鸡胚平均死亡时间(MDT)和3日龄脑内接种指数(ICPI)测定表明,FW、F48-E8属于速发型毒株;ND98、P1、P2,鸽NDV、Ⅰ系、H2、BY属于中发型毒株,Ⅱ系、I2、P3、ND99、ND79、Lasota属于缓发型毒株.对毒株的三项表型特征试验观察结果表明,血凝解脱速率、血凝素对热的稳定性、ND不同分离株与不同动物红细胞的血凝性等表型特征与NDV毒力没有相关性.间接酶联免疫吸附实验结果表明,A群为速发型强毒株,B群为缓发型弱毒与中等毒力株,C群为介于速发型强毒与中等毒力之间毒株.结论 NDV毒力的强弱与血凝素对热的稳定性没有相关性.贵州各地的现场流行毒株,它们的毒力介于强毒与中等毒力之间,与传统的毒力指数测定的结果基本相符.利用三株针对HN蛋白的单抗,由于它们各自的生物学特性和与不同毒力毒株的反应性不同,因而可将用于新城疫病毒强弱毒株的鉴定.     

单克隆抗体与原位杂交检测早期培养细胞中巨细胞病毒的比较（文摘）

巨细胞病毒(CMV)感染人群(如AIDS病人，化疗患者和新生儿等)日益增多．追切需要一种快速敏感检测诊断CMV的方法。目前，检验诊断CMV的方法有：用免疫荧光法检测CMV早期抗原和分离培养病毒，观察CPE的出现等。本文详细地比较了4种检测早期培养细胞CMV诊断方法。这4种方法是(1)直接McAb荧光染色法(DFA)；(2)间接McAb荧光染色法(IFA)；(3)生物素标记DNA探针的原位杂交及(4)辣根过氧化物酶直接标记DNA(HRP—DNA)探针的原位杂交。     

抗幽门弯曲菌单克隆抗体的制备(文摘)

作者将培养出的幽门弯曲菌菌体用福尔马林灭活,分3次注射到6周龄BALB/c小鼠的腹腔内进行免疫。取脾细胞,同骨髓瘤细胞X 63-Ag8.653进行细胞融合,获得杂交细胞瘤。为筛选抗体和探讨其特异性,将幽门弯曲菌、空肠弯曲菌和大肠杆菌超声波破碎可溶性抗原,变成固体,用酶联免疫吸附测定法测定。再将幽门弯曲菌的可溶性抗原用10％SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,在硝化纤维素膜上转录,使其与各种单克隆抗体反应,充分洗净后,再与过氧化物酶标记的鼠免疫球蛋白抗体反应,然后以氯萘酚为基质染色鉴定。