人参皂苷Rg1对脂多糖诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨人参皂苷Rg1(简称Rg1)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用及机制。方法常规培养PC12细胞后分为六组:A组作为对照,B组细胞采用LPS 5μg/mL处理,C组细胞采用Rg1 10μmol/L+LPS 5μg/mL处理,D组细胞采用Rg1 20μmol/L+LPS 5μg/mL处理,E组细胞采用Rg1 30μmol/L+LPS 5μg/mL处理,F组细胞采用佛波酯(PMA)20 ng/mL预孵育1 h后再用Rg1 10μmol/L+LPS 5μg/mL处理。采用CCK-8法检测细胞生存率,ELISA检测细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α水平,二硝基苯肼法测定乳酸脱氢酶(LDH)水平,荧光法检测活性氧(ROS)水平,Western blot检测核因子抑制蛋白(IκBα)和p65蛋白表达水平。结果与A组比较,B组细胞生存率和IκBα蛋白水平降低,IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、LDH、ROS和p65蛋白水平升高(P<0.05)。与B组相比,Rg1能够呈浓度依赖性地提高PC12细胞生存率和IκBα蛋白...     

麻黄碱对脂多糖诱导的小胶质细胞功能损伤的修复作用及机制

目的 研究麻黄碱对脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞功能损伤的修复作用及机制。方法 以人小胶质细胞HMC3为研究对象,考察不同质量浓度麻黄碱（75、150、300、600μg/mL）对HMC3细胞活力和凋亡的影响。然后将HMC3细胞分为对照组（不受药物干预）、LPS组（1μg/mL）、麻黄碱组（1μg/mL LPS+300μg/mL麻黄碱）、BAY11-7082组[1μg/mL LPS+5μmol/L核因子κB(NF-κB)信号通路抑制剂BAY11-7082]、抑制剂组（1μg/mL LPS+300μg/mL麻黄碱+5μmol/L BAY11-7082）和激活剂组（1μg/mL LPS+300μg/mL麻黄碱+1μmol/L NF-κB信号通路激活剂Prostratin）,加入相应药物作用24 h后,检测细胞迁移能力和细胞中可溶性白细胞介素6(s IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平以及NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果 300μg/mL的麻黄碱可使HMC3细胞活力显著升高、凋亡率显著降低（P<0.05）。与对照组相比,LP...     

丹参酮ⅡA对人肺腺癌细胞A549生物学行为的影响初探

目的探讨丹参酮Ⅱ_A对人肺腺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(A组,等体积培养基),顺铂组(B组,10μg/mL顺铂),丹参酮Ⅱ_A低、中、高剂量组(C₁组、C₂组、C₃组,5,10,20μmol/L),各组细胞以加入相应药物或培养基处理。采用MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验法观察细胞迁移情况,Transwell法检测细胞侵袭力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法及Western blot法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、整合素(integrin)α₂、integrin β₁、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA和蛋白的表达水平。结果与A组比较,B组及C₁组、C₂组、C₃组细胞处理24,48,72 h时的增殖率均显著降低,24 h时的...     

3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

目的 探讨3种中药成分（姜黄素、连翘苷、白藜芦醇）对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（HAEC）损伤的影响。方法 实验设空白对照组（等体积基础培养液）,溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜（DMSO）的基础培养液],Ox-LDL组（20μg/mL Ox-LDL）,姜黄素(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素）,连翘苷(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷）,白藜芦醇(1)(2)(3)组（20μg/mL OxLDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇）,采用四甲基偶氮噻唑盐（MTT）法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果 与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷(4)组细胞增殖率均显著降低（P <0.01或P ...     

芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

目的 从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法 将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^-1芸香苷+10ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β+1μmol·L^-1沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+...     

芍药苷对TNF-α诱导的川崎病血管内皮细胞氧化应激和炎症的影响

目的 探讨芍药苷(PF)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的川崎病(KD)血管内皮细胞氧化应激和炎症的影响及其作用机制。方法 体外培养人冠状动脉内皮细胞(HCAECs),将细胞随机分为Control组、PF组、KD组、PF+KD组,Control组不给予任何处理,PF组和PF+KD组给予25μg/ml的PF预处理24 h; KD组和PF+KD组给予50 ng/ml的TNF-α处理6 h。采用CCK-8法检测各组的增殖活性,DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平,WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,ABTS法检测总抗氧化能力(T-AOC),qRT-PCR法检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)、E-选择素mRNA表达量,Western Blot法检测IL-1β、IL-6、红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)、血红素氧化酶-1(HO-1)、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)、Keap1、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达。结果 与Control组比...     

依托咪酯对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨依托咪酯对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将人CHON-001软骨细胞分为空白组(常规培养基培养)、模型组(用10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、高剂量实验组(用5μmol·L^-1依托咪酯+10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、抑制药组[用5μmol·L^-1无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制药IWR-1-endo+10 ng·mL^-1 IL-1β培养]、抑制药+高剂量实验组(用10 ng·mL^-1 IL-1β+5μmol·L^-1依托咪酯+5μmol·L^-1 IWR-1-endo培养)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中促炎因子的含量;用蛋白质印迹法测定基质金属蛋白酶(...     

Wnt通路对胰岛素样生长因子-1抑制小鼠毛细胞凋亡的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)抑制小鼠毛细胞凋亡作用的调控机制。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜。在分别含有正常对照培养液(A组)、0.5 mmol/L庆大霉素(GM)(B组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF(C组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+5μg/mL wif(D组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+10μg/mLwif(E组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+15μg/mL wif(F组)的成分中培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western blot及Real-time PCR法观察Caspase-3的表达情况。结果 B组耳蜗毛细胞经刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较A组明显上升(P<0.01),C组耳蜗毛细胞经IGF刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3mRNA和蛋白表达较B组明显下降(P<0.01),应用Wnt阻断剂(wif)后D、E及F组细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较C组升高,其中F组升高显著(P<0.01)。结论 IGF可能通过激活Wnt通路抑制毛细胞凋亡。     

白藜芦醇基于NF-κB p65通路对脑胶质瘤细胞的作用

目的 探讨白藜芦醇对脑胶质瘤细胞U251的增殖和上皮间质转化(EMT)的影响及对核转录子kappa B p65(NF-κB p65)通路的调节作用。方法 将第3代对数生长期U251细胞随机分为对照组、白藜芦醇组、激动剂组和激动剂+白藜芦醇组,对照组细胞不做处理,白藜芦醇组细胞加入50μmol·L^-1白藜芦醇处理,激动剂组细胞加入1μg·mL^-1脂多糖(LPS)刺激,激动剂+白藜芦醇组细胞加入LPS 1μg·mL^-1刺激12 h后再用50μmol·L^-1白藜芦醇预处理12 h, MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA检测白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Transwell实验检测细胞侵袭能力以及蛋白印迹法检测上皮钙黏蛋白(E-cad)、神经钙黏蛋白(N-cad)、波形蛋白(vimentin)和p-p65蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,白藜芦醇组细胞存活率、IL-6、IL-1β、TNF-α含量以及N-cad、vimentin和p-p65蛋白相...     

丹红注射液对感染性休克大鼠肺损伤的保护作用机制

目的观察丹红注射液(DHI)对感染性休克(SS)大鼠肺损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法2018年4月至2019年8月,48只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组、DHI干预组和阳性对照组,12只/组。采用腹腔注射脂多糖构建内毒素性休克致肺损伤模型;造模成功后,DHI干预组经腹腔注射2 mL/kg DHI,阳性对照组经腹腔注射1 mL/kg地塞米松,模型组和对照组大鼠均予以等体积生理盐水。通过苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织病理改变;测量肺组织湿干质量比(W/D);采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6含量水平;采用免疫组织化学法检测肺组织核因子-κB(NF-κB)及κB抑制因子α(IκB-α)蛋白表达。结果模型组大鼠肺组织W/D较对照组增加［(5.56±0.51)比(4.02±0.37)］,DHI干预组肺组织W/D较模型组降低［(4.72±0.44)比(5.56±0.51)］(P<0.05),DHI干预组与阳性对照组W/D［(4.72±0.44)比(4.45±0.46)］比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组TNF-α［(0.66±0.08)μg/g比(0.23±0.06)μg/g］,IL-6［(128.04±10.35)ng/g比(38.17±6.82)ng/g］含量较对照组升高(P<0.05),DHI干预组TNF-α［(0.41±0.06)μg/g比(0.66±0.08)ng/g］,IL-6［(66.38±6.20)ng/g比(128.04±10.35)ng/g］含量较模型组下调(P<0.05),阳性对照组肺组织TNF-α［(0.38±0.07)μg/g比(0.41±0.06)μg/g］,IL-6［(60.54±5.27)ng/g比(66.38±6.20)ng/g］含量与DHI干预组比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,模型组NF-κB(p65)及IκB-α呈强阳性免疫反应,与模型组比较,DHI干预组NF-κB(p65)及IκB-α阳性反应减弱,阳性细胞百分比下降(P<0.05),DHI干预组与阳性对照组NF-κB(p65)及IκB-α阳性细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论DHI可能通过抑制NF-κB活化,减少TNF-α、IL-6等促炎细胞因子表达,在SS大鼠肺损伤中发挥保护作用。     

高效液相色谱法同时测定口服五维赖氨酸葡萄糖中6种成分含量

目的 建立同时测定口服五维赖氨酸葡萄糖中6种成分含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为Alltima C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为5 mmol/L庚烷磺酸钠溶液(用20%磷酸水溶液调pH至2.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为200 nm(泛酸钙、盐酸赖氨酸),261 nm(烟酰胺、维生素B₂、维生素B₁),290 nm(维生素B₆),柱温为40℃,进样量为20μL。结果 泛酸钙、烟酰胺、维生素B₆、盐酸赖氨酸、维生素B₂、维生素B1质量浓度分别在1.174～23.49μg/mL、4.220～84.40μg/mL、0.520 7～10.41μg/mL、20.88～417.7μg/mL、0.427 8～8.555μg/mL、1.676～33.52μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为101.02%,99.78%...     

大蒜素抑制胃癌细胞上皮-间质转化作用及其机制

目的研究大蒜素对胃癌细胞上皮-间质转化(EMT)的抑制作用及其机制。方法以含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养人胃癌细胞株HGC-27,分别采用大蒜素(3μg·L^-1)联合白细胞介素6(IL-6,50 ng·mL^-1)、大蒜素(3μg·L^-1)、IL-6(50 ng·mL^-1)处理,另设空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组胃癌HGC-27细胞E-cadherin、vimentin及核因子-κB(NF-κB)P65的mRNA表达;Wst-3-2H-四唑单钠盐(CCK-8)实验、细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测各组胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果RT-qPCR显示,与空白对照组比较,大蒜素组E-cadherin mRNA表达上调,vimentin及NF-κB mRNA表达下调;IL-6组E-cadherin mRNA表达下调,vimentin及NF-κB P65的mRNA表达上调(均P<0.05)。与IL-6组比较,大蒜素联合IL-6组E-cadherin mRNA表达上调,vimentin与NF-κB mRNA表达下调(均P<0.05)。CCK-8实验结果显示,与空白对照组比较,大蒜素组胃癌HGC-27细胞被明显抑制,IL-6组具有明显增殖优势;与IL-6组比较,大蒜素联合IL-6组细胞被抑制(均P<0.05);划痕实验中,与空白对照组比较,12,24 h大蒜素组胃癌细胞迁移能力明显减弱;与IL-6组比较,大蒜素联合IL-6组划痕愈合百分比缩小(均P<0.05)。细胞侵袭实验中,与空白对照组比较,大蒜素组侵袭数目减少,IL-6组侵袭数目明显增多;大蒜素联合IL-6组细胞侵袭能力较IL-6组明显减弱(均P<0.05)。结论大蒜素能明显抑制胃癌细胞EMT,减弱其增殖、迁移及侵袭能力,该过程可能与调节NF-κB信号通路有关。     

异补骨脂查耳酮对前列腺癌细胞PC3增殖、迁移、凋亡、侵袭的影响

目的 探讨异补骨脂查耳酮对前列腺癌细胞PC₃增殖、迁移、凋亡和侵袭的影响。方法 实验分为空白组(A组，等体积培养基)，阿霉素组(B组，20μmol/L)，异补骨脂查耳酮低、中、高剂量组(C₁组、C₂组、C₃组，10,20,40μmol/L)。各组细胞以培养基或加入相应药物的培养基处理。采用CCK-8法，测定450 nm波长处细胞的吸光度，并计算细胞存活率；改良Matrigel Boyden室测定法检测细胞侵袭力，并统计侵袭细胞数；划痕实验法检测细胞相对迁移力，并计算相对迁移率；流式细胞术检测细胞凋亡情况，并计算细胞凋亡率；实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞核因子红系2相关因子(Nrf2)、超氧化物歧化酶1(SOD1)mRNA表达水平；Western blot法检测细胞Nrf2、SOD1蛋白表达水平。结果 与A组比较，B组和C₁组、C₂组、C₃组细胞的存活率、侵袭数、迁移率均显著降低(P <0.05)，凋亡率、Nrf...     

青蒿琥酯对香烟烟雾诱导气道上皮屏障损伤的防护作用及机制

目的 探讨青蒿琥酯(ART)对气道上皮屏障损伤的防护作用及其机制。方法 细胞实验，将人支气管上皮细胞(HBEC)分为对照组(A组，常规培养)，香烟烟雾提取物(CSE)组(B组，2.5%CSE处理24 h),ART低、中、高剂量组(C₁组、C₂组、C₃组，1,10,100μmol/L，予2.5%CSE刺激前1 h加入ART共孵育)，制备上清液，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平，采用流式细胞术检测细胞凋亡水平，通过测定跨上皮细胞电阻(TEER)考察上皮屏障完整性，采用免疫印迹法检测细胞间连接蛋白ZO-1、E-cadherin、表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平。动物实验，将25只BALB/c小鼠随机分为对照组(a组，等体积生理盐水)，香烟烟雾(CS)组(b组，等体积生理盐水)，ART低、中、高剂量组(c₁组、c₂组、c₃组，25,50,100 mg/kg)。使小鼠持续暴露于CS环境(每天2...     

人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖和细胞因子分泌的影响及机制研究

目的:研究人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖及细胞因子分泌的影响,并研究其作用机制。方法:将小鼠脾淋巴细胞分为空白对照组、阳性对照组(刀豆蛋白A,5μg/mL)和不同质量浓度人参根提取物组(32、125、500μg/mL,以冻干粉末计)。各组细胞加入相应药物培养48 h后,分别采用吖啶橙染色法检测细胞的自噬情况;采用CCK-8法检测细胞的增殖情况;采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液中白细胞介素4(IL-4)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链β3(LC3B)、酵母ATG6同源物(Beclin-1)的表达水平以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化水平。结果:与空白对照组比较,32、125、500μg/mL人参根提取物均能够增加小鼠脾淋巴细胞酸性自噬体的数量(P<0.05或P<0.01);125、500μg/mL人参根提取物均可显著提高细胞存活率,显著提高细胞中IL-4、IL-6和TNF-α的水平,显著促进细胞中LC3BⅠ向LC3BⅡ转化,显著上调...     

丹皮酚对脂多糖诱导的星形胶质细胞炎性因子分泌的影响

目的观察丹皮酚对体外培养的星形胶质细胞炎性因子分泌的影响,并探讨其作用机制。方法采用神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色法鉴定星形胶质细胞;实验分为对照组,模型组和2.5、5、10μmol·L-1丹皮酚组,0.5 mg·L-1脂多糖(LPS)诱导炎症反应。采用ELISA法测定培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用Western blot检测细胞IκBα蛋白表达和磷酸化水平及胞核NF-κB(p65)蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组星形胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著增加(P<0.01),胞浆IκBα蛋白表达受抑(P<0.01),IκBα蛋白磷酸化和胞核NF-κB(p65)蛋白表达水平上调(P<0.01);5、10μmol·L-1丹皮酚能减少LPS活化的星形胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05或P<0.01),增加胞浆IκBα蛋白表达(P<0.05或P<0.01),抑制LPS上调的IκBα蛋白磷酸化和胞核NF-κB(p65)蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论丹皮酚能抑制LPS诱导的星形胶质细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,IκBα/NF-κB信号通路可能参与了丹皮酚对星形胶质细胞炎症反应的抑制作用。     

绿原酸抑制巨噬细胞激活的机制研究

目的 观察绿原酸对脂多糖（LPS）致巨噬细胞激活的影响，并探讨骨髓细胞2表达的触发受体（TREM2）蛋白在其中的作用。方法 为筛选LPS造模浓度，分别以1、10、100 ng/mL的LPS培养细胞24 h，检测细胞培养上清液中白细胞介素6(IL-6)水平和细胞中诱导型一氧化氮合酶（i NOS）蛋白表达水平。为筛选绿原酸给药浓度，将细胞分为Control组、LPS处理组和3个不同浓度绿原酸（0.01、0.1、1μmol/L）干预组，检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β水平和细胞中iNOS、TREM2蛋白表达水平以及细胞活力。为观察TREM2在绿原酸抑制巨噬细胞激活中的作用，采用TREM2小干扰RNA(TREM2-siRNA)干扰细胞TREM2蛋白表达，将细胞分为Control组、LPS处理组、绿原酸+LPS组、TREM2-siRNA+绿原酸+LPS组和乱序-siRNA(SCsiRNA)+绿原酸+LPS组，在含有上述药物的培养基/空白培养基中孵育24 h后，检测细胞培养上清液中TNF-α和IL-1β水平以及细胞中TREM2、iNOS和核因子κB p65(NF-κB ...     

壮药痛风立安胶囊对痛风性关节炎的抗炎作用及机制研究

目的 结合体内外实验研究壮药痛风立安胶囊对痛风性关节炎的抗炎作用及机制。方法 将60只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组（27 mg/kg别嘌醇+0.27 mg/kg秋水仙碱）和痛风立安胶囊低、中、高剂量组（2.2、4.5、9.0 g/kg），每组10只。除正常组外，其余各组大鼠均诱导痛风性关节炎模型。各给药组大鼠灌胃相应药物，正常组和模型组大鼠灌胃等体积纯水，连续14d。检测大鼠踝关节肿胀率、血清中白细胞介素1β(IL-1β)水平、滑膜组织中核因子κB(NF-κB)蛋白表达水平，观察大鼠踝关节滑膜组织病理形态学变化。另以脂多糖刺激RAW264.7细胞建立炎症模型，以痛风立安胶囊（62.5、125、250μg/mL）干预后，检测细胞中一氧化氮（NO）、活性氧（ROS）、IL-1β水平，NF-κB蛋白表达水平及其在细胞内的定位。结果 体内实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠踝关节肿胀率、血清中IL-1β水平、滑膜组织中NF-κB蛋白表达水平均显著升高（P<0.05），表现出滑膜增生、水肿、血管充血、毛细血管增生、炎症细胞增多等病理改变；与模型组比较，痛风立安胶囊高剂量组大鼠上...     

姜黄素对H2O2致H9c2心肌细胞损伤的抗凋亡作用及对NF-κB信号通路的调节作用研究

目的:探讨姜黄素对H₂O₂致H9c2心肌细胞损伤的抗凋亡作用及对核因子κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法:将大鼠H9c2心肌细胞随机分为正常对照组、损伤模型组和姜黄素低、中、高剂量组(25、50、100μmol/L)。正常对照组不作任何干预;损伤模型组细胞以50μmol/L H₂O₂诱导12 h以建立损伤模型;姜黄素各剂量组经相应浓度药物预处理24 h后,再以50μmol/L H₂O₂诱导12 h。继续培养24 h后,采用MTT法和TUNEL法分别检测细胞的存活率和凋亡率;采用WTS-8法和显色法分别检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;采用免疫荧光法检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)阳性表达的相对荧光强度;采用实时定量聚合酶链式反应法检测细胞中NF-κB p65 mRNA的表达水平;采用Western blotting法检测细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白的表达水平。结...     

雷公藤多苷对人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响

目的 研究雷公藤多苷对屋尘螨抗原Derp1诱导的人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响。方法 人支气管上皮细胞16HBE分成对照组、Derp1组（屋尘螨抗原Derp1处理）、实验-5μg·mL^-1组(5μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1组(10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA组(转染pcDNA,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA-高迁移率族蛋白B1（HMGB1）组(转染pcDNA-HMGB1,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)。用蛋白质印迹法检测HMGB1、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达,用流式细胞术检测细胞凋亡,用酶联免疫吸附法检测培养液上清液中白细胞介素-6（IL-6）、肿...