雷洛昔芬对去卵巢大鼠骨组织TGF-β1基因表达的影响

目的探讨TGF-β1基因在绝经后骨质疏松症（PMO）发病中的意义及雷洛昔芬对该基因表达的调节作用。方法通过复制大鼠骨质疏松动物模型,进行股骨和椎骨骨密度测定,提取胫骨骨组织总RNA,用RT-PCR法扩增检测各组大鼠骨组织TGF-β1 mRNA的表达水平。结果与O组相比,E组和RL组TGF-β1 mRNA表达水平升高（P〈0.05）。E组和RL组与S组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论低剂量雷洛昔芬可上调TGF-β1基因的表达,从而促进骨形成,抑制骨吸收。     

虎潜丸对去卵巢大鼠骨密度及骨组织形态学的影响

目的探讨虎潜丸干预对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态学的影响。方法将6个月龄的40只雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、虎潜丸组和假手术组,每组10只。确定造模成功后,虎潜丸组给予虎潜丸煎剂浓缩液灌胃,每天1次;雌激素组给予尼尔雌醇悬浊液灌胃,每周1次;模型组和假手术组给予蒸馏水灌胃,每天1次。灌胃治疗12周后．测量各组大鼠的骨密度及显微镜下观察骨组织形态。结果虎潜丸组及雌激素组与模型相比较,全身骨密度和腰椎骨密度都得到了一定程度提高,差异具有统计学意义（P〈0．05）,虎潜丸组与雌激素组大鼠骨密度相比较无明显差距（P〉O．05）,并能明显改善去卵巢骨质疏松大鼠骨组织显微结构的病理变化。结论虎潜丸对切除卵巢后所致的大鼠骨质疏松症模型有明显的改善作用。     

辛伐他汀对大鼠成骨细胞骨形成蛋白2及其信号传导蛋白Smad1和Smad5表达的影响

目的:研究辛伐他汀对成骨细胞骨形成蛋白2(BMP-2)及其信号传导蛋白Sma和Mad相关蛋白(Smad)1、5表达的影响,探讨该药物影响成骨的可能机制。方法:组织块培养法培养原代成骨细胞,传代纯化后用钙钴法染色鉴定。对照组S0无药物干预,实验组选用含不同浓度[10~8(S1组)、10~7(S2组)、5×10~7(S3组)、10~6(S4组)mol/L]辛伐他汀培养液对传代的成骨细胞进行72 h干预,采用反转录PCR(RT-PCR)测得BMP-2、Smad1、Smad 5 mRNA相对表达量,使用单因素方差分析和SNK-q检验进行统计学检验,以得出不同浓度药物对BMP-2及其信号传导蛋白的影响。结果:BMP-2、Smad1、Smad5 mRNA相对表达量均随药物浓度(0、10~8、10~7、5×10~7、10~6mol/L)增高而增加。三者在辛伐他汀浓度为10~6mol/L时表达量均最高。备组数据两两比较除Smad5表达量在对照组S0与S1组间,S3与S4组间差异无统计学意义(P>0.05)外,备实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:辛伐他汀能在一定剂量范围上调BMP-2的表达,可能与诱导BMP-2的信号转导分子Smadl、Smad5 mRNA的表达相关。     

仙珍骨宝对去卵巢大鼠腰椎骨组织形态计量学的影响

目的 观察仙珍骨宝对去卵巢大鼠腰椎骨组织形态计量学的影响.方法 3月龄雌性SD大鼠60只,随机分为SHAM、OVX、OVX+DES、OVX+仙低、OVX+仙中和OVX+仙高组6组,每组10只.SHAM组大鼠仅行假手术,OVX、OVX+DES、OVX+仙低、OVX+仙中和OVX+仙高组行去卵巢术.术后休息2 d后,SHAM组和OVX组大鼠灌胃生理盐水,OVX+DES、OVX+仙低、OVX+仙中和OVX+仙高组大鼠分别灌胃己烯雌酚[5 mL/(kg·d)]、低剂量(25%)仙珍骨宝、中剂量(50%)仙珍骨宝和高剂量(100%)仙珍骨宝.持续3个月后,用骨组织形态计量学等方法观察大鼠腰椎的动态参数和静态参数.结果 (1)与OVX组比较,OVX+仙低、OVX+仙中和OVX+仙高组骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)均增加(P<0.05),但3组的%Tb.Ar、骨小梁数量和骨小梁分离度均未达到SHAM组水平.(2)与OVX组比较,OVX+仙低和OVX+仙高组的每毫米破骨细胞数显著减少(P<0.05);与OVX组比较,OVX+仙低、OVX+仙中和OVX+仙高组的骨小梁荧光标记周长百分数和单位骨小梁周长骨形成率明显减少(P<0.05).结论 仙珍骨宝通过降低去卵巢大鼠的高转换来增加腰椎骨量.     

滋阴通络方对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢及骨密度的影响

目的 探讨滋阴通络方对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢及骨密度的影响.方法 取50只SD雌性大鼠建立去卵巢大鼠模型,另取10只SD大鼠设置为假手术组.将建模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组,西药组[阿仑膦酸钠(10.51 mg/kg)与阿法骨化醇(0.075 μg/kg)],滋阴通络方低(1.34 g/kg)、中(2.68...     

蒙药蓝刺头对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体mRNA 表达影响的实验研究

目的:应用去卵巢大鼠建立绝经后骨质疏松( Postmenopausal osteoporosis,PMOP) 模型,观察蒙药蓝
刺头对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织雌激素受体α 和β mRNA 的影响,为蒙药治疗绝经后骨质疏松提供实验依
据。方法:取4mo 龄雌性Wistar 大鼠84 只,按照随机对照原则,将大鼠分为模型组、假手术组、蓝刺头高、中、低
剂量组、己烯雌酚组及强骨胶囊组7 组,每组12 只,假手术组只摘除少量脂肪组织,其余各组均摘除双侧卵巢,
造模成功后,正常条件下饲养90d 后给予相应药物灌胃,连续灌胃90d 后处死大鼠,分离大鼠双侧胫骨,用RTPCR
法检测胫骨近端骨组织雌激素受体α 和β mRNA 表达情况。结果:蒙药蓝刺头能明显改善去卵巢骨质疏松
大鼠的一般状况; 与模型组相比己烯雌酚组、蒙药蓝刺头各剂量组及强骨胶囊组均提高了ERα、ERβ mRNA 的表
达;与己烯雌酚组相比,蓝刺头中剂量组提高了ERβ mRNA 的表达; 与强骨胶囊组相比蓝刺头各剂量组对ER
mRNA 表达均无明显差异。结论:蓝刺头能够上调去卵巢大鼠ERα 和ERβ 的表达,说明蒙药蓝刺头可能通过促
进骨形成,调节骨吸收与骨形成的偶联,降低骨转换率,达到防治PMOP 的目的。     

鹿角壮骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨细微结构及骨代谢影响的实验研究

目的 观察鹿角壮骨胶囊对去卵巢大鼠骨细微结构及骨代谢的影响并探讨其机制.方法 120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆组,鹿角壮骨胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组,除假手术组外,其余均切除双侧卵巢,干预12周后检测各组血清雌二醇(E2)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型原胶原N-端前肽(PINP)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(S-CTX)水平,采用双能X线骨密度测量仪测定左侧股骨骨密度;显微镜下观察右股骨小梁的结构变化,并检测右股骨组织形态计量学参数平均骨小梁面积(％Tb.Ar)、骨小梁宽度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)以及骨小梁数目(Tb.N),采用免疫组织化学染色法检测大鼠股骨骨保护蛋白(OPG)及核因子-κ β受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达.结果 ①鹿角壮骨胶囊各组血清E2、TRACP-5b及BALP高于模型组(P＜0.01),血清PINP和S-CTX水平低于模型组(P＜0.01);②鹿角壮骨胶囊各组股骨骨密度高于模型组(P＜0.01);③鹿角壮骨胶囊各组Tb.Ar、Tb.Th和Tb.N显著高于模型组(P＜0.01),Tb.Sp显著低于模型组(P＜0.01);④鹿角壮骨胶囊各组股骨OPG蛋白表达高于模型组(P＜0.01),股骨RANKL蛋白表达低于模型组(P＜0.01).结论 鹿角壮骨胶囊不仅能有效地改善去卵巢大鼠激素水平和骨细微结构,而且可提高大鼠骨密度,降低骨转化.     

淫羊藿提取物对去卵巢大鼠离体骨骨密度及骨重量的影响

目的：研究淫羊藿提取物对去卵巢大鼠骨密度、骨重量的影响,探讨中医肾主骨理论。方法：取84只雌性大鼠随机分成假手术组、模型组、己烯雌酚组、骨疏康组、淫羊藿提取物高、中、低剂量组7组,每组12只。造模成功后,饲养90 d,开始灌胃90 d后,检测离体骨骨密度、骨重量。结论：淫羊藿提取物可提高去卵巢大鼠离体骨骨密度、增加离体骨湿重、干重。对实验大鼠去卵巢所致骨质疏松症有明显的治疗作用。     

不同干预方法对去卵巢骨质疏松大鼠子宫GSK-3β蛋白表达的影响

[摘要] 目的 本研究旨在观察全身垂直振动、跑台运动和大豆异黄酮对去卵巢骨质疏松大鼠子宫重量指数和组织形态学以及糖原合成激酶3β（GSK-3β）蛋白表达的影响。方法 将72只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组（12只）和去卵巢组（60只）。去卵巢10周时,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组、振动组、跑台组、金雀异黄酮组和雌激素组（每组8-10只）,并开始进行不同干预处理。干预处理8周时,于末次处理结束36-48小时内,腹主动脉取血处死各组大鼠,用电子天平称量大鼠子宫的重量,用HE染色方法观察子宫形态学的变化,用Western blot方法检测子宫GSK-3β和P-GSK-3β蛋白表达的变化。结果 与去卵巢组比较,雌激素组大鼠子宫重量指数显著增加,而振动组、跑台组、金雀异黄酮组大鼠子宫重量指数均无显著变化;与去卵巢组比较,雌激素组、跑台组和振动组大鼠子宫P-GSK-3β/GSK-3β蛋白的比值均显著增加,而金雀异黄酮组无显著变化。结论 全身垂直振动和跑台运动均能刺激去卵巢骨质疏松大鼠子宫GSK-3β蛋白的磷酸化,而金雀异黄酮无此效应。     

密骨方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨折愈合过程中神经纤毛蛋白1表达的影响

目的 采用密骨方干预去卵巢骨质疏松骨折大鼠,观察密骨方对骨折断端神经纤毛蛋白1(Nrp-1)表达的影响,探讨中药密骨方影响骨质疏松骨折愈合的机制.方法 将3月龄雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、密骨方治疗组3组,适应性饲养1周后采取摘除双侧卵巢的方法建立骨质疏松模型.术后5个月,克氏针右侧股骨骨髓腔...     

成骨因子 BMP-2/Smads/Runx2信号转导通路

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)-2在骨形成过程中起着重要作用, BMP-2与多种细胞因子形成信号通路,促进成骨性细胞分化和骨细胞外基质合成与分泌。在骨形成过程中, BMP-2也作为启动调节因子促进新骨形成。该文就骨形态发生蛋白重要信号通路 BMP-2/ Smads/ Runx2与骨发生发育的研究进展作一综述。     

颌骨成釉细胞瘤中BMP-2 mRNA表达的原位杂交研究

目的研究颌骨成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)中骨形成蛋白(BMP)-2 mRNA的表达,探讨其与AB的发生、发展及生物学行为的关系.方法采用原位杂交方法对51例AB进行BMP-2 mRNA的检测.结果51例颌骨AB标本中33例有BMP-2 mRNA表达(64.71%),以肿瘤滤泡周边的高柱状细胞杂交信号最强.原发病例与复发及恶变病例中BMP-2 mRNA的表达率比较差别有显著性意义(P＜0.05).结论BMP-2 mRNA的表达可能与AB的发生及生物学行为有一定关系.     

糖尿病大鼠早期骨微结构改变及其BMP-2基因的表达

目的 观察糖尿病大鼠早期的骨密度、骨微结构改变及骨组织中BMP-2基因的表达.方法 清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只,按照随机数字表将其分为A组(普通饲料对照组)、B组(高脂饲料 链脲佐菌素组)和C组(普通饲料 大剂量链脲佐菌素组).饲养12周后,分别对各组大鼠进行骨密度、光镜、扫描电镜、骨形态计量学的观察以及BMP-2基因表达等指标的检测.结果 与A组相比,B组骨微结构无明显变化(P＞0.05),但BMP-2基因表达增高(P＜0.05),C组骨微结构明显改变(P＜0.05),BMP-2基因表达降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同的糖尿病大鼠模型早期骨微结构及BMP-2基因表达情况改变不完全一致,可能与高胰岛素血症、胰岛素抵抗有一定关系.     

局部应用辛伐他汀对拔牙窝内BMP-2 mRNA表达的影响及意义

目的：探讨局部应用辛伐他汀对拔牙窝内骨形成蛋白(BMP)〖KG-*3〗-2　mRNA表达的影响,阐明其作用机制。方法：选用健康雄性 Wistar大鼠56只,随机分为实验组28只和对照组28只,拔除右下颌中切牙后,实验组即刻植入载辛伐他汀聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架材料,对照组植入单纯 PLGA支架材料作为对照,于术后5 d、1周、2周和4周分别处死大鼠,设计针对BMP-2 mRNA的寡核苷酸探针,采用原位杂交技术检测拔牙窝 BMP-2 mRNA的表达。结果：术后5 d,实验组和照组均未见有BMP-2 mRNA阳性表达细胞;术后1周,实验组植入材料和牙槽窝骨壁之间的间充质细胞内可见染色较深的阳性细胞,而对照组偶见染色较浅的阳性细胞;术后2周,实验组在植入材料和牙槽窝骨壁之间的间充质细胞内可见较多颗粒清晰的阳性细胞,新形成的类骨质表面成骨细胞内也有BMP-2 mRNA阳性表达,阳性细胞数明显多于对照组;术后4周,实验组和对照组均可见BMP-2 mRNA阳性表达细胞。术后1周、2周、4周实验组BMP-2 mRNA阳性细胞数明显多于对照组（P<0.05）。结论：局部应用辛伐他汀可通过增加BMP-2 mRNA的表达促进拔牙窝骨损伤的愈合。     

雷奈酸锶对卵巢切除大鼠BMSCs成骨分化及BMP-2表达的影响

目的 探讨雷奈酸锶(SR)对卵巢切除大鼠骨髓基质干细胞成骨分化及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响.方法 3月龄SD大鼠24只,分别接受假手术(Sham组,n=8)和双侧卵巢切除(OVX,n=16)手术,术后8周OVX大鼠分为2组,分别接受安慰剂(OVX+V组)或SR(0.9g· kg-1· d-1,OVX+ SR组)治疗3个月.实验结束后处死所有大鼠,检测第4腰椎骨密度、最大载荷、弹性模量等生物力学性能,取股骨和胫骨骨髓细胞进行体外培养并向成骨细胞诱导分化,第25天共聚焦显微镜观察BMP-2的表达及分布,第28天提取细胞RNA及蛋白,RT-PCR及Western blot法检测BMP-2的表达,细胞培养第32天yonkossa染色观察细胞外基质矿化能力.结果 (1)骨密度:OVX+V组显著低于Sham组和OVX+ SR组(P＜0.05),OVX+ SR组显著低于Sham组.(2)最大载荷:OVX+V组显著低于OVX+ SR组(P＜0.05),OVX+ SR组显著低于Sham组(P＜0.05);弹性模量:OVX+V组显著低于Sham组和OVX+ SR组(P＜0.05).(3)共聚焦显微镜观察各组细胞BMP-2的表达及胞内分布无明显差异.(4) RT-PCR及Western blot法检测BMP-2在各组的表达差异无统计学意义.(5)von kossa染色观察各组矿化面积百分比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SR可部分改善卵巢切除大鼠骨量丢失和力学性能,对其骨髓基质干细胞体外成骨分化能力及BMP-2的表达无显著影响.     

BMP-2对室管膜前下区神经干细胞向多巴胺能神经元分化及对DLX5表达的影响

目的 探讨骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向多巴胺能神经元分化及对DLX5表达的影响.方法 体外培养SVZa NSCs,分为对照组、BMP-2组、BMP-2+Noggin组和Noggin组,通过免疫荧光染色和流式细胞术,观察其分化为酪氨酸羟化酶阳性(TH+)神经元的情况;用RT-PCR检测DIX5 mRNA表达水平.结果 BMP-2组SVZa NSCs向TH+神经元分化的比例和DLX5 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05),且这种效应能被其拮抗剂Noggin特异性抑制.结论 BMP-2可能通过上调DLX5表达水平从而促进SVZa NSCs向多巴胺能神经元分化.     

去势大鼠骨中BMP-2, BMP-7基因表达

0 引言 BMP-2有很强的诱导及促进成骨细胞分化和诱导体外成骨能力.许多实验表明BMP-2基因表达是成骨细胞分化必不可少的因素.     

ERK1/2在姜黄素对肺癌A549细胞增殖抑制中的作用

目的: 探讨姜黄素在抑制肺癌A549细胞增殖过程中,对ERK1/2丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响。方法: 不同浓度的姜黄素作用于A549细胞24 h后,采用MTT法检测姜黄素对A549肺癌细胞增殖的抑制作用;应用Westernblot分别检测ERK/2、p-ERK/2蛋白及其下游相关基因基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的表达。结果: 姜黄素对A549细胞增殖有明显的抑制作用,且具有剂量依赖性(P<0.01)。姜黄素抑制A549细胞p-ERK蛋白的表达(P<0.05),但不影响总ERK1/2蛋白的表达;姜黄素可促进TIMP-1蛋白表达(P<0.05),但抑制MMP-9的表达(P<0.01)。结论: 姜黄素影响ERK1/2MAPK信号转导通路,调节凋亡相关蛋白表达是其抑制A549细胞细胞增殖的作用之一。     

苏氏接骨胶囊对胫骨干骨折大鼠模型促早期愈合作用及BMP-2表达的影响

[目的]探讨苏氏接骨胶囊（简称Su）对大鼠胫骨干骨折早期愈合的促进作用及骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达的影响。[方法]36只6周龄雄性SD大鼠按照随机数字表分为假干预组、Su剂量140 mg/（kg·d）组（Su-140组）和Su剂量280 mg/（kg·d）组（Su-280组）。分组建立胫骨干闭合骨折髓内钉固定模型,术后第2天开始给予相应的药物干预。造模后10 d,过度麻醉心脏取血并处死各组大鼠。对大鼠患肢胫骨进行取材后,通过X线对骨折愈合情况进行初步检查;通过Micro-CT技术计算骨痂的骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）,并对骨痂进行组织形态学观察;通过免疫组化技术观察骨痂中BMP-2的表达,实时荧光聚合酶链反应（Real Time-PCR）定量检测血清BMP-2的含量。[结果]骨折造模术后10 d,假干预组、Su-140组及Su-280组3组大鼠的骨折断端均可见骨痂形成,骨折端愈合尚稳定,部分标本骨折断端稍有微动。经X线观察Su-280组骨折端愈合情况好于Su-140组及假干预组,Su-140组优于假干预组。Micro-CT检测结果提示,Su-140组和Su-280组的BV/TV值均高于假干预组,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。Tb.Th和Tb.N 2个参数,Su-140组与假干预组间比较无统计学意义（P>0.05）,Su-280组与假干预组间比较有统计学差异（P<0.01）,Su-140组与Su-280组间比较有统计学差异（P<0.01或P<0.05）。免疫组化结果显示,Su-280组骨痂内有大面积的BMP-2表达区域,Su-140的表达区域较少,假干预组更少;RealTime-PCR结果显示,3组间BMP-2的含量差异存在显著性（P<0.05）,其中Su-280组与Su-140组和假干预组差异均有显著性（P<0.05）,Su-140组和假干预组间差异无显著性（P>0.05）。[结论]苏氏接骨胶囊能促进大鼠胫骨干骨折的早期愈合及BMP-2的表达,且随药物浓度的增加,骨折愈合越快,其机制可能为Su促进BMP-2的表达,进而诱导成骨细胞及胞外基质的分化增殖,促进骨形成及骨愈合。